654-2有保护细胞、抗蛋白分解作用

654-2对多种类型休克有良好疗效,已为大量的临床工作和实验室研究所证实,但其抗休克原理尚未阐明。过去认为,654-2的抗休克作用在于直接扩张小血管,改善微循环;但近年来在家兔实验性休克模型上进行的研究表朋,654-2的疗效明显优于α-受体阻滞剂酚苄明,后者扩血管作用虽强,但对休克无明     

休克发病中的体液因素

尽管对休克的实验研究已进行了半个多世纪,但其发病机制仍未完全阐明。作为危急重症,休克仍是威胁人们生命的常见症候群。六十年代以来,在休克发病的微循环学说指导下,合理补液和正确使用血管活性药物,对于早期低血容量性休克的治疗已取得成效,死亡率显著降低。虽然,近20年来,抗菌素和心脏病监护有了飞速发展,但感染性休克、心源性休克和各种晚期休克的预后,并无根本性好转,死亡率仍很高。这表明,休克过程远比人们所认识的复杂得多,休克的微循环学说还需要发展和补充。七十年代后期以来,随着实验技术的进步,对休克的研究,从细胞、亚细胞和分子水平,联系休克时血液流变动力学的     

正常大鼠肾脏细胞溶酶体膜的构成蛋白

溶酶体是细胞内对其吞噬之物质溶解及消化之主要场所,同时也是细胞自噬作用的主要细胞器。为了进一步了解此细胞器的功能与结构,我们采用免疫荧光标记法,通过5种针对大鼠肝细胞溶酶体膜蛋白的特异性单克隆抗体,对大鼠正常肾脏细胞溶酶体膜蛋白进行了标记,并通过NH_4Cl溶液对溶酶体作了膜膨胀处理,结果显示:(1)细胞内溶酶体膜蛋白是由多种蛋白所构成,其各种蛋白的含量是不同的;(2)所有溶酶体膜蛋白均表达于该细胞器之表面;(3)NH_4Cl溶液能有效地使溶酶体扩张,这将有和于进一步研究溶酶体的结构。     

重症休克时平滑肌细胞内的钙动力学变化

使用荧光比率方法研究血管平滑肌细胞钙动力学变化在重症休克血管反应性降低中的作用．复制SD大鼠失血性休克模型,分离肠系膜细动脉血管平滑肌(ASMC)．使用荧光探针Fluo-3／AM、FuraRed双标记比率方法结合激光扫描共聚焦显微成像技术测定单个平滑肌细胞钙动力学变化,观察ATP敏感钾通道(KATP)特异性阻滞剂优降糖对血管反应性和钙动力学影响、实验结果发现休克后2h(失代偿期),血管反应性明显降低,norepinephrine作用带来的平滑肌细胞内钙离子浓度升高的程度明显减弱;加入优降糖可明显提高NE对平滑肌细胞内钙离子的升高作用,改善细动脉对NE的反应性．带来血管反应性部分恢复．     

大白鼠肠系膜上动脉夹闭休克时SOD抗脂质过氧化损伤的研究

近年来已有越来越多的研究工作证实自由基特别是氧衍生的自由基经脂质过氧化作用参与休克过程中的细胞损伤过程,因此应用自由基清除酶(剂)来阻断或防治休克时自由基介导的细胞损伤,无疑为休克时的细胞保护和细胞复苏提供了一条新的重要途径。我们在大白鼠肠系膜上动脉夹闭(Superior Mesenteric ArteryOcclusion,SMAO)休克模型上,通过观察休克动物的存活率,血浆溶酶体酶(包括β-葡萄糖     

内源性鸦片样物质在出血性和中毒性休克中的作用

本工作应用家兔作急性实验发现:(1)脑室注射50微克β-內啡肽,可使血压下降12.2±2.0毫米汞柱。此效应可被脑室注射鸦片受体阻断纳络酮所拮抗。(2)在出血性和中毒性休克时,脑内鸦片样物质的活性显著升高。其中以脑干部位升高得更为明显。(3)脑室注射80微克纳络酮可以部分桔抗出血性和中毒性休克的低血压效应,延长中毒性休克动物的存活时间。(4)脑室注射100微克的5-羟色胺可以逆转纳络酮的抗休克作用,使休克低血压效应加剧。这些实验结果提示:中枢鸦片样物质在休克发生过程中具有重要作用。阻断鸦片样物质的作用,可能是防治休克低血压效应的一个途径。     

受体介导内吞引起的巨噬细胞胞质酸化和胞吐作用

本文利用激光扫描共聚焦显微镜A-CAS570从细胞形态学和功能两方面,研究了刀豆素A(Concanavalin A,Con A)、麦芽凝集素(Wheat Germ Agglutinin,WGA)、酵母多糖(Zymosan A,Z.A)对小鼠腹腔巨噬细胞胞质pH和溶酶体内荧光探针FITC—Dextran排出细胞的影响。结果显示三种配体加入细胞外液10min内,胞质pH很快下降,此后维持在该水平;在15min左右细胞外FITC一Dextran迅速增加,20min后变化趋于停止;在三种配体加入后15min左右,细胞内溶酶体在质膜内侧增多;25—30min溶酶体重新向细胞中央运动。根据上述实验结果,我们认为溶酶体pH升高是触发溶酶体内荧光探针通过胞吐作用排出细胞的必要条件,胞质酸化抑制溶酶体内容物通过胞吐作用排出细胞。配体刺激引起的溶酶体内容物通过胞吐作用排出细胞和胞质酸化是细胞自我调节和保护的一种反映。     

溶酶体途径在细胞自噬过程中的功能意义

溶酶体具有高度保守的异质性,是细胞自噬的关键细胞器。细胞质中的蛋白质和细胞器最终在溶酶体降解,故溶酶体在维持细胞结构和功能的平衡方面起着重要生理作用。通过自噬溶酶体途径,细胞可清除某些病原体并参与抗原呈递。细胞自噬与异噬经溶酶体密切联系。自噬过程中溶酶体功能障碍与某些疾病和衰老等相关。对细胞自噬的溶酶体途径及其功能意义作了概述。     

重度失血性休克家兔肾上腺髓质反应的实验研究

休克是临床上常见的危症,无论平时或战时均占重要地位。七十年代以来,对于休克的发病机理,从细胞、亚细胞及分子水平探讨了休克时细胞代谢障碍和能量消耗,有了较大的进展,对失血性休克引起内分泌改变的研究虽已有人报导,所得结果并不一致,并多为轻度或中等度失血。为此,本文以家兔为实验对象,观察重度失血性休克后肾上腺髓质的反应。     

内体—溶酶体运输及其细胞功能

哺乳动物细胞中,内吞作用通过质膜内陷形成囊泡来摄取外界物质,经早内体到达晚内体/溶酶体降解或经再生循环回到质膜。内体运输网络参与细胞一系列重要生命活动,如信号通路调节、细胞器发生以及胞吐作用等。近年来发现Aps、BLOCs、HOPS和ESCRTs等复合体共同参与货物由胞内体到溶酶体或溶酶体相关细胞器的运送。该文主要就这些内体—溶酶体运输系统中重要蛋白复合体的组成和功能进行综述。     

肾素-血管紧张素系统

本文主要介绍肾素的生成部位、血管紧张素形成的可能途径、肾素分泌调节的四种假说、血管紧张素的作用及其与血压异常的关系。近年研究指出,失血时出现的大量血管收缩是由于血管紧张素Ⅱ的作用,提示血管紧张素拮抗剂有抗休克意义。血管紧张素Ⅱ除了对心血管系统的作用外,还有中枢性加压、嗜饮及刺激ADH 与 AGTH 分泌等作用。脑肾素-血管紧张素系统可能作为一种中枢性递质。晚近提出的“七肽假说”认为,血管紧张素Ⅲ是刺激醛固酮生成的“钥匙”,是当前兴趣的焦点。对心血管的作用似以血管紧张素Ⅱ为主,而对肾上腺皮质的作用则以血管紧张素Ⅲ更为重要。对恶性高血压及部分高肾素性血管收缩性高血压与特发性高血压,肾素-血管紧张素系统起着诱发与维持高血压的作用。因此,临床上对于不同类型的高血压,治疗措施应有所不同。在动物出血性低血压及休克的治疗中,认为转换酶抑制剂越早应用存活率越高,这为临床出血性休克的治疗提供了新的线索。     

登革病毒感染后ECV304细胞骨架actin变化的研究

登革病毒属于黄病毒属 ,它以蚊虫为传播媒介 ,引起登革热 (DF)或死亡率较高的登革出血热 (DHF)。DHF主要特点是血管通透性增加引起血浆渗漏 ,继发休克。DHF发生机理尚不明了。临床研究提示 :登革病毒感染后 ,血管内皮细胞 (VEC)无明显器质性变化 ,推测血管渗透性增加可能与VEC功能失调有关。由于细胞骨架系统与VEC功能及微血管的完整性密切相关 ,所以实验以血管内皮细胞株ECV30 4为细胞模型 ,研究登革病毒感染与细胞骨架微丝变化的关系 ;并通过药物干扰微丝的聚合与解聚 ,探讨微丝在DHF发病过程中的可能作用。实验用 2型登革病毒…     

肿瘤血管导向性干扰素IFN-α2a-NGR与5-氟尿嘧啶联合应用对A549细胞增殖的影响

目的:观察重组蛋白肿瘤血管导向性干扰素IFN-α2a-NGR与化疗药物5-氟尿嘧啶联合使用在体外对人非小细胞肺癌细胞株A549的作用,为IFN-α2a-NGR的临床实验设计提供实验依据。方法:不同浓度的肿瘤血管导向性干扰素IFN-α2a-NGR、5-氟尿嘧啶单独及联合作用于细胞株A549,通过MTT法检测单药及联合用药对细胞增殖的影响,经AnnexinⅤ-FITC细胞凋亡检测试剂盒染色、流式细胞术检测细胞凋亡情况,荧光显微镜观察药物作用的细胞形态。结果:IFN-α2a-NGR与5-氟尿嘧啶联合作用于A549细胞株时,其细胞增殖抑制率、细胞凋亡率均较单独作用时高,具有统计学显著性差异(P<0.05);荧光显微镜观察可见药物作用后细胞形态改变。结论:肿瘤血管导向性干扰素IFN-α2a-NGR与5-氟尿嘧啶联合使用具有协同抑制肿瘤细胞增殖的作用。     

C6大白鼠神经胶质瘤细胞HSP68的修饰和降解分析

本文用蛋白水解酶复性电泳、放射自显影和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹等方法分析Ｃ６细胞ＨＳＰ６８在体内、外修饰和降解表明：（１）Ｃ６细胞的中性蛋白水解酶几乎不参与ＨＳＰ６８降解;（２）ＨＳＰ６８降解涉及到胞液ＡＴＰ结合蛋白水解酶和溶酶体酸性蛋白水解酶,其中,ＡＴＰ结合蛋白水解酶在起动ＨＳＰ６８降解和把ＨＳＰ６８降解成多肽大片段方面起重要作用,溶酶体酸性蛋白水解酶主要参与把多肽大片段彻底降解;（３）热休克诱导Ｈ     

溶酶体膜上的离子通道

溶酶体是真核细胞中广泛存在的一种囊泡状细胞器,其内部含有多种酸性水解酶,是细胞降解生物大分子的主要位点.在溶酶体膜上也存在多种不同类型的蛋白质,包括离子通道、转运体、结构蛋白、酶等,其中离子通道蛋白由于他们在溶酶体离子动态平衡和跨膜转运、溶酶体膜电位和pH以及细胞营养代谢水平的调控中的重要作用,受到越来越多的关注,多种溶酶体离子通道也被相继鉴定出来.本文简要综述了近年来关于不同类型溶酶体膜离子通道蛋白的研究工作,阐述这些离子通道的特性、功能调控和在溶酶体生理活动中的作用.     

内分泌细胞中溶酶体对激素分泌调节的作用

本实验用外源性雄激素引起垂体促性腺激素细胞和睾丸间质细胞分泌抑制,对这两种细胞中的溶酶体及分泌吞噬和自体吞噬活动进行了超微结构形态观察和半定量分析。实验中应用了CMP酶细胞化学技术和免疫胶体金技术。研究结果显示,在分泌受抑制状态下,垂体促性腺激素细胞中溶酶体增多,分泌吞噬活动加强;与此同时,睾丸间质细胞也表现溶酶体增多、自体吞噬活动加强。这些结果不仅再次证明在分泌蛋白质激素细胞中溶酶体以分泌吞噬的方式参与了激素分泌调节,更重要的是初步证明在分泌类固醇激素细胞的分泌调节中,也有溶酶体的参与,其形式是自体吞噬作用。细胞通过自体吞噬作用得以在短时间内清除一部分合成激素的细胞器和其中的激素,这可能是分泌类固醇激素的细胞及时有效地调整激素分泌量的一项重要机制,与分泌蛋白质激素细胞的分泌吞噬有着相同的意义。     

胰高血糖素抗大鼠失血性休克的研究

在重度失血性休克大鼠上(MAP=3.33～3.87kPa)观察到,静脉注射胰高血糖素(20μg/kg)不仅使动脉血压回升,心率加快;而且还明显增加残余循环血量。用注射高渗葡萄糖的方法模拟胰高血糖素所致的高血糖浓度,提示胰高血糖素的升压作用与其升糖作用没有明显的关系。实验结果表明,胰高血糖素对急性失血性休克大鼠有良好的抗休克作用,其升压效应可能是通过增加心输出量和循环血量实现的。     

睾丸间质细胞——研究自体吞噬的一种正常细胞模型

细胞在生理状态下自体吞噬出现的频率很低,很难用正常细胞来研究自体吞噬活动,一般都通过诱导自体吞噬来获得有关自体吞噬活动的资料。本实验观察了肝、肾、睾丸等组织的32种细胞,发现睾丸间质细胞中自体吞噬出现频率远远高于其他细胞,平均每100个细胞切面中可以看到25个自噬小体,从而为研究自体吞噬的过程和机理提供了一个正常细胞模型。本实验还观察到睾丸间质细胞的自体吞噬活动可分为前自噬小体、早期自噬小体和晚期自噬小体三个阶段,是一个连续的过程。前自噬小体和早期自噬小体不含溶酶体酶,只有在自噬小体与溶酶体接触后,才从后者获取溶酶体酶并将其内容物消化分解,成为晚期自噬小体。由自体吞噬所产生的残余体并不在睾丸间质细胞内积聚,而是通过胞吐作用排出细胞外。     

IL-12诱导后白血病细胞的免疫激活效应

为探讨IL -1 2在肿瘤免疫治疗过程中的作用 ,以小鼠FBL -3红白血病细胞为实验模型 ,采用流式细胞仪和电镜等 ,观察了IL -1 2对FBL- 3细胞的诱导分化作用 .FBL -3细胞经 2 0 0U/mLIL- 1 2作用 48h后 ,S期DNA合成水平显著下降 ,单核细胞的特异性标志CD1 4表达水平明显增加 ,NBT⁺细胞率升高 ;IL -1 2作用 72h后 ,树突状细胞的特异性标志 33D1和NLDC1 45表达水平显著增加 ,MHC Ⅱ ,B7- 1 ,B7 -2和VCAM 1表达水平增加 .观察IL -1 2处理后FBL -3细胞的超微结构变化 ,可见两类细胞 :一是表面有许多皱褶 ,胞浆中有丰富的溶酶体 ;另一种细胞表面呈绒毛状 ,有许多树突状突起 ,线粒体发达 ,细胞核呈分叶状 .IL -1 2处理后的FBL -3细胞 ,能够明显刺激静息的T淋巴细胞增殖 .表明 ,IL -1 2可诱导小鼠红白血病细胞向单核细胞及树突状细胞方向分化 ,具有了抗原提呈功能 ,为应用IL -1 2治疗白血病提供了新的机制     

不同组织细胞线粒体数量及功能的休克敏感性研究

摘要 目的：探究不同组织细胞线粒体数量及功能的休克敏感性差异。方法：在整体和细胞水平模拟失血性休克和脓毒性休克模型,通过mtDNA检测、线粒体形态分析和线粒体ROS检测观察休克不同时相点肠组织（肠上皮细胞）、血管组织（血管平滑肌细胞）和心肌组织（心肌细胞）中线粒体数量和功能的变化。结果：对于失血性休克（缺氧）刺激,肠组织线粒体数量的休克敏感性明显强于血管和心肌组织（P<0.05）。肠、血管、心肌组织中线粒体数量明显增多分别开始于失血性休克后0.5小时、1小时和2小时。对于脓毒性休克（LPS）刺激,肠组织线粒体数量的休克敏感性明显弱于血管和心肌组织（P<0.05）。肠、血管、心肌组织中线粒体数量明显增多分别开始于脓毒性休克后9小时、6小时和3小时。只有高浓度长时间LPS刺激才会引起肠上皮细胞线粒体数量的明显增高。各组织细胞线粒体功能对各型休克刺激的敏感性和反应程度虽然存在差异,但都晚于线粒体数量异常的发生（P<0.05）。结论：各型休克的组织器官敏感性差异可能与不同组织细胞中线粒体的休克敏感性不同有关。线粒体数量异常增加是引起休克后线粒体损伤和细胞功能障碍的始动环节,不同组织细胞线粒体的休克敏感性差异也是影响休克组织器官损伤差异的重要原因之一。