“比较过氧化氢在不同条件下的分解”探究实验的改进

现行人教版生物学必修1中的"比较过氧化氢在不同条件下的分解"实验存在以下缺陷:1在滴入新鲜的肝脏研磨液时,瞬时产生的大量泡沫容易伤到实验者并使燃烧的卫生香熄灭;2由于整个实验过程及装置都处于全敞开模式,气体漏泄、反应时间延迟等都易导致实验现象不明显。通过改进实验装置,解决了以上缺陷。     

利用自制简易分光光度计定量探究影响蛋白酶活性的元素

描述了一种定量研究酶活性的实验装置和方案。用蛋白酶分解乳蛋白的反应代替原教材中的肝脏研磨液分解过氧化氢的反应，结合自制简易分光光度计，使定量研究酶促反应变得更简单可靠。在比色皿中测量酶与底物混合物的透光度随反应时间的变化曲线，实现蛋白酶活性的定量实时观察；定量研究相同时间、不同温度下酶与底物混合物的透光度变化，描述和交流温度对蛋白酶活性的影响。此外，探讨了进一步降低实验仪器成本的方案，以利于更多的学校进行操作和实施。     

有关酶的高效性与专一性实验的探讨

高中生物学新教材 (第 1册 )通过“[实验五 ]比较过氧化氢酶和 Fe3 +的催化效率、[实验六 ]探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的水解作用”这两个实验来探讨酶的高效性和专一性。这两个实验需要的材料用具较多 ,而且都是对照实验 ,要求操作快速而准确。对于高中学生而言 ,有一定难度。根据教学过程中学生存在的一些问题 ,我把实验过程进行归纳和总结 ,以表格的形式反映出来 ,让学生根据表格当中的步骤来操作 ,表格如下 :[实验五 ]比较过氧化氢酶和 Fe3 +的催化效率1试管编号 122滴加 3%过氧化氢溶液 2 m L 2 m L3滴加催化剂 2 0 %新鲜肝脏磨液 2滴 3…     

对“酶作用特性”实验的几点建议

１）在酶的高效性实验中,由于新鲜肝脏在过氧化氢溶液中反应剧烈,常会有泡沫溢出试管,给实验带来不便,因此实验中宜采用较长的试管（如１５×１８型号）,并在距离试管口约３ｃｍ处加少许棉花,这样,既可防止泡沫外溢,又有利于无火焰卫生香的复燃,效果甚好。２）在...     

“比较过氧化氢在不同条件下的分解”实验替代材料筛选

通过实验证明,方便易得、便于保存的马铃薯块茎中含有大量的过氧化氢酶,替代动物肝脏进行"比较过氧化氢在不同条件下的分解"实验,可以减轻教师准备实验的工作量,提高实验课效率。     

拥挤胁迫下小鼠肝脏脂质过氧化物含量和抗氧化物酶活性的变化

把实验小鼠分成2、6和10只3个密度组,饲养一周后取肝脏,采用硫代巴比妥酸法、比色法和亚硝酸盐形成法分别测定脂质过氧化物、过氧化氢酶和超氧化物歧化酶。6只组和10只组小鼠肝脏脂质过氧化物显著高于2只组;10只组过氧化氢酶活性显著低于2只组,说明拥挤降低小鼠肝脏中过氧化氢酶的活性,使脂质过氧化物含量增加,从而对机体造成过氧化损伤。     

“比较过氧化氢在不同条件下的分解”实验改进

通过实验证明,香菇中含有大量过氧化氢酶,用香菇代替动物肝脏进行"比较过氧化氢在不同条件下的分解"实验,可以降低实验风险,提高学生的实验参与度,减轻教师准备实验的工作量。用排水法改进实验,通过比较量筒中收集到相同体积水所需的时间长短比较过氧化氢在不同催化剂下的分解速率,变定性实验为定量实验,直观地得出酶的催化效率较无机催化剂高的结论。     

沙棘油对运动大鼠心肌及肝脏抗氧化作用的实验研究

目的:研究沙棘油对6周递增负荷运动训练大鼠心肌及肝脏自由基的影响。方法:通过对运动大鼠按一定方式分组实验,选取心脏及肝脏的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)四个抗氧化指标进行测试。结果:运动训练后灌胃沙棘油能显著提高大鼠心肌及肝脏中超氧化物歧化酶,谷胱甘肽过氧化物酶以及过氧化氢酶的活性,并能显著降低丙二醛的含量。结论:证实了沙棘油具有增强抗氧化酶活性和提高大鼠运动能力的作用。     

“探究pH对过氧化氢酶的活性影响”实验的改进和优化

采用肝脏、马铃薯、胡萝卜、香蕉等材料,利用U型气压计对"探究pH对过氧化氢酶活性影响"的实验设计进行部分改进和优化,比较几种材料中过氧化氢酶的活性,并探究不同材料中过氧化氢酶的最适pH值,实现了对课本实验的定量改进,对学生的创新性思维和探究能力的培养具有积极的意义。     

苯并（a）芘对大弹涂鱼肝脏抗氧化酶活性影响的初步研究

在实验条件下,研究了不同浓度苯并(a)芘(BaP)暴露对大弹涂鱼肝脏内抗氧化酶-超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和过氧化氢酶(CAT)活性的影响.结果表明,不同浓度的BaP暴露对抗氧化酶活性产生不同程度的影响.低浓度组(3μg     

大鼠肝脏过氧化氢酶的分离纯化及性质

根据过氧化氢酶的催化特性,采用盐析,透析,离心等技术,从大鼠肝脏中分离纯化过氧化氢酶,提纯倍数达到26倍,酶活性回收率为57%。为一般实验室分离纯化大鼠过氧化氢酶提供了一种有效的方法。酶学性质研究表明,该酶最适温度为37℃,最适pH值为7.5,在此条件下,以过氧化氢为底物的Km值为56 mmol.L-1。     

变态幼蛙对蝌蚪时期农药胁迫的毒性响应

本研究探讨阿特拉津和毒死蜱染毒东北林蛙蝌蚪对变态幼蛙肝脏组织抗氧化酶、解毒酶、细胞色素P450 3A(CYP3A)mRNA的影响.实验通过二者梯度剂量,单独、共同胁迫蝌蚪,变态完成后分析了肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、乙酰胆碱酯酶(AChE)、羧酸酯酶(CbE)及CYP3A mRNA表达的响...     

从人血液中克隆过氧化氢酶基因

目的从人血液中克隆过氧化氢酶基因。方法以新鲜的人血液为材料,提取全血RNA,运用RT—PCR方法扩增过氧化氢酶基因,构建pMDl8T／CAT克隆载体,并进行了不同来源过氧化氢酶的氨基酸序列同源分析。结果从人血液中成功扩增出过氧化氢酶基因,获得了重组载体PMD-18T／CAT,氨基酸序列分析的同源性达80％以上。结论从人血液中可以很方便地克隆出过氧化氢酶基因。     

富硒酵母对铁过量导致小鼠肝损伤保护作用的实验研究

目的:对铁过量引发肝脏损伤的小鼠应用不同剂量的富硒酵母所起到的保护作用进行研究。方法:利用腹腔注射方法,向小鼠体内注射过量的铁元素,经过6周的诱导之后导致小鼠肝脏受损,然后给予小鼠不同剂量的富硒酵母进行治疗。分别观察每组小鼠肝脏内丙二醛、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶的含量和活性,以及对细胞凋亡所造成的影响。结果:本次实验当中,与对比组相比,采取每天给予40药物治疗的研究Ⅱ组小鼠肝组织中的丙二醛含量明显下降,同时也使得超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶的活性明显提高,减少细胞凋亡情况;而采用每天给予20或60的研究Ⅰ组和Ⅲ组肝组织内的丙二醛含量明显提升,同时也使得超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶的活性明显降低,增加了细胞凋亡情。结论:富硒酵母的药效具有一定的浓度指向,应该根据实际治疗目的选择不同的药物浓度,这样才能够有效提升治疗效果。     

棕背树蜥不同组织三种同工酶之间的差异研究

文章采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,研究了分布在广东韶关地区的棕背树蜥(CalotesemmaGray)的肝脏、肌肉、心脏、脑、生殖腺五种组织酯酶(EST)、淀粉酶(AMY)和过氧化氢酶(CAT)三种同工酶,研究结果,酯酶(EST)同工酶有两条共有的酶带,Rf8除了肝脏不具备外,心脏、肌肉、脑和性腺共有,体现肝脏的特异性,性腺酶带有明显的性别差异;淀粉酶(AMY)同工酶有一条共同酶带,肝脏酶带最为复杂,其次是生殖腺和雌体心脏,五种组织中有三种组织出现雌雄差异;过氧化氢酶(CAT)有两条共有的酶带,肝脏和生殖腺的酶带复杂,而且出现明显的性别差异性,心脏、肌肉和脑酶带相似,呈现不同组织的同源性.上述果表明三种同工酶在不同的组织表现出明显的同源性和差异性,雌雄个体间同一种酶表现出性别差异。     

非受体酪氨酸激酶ARG与过氧化氢酶相互作用机制的初步研究

通过体外结合实验,发现Arg蛋白与过氧化氢酶之间有相互作用,且这种作用是通过Arg蛋白的SH3结构域和过氧化氢酶的P290FNP介导的。利用体外激酶分析和Western印迹证明Arg蛋白可以使过氧化氢酶磷酸化。本研究为过氧化氢酶的活性调控研究奠定了基础。     

实验性糖尿病大鼠肝过氧化物酶体脂肪酸β-氧化及D-双功能蛋白活性变化的初步研究

为研究过氧化物酶体脂肪酸β-氧化及D-双功能蛋白在糖尿病脂代谢紊乱中所起的作用,分析了链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠肝脏过氧化物酶体数量和过氧化物酶体脂肪酸β-氧化及D-双功能蛋白活性的改变,并用蛋白质印迹检测过氧化氢酶和D-双功能蛋白的表达量.发现糖尿病大鼠肝脏过氧化物酶体增殖,过氧化氢酶蛋白量和酶活性显著增加,过氧化物酶体脂肪酸β-氧化增强,D-双功能蛋白含量和酶活性显著降低,脂酰CoA氧化酶、L-3-羟脂酰CoA脱氢酶活性显著增加.对过氧化物酶体脂肪酸β-氧化增强和D-双功能蛋白活性降低与糖尿病脂代谢紊乱的关系进行了初步探讨.     

猪肝过氧化氢酶提取条件的研究

过氧化氢酶又称触酶,专一分解过氧化氢,溶于水,几乎不溶于乙醇、氯仿、乙醚。传统方法是从牛、马或人的红细胞、肝、肾中通过选择性沉淀法、缓冲液提取法、层析法等提取过氧化氢酶。本研究以猪肝为原料对过氧化氢酶的提取条件进行了试验。根据猪肝过氧化氢酶在pH5．3—8．0有活性、最适pH为7．0、溶于水的特性,采用水浸提法提取猪肝过氧化氢酶。先选择影响提取的主要因素(浸提时间、温度、料水比)分别作为单因素进行梯度实验,确定其合适范围;再通过进一步的正交实验得到猪肝过氧化氢酶提取条件的优化组合,并综合后处理中固液分离的要求,确定最佳提取条件,即料水比15、浸提温度25℃、浸提时间8h。     

芬娜冬菇子实体发育过程及胞外酶活性

分离并鉴定了采自北京妙峰山的1株野生大型真菌——芬娜冬菇Flammulina fennae,对该菌株进行了子实体发育过程研究,并对其最适生长条件进行了正交实验,测定并分析了菌株液体发酵及子实体生长过程中的酶活变化。结果表明:芬娜冬菇在原基期就完成了菌柄菌盖的分化;正交实验结果显示,不同氮源和p H对菌株生长影响显著,不同碳源则影响不显著;菌株液体发酵过程中未检测到过氧化氢酶和酸性木聚糖酶活性,而子实体发育过程中,漆酶、纤维素酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、酸性木聚糖酶活性较高。在原基形成期和子实体发育后期5种酶活性较高,均呈现先升后降的变化趋势,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、纤维素酶活性峰值出现在原基形成期和子实体发育后期,酸性木聚糖酶活性峰值出现在原基发育期,漆酶活性峰值出现在子实体发育后期。     

海芋过氧化氢酶的分离纯化及其性质

为了探索海芋(Alocasia macrorrhiza)过氧化氢酶的分子结构和酶学性质,提取海芋新鲜叶片、叶柄和块茎的粗酶进行活力比较和同工酶分析。用Sephadex G 200凝胶过滤层析法将粗酶分离纯化,以PAGE电泳对酶纯度鉴定。结果表明:海芋过氧化氢酶较单一,没有同工酶。经层析法进行分离获得电泳纯的过氧化氢酶,其活力回收率为40.83%,纯化倍数为8.88倍。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)分析结果发现:该酶由5条肽链组成,全酶相对分子质量为2.621 1×105。酶学性质研究结果表明:该酶最适反应温度40℃,最适p H为7.5。在25~45℃和p H 6.0~9.0下,该酶能保持较强的催化活力,稳定性较好。在最适条件下,该酶的Km值为16.43mmol/L,对底物的亲和力较好。甲醇、乙醇和异丙醇对此酶活力有显著的抑制作用。