茶饼病菌分生孢子阶段分离培养及其发酵液*对植物的刺激作用

在丝状真菌中,孢子萌发后无营养菌丝生长阶段就直接重复产孢的现象称为微循环产孢（microcycle conidiation） (Smith et al.,1981)。虫草子囊孢子微循环产孢对于确证其无性型有其特殊的意义。梁宗琦等（1991）、刘爱英等（1996）及刘作易等（1996）已经用此法确证了一些虫草的无性型。本文报道对破坏外担子菌即茶饼病菌Exobasidium vexans Massee的微循环产孢和其分生孢子阶段的观察,以及其发酵上清液对萝卜种子的刺激作用。 1材料和方法 1.1 材料 茶泡扁圆至圆形中空,白色疏松海棉状质地,厚约2～3mm,表面淡绿色,尚残留有叶片的下…     

温湿度和光照对宁夏灌区春小麦白粉病菌分生孢子萌发的影响

在宁夏灌区,春小麦白粉病菌(Erysiphe graminis f.sp.tritici)的分生孢子在-3-29℃温度范围都可萌发。温度达33℃时不能萌发,最适温度为10—15℃。分生孢子虽然在0—100%的湿度下都可以萌发。但以饱和湿度最适。紫外光对分生孢子有强烈的杀伤作用。直射阳光对分生孢子的萌发有抑制作用;在散射光和黑暗条件下,孢子的萌发率没有显着差异。     

虎奶菇发酵液抑菌成分的理化性质及其分离鉴定

为探明虎奶菇发酵液中的抑菌成分,本文以金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)为指示菌,研究了温度、pH、紫外线、蛋白酶K对虎奶菇发酵液抑菌活性的影响;并采用硅胶柱层析及反相中压液相层析追踪分离抑菌活性物质,通过核磁共振并结合相关资料对分离到的单体化合物进行了结构鉴定。结果显示,发酵液抑菌成分对蛋白酶较为稳定,对紫外照射敏感,可在90℃以下、pH1~9的范围内较好的保持其抑菌活性;活性追踪分离得到1个抑菌物质PtrA,经鉴定为2-呋喃甲酸(2-furoic acid)。     

植物内生真菌分离培养的研究方法

从研究对象、抽样方针、样品收集和贮存、表面消毒、培养基和选择性分离试剂、培养条件及内生真菌的鉴定等方面对植物内生真菌分离和纯化的研究方法进行了综述。     

马铃薯内生细菌的分离及其对环腐病菌的拮抗作用检测（简报）

马铃薯是世界四大作物之一,我国是世界上马铃薯种植面积最大的国家,种植面积达6000万亩。近年来,在马铃薯经济良好发展的带动下,马铃薯生产在种植面积和单产水平上有了大幅度提高。然而各种病害随之表现出逐年上升的趋势。     

植物发酵液提取物对铜绿假单胞菌生物膜的作用

【目的】探讨植物发酵液提取物(plant fermentation extract,PFE)对铜绿假单胞菌生物膜的抑制作用,为临床上铜绿假单胞菌感染相关疾病的治疗提供参考。【方法】通过划线法分离临床标本中的铜绿假单胞菌并进行鉴定,通过报告菌株测定铜绿假单胞菌的毒力因子,采用试管法和激光共聚焦扫描显微镜测定生物膜的形成。【结果】在分离出的16株铜绿假单胞菌中,PFE对PA007菌株的作用效果最好,1%PFE显著降低PA007菌株生物膜、绿脓菌素和N-(3-oxododecanoyl)-HSL(3-oxo-C12-HSL)的产量(P0.05)。同时,也显著降低Las A蛋白酶的活性以及持留菌存活率(P0.05)。荧光定量PCR实验结果表明PFE能显著抑制las I和pqs A基因的表达(P0.05)。【结论】PFE具有抗铜绿假单胞菌感染能力,在临床上铜绿假单胞菌感染疾病的治疗中具有巨大的潜在价值。     

植物维管组织的难养菌的分离和培养

多种微生物,包括真菌、细菌、支原体、原生动物和病毒,都能诱发植物维管组织病害。容易培养的真菌和细菌的病原作用早已确立,而难养菌在植物病害中所起的作用却不易阐明。多数情况下,尽管没有任何证据说明染病植物体存在病毒体,却常常把这些病害看成是病毒所致。     

培养基质对植物组织培养的影响

培养基质对植物组织培养的影响严菊强（浙江农业大学农学系,杭州３１００２９）ＥＦＦＥＣＴＳＯＦＭＥＤＩＵＭＭＡＴＲＩＸＯＮＰＬＡＮＴＴＩＳＳＵＥＣＵＬＴＵＲＥＹａｎＪｕ－ｑｉａｎｇ（Ｄｅｐｔ．ｏｆＡｇｒｏｎｏｍｙ,ＺｈｅｊｉａｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａ...     

新生小鼠心肌细胞分离培养的改良及其鉴定

通过改进新生小鼠心肌分离及其原代培养方法,提高心肌细胞的活性和纯度,构建了新生小鼠心肌细胞分离及原代培养实验平台.采用低浓度的胰酶和Ⅱ型胶原酶反复消化心脏组织5～6次,然后差速贴壁30 min分离纯化心肌细胞,得到的心肌细胞存活率和纯度高,细胞搏动率高,持续时间久.     

三种植物花粉原生质体的大量分离与初步培养

利用花粉水合导致外壁破裂,使内壁得以酶解,分离出鸢尾（Iris tectorum Maxim),风雨花（Zephyranthes grandiflora Lindl)和萱草（Hemerocallis fulva L.)三种植物成熟花粉的原生质体。初步分离出萱草四分体至成熟花粉（单核早期除外）各时期的原生质体,经过纯化处理,获得较纯净的有生活力的原生质体群体,萱草花粉原生质体的培养实现了细胞壁再生,管状及其它多种结构的形成以及生殖核的一、二次分裂。     

对植物的砂基培养和叶绿素定量测定的改进

全国中等农业学校教材<植物及植物生理学>中的两个实验:植物的砂基培养、叶绿素的定量测定是教学大纲规定的必做实验.从多年的实验情况看,这两个实验的方法都存在一些不当之处,给实验的完成带来了一定的困难,为此,我们对实验方法做了些改进,从而提高了实验的效果.     

ZtNH2-HCl和剪切力对茶叶细胞悬浮培养中茶氨酸合成的影响

以婺源绿茶嫩叶愈伤组织为材料,在采用摇床悬浮培养与发酵罐悬浮培养．分析了茶氨酸合成前体盐酸乙胺(ZtNH2-HCl)不同的添加方式和剪切力对培养细胞增长量和茶氨酸合成量的影响。结果显示,发酵罐放大培养取得了与摇床悬浮培养类似的效果;在一个培养周期中,培养细胞茶氨酸积累高峰出现在第20～22天;发酵罐大规模培养时采用桨叶式搅拌器(低剪切力)细胞增长量和茶氨酸合成苗优于标准板搅拌器;添加盐酸乙胺可大幅度提高茶氨酸积累量,先加入一定量盐酸乙胺再每天进行少量补充,茶氨酸合成最比一次性加入的效果要好。     

三种植物花粉原生质体的大量分离与初步培养

利用花粉水合导致外壁破裂，使内壁得以酶解，分离出鸢尾（Iris tectorum Maxim),风雨花（Zephyranthes grandiflora Lindl)和萱草（Hemerocallis fulva L.)三种植物成熟花粉的原生质体。初步分离出萱草四分体至成熟花粉（单核早期除外）各时期的原生质体，经过纯化处理，获得较纯净的有生活力的原生质体群体，萱草花粉原生质体的培养实现了细胞壁再生，管状及其它多种结构的形成以及生殖核的一、二次分裂。     

两株滇产广义美味牛肝菌的分离培养及其分子鉴定

采用组织分离法从广义美味牛肝菌子实体分离获得2株稳定的菌株,初步研究了两菌株的分离和培养条件。用ITS序列分析,对分离菌株进行了分子鉴定。基于ITS序列构建的系统树表明两株菌属于美味牛肝菌复合群,并与夏生牛肝菌Boletus aestivalis（Paul.）Fr.有较近的亲缘关系。     

气体成分对植物细胞悬浮培养的影响

气体成分对植物悬浮培养细胞的生长和次生代谢物的产量有深刻的影响。就有关氧、二氧化碳、乙烯和一些未知成分作用的研究进行了综述。     

十九种植物精油对茶丽纹象甲成虫的驱避和拒食活性

为了寻找茶丽纹象甲Myllocerinus aurolineatus Voss无公害防治新途径,采用行为生测法测定了19种植物精油对茶丽纹象甲的驱避和拒食活性。结果表明:大蒜油allitridi、芸香(Cantleyt corniculata(Becc)Howard)油、丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge.)、穿心莲(Andrographis paniculata(Burm.f.)Nees)、艾叶(Artemisia argyi Levl.et Vant.)、薰衣草(Lavender angustifolia Mill.)、何首乌(Fallopia multiflora(Thunb.)Harald.)、苦参(Sophora flavescens Alt.)、黄岑(Scutellaria baicalensis Georgi)、益母草(Leonurus heterophyllus Sweet)和金银花(Lonicera Japonica Thunb.)提取物对象甲的雄性和(或)雌性具有驱避活性。其中,大蒜油、丹参、何首乌和苦参又分别对象甲的雌性或雄性具有显著的选择性拒食活性;与对照相比,芸香油和金银花提取物对象甲具有非选择性拒食活性,而大蒜油和益母草提取物会显著提高象甲的取食量。艾叶、薰衣草和黄岑提取物对象甲仅表现出一定的驱避活性,未表现出拒食活性。与对照相比,穿心莲提取物对象甲具有显著的引诱作用。本研究证明芸香油、丹参、何首乌、苦参和金银花5种物质对象甲具有多方面的作用活性,具有很好的研究价值和实践意义。     

柑橘内生真菌的分离鉴定及其发酵产物对柑橘溃疡病菌的抑制活性

本研究从柑橘抗病品种的健康植株不同组织中分离纯化和鉴定内生真菌,并测定其发酵产物对柑橘溃疡病菌的抑制活性,以明确柑橘抗病品种中内生真菌的组成及其产抗柑橘溃疡病菌活性代谢产物的潜力,为柑橘溃疡病抗菌剂的开发奠定基础.该研究通过组织培养法分离内生真菌,采用形态学和分子生物学方法对其进行鉴定;基于前期的拮抗预试验结果,选取代...     

神经上皮干细胞的分离培养及其体外分化特性的观察

目的探讨大鼠胚胎神经管神经上皮干细胞的分离培养条件,并观察其在体外的分化特性.方法采用显微解剖、机械吹打、无血清悬浮培养方法分离培养神经上皮干细胞,采用巢蛋白(nestin)免疫细胞化学染色技术检测神经上皮干细胞,用NSE和GFAP免疫组化染色检测并计数神经细胞和神经胶质细胞.结果大鼠胚胎神经管神经上皮干细胞在无血清培养基中可形成大量呈nestin抗原阳性细胞构成的神经球,经传代有血清培养后分化为NSE阳性和GFAP阳性细胞,其中NSE阳性细胞占细胞总数的47.7%,GFAP阳性细胞占细胞总数的39.8%.结论胎鼠神经管神经上皮干细胞在无血清培养中可增殖和传代,在有血清培养中可分化为神经细胞和神经胶质细胞,两者之比为47.7∶39.8.     

西洋参冠瘿组织悬浮培养及其人参皂苷类成分的分离

对西洋参冠瘿组织悬浮培养生长特征进行了考察,并对其悬浮培养物中的人参皂苷类成分进行了提取、分离和鉴定。研究得到了培养物最大生物量收获时间［18.62 g/L(dry weight)］及其中最高人参皂苷累积时间（620.4 mg/L on the 27thday）。培养基中碳源、磷、氨基氮、硝基氮的利用率分别为91.8%, 100%, 81% 和97%。利用现代分离纯化方法从培养物中分离得到了4种人参皂苷类成分,利用理化及谱学技术分别鉴定为假人参皂苷F11（pseudoginsenoside F₁₁,Ⅰ）, 人参皂苷Rd（ginsenoside Rd,Ⅱ）, 人参皂苷Rb1（ginsenoside Rb1 ,Ⅲ）和人参皂苷Rb3（ginsenoside Rb3,Ⅳ）。     

人胎胰腺巢蛋白阳性细胞的分离培养及其生物学特性研究

胰腺巢蛋白（nestin)阳性细胞是近年发现的与胰腺发育密切相关的一种多能干细胞。我们对人胎胰腺中的nestin^ 细胞进行了分离和体外培养,并对其生物学特性进行了研究。结果表明：（1）胎胰nestin^ 细胞表达高水平ABCG2／BCRP1,并在形态和生长方式上均不同于导管上皮细胞;（2）Nestin^ 细胞在体外可自发形成类胰岛细胞团（ICC,islet-like cell clusters);(3)ICC中的nestin^ 细胞具有多向分化潜能,可表达多种细胞特异抗原,经体外诱导可产生少量胰岛素阳性的类β细胞。