S100A4原核表达载体的构建以及蛋白的表达和纯化

S100A4是S100蛋白家族的成员,在细胞的增殖、分化、损伤修复以及肿瘤细胞转移等方面发挥重要的调控作用.本研究将S100A4全长基因构建到pET28a原核表达载体上,利用大肠杆菌表达系统表达和纯化出高纯度的重组人S100A4.通过试验证明,重组人S100A4蛋白在体外可以有效地增强黑色素瘤细胞A375-S2的增殖.重组人S100A4原核表达与纯化方法的建立将促进其结构和生物学功能研究,并且对于S100蛋白家族其它蛋白的表达与纯化具有重要的参考意义.     

S100A4 在胰腺癌中的研究进展

胰腺癌最重要的生物学特性是容易发生转移和侵袭,致使很多患者无法得到根治性治疗。外科手术是胰腺癌惟一可能治愈的手段,但仅有10-20%的患者有机会手术治疗。错过早期诊断、常规疗法普遍不明显及快速肿瘤扩散共同导致患者的预后不良。胰腺癌的发生、发展受多基因调控。S100A4基因是近几年发现的一种具有促肿瘤作用的基因,目前研究认为该蛋白在胰腺癌的侵袭和转移中起重要作用.本文主要就S100A4与胰腺癌的有关研究进展加以综述。     

S100A4在胰腺癌中的研究进展

胰腺癌最重要的生物学特性是容易发生转移和侵袭,致使很多患者无法得到根治性治疗。外科手术是胰腺癌惟一可能治愈的手段,但仅有10-20%的患者有机会手术治疗。错过早期诊断、常规疗法普遍不明显及快速肿瘤扩散共同导致患者的预后不良。胰腺癌的发生、发展受多基因调控。S100A4基因是近几年发现的一种具有促肿瘤作用的基因,目前研究认为该蛋白在胰腺癌的侵袭和转移中起重要作用.本文主要就S100A4与胰腺癌的有关研究进展加以综述。     

S100A4基因表达在肿瘤转移中的作用

肿瘤转移是细胞恶性的重要标志之一,有许多基因和因子都参与这一过程。对S100A4基因的研究发现,它可参与细胞周期调控、细胞增殖与分化、血管生成、细胞外基质重建等多种生命过程,调控细胞的生长和运动。在某些特定的肿瘤细胞内,它的表达含量的增加可促进肿瘤细胞发生转移,并与癌症的发生具有某些相关性,可能对人类癌症的发生具有预后作用。现就S100A4基因表达与肿瘤转移的关系进行初步的探讨,以期对癌症的临床诊断提供一些参考。     

S100A4基因在结肠癌中的表达及意义

目的：通过检测S100A4基因在结肠癌细胞系及结肠癌组织中的表达,探讨其与结肠癌的关系。方法：运用RT-PCR法检测不同结肠癌细胞系中S100A4基因的表达情况;通过原位杂交和免疫组化方法检测61例结肠癌标本中S100A4基因的表达。结果：结肠癌细胞系Lovo及HT29均有S100A4基因表达。S100A4蛋白和RNA在结肠癌中表达率分别为36．1％和34.4％,而在正常结肠组织中不表达（p〈0．05）。临床分期晚比临床分期早的患者S100A4表达明显增高（p〈0.05）;有淋巴结转移的患者比无淋巴结转移的患者S100A4表达明显增高（p〈0．05）。此外,S100A4表达还与肿瘤大小,病理学分级,肉眼分型等相关。结论：结肠癌中S100A4基因表达增高,而且与肿瘤的侵袭及转移密切相关,是判断结肠癌生物学行为及预后的有价值的指标。     

活动期溃疡性结肠炎血清S100A2、S100A12与炎症因子的相关性分析及对复发的预测价值

摘要 目的：探讨活动期溃疡性结肠炎（UC）血清S100钙结合蛋白（S100）A2、S100A12与炎症因子的相关性分析及对复发的预测价值。方法：选取2019年1月～2021年1月我院收治的102例活动期UC患者为活动期组,根据2年后是否复发分为复发组和未复发组,另选取同期来院复查的50名缓解期UC患者为缓解期组,50名体检健康者为对照组。检测并比较三组血清S100A2、S100A12与炎症因子[C反应蛋白（CRP）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）]水平。采用Pearson/Spearman相关性分析活动期UC患者血清S100A2、S100A12与炎症因子水平的相关性,单因素及多因素Logistic回归分析活动期UC复发的影响因素,受试者工作特征曲线分析血清S100A2、S100A12水平对活动期UC复发的预测价值。结果：对照组、缓解期组、活动期组血清S100A2、S100A12、CRP、IL-6、TNF-α水平依次升高（P＜0.05）。活动期UC患者血清S100A2、S100A12与CRP、IL-6、TNF-α水平均呈正相关（P均＜0.001）。随访2年,102例活动期UC患者复发率为56.86%（58/102）。单因素分析显示,病情严重程度、CRP、IL-6、TNF-α、S100A2、S100A12为活动期UC患者复发的影响因素（P＜0.05）。多因素Logistic回归分析显示,病情严重程度为重度和CRP、IL-6、TNF-α、S100A2、S100A12升高为活动期UC患者复发的独立危险因素（P＜0.05）。血清S100A2、S100A12水平单独和联合预测活动期UC复发的曲线下面积分别为0.782、0.784、0.876,两指标联合预测活动期UC患者复发的预测价值大于各指标单独预测。结论：活动期UC患者血清S100A2、S100A12与炎症因子水平和复发密切相关,血清S100A2、S100A12联合预测活动期UC患者复发的价值较高。     

S100A4在子宫内膜癌中的表达及其临床病理意义

目的:检测S100A4在子宫内膜癌中的表达并分析其与子宫内膜癌临床病理指标的相关性,为子宫内膜癌的临床诊断、治疗及与预后预测提供参考依据。方法:采用免疫组织化学技术检测比较70例子宫内膜癌和40例正常子宫内膜组织中S100A4的表达,并分析子宫内膜癌组织中S100A4的表达与患者临床病理指标和生存期的相关性。结果:70例子宫内膜癌组织中S100A4的阳性表达率为57.14%(40/70),40例正常子宫内膜组织中S100A4的阳性表达率为10%(4/40),显著低于子宫内膜癌组织(P0.05)。子宫内膜癌组织中S100A4的表达与患者的年龄和淋巴结转移无显著相关,但与肿块浸润子宫肌壁深度、分化程度、临床分期均呈显著相关(P0.05)。S100A4呈阳性表达的子宫内膜癌患者的生存率和生存期均较S100A4呈阴性表达病例显著降低或缩短(P=0.01)。结论:子宫内膜癌组织中S100A4呈异常高表达,与子宫内膜癌的发生发展和预后密切相关,可能作为子宫内膜癌诊断和预后预测的参考标志物。     

S100A14在乳腺癌不同分子亚型中表达的临床病理研究

目的:探讨S100钙结合蛋白A14(S100A14)在乳腺癌不同分子亚型中的表达及临床病理意义,为确定新的分子分型标志物提供参考依据。方法:254例乳腺癌石蜡组织来源于2013年1月16日至2014年5月22日在中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院暨湖南省肿瘤医院进行乳腺癌根治术的患者。应用免疫组织化学方法检测S100A14在乳腺癌组织中的表达,分析其S100A14在不同分子亚型乳腺癌组织中表达及其与患者临床病理指标间的相关性,采用Kaplan-Meier法分析S100A14蛋白表达与乳腺癌患者预后的关系。结果:S100A14在ER+/PR+/HER2+型、ER+/PR+/HER2-型、ER-/PR-/HER2+型、ER-/PR-/HER2-型乳腺癌四种分子亚型中的阳性表达分别为38.5%、47.1%、75.5%、80.0%,以在ER-/PR-/HER2-型中表达最高,在ER+/PR+/HER2+型中表达最低,四组间的阳性表达比较差异有显著统计学意义(P0.01);S100A14的表达与乳腺癌患者术后肝转移呈正相关(r=0.134,P0.05),与ER、PR表达均呈负相关(r=-0.353,P0.01),而与ER+/PR+/HER2+型、ER+/PR+/HER2-型乳腺癌的临床病理特征无显著相关性(P0.05)。在ER-/PR-/HER2+型乳腺癌中,有腋窝淋巴结转移组患者的S100A14阳性表达率明显高于无腋窝淋巴结转移组,差异有统计学意义(P0.05);在ER-/PR-/HER2-型中,S100A14表达与术后肺转移呈负相关(r=-0.272, P=0.044)。结论:S100A14在不同分子亚型乳腺癌中表达存在差异,其表达与不同分子类型乳腺癌转移或复发有关,可能作为乳腺癌分子分型的候选标记物。     

S100A4蛋白与肿瘤血管生成的研究进展

肿瘤血管生成是指肿瘤细胞诱导的微血管生长以及肿瘤中血液循环建立的过程。重要脏器的转移是恶性肿瘤致死的主要原因,而肿瘤生长、转移和复发都依赖于肿瘤血管生成.S100A4基因是近几年发现的一种具有促肿瘤作用的基因,该基因编码一种钙离子结合调节蛋白,通过与钙离子结合在肿瘤发生和发展中起重要作用。目前研究认为该蛋白在肿瘤的侵袭和转移中有促血管生成作用.本文主要就S100A4与肿瘤血管生成的有关研究进展加以综述。     

S100A9在肿瘤方面的研究进展

S100A9是钙结合蛋白8100蛋白家族中重要的成员之一,其参与炎症反应、调节细胞生长分化、生长抑制、诱导细胞凋亡等,近年来研究发现S100A9时肿瘤的生长、增殖及侵袭有着重要作用,可能会成为肿瘤诊治的新靶点.基于上述思路,本文拟对S100A9与肿瘤的关系进行简要综述.     

CD44及CD24在乳腺癌组织中的表达及与临床病理特征的关系研究

目的:探讨肿瘤标志因子CD44及CD24在乳腺癌组织中的表达及与临床病理特征的关系。方法:选择从2015年1月到2017年1月在我院接受手术治疗的乳腺癌患者80例纳入本次研究,另选同期在我院治疗的导管原位癌患者30例,小叶增生患者20例及导管单纯增生患者20例的组织提取标本进行对照,分析CD44及CD24在乳腺癌组织和不同病变类型中的表达,并分析CD44~+/CD24~-细胞在癌症免疫分型中的表达以及CD44~+/CD24~-细胞与乳腺浸润导管癌相关病理特征的关系。结果:乳腺癌组织内的CD44阳性率为52.50%,CD24的阳性率为57.50%,均显著高于癌旁组织的11.25%和15.00%,差异均有统计学意义(均P0.05)。CD44及CD24在导管原位癌及乳腺浸润导管癌中的阳性率高于小叶增生和导管单纯增生,导管原位癌的阳性率高于乳腺浸润导管癌,差异均有统计学意义(均P0.05),且CD44在乳腺浸润导管癌不同分化类型中的阳性率差异有统计学意义(P0.05)。CD24在乳腺浸润导管癌不同分化类型中的阳性率差异不显著(P0.05)。CD44~+/CD24~-细胞在不同癌症免疫分型以及不同分化中的阳性率比较差异均有统计学意义(P0.05)。CD44~+/CD24~-细胞与乳腺浸润导管癌患者的年龄、月经状态、肿瘤直径、淋巴结转移以及远处转移之间均无明显关系(均P0.05)。结论:CD44及CD24在乳腺癌组织内存在较高的阳性率,且CD44~+/CD24~-在乳腺原位癌及低分化的乳腺癌组织内具有更高的阳性率,临床上可尝试通过监测CD44~+/CD24~-的阳性表达情况评价患者的病情及预后。     

FGFR4 mRNA及蛋白在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的:研究乳腺癌组织与乳腺癌癌旁组织中FGFR4 mRNA及蛋白的表达及其临床意义。方法:分别以实时荧光定量RT-PCR、Western blot的方法检测52例乳腺癌组织和52例癌旁正常组织中FGFR4 mRNA和蛋白的表达,分析FGFR4 mRNA和蛋白的表达与临床病理特征的相关性。结果:在乳腺癌组织中,FGFR4 mRNA及蛋白的表达均高于在乳腺癌癌旁正常组织(P0.05),并且FGFR4的表达与患者淋巴结转移和Her-2相关,而与患者年龄、肿瘤大小、分化程度、ER和PR无明显相关性(P0.05)。结论:FGFR4 mRNA及蛋白在乳腺癌组织中表达升高,与淋巴结转移和Her-2有关,有望成为预测乳腺癌的转移和预后的参考指标之一。     

胃肠道间质瘤组织S100A4、CD55的表达及与临床病理参数及预后的关系研究

摘要 目的：探讨胃肠道间质瘤组织S100A4、衰变加速因子（CD55）的表达及与临床病理参数及预后的关系。方法：选取2011年1月-2015年12月在陆军军医大学附属西南医院江北院区/陆军第958医院行手术切除并经术后病理确诊的124例GIST组织和对应的瘤旁正常组织病理蜡块,采用免疫组化法检测S100A4、CD55在GIST组织及瘤旁正常组织中的表达,分析其表达与GIST患者临床病理参数及预后的关系。结果：S100A4、CD55在GIST组织中的高表达率明显高于瘤旁正常组织,差异有统计学意义（P<0.05）。S100A4、CD55表达与GIST患者肿瘤大小、核分裂相、NIH分级及远处转移有关（P<0.05）,与GIST患者年龄、性别、发生部位、组织学类型无关（P>0.05）。S100A4、CD55低表达的GIST患者术后复发率和转移率低于S100A4、CD55高表达的GIST患者,差异有统计学意义（P<0.05）;S100A4、CD55低表达组患者5年中位无进展生存期明显高于S100A4、CD55高表达组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：S100A4、CD55在GIST组织存在高表达, 二者可能参与了GIST的侵袭与转移,并与患者术后的预后有关。     

血清钙结合蛋白S100A12、脂联素及IL-17与稳定期COPD患者严重程度及肺功能的相关性

摘要 目的：探讨血清钙结合蛋白S100A12、脂联素及白细胞介素-17（Interleukin-17,IL-17）水平与稳定期慢性阻塞性肺疾病（COPD）病情严重程度和肺功能的关系。方法：选择稳定期COPD患者（稳定期COPD组）和健康体检者（对照组）各80例,稳定期COPD患者分为四级：I级轻度（22例）,Ⅱ级中度（24例）,Ⅲ级重度（19例）,Ⅳ级极重度（15例）。使用肺功能仪对所有研究对象的肺功能进行检查,采用血气分析仪检测动脉血中的氧分压 (PaO₂) 和二氧化碳分压 (PaCO₂),采用酶联免疫吸附试验检测血清中钙结合蛋白S100A12、脂联素和IL-17水平,采用 Pearson相关分析各指标之间的相关性。结果：稳定期COPD组肺功能[第一秒用力呼出气量容积占预计值百分比（FEV₁%）和第一秒用力呼出气量容积/用力肺活量（FEV1/FVC%）]和PaO₂显著低于对照组（P<0.05）,并随着COPD严重程度增加而降低（P<0.05）;稳定期COPD组血清钙结合蛋白S100A12、脂联素、IL-17水平和PaCO₂均高于对照组（P<0.05）,并随COPD严重程度增加而升高（P <0.05）。Pearson相关分析显示：稳定期COPD患者血清钙结合蛋白S100A12、脂联素和IL-17水平与FEV₁%、FEV₁/FVC%和PaO₂呈负相关（P<0.05）,与PaCO₂呈正相关（P<0.05）。结论：钙结合蛋白S100A12、脂联素和IL-17可能共同参与了稳定期COPD慢性炎症过程,引起气流受限,影响肺通气功能,可以辅助评估稳定期COPD病情的严重程度。     

肿节风注射液辅助治疗晚期食道癌的疗效及对患者血清VEGF、S100A4水平的影响

目的:探讨肿节风注射液辅助治疗晚期食道癌的疗效及对患者血清血管内皮细胞生长因子(VEGF)、钙结合蛋白S100A4(S100A4)水平的影响。方法:选取2015年12月～2018年12月我院收治的晚期食道癌患者61例,采用随机数字表法将患者分为两组。对照组患者采用TP方案进行化疗,观察组在对照组的基础上给予肿节风注射液。比较两组患者的临床治疗效果,治疗前后的症状积分、生存质量评分和血清VEGF、S100A4水平的变化以及不良反应的发生情况。结果:治疗后,观察组总有效率和疾病控制率分别为93.55%、87.1%,均显著高于对照组(70%、60%,P0.05)。两组患者治疗后的症状积分、血清VEGF、S100A4水平均较治疗前显著下降,且观察组以上指标均显著低于对照组(P0.05)。对照组患者治疗后的生存质量评分明显下降,而观察组生存质量评分较治疗前无明显变化,但显著高于对照组(P0.05)。两组患者白细胞减少、血小板减少、贫血、恶心呕吐及肝肾功能异常等不良反应发生率比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:肿节风注射液联合化疗可显著提高晚期食道癌患者的临床疗效,改善患者的生存质量,可能与其有效降低患者血清VEGF、S100A4水平有关。