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从大熊猫基因组中克隆了FOXL2基因,并对其进行序列分析及原核表达和真核表达.将FOXL2编码区序列克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达出FOXL2重组蛋白.成功构建了真核表达载体FOXL2-pcDNA3.1/V5-His C,并通过脂质体介导转染HEK293细胞,Western blot检测FOXL2蛋白表达.SDS-PAGE分析表明,FOXL2重组蛋白在诱导4h后表达量达到峰值,其大小约为58.9 kDa,Western blot分析结果显示重组蛋白能够被抗His单克隆抗体特异性识别.FOXL2基因的克隆及其表达为进一步进行FOXL2的活性检测以及应用研究奠定了基础. 相似文献
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Cocquet J De Baere E Gareil M Pannetier M Xia X Fellous M Veitia RA 《Cytogenetic and genome research》2003,101(3-4):206-211
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FOXL2 and BPES: mutational hotspots,phenotypic variability,and revision of the genotype-phenotype correlation 总被引:15,自引:0,他引:15
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De Baere E Beysen D Oley C Lorenz B Cocquet J De Sutter P Devriendt K Dixon M Fellous M Fryns JP Garza A Jonsrud C Koivisto PA Krause A Leroy BP Meire F Plomp A Van Maldergem L De Paepe A Veitia R Messiaen L 《American journal of human genetics》2003,72(2):478-487
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Deletions involving long-range conserved nongenic sequences upstream and downstream of FOXL2 as a novel disease-causing mechanism in blepharophimosis syndrome 总被引:6,自引:0,他引:6
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Beysen D Raes J Leroy BP Lucassen A Yates JR Clayton-Smith J Ilyina H Brooks SS Christin-Maitre S Fellous M Fryns JP Kim JR Lapunzina P Lemyre E Meire F Messiaen LM Oley C Splitt M Thomson J Van de Peer Y Veitia RA De Paepe A De Baere E 《American journal of human genetics》2005,77(2):205-218
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Lee K Pisarska MD Ko JJ Kang Y Yoon S Ryou SM Cha KY Bae J 《Biochemical and biophysical research communications》2005,336(3):876-881
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目的 研究小睑裂综合征(blephamphimosis—ptosis—epicanthusinversus syndrome,BPES)患者与正常人相比眼睑组织中FOX12、SOX14及BPESC13个基因mRNA的相对表达水平,探讨这3个基因与BPES的相关性,以及可能存在的发病机制。方法TRIzol法抽提眼睑组织总RNA,反转录为cDNA,应用实时荧光定量PCR技术分别检测15例BPES患者(A组)及15例正常人眼睑组织(B组)中FOXL2、SOX14和BPESClmRNA的表达水平,用两配对样本wilcoxon符号秩检验法和2-AAC,法分析两组数据及其差异。结果FOXL2、SOX14和BPESCI3个基因tuRNA的表达水平在A、B两组间的差异均具有统计学意义,P值均〈0.05。A、B两组间,FOXL2基因的△Ct之差(△△ct),负秩与证秩的平均秩分别为6.00和8.50,SOX14基[天1的△△Ct负秩与正秩的平均秩分别为4.20和9.33,BPESC1基因的△△ct负秩与正秩的平均秩分别为8.23和6.50,可认为A组FOXL2基因和SOXl4基因的△ct值大于B组,BPESCI基因的△ct值小于B组,即A组的FOXL2基因和SOX14基因的表达水平低于B组,BPESCI基因表达水平高于B组。结论FOXL2、BPESC1及SOX14均与BPES具有一定相关性,FOXL2和SOX14的低表达以及BPESC1的高表达可能与BPES的发病相关。 相似文献
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