MEF2C在湿性年龄相关性黄斑变性中的表达及其对脉络膜新生血管和巨噬细胞极化的影响

摘要 目的：揭示肌细胞增强因子2C（MEF2C）在湿性年龄相关性黄斑变性（AMD）中的表达及其对脉络膜新生血管（CNV）和巨噬细胞极化的影响。方法：通过qRT-PCR法检测30例湿性AMD患者（AMD组）和30例健康体检者（健康对照组）的血清MEF2C水平。将MEF2C过表达慢病毒（MEF2C-LV组）和阴性对照过表达慢病毒（NC-LV组）转染至恒河猴脉络膜血管内皮细胞系（RF/6A）。转染后,将RF/6A细胞分为常氧组（Normoxia组）、低氧组（Hypoxia组）、低氧+NC-LV组（Hypoxia+NC-LV组）、低氧+MEF2C-LV组（Hypoxia+MEF2C-LV组）。转染及缺氧处理后,分别测定各组细胞进行Matrigel小管。通过激光诱导CNV C57BL/6J小鼠模型,将建模成功的C57BL/6J小鼠随机分为模型组、NC-LV组和MEF2C-LV组,每组10只,未建模的小鼠作为对照组。然后对NC-LV组和MEF2C-LV组小鼠玻璃体腔注射NC-LV或MEF2C-LV,对照组和模型组小鼠不进行治疗。治疗7 d后进行眼底荧光血管造影（FFA）和眼球苏木精伊红（HE）染色。通过qRT-PCR和Western blot检测MEF2C、VEGFA、VEGFR2、IL-12p35、IL-12p40和IL-10的mRNA和蛋白表达。结果：与Healthy组相比,AMD组患者的血清MEF2C水平显著降低（1.00±0.23 vs 0.48±0.29,t=7.689,P<0.001）。与Normoxia组相比,Hypoxia组的闭合管腔数量增加（P<0.05）。与Hypoxia组相比,Hypoxia+MEF2C-LV组的闭合管腔数量减少（P<0.05）。与模型组相比,MEF2C-LV组视网膜和脉络膜病变程度减轻,结构基本恢复正常,脉络膜组织厚度降低,血管生成减少。与模型组相比,MEF2C-LV组的CNV相对荧光强度降低,脉络膜组织中MEF2C、VEGFA和VEGFR2的mRNA和蛋白表达水平均降低（P<0.05）。与模型组相比,MEF2C-LV组脉络膜组织中IL-12p35和IL-12p40的mRNA和蛋白表达水平均升高,IL-10均降低（P<0.05）。结论：MEF2C在湿性AMD患者血清中低表达,上调MEF2C可抑制脉络膜血管生成,并促进巨噬细胞从M2型向M1型的转换。     

卵巢癌细胞中MTDH-PTEN互作对奥沙利铂耐药性的影响及机制

摘要 目的：探究卵巢癌细胞中MTDH-PTEN互作对奥沙利铂耐药性的影响及机制。方法：人卵巢癌细胞系通过慢病毒感染,将其分为对照组、NC-shRNA组和MTDH-shRNA组。通过RT-PCR分析不同组细胞MTDH和PTEN mRNA表达。通过MTT测定法测定细胞活力。通过CCK-8检测奥沙利铂诱导下的细胞增殖。通过膜联蛋白V染色细胞凋亡测定细胞凋亡。通过流式细胞仪分析细胞周期。通过Transwell试验检测细胞迁移和侵袭。通过流式细胞仪分析细胞周期。通过共免疫沉淀分析MTDH和PTEN的互联作用。结果：MTDH-shRNA组MTDH mRNA表达较NC-shRNA组和对照组降低（P<0.05）,MTDH-shRNA组PTEN mRNA表达较NC-shRNA组和对照组升高（P<0.05）。当未添加奥沙利铂（浓度为0 μM）,各组细胞活力比较无差异（P>0.05）。当奥沙利铂浓度为2 μM、4 μM和8 μM时,MTDH-shRNA组细胞活力较NC-shRNA组和对照组降低（P<0.05）。0 h,各组细胞增殖比较无差异（P>0.05）,第24 h、48 h和72 h时,MTDH-shRNA组细胞增殖较NC-shRNA组和对照组降低（P<0.05）。MTDH-shRNA组细胞凋亡率较NC-shRNA组和对照组升高（P<0.05）。MTDH-shRNA组G1期细胞占比较NC-shRNA组和对照组升高（P<0.05）,MTDH-shRNA组S/M期细胞占比较NC-shRNA组和对照组降低（P<0.05）。MTDH-shRNA组细胞迁移和侵袭数量较NC-shRNA组和对照组减少（P<0.05）。结论：MTDH在卵巢癌细胞中与PTEN共表达并与可与PTEN相互作用,因此可通过抑制MTDH表达、诱导PTEN表达可以恢复对卵巢癌细胞对奥沙利铂的药物敏感性。     

新生血管性年龄相关性黄斑变性对抗VEGF治疗的耐药性危险因素分析

摘要 目的：探究新生血管性年龄相关性黄斑变性对抗血管内皮生长因子（VEGF）治疗的耐药性危险因素。方法：选取2019年5月至2021年5月于我院接受治疗的90例nAMD患者作为研究对象,进行VEGF治疗,根据患者的耐药情况将其分为耐药组（n=19）和非耐药组（n=71）,统计患者资料,对比分析产生耐药性的危险因素。结果：危险因素与AMD类型、PED、椭圆体带完整性、积液、出血、BCVA、眼压、CRT异常有关（P<0.05）,危险因素与性别和平均年龄无关（P>0.05）;Ⅰ型CNV患者在VEGF治疗前后CRT水平未出现显著变化（P>0.05）,II型CNV患者和混合型CNV患者治疗前后CRT水平均显著降低（P<0.05）。Logistic回归分析显示：最终进入主效应模型的因素即抗VEGF治疗的耐药性发生的多因素为积液、PED、出血、AMD类型。结论：新生血管性年龄相关性黄斑变性（nAMD）对抗VEGF治疗出现耐药性与积液、出血和AMD类型有关。     

右美托咪啶通过抑制NADPH氧化酶2缓解氧化应激小鼠模型神经元的毒性和认知障碍的机制

摘要 目的：探讨右美托咪啶通过抑制NADPH氧化酶2缓解氧化应激小鼠模型神经元的毒性和认知障碍的机制。方法：10只野生型以及20只Sod1KO雄性BALB/c小鼠,12月龄,根据实验目的分为3组：对照组（野生型小鼠）,模型组（氧化应激小鼠模型）和DEX组（氧化应激小鼠模型+50 μg/kg DEX治疗）,每组10只。通过MWM 测试检测小鼠的空间学习和记忆能力。通过免疫染色检测海马中Neu-N+细胞数和PSD-95表达水平。通过蛋白质印迹检测海马中Neu-N、PSD-95、TH、总α-突触核蛋白和Ser129-磷酸化α-突触核蛋白表达水平。通过ROS、MDA和SOD检测试剂盒分别检测ROS、MDA和SOD水平。通过 ELISA试剂盒检测NOX2水平。通过RT-qPCR检测IL-1β、IL-6和TNF-α水平。结果：对照小鼠表现出正常的空间学习功能,与对照组小鼠相比,模型组小鼠逃避潜伏期和游泳距离增加（P<0.05）,而DEX治疗能够降低模型组小鼠逃避潜伏期和游泳距离（P<0.05）。三组小鼠平均游泳速度没有统计性差异（P>0.05）。与对照组小鼠相比,模型组小鼠小鼠海马中Neu-N+细胞数和PSD-95表达水平降低（P<0.05）,而DEX治疗能够增加小鼠海马中Neu-N+细胞数和PSD-95表达水平（P<0.05）。与对照组小鼠相比,模型组小鼠小鼠海马中Neu-N、PSD-95和TH蛋白表达水平降低（P<0.05）,总α-突触核蛋白和Ser129-磷酸化α-突触核蛋白表达水平升高（P<0.05）,而DEX治疗能够增加小鼠海马中Neu-N、PSD-95和TH蛋白表达水平（P<0.05）,降低总α-突触核蛋白和Ser129-磷酸化α-突触核蛋白表达水平（P<0.05）。与对照组小鼠相比,模型组小鼠ROS和MDA水平增加,SOD水平降低（P<0.05）,而DEX治疗能够降低ROS和MDA水平,增加SOD水平（P<0.05）。与对照组小鼠相比,模型组小鼠NOX2水平增加（P<0.05）,而DEX治疗能够降低NOX2水平（P<0.05）。与对照组小鼠相比,模型组小鼠IL-1β、IL-6和TNF-α水平增加（P<0.05）,而DEX治疗能够降低IL-1β、IL-6和TNF-α水平（P<0.05）。结论：DEX对NOX2的抑制可通过抑制小鼠模型中的氧化应激和神经炎症来阻断学习和记忆障碍以及海马神经变性。     

基于HIF-1α-iNOS信号通路探讨瑞舒伐他汀联合缺血后处理对糖尿病小鼠的心肌保护作用

摘要 目的：探讨瑞舒伐他汀联合缺血后处理对糖尿病小鼠心肌的作用并分析其保护作用的机制。方法：应用高脂高糖饮食的方法构建2型糖尿病小鼠动物模型,随机分为假手术组（sham组）、缺血/再灌注组(I/R组)、缺血后处理组（IpostC组）及瑞舒伐他汀联合缺血后处理组（RPO+IpostC组）,每组10只。分析各组小鼠低氧诱导因子-1α（HIF-1α）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）蛋白表达及血浆炎症因子、血清一氧化氮（NO）水平变化,观察各组小鼠心肌梗死面积、心肌组织HE染色结构变化。结果：与I/R组、IPostC组相比,RPO+IpostC组HIF-1α,iNOS蛋白表达显著上调（P<0.05）;与IpostC 组相比,RPO+ IpostC组小鼠血清NO和血浆IL-1β、IL-6、TNF-α水平均明显降低,血浆IL-10升高（P<0.05）;经显微镜观察显示,sham组小鼠的心肌细胞HE染色结构正常,RPO+IpostC组小鼠心肌细胞HE染色后损伤相对较小;与I/R组相比,IpostC组和RPO+IpostC组小鼠缺血面积（AAR/LV）、梗死面积（IRR/AAR）均明显减小,且RPO+IpostC组小鼠AAR/LV、IRR/AAR最小（P<0.05）。结论：瑞舒伐他汀联合缺血后处理可以通过对糖尿病小鼠HIF-1α-iNOS信号通路进行调节,进而上调HIF-1α、iNOS蛋白表达,减轻炎症反应,降低心肌细胞缺血再灌注损伤,保护心肌。     

欧前胡素调节Gas6/Axl轴对膀胱癌荷瘤小鼠免疫功能的影响

摘要 目的：探讨欧前胡素（IMP）调节生长停滞特异蛋白6（Gas6）/Axl轴对膀胱癌荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法：从60只SPF级雄性C57BL/6小鼠中随机选取12只小鼠作为对照组（CON组）,其余小鼠平均分为Model组、IMP组、Gas6组、IMP+Gas6组,每组12只,往其左侧前肢皮下注射0.2 mL浓度为1×10⁷个/mL的鼠源性膀胱癌肿瘤细胞系T739细胞溶液（Model组和IMP组注射对照载体的T739稳转株细胞,Gas6组和IMP+Gas6组注射过表达Gas6的T739稳转细胞株）造模。造模成功后,IMP组及IMP+Gas6组通过腹腔注射5 mg/kg的IMP;CON组、Model组及Gas6组通过腹腔注射等量的生理盐水,2天1次,持续5次。测量小鼠肿瘤体积和重量;测定胸腺指数和脾脏指数;酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测血清白介素2（IL-2）、γ干扰素（IFN-γ）、血管内皮生长因子（VEGF）水平;苏木精-伊红（HE）染色检查肿瘤组织病理变化;流式细胞术检测T细胞亚群;TUNEL染色检测细胞凋亡;蛋白质印迹法（Western blot）检测Gas6/Axl通路相关蛋白表达。结果：Model组肿瘤细胞整体上排列松散,出现不同程度的核固缩、核碎裂现象;IMP则可以逆转该现象,使肿瘤细胞排列重新变得紧密,细胞核固缩程度提升,核碎裂现象降低;Model组较CON组肿瘤体积、肿瘤质量、CD8⁺细胞百分比、Gas6、Axl蛋白水平、VEGF水平显著增加（P<0.05）,胸腺指数和脾脏指数、IL-2、IFN-γ、CD4⁺细胞百分比、CD4⁺/CD8⁺、肿瘤细胞凋亡率显著下降（P<0.05）;与Model组相比,IMP组胸腺指数和脾脏指数、IL-2、IFN-γ、CD4⁺细胞百分比、CD4⁺/CD8⁺、肿瘤细胞凋亡率显著升高（P<0.05）,肿瘤体积、肿瘤质量、CD8⁺细胞百分比、Gas6、Axl蛋白水平、VEGF水平显著下降（P<0.05）;而Gas6组结果与IMP组趋势相反;而IMP+Gas6组的结果显示：IMP能逆转Gas6过表达后对膀胱癌荷瘤小鼠的促瘤作用。结论：IMP可能通过下调Gas6/Axl信号通路改善膀胱癌荷瘤小鼠免疫功能,从而产生抑瘤效果。     

扶正方对Lewis肺癌小鼠免疫功能、PI3K/AKT信号通路和外周血IL-2、IL-6、INF-γ的影响

摘要 目的：观察扶正方对Lewis肺癌小鼠免疫功能、磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）信号通路和外周血白细胞介素（IL）-2、IL-6、γ干扰素（INF-γ）的影响。方法：将40只Lewis肺癌小鼠随机分为模型组（M组）、扶正方低剂量组（A组）、扶正方高剂量组（B组）、顺铂组（S组）,每组10只,A组、B组分别给予扶正方0.4 mL/20 g、0.8 mL/20 g灌胃,M组给予生理盐水0.4 mL/20 g灌胃,S组给予顺铂1 mg/mL,0.4 mL灌胃,连续14d,比较各组小鼠一般情况、肿瘤重量,胸腺指数、脾脏指数、脾脏CD3⁺细胞、CD4⁺细胞、CD8⁺细胞比例细胞百分比,鼠肿瘤组织PI3K/AKT信号通路蛋白表达水平及外周血IL-2、IL-6、INF-γ水平。结果：A组、B组、S组小鼠肿瘤重量低于M组,S组小鼠肿瘤重量低于A组、B组（P<0.05）,治疗前各组小鼠体重比较无统计学差异（P>0.05）,治疗后A组、B组小鼠体重高于S组、M组（P<0.05）。A组、B组小鼠胸腺指数显著高于M组、S组（P<0.05）。A组、B组CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺显著高于M组、S组,CD8⁺显著低于M组、S组（P<0.05）,B组CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺显著高于A组,CD8⁺低于A组（P<0.05）。A组、B组、S组小鼠肿瘤组织PI3K蛋白、AKT蛋白表达水平显著低于M组（P<0.05）。A组、B组、S组小鼠外周血IL-2、INF-γ水平显著高于M组,IL-6水平显著低于M组（P<0.05）。结论：扶正方可以提升Lewis肺癌小鼠免疫功能,调节IL-2、IL-6、INF-γ细胞因子水平,抑制PI3K/AKT信号通路起到抗肺癌的作用。     

LMTK2基因沉默抑制人上皮性卵巢癌细胞生长和转移的作用机制

摘要 目的：探讨狐猴酪氨酸激酶2（LMTK2）基因沉默对人上皮性卵巢癌(EOC)细胞生长和转移的抑制作用及其可能的机制。方法：通过RT-qPCR和Western-blot检测了人正常卵巢上皮细胞IOSE80和人上皮性卵巢癌细胞系（SKOV3、ES2、OVCAR-3和HEY）中LMTK2的表达,使用Lipofectamine 3000转染试剂将LMTK2的短发夹RNA（shRNA）、阴性对照shRNA、LMTK2过表达重组pcDNA3.1质粒或阴性对照质粒转染到SKOV3细胞中,并分为LMTK2-shRNA组、NC-shRNA组、LMTK2-pcDNA3.1组或NC-pcDNA3.1组。另外,使用PI3K/Akt抑制剂LY294002处理SKOV3细胞1 h。通过CCK-8法测定细胞增殖,Annexin V-FITC/PI染色法测定细胞凋亡,划痕实验评价细胞迁移,Transwell实验评价细胞侵袭。对BALB/c雌性裸鼠皮下注射转染NC-shRNA或LMTK2-shRNA的SKOV3细胞建立体内移植瘤模型,并记录接种28 d内的肿瘤体积。结果：与人正常卵巢上皮细胞IOSE80相比,卵巢癌细胞系（SKOV3、ES2、OVCAR-3和HEY）中LMTK2的mRNA和蛋白表达水平均显著升高,其中SKOV3的LMTK2 mRNA和蛋白表达水平最高（P<0.05）。与NC-shRNA组相比,LMTK2-shRNA组SKOV3细胞活力、相对迁移面积、侵袭细胞数均显著降低,而细胞凋亡率显著升高（P<0.05）。此外,与NC-shRNA组相比,LMTK2-shRNA组SKOV3细胞中Bax的蛋白表达水平显著升高,而Bcl-2、MMP2、MMP9、p-Akt的蛋白表达水平显著降低（P<0.05）。LY294002处理逆转了上调LMTK2对SKOV3细胞生长和转移的影响（P<0.05）。在接种第21天和28天时,与NC-shRNA组相比,LMTK2-shRNA组裸鼠的肿瘤体积显著降低（P<0.05）。结论：LMTK2基因沉默通过抑制PI3K/Akt信号通路降低了人上皮性卵巢癌细胞的生长和转移能力。     

神经生长因子抗体在小鼠膝关节炎疼痛模型中的作用研究

摘要 目的：探究神经生长因子（Nerve growth factor,NGF）抗体L148M在碘乙酸（Monoiodoacetate,MIA）诱导的膝关节炎（Kee osteoarthritis,KOA）小鼠模型中的作用机制。方法：随机将8周龄C57BL/6雄性小鼠分为对照组、MIA组和L148M组。采用关节腔注射20 mg/mL MIA诱导KOA小鼠模型。手术后2周,L148M组小鼠给予腹腔注射L148M（10 mg/kg）处理。通过苏木精-伊红（HE）染色、番红O染色、OARSI评分和Micro-CT分析评估小鼠膝关节软骨及软骨下骨组织形态学变化。通过qRT-PCR检测CCR2、MCP1、MMP-1、MMP-3、MMP-13、COL10、IL-1β和TNF-α的mRNA表达水平。通过Western blotting检测INOS、COX-2、Collagen II和Aggrecan的蛋白表达水平。通过免疫组织化学法分析VEGFA和Ang-1的蛋白表达水平。通过Micro-CT血管造影分析软骨下骨血管形成数量。结果：HE染色结果显示,L148M组小苏软骨细胞数和关节软骨厚度均高于MIA组。番红O染色显示,L148M组小鼠基质降解小于MIA组。L148M组OARSI评分显著低于MIA组（P<0.05）。micro-CT扫描结果表明,L148M组小鼠软骨和软骨下骨结构完整,没有明显病理损伤。qRT-PCR检测结果显示,与MIA组相比,L148M组小鼠COL10、MMP1、MMP3和MMP-13表达水平均显著降低（P<0.05）。Western blotting检测结果表明,与MIA组相比,L148M组小鼠Collagen II和Aggrecan表达水平升高,INOS和COX-2表达水平降低（P<0.05）。疼痛行为学分析显示,与MIA组相比,L148M组小鼠行进距离和机械刺激反应阈值均降低（P<0.05）。micro-CT血管造影分析显示,L148M小鼠组微血管数量和体积明显低于MIA组（P<0.05）。免疫组化检测显示,L148M组小鼠VEGFA和Ang-1蛋白表达水平均显著低于MIA组（P<0.05）。结论：L148M通过抑制软骨下骨异常血管生成,缓解关节炎症疼痛;并通过抑制炎症细胞因子表达,减轻软骨和软骨下骨病理损伤。     

雷公藤甲素对Con A诱导小鼠急性肝损伤的保护作用及机制

摘要 目的：探究雷公藤甲素（Triptolide）对刀豆蛋白A（Concanavalin, Con A）诱导的小鼠急性肝损伤的保护机制。方法：雄性BALB/c小鼠30只,随机等分为正常对照组、Con A模型组和雷公藤甲素治疗组。通过尾静脉注射Con A构建小鼠急性肝损伤模型。微孔板法检测血清谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）水平,HE染色观察肝组织病理变化,免疫组化、实时荧光定量PCR（RT-qPCR）和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测肝组织及血清中细胞因子水平。结果：与正常对照组比较,Con A诱导急性肝损伤小鼠血清ALT、AST水平显著增高（P<0.05）,肝组织呈局灶性炎性浸润、坏死。与Con A模型组比较,雷公藤甲素治疗组小鼠血清ALT、AST水平显著下降（P<0.05）;肝组织病理程度明显减轻;肝组织中CD4⁺T细胞的浸润降低,促炎细胞因子（IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-2）的水平显著降低（P<0.05）。结论：雷公藤甲素可以通过抑制CD4⁺T细胞向肝脏募集,下调IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-2的表达,有效防治Con A诱导的急性免疫性肝损伤。     

miR-613通过靶向VEGFA抑制神经胶质瘤细胞的增殖、侵袭和血管生成

摘要 目的：旨在探究miR-613在胶质瘤中的表达及对细胞增殖、侵袭和血管生成的影响。方法：根据细胞转染将实验分组为对照miRNA组（Control组）、miR-613模拟物组（mimics组）和miR-613 mimics+VEGFA组（VEGFA组）。采用逆转录定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测胶质瘤细胞和组织中miR-613和VEGFA mRNA的表达水平;采用荧光素酶报告基因分析miR-613与血管内皮生长因子（VEGF）的关系;采用Western blotting检测VEGFA蛋白的表达水平;通过体外实验检测转染细胞的增殖能力、侵袭能力和管状形成能力。结果：与正常组织样本相比,胶质瘤I-II期组样本的肿瘤细胞呈现异形,具有深核染色,并且肿瘤细胞密度适度较低,而胶质瘤III-IV期组样本的肿瘤细胞的核分裂活跃,具有明显的微血管增殖和明显的细胞异型性;miR-613在胶质瘤I-IV期组织样本中显著降低（P<0.05）。在U87和U251细胞系的VEGFA-WT组中,与Control组相比,mimics组的荧光素酶活性显著降低（P<0.05）。与Control组相比,U87和U251细胞系中mimics组VEGFA的mRNA和蛋白表达水平均显著降低（P<0.05）。克隆形成实验、血管生成实验和细胞侵袭实验结果表明,与Control组相比,mimics组的克隆形成数量、细胞侵袭数、内皮细胞HUVEC的管状形成数和Ang-2蛋白表达水平均显著降低（P<0.05）;与mimics组相比,VEGFA组克隆形成数量、细胞侵袭数、内皮细胞HUVEC的管状形成数和Ang-2蛋白表达水平均显著升高（P<0.05）。结论：miR-613通过靶向VEGFA抑制了神经胶质瘤细胞的侵袭、增殖和血管生成,提示miR-613可能成为未来治疗胶质瘤的潜在靶点。     

雷珠单抗联合复方血栓通胶囊对年龄相关性黄斑变性患者血液流变学和血清VEGF、PDGF的影响

摘要 目的：观察雷珠单抗联合复方血栓通胶囊对年龄相关性黄斑变性（AMD）患者血液流变学和血清血管内皮生长因子（VEGF）、血小板衍生生长因子（PDGF）的影响。方法：选取我院2019年6月~2021年1月收治的AMD患者60例（96眼）,按照随机数字表法分别为对照组（n=30,46眼）和实验组（n=30,50眼）,对照组给予雷珠单抗治疗,实验组给予雷珠单抗联合复方血栓通胶囊治疗,对比两组眼部相关指标、血液流变学指标和血清VEGF、PDGF水平变化情况,观察两组治疗期间不良反应发生情况。结果：实验组治疗3个月后眼内压（IOP）、黄斑中央区厚度（CMT）、脉络新生血管（CNV）面积低于对照组,视力高于对照组（P<0.05）。实验组治疗3个月后全血低切/中切/高切黏度、血浆黏度低于对照组（P<0.05）。实验组治疗3个月后血清VEGF、PDGF水平低于对照组（P<0.05）。两组不良反应发生率对比无差异（P>0.05）。结论：雷珠单抗联合复方血栓通胶囊可改善AMD临床症状,促进视力恢复,其作用机制可能与调节机体血液流变学、血清VEGF、PDGF水平有关。     

血清cfDNA、VEGFA与晚期胃癌患者化疗疗效和预后的关系研究

摘要 目的：研究血清循环游离脱氧核糖核酸（cfDNA）、血管内皮生长因子A（VEGFA）与晚期胃癌患者化疗疗效和预后的关系。方法：选取2018年6月~2020年6月在空军第九八六医院接受含奥沙利铂方案化疗的晚期胃癌患者108例,所有患者均接受含奥沙利铂方案化疗,化疗2个周期后,根据实体瘤疗效评价标准（RECIST）1.1版评估疗效分为敏感组和不敏感组,比较两组血清cfDNA、VEGFA水平;随访24个月,Kaplan-Meier生存曲线分析血清cfDNA、VEGFA高表达和低表达组的总生存期（OS）,采用Cox风险比例模型进行预后多因素分析。结果：不敏感组血清cfDNA、VEGFA水平显著高于敏感组（P＜0.05）。cfDNA、VEGFA高表达组患者中位OS均明显短于cfDNA、VEGFA低表达组（P＜0.05）。Cox回归模型单因素分析显示,性别、年龄、部位与晚期胃癌预后无关（P＞0.05）,而TNM分期Ⅳ期、分化程度低分化、有淋巴结转移、化疗疗效不敏感、cfDNA高水平、VEGFA高水平与晚期胃癌预后差显著相关（P＜0.05）。Cox回归模型多因素分析显示,淋巴结转移、化疗疗效不敏感及cfDNA、VEGFA水平高是晚期胃癌患者预后的危险因素（P＜0.05）。结论：血清cfDNA、VEGFA水平检测有助于晚期胃癌患者化疗疗效监测和预后评估。     

TRB3基因敲除减轻糖尿病小鼠中骨骼肌萎缩和纤维化的研究

摘要 目的：探讨TRB3基因敲除对糖尿病小鼠中骨骼肌萎缩和纤维化的影响。方法：选择30只TRB3敲除（TRB3-/-）小鼠和30只C57/BL6J小鼠，随机分为4组，包括TRB3基因敲除糖尿病模型组（A组）、TRB3基因敲除正常对照组（B组）、普通对照组（C组）和糖尿病模型组（D组）。正常对照组小鼠喂养标准大鼠饲料，糖尿病模型小鼠使用腹腔注射小剂量链脲佐菌素的方法建立糖尿病小鼠模型。进行前肢握力测试、悬栅试验、肌肉功能试验，同时测定骨微结构各指标水平、抗I型胶原蛋白和抗III型胶原蛋白水平、萎缩基因MuRF1和Atrogin-1水平。结果：A组、B组、D组小鼠前肢握力显著低于C组，其中D组小鼠前肢握力最低（P<0.05）；A组、B组、D组小鼠悬栅试验倒挂时间显著低于C组，其中D组小鼠悬栅试验倒挂时间最短（P<0.05）；A组、B组、D组小鼠肌肉功能CSA值显著低于C组，其中D组小鼠肌肉功能CSA值最低（P<0.05）；A组、B组、D组小鼠骨微结构指标BMD、BV/TV、Tb.N、Tb.Th值显著小于C组，其中D组数值最低（P<0.05）；而Tb.Sp和SMI值显著大于C组，其中D组数值最高（P<0.05）；A组、B组、D组小鼠抗I型胶原蛋白和抗III型胶原蛋白水平显著高于C组，其中D组抗I型胶原蛋白和抗III型胶原蛋白水平最高（P<0.05）；A组、B组、D组小鼠萎缩基因MuRF1和Atrogin-1水平显著高于C组，其中D组萎缩基因MuRF1和Atrogin-1水平最高（P<0.05）。结论：TRB3基因敲除可显著减轻糖尿病小鼠中骨骼肌萎缩和纤维化，增加骨强度。     

针刺百会穴对产后抑郁小鼠行为学改变和海马区NMDAR相关蛋白表达的影响

摘要 目的：研究针刺百会穴对产后抑郁小鼠行为学改变和海马区N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDAR）相关蛋白表达的影响。方法：30只C57BL/6母鼠被随机分为对照组、模型组和治疗组,每组30只。模型组和治疗组小鼠在妊娠期间通过皮下注射地塞米松磷酸钠建立产后抑郁小鼠模型,对照组小鼠皮下注射等量的生理盐水作为对照。治疗组小鼠分娩后通过针刺百会穴治疗14天,模型组和对照组小鼠不进行治疗。比较三组小鼠24 h食物消耗量和体重,黑白箱实验中白箱停留时间和黑白箱穿梭次数,以及强迫游泳实验不动状态时间和悬尾实验中悬尾不动时间。同时,通过免疫印记法检测三组小鼠海马去NMDA受体（NR2A和NR2B）、cAMP 结合蛋白(CREB) 和钙调蛋白激酶II(CaMKII) 蛋白表达水平。结果：治疗前,产后抑郁小鼠24 h食物消耗量、体重、白箱停留时间、黑白箱穿梭次数以及海马区CREB蛋白表达水平均显著低于对照组小鼠（P<0.05）,而游泳不同状态时间、悬尾不动时间和海马区NR2A、NR2B、cAMP蛋白表达水平均显著高于对照组小鼠（P<0.05）。治疗后,针刺百会穴治疗组小鼠24 h食物消耗量、体重、白箱停留时间和黑白箱穿梭次数以及海马区CREB蛋白表达水平均显著高于模型组小鼠（P<0.05）,而游泳不同状态时间、悬尾不动时间和海马区NR2A、NR2B、cAMP蛋白表达水平均显著低于模型组小鼠（P<0.05）。结论：针刺百会穴可以显著改善产后抑郁小鼠行为学情况,提高其运动能力,其可能与影响产后抑郁小鼠NMDAR相关蛋白表达有关。     

IL-6抗体对银屑病小鼠的治疗作用及其对外周血辅助性T细胞和树突状细胞影响的研究

摘要 目的：研究白介素-6（Interleukin-6,IL-6）抗体对银屑病小鼠的治疗作用,并探讨IL-6抗体治疗对银屑病小鼠外周血辅助性T细胞和树突状细胞影响。方法：30只6-8周龄SPF级BALB/c小鼠按照随机数字表法分为Normal组、Model组和IL-6组,Model组和IL-6组小鼠通过在背部脱毛区涂抹咪喹莫特建立银屑病小鼠模型。IL-6组小鼠通过在背部脱毛区皮下注射IL-6抗体进行治疗。比较三组小鼠皮损组织银屑病皮损面积及严重程度指数（psoriasis area and severity index,PASI）、表皮厚度和血管数、血清TNF-α、IL-17和IL-23含量、外周血树突状细胞、Th17细胞和Th22细胞比例以及皮损组织IL-6、IL-21和STAT3蛋白表达。结果：IL-6抗体治疗后,Model组和IL-6组小鼠皮损组织PASI、表皮厚度和血管数,血清TNF-α、IL-17和IL-23含量,外周血树突状细胞、Th17细胞和Th22细胞比例,以及皮损组织IL-6、IL-21和STAT3蛋白表达均显著高于Normal组小鼠（P<0.05）;与Model组相比,IL-6组小鼠皮损组织PASI、表皮厚度和血管数,血清TNF-α、IL-17和IL-23含量,外周血树突状细胞、Th17细胞和Th22细胞比例,以及皮损组织IL-6、IL-21和STAT3蛋白表达均显著降低（P<0.05）。结论：IL-6抗体对银屑病小鼠模型具有较好的治疗作用,其机制可能与通过抑制IL-6/STAT3通路影响Th17/Th22和树突状细胞水平有关。     

KGF联合HIF-1α对BECN1敲除IEC-6细胞缺氧的保护作用及机制

摘要 目的：探讨KGF联合HIF-1α对BECN1敲除后的IEC-6细胞在缺氧应激状态下的保护作用及相关机制。方法：构建敲除BECN1基因的稳定细胞系IEC-6B-细胞,分为空白对照组（BC）、阴性对照组（NC）、HIF-1α组、KGF联合HIF-1α组（KH）。观察细胞形态学改变。检测细胞存活率、ATP含量、细胞周期和细胞凋亡率。检测自噬相关基因表达水平和凋亡、自噬相关蛋白的表达。结果：低氧处理24 h后,各组细胞可见梭形、星形及其它异常形态变化;NC组细胞胞质内可见大量大小不一的吞噬溶酶体泡;其他各组细胞呈现细胞早期凋亡形态变化,BC组和KH组细胞胞质中可见自噬泡。与BC组相比较,各敲除组细胞存活率均显著降低（P<0.01）,其中KH组细胞存活率高于NC组、KGF组及HIF-1α组（P<0.05）。BC组细胞内ATP含量均显著高于其他各组（P<0.05）。与BC组和KH组比较,其他三组细胞G0/G1期百分比显著增加,细胞凋亡率均显著增加（P<0.05）。与BC组相比较,其余各组细胞自噬基因BECN1、SQSTM1及LC3基因mRNA表达均显著降低（P<0.05）;Beclin 1蛋白及LC3 II/LC3 I的比值均显著降低（P<0.05）,且p62蛋白表达显著增加（P<0.05）。KH组的Bax/Bcl-2的比值、Caspase3蛋白表达低于NC组（P<0.05）。结论：KGF联合HIF-1α能促进细胞增殖、增强细胞能量代谢、减少G₀/G₁期阻滞细胞率、抑制细胞凋亡作用,对低氧应激的IEC-6B-细胞具有保护作用。     

痛敏穴刺血加艾灸疗法治疗类风湿关节炎临床疗效研究

摘要 目的：观察痛敏穴刺血加艾灸疗法治疗类风湿关节炎（RA）患者的临床疗效。方法：选取2019年1月~2022年1月44例类风湿关节炎患者随机分为2组,每组22例。对照组予以来氟米特片和塞来昔布胶囊治疗,观察组在对照组基础上采用痛敏穴刺血加艾灸疗法。两组患者治疗前后采用视觉模拟评分法（VAS）和疾病活动评分（DAS-28）进行评估,并检测类风湿因子(RF)、超敏C反应蛋白（hs-CRP）、血沉(ESR)、类风湿因子（RF）、纤维蛋白原（FIB）、D二聚体水平。结果：两组治疗后VAS评分降低（P<0.05）,而研究组较对照组低（P<0.05）。两组治疗后DAS-28评分降低（P<0.05）,而研究组较对照组低（P<0.05）。两组治疗后RF、hs-CRP、FIB、D二聚体水平均明显下降（P<0.05）,而研究组均明显低于对照组（P<0.05）。观察组总有效率（100.00 %）明显高于对照组（72.73 %）（P<0.05）。结论：痛敏穴刺血加艾灸能够提高RA患者的临床疗效,且能够提高机体的抗炎效应。     

和血明目片联合全视网膜激光光凝术对糖尿病视网膜病变患者视力状况、血液流变学及脉络膜厚度的影响

摘要 目的：探讨和血明目片联合全视网膜激光光凝术（PRP）对糖尿病视网膜病变（DR）患者视力状况、血液流变学及脉络膜厚度的影响。方法：选择2018年3月~2019年12月期间来安徽省第二人民医院接受治疗的60例DR患者,经计算机随机编号按奇偶顺序分为对照组（奇数,n=30）和研究组（偶数,n=30）,两组在接受常规降糖治疗的基础上,对照组患者接受PRP治疗,研究组患者接受和血明目片联合PRP治疗,对比两组临床总有效率,观察两组治疗前后的视力状况、血液流变学及脉络膜厚度变化。结果：研究组的临床总有效率高于对照组（P<0.05）。治疗后,两组裸眼视力、视野、视敏度均升高,研究组的升高程度大于对照组（P<0.05）。治疗后,两组血浆黏度（PV）、红细胞聚集指数（AI）、全血高切黏度（NBH）、全血低切黏度（NBL）、血沉（ESR）均下降,研究组的下降程度大于对照组（P<0.05）。治疗后,两组黄斑中心凹下脉络膜厚度（SFCT）、下方脉络膜厚度（ICT）、上方脉络膜厚度（SCT）、鼻侧脉络膜厚度（NCT）、颞侧脉络膜厚度（TCT）均下降,研究组的下降程度大于对照组（P<0.05）。两组均未见明显的不良反应发生。结论：和血明目片联合PRP可有效改善DR患者的视力状况、血液流变学及脉络膜厚度。     

顺铂联合VEGF抗体对食管癌移植瘤小鼠免疫调节以及癌细胞增殖和肺转移的影响

摘要 目的：研究顺铂联合血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）治疗对食管癌移植瘤小鼠免疫功能、癌细胞增殖以及肺转移的影响。方法：30只BALB/c小鼠通过皮下注射食管癌移植瘤模型。一周后,30只食管癌移植瘤模型小鼠被随机均分为3组,即模型组、顺铂组和联合组。模型组不进行治疗,顺铂组腹腔注顺铂治疗,联合组腹腔注射顺铂联合尾静脉注射VEGF抗体进行治疗,共治疗7周。比较各组小鼠体重,食管癌移植瘤体积和重量,卵巢癌细胞肺组织转移结节数、癌细胞转移面积和转移病灶总数,以及食管癌移植瘤外周血CD4⁺、CD8⁺以及CD4⁺/CD8⁺ T淋巴细胞比例。结果：（1）顺博组和联合组小鼠体重均显著高于对照组,而联合组小鼠体重显著高于顺铂组（P<0.05）;（2）顺铂组和联合组小鼠CD4+和CD8+细胞比例均显著低于对照组（P<0.05）,而CD4⁺/CD8⁺却显著高于对照组（P<0.05）;（3）联合组小鼠CD4⁺和CD8⁺细胞比例均显著高于对照组（P<0.05）,而CD4⁺/CD8⁺却显著低于顺铂组（P<0.05）;（4）顺铂组和联合组小鼠食管癌肿瘤组织体积和重量,肺转移结节数、转移面积和转移病灶数均显著低于对照组（P<0.05）,而联合组小鼠显著低于顺铂组（P<0.05）。结论：VEGF抗体可以显著增强顺铂在体内对食管癌的抗癌特性,并有助于增强食管癌移植瘤小鼠免疫功能、抑制癌细胞体内增殖和肺部转移。