婴儿双歧杆菌对小鼠肉瘤S180的抑制作用

本文主要观察婴儿双歧杆菌(Bif. 189—3)对小鼠皮下移植肉瘤180(S180)的抑制作用。结果发现,该菌无论在S180移植前或移植后经皮下注射,均能明显抑制皮下移植S180的增长,并使带瘤鼠存活期显著延长。病理检查见实验组肿瘤坏死明显,肿瘤周围有大量炎症细胞浸润。提示该菌能非特异性增强肿瘤局部的免疫反应。     

成都地区母乳双歧杆菌对婴儿肠道双歧杆菌构建的影响

观察不同喂养方式婴儿肠道双歧杆菌的构建规律,初步探索母乳双歧杆菌与婴儿肠道双歧杆菌之间的相关性。

在四川大学华西第二医院纳入57对母婴志愿者,根据喂养方式分为母乳（BF）组（n = 31）和混合喂养（MF）组（1月龄内添加奶粉时间＞8 d,n = 26）,收集产妇产后0天、第30天的母乳,以及婴儿出生后0天、第7天、第30天的粪便。采用实时荧光定量PCR测定母乳和婴儿粪便中双歧杆菌属、角双歧杆菌（B. angulatum）、链双歧杆菌（B. catnulatum）、齿双歧杆菌（B. dentium）、短双歧杆菌（B. breve）、两歧双歧杆菌（B. bifidum）、长双歧杆菌长亚种（B. longum subsp. longum）、长双歧杆菌婴儿亚种（B. longum subsp. infantis）及青春双歧杆菌（B. adolescentis）的丰度。观察2组婴儿肠道双歧杆菌0―7―30天的构建规律;分析母乳双歧杆菌与婴儿肠道双歧杆菌之间的相关性。

0―7―30天2组婴儿肠道双歧杆菌构建过程存在差异。母乳双歧杆菌与婴儿肠道双歧杆菌存在相关：0 d时,BF组母乳B. angulatum与婴儿肠道B. longum subsp. longum呈正相关（r = 0.962 3,P = 0.037 7）,母乳B. longum subsp. infantis与婴儿肠道B. longum subsp. longum、B. breve及B. dentium呈正相关（r = 0.998 4,P = 0.036 1;r = 1.000 0,P = 0.000 2;r = 1.000 0,P = 0.002 3）,母乳B. catnulatum与婴儿肠道B. dentium呈正相关（r = 0.997 7,P = 0.043 1）;30 d时,BF组母乳B. adolescentis与婴儿肠道双歧杆菌属呈正相关（r = 0.532 2,P = 0.013 0）,母乳B. longum subsp. longum与婴儿肠道B. breve、B. catnulatum呈负相关（r = ‒0.458 9,P = 0.048 1;r = ‒0.520 7,P = 0.032 1）,母乳B. catnulatum与婴儿肠道B. angulatum呈负相关（r = ‒0.682 8,P = 0.007 1）,母乳双歧杆菌属与婴儿肠道B. longum subsp. longum呈负相关（r = ‒0.714 3,P = 0.046 5）;30 d时,MF组母乳B. bifidum与婴儿肠道B. longum subsp. longum呈正相关（r = 0.579 2,P = 0.030 0）,母乳B. angulatum与婴儿肠道B. catnulatum呈正相关（r = 0.550 1,P = 0.022 1）。

喂养方式会影响婴儿肠道双歧杆菌构建;母乳中存在双歧杆菌且与婴儿肠道双歧杆菌相关,母乳喂养与婴儿肠道双歧杆菌的相关性更密切,尤其0 d时相关性更强;混合喂养可能由于奶粉的添加使母乳双歧杆菌与婴儿肠道双歧杆菌的相关性降低,规律性减弱。

     

芍药苷对哮喘模型小鼠气道炎症趋化因子及受体的干预作用

目的观察芍药苷给药后对小鼠哮喘模型气道炎症趋化因子及受体的影响。方法用卵蛋白(OVA)致敏和激发建立小鼠哮喘模型;ELISA法检测血清IL-6、TNF-α水平及支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中卵蛋白特异性Ig E(OVA-Ig E)和趋化因子CCL19、CCL21水平;RT-PCR法检测肺组织中趋化因子受体CCR7mRNA表达;Western blot检测肺组织CCR7及核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)蛋白表达。结果芍药苷干预组小鼠血清IL-6、TNF-α水平显著下降;BALF中OVA-Ig E和CCL19、CCL21水平显著降低;肺组织CCR7mRNA、CCR7及NF-κB蛋白表达明显减少。结论芍药苷对哮喘模型小鼠气道炎症趋化因子CCL19/CCL21及其受体CCR7具有显著的抑制作用。     

双歧杆菌发酵果蔬汁对小鼠抗疲劳作用的实验研究

目的检测发酵果蔬汁对小鼠的抗疲劳作用。方法将3种果蔬汁按一定比例加入双歧杆菌、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌,经发酵,分别以高中低3个剂量喂食小鼠30d后,进行小鼠负重游泳实验,检测肝糖原、乳酸和尿素氮等各项抗疲劳指标。结果3种果蔬汁均能显著延长小鼠负重游泳时间,提高小鼠肝糖原的储备量;降低小鼠游泳后血乳酸和尿素氮均值,增加血红蛋白含量及乳酸脱氢酶活性,减少血尿酸含量。且抗疲劳强度程度与型量声低有一定相差。结论3种发酵果蔬汁具有抗疲劳作用。     

三七总皂苷对支气管哮喘小鼠气道炎症及气道重建的影响

目的:探讨三七总皂苷对支气管哮喘小鼠气道炎症及气道重建的影响。方法:选择昆明种小鼠24只,将其随机分为三七总皂苷(PNS)治疗组、阳性对照组(哮喘组)和阴性对照组,每组8只。小鼠腹腔内注射氢氧化铝-卵清蛋白悬浊液(OVA-Al(OH)3)进行致敏,致敏完成后用2%卵清蛋白溶液(OVA)雾化激发,在激发前30分钟给药治疗,雾化激发6周。建模完成后,做心肺组织灌流,取左肺固定做HE染色,镜下观察评估气道病理学改变(气道狭窄阻塞率、气道上皮坏死糜烂率、上皮细胞杯状化生率、炎性细胞浸润率及平滑肌增生率);行免疫组织化学染色,用图像分析软件半定量测量转化生长因子-beta1(TGF-β1)的含量;行特殊染色,用图像分析软件测量基底膜厚度;取右肺组织,利用酶联免疫吸附法(ELISA)测定肺组织匀浆白介素-17(IL-17)因子的水平。结果:1各组小鼠经心肺组织灌流后,与哮喘组比较,三七治疗组小鼠的肺部红肿减轻,肺表颜色较正常组略微泛红。2三七治疗组气道狭窄率、上皮细胞坏死率、炎细胞浸润率、平滑肌增生率均显著低于哮喘组(P0.05),但与正常组比较无显著性差异(P0.05)。3三七治疗组气道上皮细胞TGF-β1含量显著低于哮喘组(P0.001),肺组织白介素-17含量降低至哮喘组一半以下(P0.05),与对照组相比均无显著性差异(P=0.94,P=0.23)。4哮喘组、三七组和对照组小鼠的支气管基底膜厚度分别为(0.7893±0.014)、(0.7216±0.016)、(0.5655±0.012)μm,哮喘组显著高于三七组和对照组,均具有显著性差异(P0.05)。结论:三七总皂苷可以有效改善支气管哮喘小鼠的气道重建,并抑制其气道炎性。     

平喘固本合剂对昆系小鼠急性哮喘模型气道炎症作用影响

目的:探讨平喘固本合剂对昆系小鼠急性哮喘模型气道炎症作用影响及相关机制。方法:昆明系小鼠40只,随机分为对照组(A),哮喘模型组(B),喘固本合剂治疗组(C),布地奈德雾化治疗组(D)及平喘固本合剂联合布地奈德雾化治疗组(E)。用鸡卵蛋白(OVA)致敏建立昆系小鼠哮喘急性气道炎症模型,并给与药物治疗10天。对各组支气管肺泡灌洗液(BALF)中各种细胞进行分类并计数,观察肺组织的病理变化,同时应用ELISA法测定灌洗液中炎症相关因子的水平变化。结果:与B组比较,C组、D组、E组BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞数、巨噬细胞数及IL-4、IL-4/IFN-γ明显降低(P<0.05),IFN-γ明显升高(P<0.05)。对于IL-4、IL-4/IFN-γ水平的比较C组与D组无明显统计学差异,E组与两者具有明显统计学意义(P<0.05)。HE染色显示C组、D组、E组较单纯模型组炎症细胞浸润,平滑肌肥厚及黏膜肺组织水肿等炎症表现明显减轻。结论:平喘固本合剂对哮喘昆系小鼠气道炎症有明显的抑制作用,其作用机制可能与抑制IL-4的表达、炎性细胞聚积及促进IFN-γ的表达有关,并且可能与糖皮质激素有一定协同作用。     

小青龙汤对小鼠支气管哮喘模型气道炎症及细胞因子的影响

目的:探讨中药方剂小青龙汤对小鼠哮喘模型气道炎症及细胞因子的影响。方法:40只BALB/c小鼠随机分为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、小青龙汤低剂量组(C组)和小青龙汤高剂量组(D组)。B、C、D组采用卵蛋白(OVA)腹腔注射致敏与雾化吸入激发制作哮喘模型。于OVA激发结束后24h收集支气管肺泡灌洗液(BALF)计数炎性细胞总数及嗜酸性粒细胞(EOS)数目,并测定BALF上清液中白细胞介素-4(IL-4)和干扰素-γ(IFN-γ)水平变化。结果:小青龙汤的干预治疗能显著降低小鼠BALF中炎性细胞总数及EOS数量;BALF上清液中IFN-γ水平明显升高,IL-4水平显著下降。D、C组与A组、B组有显著性差异(P<0.05),C组与D组结果亦存在显著性差异(P<0.05)。结论:小青龙汤能明显降低哮喘小鼠BALF中炎性细胞数量,影响细胞因子水平变化,从而改善哮喘气道炎症。     

青春双歧杆菌对1型糖尿病小鼠胰岛β细胞的保护作用

目的 探讨青春双歧杆菌对1型糖尿病小鼠胰岛β细胞的保护作用.方法 给予1型糖尿病小鼠口服青春双歧杆菌,观察实验组和对照组体重的变化及糖尿病发病率.ELISA法测定血清、脾细胞上清IL-4和IFN-γ浓度,电镜观察胰岛超微结构变化.结果 15周龄时实验组体重(23.41±1.64)g, 而对照组为(22.31±1.32)g(P<0.05);实验组发病率低于对照组(P＜0.05);实验组血清、脾细胞上清IL-4浓度明显高于对照组,而IFN-γ低于对照组(P<0.05);对照组残存胰岛的β细胞数目稀少,有核膜和内浆网扩张、核糖体脱颗粒和分泌颗粒空泡样变等超微结构异常,而实验组胰岛β细胞数显著多于对照组(P<0.05),且无上述超微异常.结论 青春双歧杆菌通过上调IL-4水平,降低IFN-γ水平,促使免疫平衡向Th2方向偏移,且有保护胰岛β细胞超微结构的作用,在一定程度上可预防和延缓NOD鼠糖尿病的发生.     

酪酸梭菌和婴儿型双歧杆菌对霍乱弧菌的拮抗试验

了解酪酸梭菌和婴儿型双歧杆菌单独及混合培养时对霍乱弧菌的拮抗作用。将酪酸梭菌ＬＣＬ１６６和婴儿型双歧杆菌ＬＣＬ１７２分别与霍乱弧菌Ｏ１、Ｏ１３９单独和混合培养,定时对霍乱弧菌计数,并对菌数的对数进行在检验。两株菌混合培养时对霍乱弧菌的抑制效果基本相同,单独和混合培养时对霍乱弧菌的拮抗作用主要由酪酸梭菌引起,酪酸梭菌具有抑制霍乱弧菌的作用。     

双歧杆菌对免疫抑制小鼠白色念珠菌感染的保护作用

为探讨双歧杆菌对白色念珠菌感染的保护作用,作者采用环磷酰胺腹腔注射方法复制了免疫抑制小鼠模型,研究白色念珠菌感染前后两歧双歧杆菌灌饲的保护作用。结果表明：白色念珠菌感染前灌饲两歧双歧杆菌能有效地抑制白色念珠菌在小鼠肠道中的定植,并且保护肠粘膜的完整性。对其机理的研究认为,两歧双歧杆菌可能是通过调整肠道菌群平衡、增加肠道中生理菌群的数量、降低肠道ｐＨ值、以及产生抗菌物质等途径发挥保护作用     

双歧杆菌对PHN保护作用的研究

被动型Ｈｅｙｍａｎｎ肾炎（ＰａｓｉｖｅＨｅｙｍａｎｎＮｅｐｈｒｉｔｉｓ,ＰＨＮ）是一种在临床生化及病理学改变方面均酷似人类膜性肾病的实验动物模型,是研究人类膜性肾病的理想模型。本文在成功复制ＰＨＮ模型的基础上,应用双歧杆菌经口饲喂和腹腔内注射两种途径治疗ＰＨＮ大鼠,同时以生理盐水作为治疗对照。结果表明腹腔内注射双歧杆菌可以明显降低２４小时尿蛋白（与经口饲喂和治疗对照组相比Ｐ＜００５）,而经口饲喂双歧杆菌组,作用不明显,推测双歧杆菌全身应用可以通过提高机体细胞免疫能力降低该病的发生     

婴儿双歧杆菌对花生过敏小鼠模型肠道Th2反应的调节

目的研究婴儿型双歧杆菌对花生过敏小鼠肠道Th2型反应的调节作用。方法通过应用花生蛋白诱导肠道的Th2型反应,建立食物过敏小鼠模型。过敏小鼠灌胃给予婴儿型双歧杆菌（ATCC菌或CGMCC0313-2）或不做处理。然后分离小鼠小肠黏膜CD4＋T细胞或DC,另取肠黏膜组织进行石蜡包埋甲苯胺蓝染色肥大细胞计数,HE染色进行嗜酸细胞和单个核细胞计数,流式细胞检测CD4＋T中Th2（CD4＋IL4＋T）细胞和Treg（CD4＋CD25＋Foxp3＋T）比例,另取CD4＋T进行CFSE标记,与DC共培养4d后流式细胞检测CD4＋T增殖反应,收集细胞培养液ELISA检测IL-4、IL-5和IL—13分泌水平。结果过敏组小鼠Th2型细胞数,CD4＋T细胞增殖反应,IL4、IL-5和IL-13水平,肠黏膜中肥大细胞、嗜酸性细胞和单个核细胞数均明显高于对照组（P〈0．01）,而Treg数目低于对照组（P〈0．01）,婴儿双歧杆菌干预后,婴儿双歧杆菌组Th2型细胞数,IL4、IL-5和IL-13水平,肠黏膜中肥大细胞、嗜酸性细胞和单个核细胞数均明显低于过敏组（P〈0．01）,而Treg数目高于过敏组（P〈0．01）。结论口服婴儿型双歧杆菌可以抑制花生过敏导致的肠道Th2型反应。     

酪酸梭菌与婴儿型双歧杆菌对产气荚膜梭菌试管内生物拮抗作用的研究

用酪酸权菌（Clostridium butyricum）和婴儿型双歧杆菌（Bifidobacterium Infantis）对产气荚膜梭菌（Clostriduim perfringens）进行试管内的生物拮抗试验。将酪酸梭菌、婴儿型双歧杆菌及酪酸梭菌和婴儿型双歧杆菌分别对产气荚膜酸菌以一定的比例等量混合接种于GAM液体培养基中进行厌氧培养。实验证明酪酸梭菌和婴儿型双歧能明显抑制产气荚膜梭菌的生长,并且比各自单独培养时显示了较强的生物拮抗作用。     

婴儿肠道双歧杆菌多样性的研究进展

双歧杆菌是婴儿肠道中最丰富的微生物,对婴儿肠道微生物的成熟和稳定有显著影响,与婴儿健康紧密相关。大量研究表明,婴儿肠道中最广泛存在的双歧杆菌有长双歧杆菌、短双歧杆菌和两歧双歧杆菌。母婴之间垂直传递可直接影响婴儿肠道中双歧杆菌各种属的早期定植和相对丰度变化,特别是分娩方式和喂养方式会显著影响婴儿肠道双歧杆菌。此外,胎龄和辅食等因素对婴儿肠道中双歧杆菌的组成与多样性也有一定影响。本文对婴儿肠道双歧杆菌的种属组成、相对丰度变化以及影响其多样性的因素进行了综述,为婴儿双歧杆菌群落的认识提供一定的理论依据。     

分叉双歧杆菌对小鼠腹水瘤的抑制作用

本文观察了分叉双歧杆菌对小鼠腹腔移植的淋巴细胞腹水瘤(SRS)的抑制作用。结果发现,分叉双歧杆菌在SRS瘤细胞移植前或移植后应用,均能明显抑制瘤细胞的生长,特别在移植后应用,抗瘤效果更显著。主要表现为荷瘤小鼠存活时间延长、存活率提高。将该菌预先进行处理或不处理后加入体外培养的SRS瘤细胞中,发现该菌对离体的瘤细胞生长也有直接抑制作用。     

双歧杆菌发酵果蔬汁对小鼠免疫调节机制的研究

目的研究双歧杆菌发酵果蔬汁对小鼠免疫调节作用的机制。方法将小鼠随机分成纯净水对照组、非发酵果蔬汁组和发酵果蔬汁低、中、高三个剂量组,饮水法喂饲小鼠30d,检测小鼠脾细胞的增殖能力及T淋巴细胞亚群,ELISA法测定血清IL-6和IFN-γ水平。结果发酵果蔬汁可增强小鼠脾细胞的增殖能力,T细胞表面标志CD3、CD4、CD8表达增强,促进血清中IL-6和IFN-γ的生成。结论双歧杆菌发酵果蔬汁能提高小鼠的体液、细胞免疫和非特异性免疫功能,并呈剂量效应关系。     

树突状细胞在哮喘慢性气道炎症中的作用

树突状细胞(dendritic cells, DCs)作为专职抗原提呈细胞启动了哮喘初次免疫应答,但是DCs在抗原特异性免疫应答及其引发的哮喘慢性气道炎症反应中的作用存在一定争议,需要重新认识。本文通过综述相关研究,认为DCs在哮喘中的免疫活性并不局限于启动过敏原诱发的初次免疫应答,DCs还可以通过激活记忆性T细胞参与介导抗原特异性免疫应答,并在哮喘慢性气道炎症病理进程中发挥重要作用。此外,在多种因素作用下,哮喘气道DCs可以分化为具有免疫抑制作用或引起免疫耐受的调节性DCs (DCreg)或耐受性DCs (tolDC),抑制哮喘Th2细胞主导的慢性气道炎症。通过调节气道免疫微环境或细胞内源性信号分子,抑制DCs在抗原特异性免疫应答中活化记忆性T细胞的能力,或通过诱导DCreg/tolDC细胞分化,进而控制慢性气道炎症,将是未来防治哮喘新的重要研究方向。     

短双歧杆菌和嗜酸性乳杆菌对小鼠抗肿瘤活性的激活作用

用活的短双歧杆菌,嗜酸性乳杆菌和BCG给昆明小鼠腹腔注射,在原位激活后,由肝脏分离的非实质性细胞(NPC)对YAC-1,P815和L929的细胞毒性作用,以及NPC和Kupffer(KC)培养上清中所显示出对三株瘤细胞的肿瘤坏死因子(TNF)活性都比对照组明显增强。其次,胸腺细胞和脾细胞对ConA刺激的增殖反应也明显增强。实验结果表明双歧杆菌和乳杆菌在小鼠体内诱发抗肿瘤活性的启动能力与BCG几乎相等。     

通光散汤对小鼠哮喘模型气道高反应性和气道炎症的影响

目的观察通光散对小鼠哮喘模型气道反应和气道炎症的影响。方法35只6周龄BALB／c小鼠随机分为哮喘模型组、正常对照组和药物实验组。模型组和药物组以鸡卵白蛋白（OVA）致敏、激发;药物组在最后一次致敏后每天灌胃给予通光散汤0．72mL（相当于0．04g生药）;对照组以等体积的Ns代替OVA致敏、激发。末次激发48h后处理小鼠：无创法测定小鼠的气道高反应性,观察气道阻力变化;支气管肺泡灌洗液（BALF）行细胞学分类;观察肺组织的病理变化。结果①药物组小鼠气道阻力的变化与模型组相比明显下降,差异显著（P＜0．05）;②药物组BALF白细胞总数和Eos（％）与模型组相比明显降低（P＜0．05）。③模型组小鼠肺脏组织支气管、血管黏膜下和周围肺组织有明显的炎症细胞浸润,大量炎症细胞向支气管和血管迁移,上皮细胞部分有脱落,部分可见黏液栓,血管壁明显水肿;治疗组小鼠肺组织炎性细胞浸润和管腔黏液分泌情况较模型组明显减轻,气道粘液的分泌量得到明显的控制。结论通光散汤对小鼠哮喘模型气道高反应性和气道炎症有显著抑制作用。     

海带对双歧杆菌促生长作用的研究

探讨海带对双歧杆菌生长的促进作用。选用海带以平板打洞法、试管法对青春双歧杆菌和婴儿双歧杆菌进行了体外生长促进实验。结果发现,两种双歧杆菌在含有海带汁洞口周围,菌苔生长均较为茂盛;随着离洞口的距离渐近,菌苔逐渐增厚;随着海带汁浓度的增加,菌苔茂盛程度增加,活菌数亦增多;在海带培养基中,双歧杆菌增殖１２ 小时基本达到稳定期,与对照管比较,增殖速度快而稳定。结果表明海带对双歧杆菌增殖有稳定的促进作用。