苏云金杆菌幕虫亚种菌株的特性研究

苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)Bt53菌株是一株对仓库害虫具有高效杀虫活性的菌株,为其能在生产上有效控制仓储害虫,作者分别采用液体培养法、SDS-PAGE、喷雾处理等方法就该菌株的培养、生化及杀虫活性进行了系统的研究。研究结果表明在摇瓶培养条件下菌株Bt53优化培养基：玉米粉0．5%、黄豆粉2．0%、酵母粉0．10%、蛋白胨0．75%、磷酸二氢钾0．75%、碳酸钙0．15%;硫酸镁0．035%,培养时间40h,pH7．5,转速180r/mim,温度30℃为该菌株最佳培养条件。通过生化测定初步确定Bt53菌株为幕虫亚种。Bt53菌株晶体有菱形、长椭圆形、不规则形晶体及镶嵌形晶体,晶体大小不均,可产生分子量为43kD、15kD、19kD的晶体蛋白质。菌株Bt53对烟草粉螟二龄幼虫的室内防效以9d后发酵原粉稀释100、300倍的防效最好,超过80%。烟叶仓库中使用烟叶均匀喷雾处理比烟包表面喷雾处理效果稍好,防效较高。Bt53菌剂对烟叶的化学成分影响不大。用Bt53菌株防治烟叶仓库害虫有巨大的发展潜力。     

对烟草甲幼虫有毒杀作用的苏云金芽孢杆菌的分离与鉴定

目前仓库贮烟中烟草甲对烟叶危害较为严重,本研究试图通过筛选对烟草甲幼虫具有较高杀灭活性的苏云金芽孢杆菌菌株,以有效控制贮烟仓库中烟草甲虫害。我们收集了广西贮烟仓库中贮存的广西百色和贵州兴义生产的50份烟叶样品,利用醋酸钠筛选法共分离到芽孢杆菌137株,其中4株可能是苏云金芽孢杆菌,其菌株分离率和出菌率分别为2.91%和8.00%。扫描电镜显示GXZY032菌株能产生大量球形伴孢晶体蛋白,进一步的生理生化测定结果显示,菌株GXZY032与模式菌株Btt之间的生理生化反应特性表现基本相同,但在蔗糖发酵、淀粉水解、脲酶水解和卵磷脂酶4个项目反应上差异较大。对GXZY032菌株进行了生物毒力测定,发现该菌株对烟草甲幼虫的校正死亡率为72.5%,比模式菌株Btt的杀虫活性(86.25%)略微偏低。本研究结果将为后续发掘有效控制烟草甲幼虫的Bt菌株提供实验材料,为挖掘新型杀虫蛋白基因提供研究基础。     

云南烟叶中苏云金杆菌的分布及杀虫特性

采用4%NaCl培养基选择分离法,从云南7个生产烟区采集的450个复烤烟样中,分离出苏云金芽孢杆菌475株。分离出的Bt菌进行PCR毒素蛋白基因鉴定,其中含cryI毒素蛋白基因的Bt菌有7株,出菌率为1.47%;含cryV毒素蛋白基因的Bt菌11株,出菌率为2.32%;没有含cryⅢ毒素蛋白基因的Bt菌。对含毒蛋白基因cryⅠ及cryⅤ的18个Bt菌株用二龄烟草甲虫进行生物毒力测定,试验后9d有9个Bt菌件生物毒力测定校正死亡率均超过80%;试验后12d有5个Bt菌株生物毒力测定校正死亡率均超过95%。可见,用苏云金芽孢杆菌防治烟叶仓贮害虫是有潜力的。     

烤烟发酵有益细菌的分离筛选及优良菌株的鉴定

已有研究表明,利用从烟叶表面分离得到的微生物对烟叶进行发酵,可以改善烟叶的品质,在烟草生产中具有重要的应用潜力.本研究采用平板画线法,从烟叶、茶叶和笋干上分离得到细菌38株,并将这些菌株应用于烟叶发酵,根据烟叶化学成分和感官评吸对细菌处理的效果进行评价.结果发现,从烟叶上分离到的YX3、YX11和YX12等10个菌株可提高烟叶品质.对其中一个优良菌株(YX37)进行分子鉴定,结果表明其属于芽苞杆菌属.本研究结果证明了从烟叶表面分离烟叶发酵有益细菌的可行性和有效性,为细菌在烟草生产上的应用打下基础.     

烟草粉斑螟的观察

烟草粉斑螟是烟叶及卷烟贮存期的重要害虫。本工作研究了烟草粉斑螟的生活史、习性及影响消长的主要因子。在湖北省该虫一年发生2～3代,在26～30℃,相对湿度70～90％对,卵历期5～7天,幼虫期29～50天,幼虫5～6龄,蛹期6～18天。幼虫蚕食烟叶成孔洞,老熟幼虫在烟叶表面或麻袋及仓库隐蔽处吐丝结茧化蛹。烟叶从收购入库至贮存各环节均可遭受为害,以卷烟厂贮存过程受害最甚。通常高、中档烟叶受害重于低挡烟叶,其烟草粉斑螟种群密度随着贮存期的延长呈线性增加。烟叶含水量达13％时,幼虫发育迅速,为害重;含水量低于10％时,幼虫发育受到明显影响。     

贵州烟贮害虫发生危害的初步调查与防治

介绍了贵阳烟贮主要害虫烟草粉螟EphesiaelutellaH櫣ｂｎｅｒ、烟草甲虫ＬａｓｉｏｄｅｒｍａｓｅｒｒｉｃｏｒｎｅFabricius的发生危害与防治 ,并对其影响发生的因素进行了初析。     

醇化烟叶产蛋白酶菌株的分离鉴定及其对烟叶内在品质影响

目的从采自云南玉溪的醇化烤烟中分离得到15株产蛋白酶菌株,通过16SrRNA基因分析鉴定为芽胞杆菌属的菌株。方法为改善玉溪低次等烟叶的内在品质,利用分离到的15株产蛋白酶细菌进行发酵,发酵液经超滤制备得到的粗蛋白酶液,在室温条件下处理云南初烤烟叶,然后通过感官评吸进行评价。结果不同菌株来源的蛋白酶对烟叶感官质量改善效果不同,酶液P7、P9和P10可明显改善烟叶感官质量,烟叶香气质改善,杂气减轻,均衡性好;而酶液P5和P11则使烟叶的感官质量下降。结论研究为蛋白酶应用于烟草生产进行了有益的探索。     

一株分离自土壤的蜡蚧菌的鉴定及对烟草粉斑螟的致病性

【目的】蜡蚧菌Lecanicillium是自然界一类重要的昆虫病原真菌,为了获取更多的蜡蚧菌作为控虫真菌资源,对从森林中的根际土壤分离得到的一株蜡蚧菌进行鉴定以及与其他几种病原真菌进行烟草粉斑螟Ephestia elutella的致病性对比。【方法】采用形态特征比较和转录间隔区(ITS)序列构建分子系统树对从贵州贵定松林下土壤中分离的菌株进行综合鉴定,采用浸虫法对烟草粉斑螟3龄幼虫进行致病性筛选。【结果】根据形态特征比较和系统发育分析,该真菌为丝枝蜡蚧菌Lecanicillium aphanocladii。在测试菌株中,环链棒束孢Isaria cateinannulata、球孢白僵菌Beauveria bassiana和丝枝蜡蚧菌对烟草粉斑螟3龄幼虫7 d的校正死亡率分别为79.22%,64.92%和77.92%,表现出较好的致死效果。【结论】丝枝蜡蚧菌对烟草粉斑螟幼虫的致死效果较好,可用作仓储内烟草粉斑螟的生物防治资源。     

用2.5%敌杀死防治烟草粉螟老熟幼虫

烟草粉螟Ephestiaelulella（Htibner）,又名烟草粉斑螟,属鳞翅目、螟蛾科。以往由于长期单一地使用敌敌畏防治,致使该虫产生抗药性,防治效果减退。为解决卷烟生产的急需,我们在观察该虫生物学特性的基础上,于1993年7月起,用2．5％敌杀死在贵阳卷烟厂对烟草粉螟老熟幼虫进行了防治试验。l材料与方法烟草粉螟幼虫是从烟包内爬出来的老熟幼虫。2．5％敌杀死药剂由法国罗素——优克福公司生产。其方法：（l）将老熟供试幼虫分别放入培养皿（15X150）内,每组培养皿放幼虫10头,共设15组。设对照组,幼虫10头。然后将2．5％敌杀死分别稀…     

烟草内生真菌对烟草生长和烟叶重金属含量的影响

本文通过共培养试验、菌剂盆栽试验和田间小区试验研究了烟草内生真菌对烟苗生长和烟叶重金属含量的影响。结果表明:在199株烟草内生真菌中,镰刀菌菌株YCEF005和棘壳孢菌菌株YCEF053、YCEF191、YCEF193、YCEF199具有促进烟苗生长的作用,与内生真菌共培养的烟苗叶片数、根和地上部鲜重和干重均显著增加,YCEF005菌剂对盆栽烟草的生长促进作用最为显著。在Cd2+单一处理时,内生真菌YCEF005、YCEF053、YCEF191、YCEF193菌剂显著减少盆栽烟叶Cd含量25.87%–39.11%;在Cd2+、As3+、Pb2+混合处理时,内生真菌YCEF005、YCEF053、YCEF191、YCEF193菌剂显著减少盆栽烟叶Cd含量25.22%–50.56%、As含量22.10%–36.07%、Pb含量4.35%–47.01%;在田间小区试验中,采用YCEF005+YCEF053混合菌剂显著减少上部烟叶Pb含量18.66%、下部烟叶Cd含量22.41%。研究表明烟草内生真菌在促进烟草生长和减少烟叶重金属含量中具有一定的应用潜力。     

光合细菌改善新型烟草品质的初步研究

试验研究了喷施光合细菌菌液对新型烟草品质的影响。化学成分分析结果表明, 在苗期和大田以1：200的比例对烟叶叶面喷施光合细菌菌液, 对新型烟草内在化学成分的含量及其谐调性具有显著的影响, 尤其能够同时降低烟碱和增加钾的含量。评吸结果显示, 香味独特, 余味纯净, 劲头适中, 更加呈现出新型烟草所具有的品质特征。     

光合细菌改善新型烟草品质的初步研究

试验研究了喷施光合细菌菌液对新型烟草品质的影响.化学成分分析结果表明,在苗期和大田以1:200的比例对烟叶叶面喷施光合细菌菌液,对新型烟草内在化学成分的含量及其谐调性具有显著的影响,尤其能够同时降低烟碱和增加钾的含量.评吸结果显示,香味独特,余味纯净,劲头适中,更加呈现出新型烟草所具有的品质特征.     

真菌菌剂改善烟叶品质的初步研究*

利用分离自不同生境烟叶上的7个真菌菌株菌剂处理上部叶烤烟烟丝,分析表明,处理后烟叶内与品质相关的主要化学成分含量发生了改变,烟叶品质得到改善。其中菌株BF03、BF06及BF63使烟叶内糖、氮、烟碱、蛋白质等主要化学成分含量及各种成分之间比例趋于平衡。评吸结果表明,经供试菌剂处理的烟叶香气质提高,香气量增加,刺激性减小,余味舒适,烟叶品质明显高于对照。     

烟草与白花曼陀罗属间远缘杂种后代化学成分的研究

为缓解吸烟与健康的矛盾,通过常规育种的方法将普通烟草品种78-04与药用植物白花曼陀罗(Daturametel L.)进行属间远缘杂交育种,对选育出的新型烟草品系长柄曼陀罗烟(Mantuoluo tobacco)的内在化学成分和药用成分进行分析.酯酶同工酶和RAPD分析证实,长柄曼陀罗烟中转入了亲本药用植物的遗传物质.烟叶内在化学成分及药用成分分析显示,长柄蔓陀罗烟具有低糖、中高烟碱,含有东莨菪碱和阿托品等药用成分的特点.普通烟草与白花曼陀罗属间远缘杂交能创造变异、产生烟草新类型,对降低卷烟产品的危害性具有一定作用.     

烟蚜自然种群聚集与扩散趋势的初步研究

本文采用空间格局分析方法,从烟草移载到烟叶采收,对烟蚜Ｍｙｚｕｓ ｐｅｒｓｉｃａｅ在烟株和烟株上,中,下三个部位的聚集和扩散趋势,采用Ｍｏｎｔ Ｌｏｌｙｄ给出的方法,并结合Ｉｗａｏ的ｍ－ｍ回归分析法和ｍ－ｍ的改进模型进行判断分析。结果表明,六月下旬和七月中旬是烟蚜在烟株上的两个聚集高峰期。烟蚜在烟株不同部位的聚集和扩散趋势有所不同。整株烟株和上,中,下部烟蚜都呈聚集分布。分析结果对指导烟蚜防治有一     

烟草对烟粉虱的抗性与烟草化学成分的相关性

为探明烟草对烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)的抗性机制,分别测定了不同烟草品种的叶绿素相对含量、鲜烟叶及烤后烟叶的化学成分含量,并分析了烟草抗虫性与烟草化学成分的关系.结果表明,中部叶片叶绿素含量与烟粉虱数量呈负相关,相关系数达到了显著水平;鲜烟叶化学成分钾氯比、糖碱比、氮碱比、还原糖、烟碱、蛋...     

云南省烟草丛顶病发生规律及其综合防治

烟草丛顶病在云南西部烟区暴发流行,给烟叶生产带来严重损失,是烟草最主要的病害之一.目前烟草丛顶病得到了有效控制,但仍是烟区潜在的危险性病害.本文对烟草丛顶病的危害特征、发病症状、病原物、流行发病规律和综合防治研究进展进行了综述,提出了烟草丛顶病综合防治集成技术,可为进一步研究和防治烟草丛顶病或类似病害提供参考.     

溴氰菊酯亚致死浓度对烟草粉螟生物学特性的影响

为探讨溴氰菊酯对烟草粉螟的亚致死效应,本文采用烟叶浸渍法以溴氰菊酯亚致死浓度(LC 10和LC 25)胁迫烟草粉螟3龄幼虫,并通过年龄-龄期两性生命表的方法探究溴氰菊酯胁迫对烟草粉螟发育和繁殖的影响。结果显示:与对照相比,溴氰菊酯LC 10、LC 25处理F 0代的平均单雌产卵量显著下降;LC 25处理F 0代的产卵前期及总产卵前期明显长于对照;LC 25处理与LC 10处理和对照间,F 0代雌、雄虫寿命均差异显著;LC 10处理和LC 25处理F 1代与对照存活率明显下降,F 1代各处理间的卵、1龄幼虫、3龄幼虫、5龄幼虫、7龄幼虫和蛹的发育历期无显著差异;但LC 25处理组2龄、4龄、6龄幼虫历期比对照延长了且差异显著;LC 25处理组的成虫前期比对照组延长了且差异显著。同时LC 25处理的雌、雄虫寿命最短,但3个处理间差异不显著。研究表明,亚致死浓度的溴氰菊酯能够抑制烟草粉螟的生长发育和繁殖,以上研究结果可为田间用药控制烟草粉螟提供理论参考。     

抗烟青虫转基因烟草的培育

烟青虫属鳞翅且(Lpidoptera)昆虫。前人研究表明,苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis)中的Bt毒蛋白对其具有很强的毒杀作用。设法将Bt基因导入到烟草中,是防治这类虫害的一种有效途径。80年代后期以来,为了提高Bt基因在植物中的表达水平,在编码区密码子的优化、编码顺序的改进和高效启动子的选配方面．都有了很快的发展。有些经过部分改进或人工全合成的Bt基因,还被先后导入到番茄〔1.2〕、烟草〔2-4〕、棉花〔5.6〕、玉米〔7〕、水稻〔8〕等重要作物中。迄1995年止．在美国获准可供商业用的Bt毒蛋白转基因作物已有槔花、玉米和马铃薯等〔9〕。在烟草中迄今未见有Bt毒蛋白转基因株达到生产实用水平的报道。本实验试图通过农杆菌介导法,将密码子经过优化的Bt基因cryIA(b)及cryIA?〔10〕叫导入离体培养的烟草叶片,然后使之再生,形成转基因植株,再从其后代中选育出既保留原品种优良农艺性状,又具有对烟青虫稳定抗性的转基因株,以期提高该品种的稳产性,降低杀虫农药成本。保护烟田的良好生态环境。     

烟叶陈化过程可培养微生物的生态功能

【背景】烟叶陈化涉及多方面因素的相互作用。【目的】研究烟叶表面可培养微生物群落结构、功能和化学成分之间的联系。【方法】以储存于贵阳库、坛厂库、茅台库的烟叶为研究对象,分别对不同陈化时间的烟叶样品进行微生物分离,采用rDNA条形码技术对微生物优势菌株进行物种鉴定,利用FAPROTAX和FUNGuild数据库分别对细菌和真菌进行功能注释,并结合主要化学成分进行相关分析。【结果】243个烟叶样品中共分离到189株优势细菌菌株和229株优势真菌菌株,其中细菌以芽孢杆菌属(Bacillus)为优势种群,真菌以曲霉属(Aspergillus)和青霉属(Penicillium)为优势种群。随着陈化时间的延长,优势种群和优势功能类群比例逐渐降低,主要化学成分与微生物群落变化呈显著相关关系。【结论】微生物功能群通过结构变化推动烟叶陈化进程,同时陈化过程中主要化学成分的变化影响了微生物群落的组成与功能。