沙达旺上、下胚轴切段培养成再生植株

植物名称:沙达旺(Astragus adsurgenss)。材料类别:上胚轴及下胚轴。种子相继经0.1％昇汞溶液浸泡10分钟,自来水冲洗10分钟、漂粉精溶液(2g有效氯/100ml)浸泡20分钟进行表面消毒,以无菌水洗涤后在MS培养基上萌发。取初展真叶的幼苗,截取上、下胚轴,切成约5mm的切段作为培养材料。培养条件:外植体培养在附加不同的细胞分裂素(ZT或BA)或再加不同生长素(IAA或NAA)的     

黑松不定芽的增殖

以无菌条件下萌发22 d的黑松幼苗子叶/胚轴材料为起始外植体,在GD 3 mg·L~(-1)6-BA 0.3 mg·L~(-1)NAA培养基中诱导黑松不定芽的形成,其诱导率为96%。进一步探讨生长调节物质水平、基本培养基种类和继代周期对黑松不定芽增殖影响的结果表明:6-BA浓度为2 mg·L~(-1)、NAA浓度为0.2 mg·L~(-1)时的增殖率最高,达100%,增殖倍数也最高,为4.88;在5种基本培养基(GD、DCR、WPM、1/2MS和1/2GD)中,GD培养基比较适合不定芽的增殖,可以形成健壮有效的不定芽;此种条件下培养30 d的黑松不定芽增殖率可达4.6倍。     

瓶栽蛹草子座的方法

蛹草(Cordyceps militaris),也称北冬虫夏草,其药性与传统中药材冬虫夏草(C.sinensis)相近。我们在罐头瓶内多次育成蛹草子座,现将方法介绍如下。 (一)培养基的制作与接种方法普通大米:高梁米=9:1,使含水量达到110-120％,其中含KH_2PO_40.1％,MgSO_4 0.05％,酵母粉0.5％,蛋白质少量。每瓶加入50-100克干重的培养基。灭菌时间:高压1.5-2小时,常压8-10小时。取斜面菌种一小片或米饭培养基菌种一小块,在无菌条件下接种在罐头瓶内。菌种特点:在斜面培养基上菌丝纯白色、粗壮浓密,紧贴培养基生长,边缘清楚;在米饭培养基上容易形成浅桔黄色的色素沉着。 (二)栽培管理菌株接种后,在15℃左右条件下培养。6-10℃生长缓慢,20-25℃有利于子座形成。培养基含水量低于100％以下,生长缓慢;湿度过     

猕猴桃子叶组织培养分化成苗

材料名称:中华猕猴桃(Actinidia Chinensis Panch)材料类别:取10天左右幼龄无菌幼苗的子叶,在无菌条件下,将子叶剪成2～3毫米见方小块。培养条件:(一)诱导愈伤组织和分化培养基:     

氮素营养对非洲菊组织培养芽增值的影响

非洲菊（Gerberajamesonii）品种“签证”的无菌芽，以MS培养基（内含3％蔗糖、0．8％琼脂、10．0mg·L－1KT、05mg·L－1IAA，pH5．8）培养。每100ml的三角瓶内装30ml培养基，接6个芽，置于2000lx光照度（10h·d-1），白天20～30℃、夜间10～15℃下培养。以MS中全氮量为1（MSN），另设1／2含氮量（1／2N）和1／4含氮量（1／4N）处理。铵态氮（NH＋4４－N）和硝态氮（NO－3－N）比值试验是在总氮浓度不变的条件下调整两者浓度，共设2：1、1：1、1：2和1：5四个处理。所有上述处理均接10瓶，培养5周后随机取5个丛芽进行测定。结果…     

红花愈伤组织诱导、生长及其α-生育酚的产生

通过TLC和HPLC初步分析和鉴定,证明从红花(Carthamus tinctorius)无菌苗的胚根、胚轴及子叶和花蕾中诱导出的愈伤组织均具有合成α-生育酚的能力。其中以胚轴的愈伤组织和悬浮培养细胞的生长速率及α-生育酚的含量较高,分别达到0.35、0.39克干重/升·天和0.62、2.28毫克/100克干重样品。对红花细胞生长较适宜的培养基为MC培养基。培养基中附加10％椰子汁或0.1％酪蛋白氨基酸可使细胞生长显著提高,分别达到0.45和0.41克干重/升·天。     

斯里兰卡BG-902水稻幼茎愈伤组织的诱导和植株再生

植物名称:斯里兰卡BG-902水稻(Orgzasativa Srilanka BG-902) 材料类别:稻芽长到1.50m长,用70％酒精消毒1min,再用0.08％升汞水消毒10min,然后用无菌水冲洗3～4次,剥下幼芽,培养在N_6培养基+5％蔗糖+0.9％琼脂中,长成无菌的幼苗,拔节后将幼茎剪成5mm长作外植体。     

五桠果的组织培养和快速繁殖

1植物名称五桠果(Dillenia indica). 2材料类别实生苗茎尖. 3培养条件无菌播种培养基:(1)MS 6-BA 0.2 mg·L-1(单位下同);(2)MS NAA 0.01;(3)MS.不定芽诱导及增殖培养基:(4)MS 6-BA 2.0 NAA 0.2 椰子汁10 mL·L-1;(5)MS 6-BA 1.0 NAA 0.1 椰子汁10 mL·L-1;(6)MS 6-BA 0.5 NAA 0.1 椰子汁10 mL·L-1.壮苗培养基:(7)MS 6-BA 0.3 NAA0.01 椰子汁10 ml·L-1.生根培养基:(8)MS NAA0.2 IBA 2.0:(9)MS NAA 0.1 IBA 0.1;(10)MS IBA 0.5.以上培养基均含30 g·L-1蔗糖、琼脂6.7 g·L-1,pH 5.5～5.8.培养温度(28±2)℃,光照度1 500～2 000 lx,光照12 h·-1.     

异株藤的离体快繁

1植物名称异株藤(Calamus dioicus)。 2材料类别胚。 3培养条件(1)胚芽生长培养基：MS+6-BA 2．0 mg·L一(单位下同)+4％蔗糖;(2)丛芽诱导培养基：MS+6-BA 4．0+IBA 1．0+NAA 1．0+4％蔗糖;(3)生根培养基1／2MS(大量元素减半)+IBA 0．5+NAA 0．5+3％蔗糖。培养基(1)和(2)加0．7％卡拉胶,培养基(3)加0．73％卡拉胶,pH 5．8±0．2。培养温度(28±2)℃,每天光照10 h,光照度为2 000 k。 4生长与分化情况 4.1 萌发果实大量成熟前一个半月采集近成熟果实,去除果肉得干净种子,用75％酒精浸泡30 s,0．1％升汞表面消毒加～30 min,无菌水冲洗4～5次,在超净台上用刀片将发芽孔打开后转接至培养基(1)。种子在培养基(1)上30 d,与田间播种相同,胚根先长出发芽孔,但受6-BA的作用,胚根长至0．5～1．0 cm即不再进一步生长。接种∞d,胚芽长出发芽孔,∞d长至1．5～2．0 cm高,即可切下胚芽转入丛芽诱导培养基(2)。 4.2 丛芽诱导在培养基(2)中,胚芽高生长明显减缓,基部开始横向膨胀生长,约40d分化出丛芽,丛芽诱导率为30％～35％。     

墨兰的组织培养和快速繁殖

1植物名称墨兰品种企黑（Cymbidiumsinensecv．Qihei）和白墨（C。sinensecv．Baimo）。2材料类别墨兰种子于培养基中萌发后产生的原球茎。3培养条件（1）种子萌发培养基：1／2MS十适量琼脂;（2）芽分化培养基：1／2MS＋6－BA5．0mg·L－1（单位下同）＋NAA0．5十椰汁50ml·L－1;（3）转瓶培养基：1／2MS＋6－BA2．0＋NAA1.0＋5％活性炭。培养基中加3％蔗糖,0．8％琼脂,PH5．5。培养温度25±2℃,光照强度2W·m－2,每天光照10h。4生长与分化情况4．1种子萌发形成原球茎墨兰葫果以70％酒精消毒15min,在无菌条件下取出种子置…     

从多花野牡丹和野牡丹花柄直接诱导出芽

1植物名称多花野牡丹(Melastoma affine)和野牡丹(M.candidum). 2材料类别野外生长并处于开花期的花柄和幼嫩叶片. 3培养条件 MS基本培养基,含2%蔗糖、0.6%琼脂,pH 5.4.诱导培养基:(1)MS NAA 1.0 mg·L-1(单位下同) 6-BA 1.0,(2)MS 6-BA 1.0,(3)MS NAA 1.0;芽的生长增殖培养基:(4)MS NAA 0.5 6-BA 3.0;生根培养基:(5)MS IBA 0.1.培养温度(27±3)℃,光照度1100lx,光照时间10 h·d-1.4生长与分化情况嫩叶外植体先以洗洁精刷洗干净后,以0.1%升汞消毒8 min,并以无菌水清洗,切成2～3段放在诱导培养基上暗培养.花柄外植体经0.1%升汞消毒10 min后,以无菌水清洗.剥去花柄表面的粗糙皮层,然后将其切成0.3 cm长的切段,接种于诱导培养基上暗培养.     

金针菇FV908菌株液体培养工艺

通过单因子试验统计分析,优化筛选了适于金针菇(Flammulina velatipes)FV908的适宜培养基和摇瓶培养条件,结果表明,其适宜的液体培养基组成为5.0%玉米粉,2.0%麸皮,0.1%KHOP4,0.05%MgSO4*7H2O,10μgVB1/100ml,50μgVB2/100ml;适宜的摇瓶培养条件为培养基的起始pH6.0～7.0,500ml摇瓶装量为150ml,接种量为10%,培养温度25℃,摇床转速为120r/min,菌丝干收率4.1g/100ml.     

藏药匙叶翼首草高频组织培养再生体系优化研究

以匙叶翼首草种子为材料,探索种子最佳消毒方法,对影响无菌苗外植体愈伤组织诱导、增殖及植株再生的因素进行了研究。结果表明:(1)剥去外种皮的种子,经75%乙醇1min+0.1%HgCl_27min+50%多菌灵500倍液30min消毒后,在1/2 MS培养基中的发芽率达60.67%,无污染。(2)无菌苗的叶片和茎段都适宜诱导愈伤组织,在培养基MS+5.0mg·L~(-1) 6-BA+2.0mg·L~(-1) 2,4-D中可在10d内诱导出生长旺盛的愈伤组织,愈伤诱导率分别为84.00%、97.33%。(3)适宜的愈伤组织增殖培养基为MS+3.0mg·L~(-1) 6-BA+2.0mg·L~(-1) IAA,培养20d的叶片和茎段愈伤组织的生长率分别为74.37%、70.52%。(4)适宜的丛生芽诱导培养基为MS+3.0mg·L~(-1) 6-BA+2.0mg·L~(-1) IAA+250mg·L~(-1) L-脯氨酸+150mg·L~(-1)水解酪蛋白,30d后茎段和叶片的丛生芽发生率分别达到100%、94.44%。(5)再生苗在1/2 MS+0.5mg·L~(-1) NAA培养基中生根培养30d,生根率为100%。匙叶翼首草高效稳定的再生体系为保护其野生资源和工厂化育苗提供了有效途径。     

金琥的离体快速繁殖

1 植物名称 金琥(Echinocactus grusonii ) 。 2 材料类别 幼嫩的小球。 3 培养条件 (1)诱导小球培养基为B5+BA 2.0 mg·L-1(单位下同)+NAA 0.2;(2)增殖培养基为B5+BA 0.8+NAA 0.08;(3)生根培养基为1／2B5+BA 0.3+NAA 0.05。3种培养基中蔗糖均为3％,琼脂为0.7％,pH5.8左右,培养温度为(25±2)℃,光照度为2 000 lx,每天光照10 h。 4 生长与分化情况 将金琥小球下部切去1／2,留下上半部,用清水清冼干净,再用无菌水洗5～6次后切成小块,接种到培养基(1)上,经过45 d,刺座开始隆起,1周后,在隆起处开始分化小球,并慢慢长大。 金琥的增殖培养基中,BA浓度超过2.0ng·L-1易导致玻璃化,低于0.5 mg·L-1则增殖缓慢。如利用培养基(1)进行继代增殖,玻璃化十分严重。     

梨的胚珠培养

植物名称:梨(Pyrus)。材料类别:胚珠。培养条件:(1)诱导幼胚生长培养基:改良的Nitsch培养基 0.5mg/L BA 100mg/L LH 5％蔗糖;(2)胚萌发成苗培养基:改良MS 2％蔗糖。培养室温度25±3℃;光照度3000lx;每日光照16h。生长与分化情况:胚珠在诱导幼胚生长培养基上培养30d后,其中的幼胚利用珠心、胚乳及培养基中的多种营养进一步维持胚性生长,得到生长的胚,其平均长度均大于8mm。将胚取出并转移到胚     

外源SNP对盐胁迫下甜瓜幼苗生长及抗氧化酶活性的影响北大核心CSCD

为明确外源一氧化氮(NO)对甜瓜幼苗耐盐性的影响,该研究以甜瓜品种‘农大甜10号’为试验材料,在300 mmol·L^(-1)NaCl胁迫条件下,叶面喷施不同浓度(50、100、150、200、250μmol·L^(-1))外源NO供体硝普钠(SNP),分析甜瓜幼苗生长、光合色素含量、细胞膜透性、抗氧化酶活性、渗透调节物质含量的变化。结果表明:(1)盐胁迫显著抑制甜瓜幼苗的生长,同时显著降低叶片光合色素含量、细胞膜透性、抗氧化酶活性、渗透调节物质含量。(2)叶面喷施150μmol·L^(-1)SNP能够显著提高盐胁迫下甜瓜幼苗的株高、茎粗、干鲜重、壮苗指数,并显著提高盐胁迫下甜瓜幼苗的光合色素含量,从而提高甜瓜的光合作用。(3)喷施150μmol·L^(-1)SNP可显著提高盐胁迫下甜瓜幼苗超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、谷胱甘肽还原酶(GR)、单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)及脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)的活性,显著降低盐胁迫下甜瓜幼苗的丙二醛(MDA)、过氧化氢(H_(2)O_(2))含量及超氧阴离子(O^(-)·_(2))产生速率。(4)喷施150μmol·L^(-1)SNP可显著提高盐胁迫下甜瓜幼苗叶片脯氨酸(Pro)和可溶性蛋白的含量。研究认为,在盐胁迫环境下,适宜浓度的外源SNP(150μmol·L^(-1))可通过提高甜瓜幼苗的抗氧化酶活性以及光合色素和小分子可溶性有机化合物含量来增强活性氧的清除能力,降低膜脂过氧化作用,有效减轻盐胁迫对幼苗的伤害,从而增强其耐盐性,促进幼苗生长。     

高效诱导冬瓜再生植株的研究

将台湾冬瓜的种子接种于pH值为7.2的1/2MS培养基上预培养,5d左右种子即可萌发,萌发率为100%,幼苗生长正常。切取预培养15-20d的无菌幼苗的茎尖和带腋芽的茎段接种于MS 1mg/LNAA 4mg/L6-BA培养基上,10d左右在茎尖和茎段（带腋芽）切口处长出愈伤组织,30d左右在愈伤组织处分化出丛生芽,丛生芽的诱导频率接近95%,繁殖系数25.6。将小芽切下转入不加任何生长调节剂MS培养基上,培养几天后芽逐渐长大,并在芽的基部长出白色根系。选取生长健壮的试管苗经过炼苗后移栽到大田中,生长良好。     

良种白沙枇杷"冠玉"的组织培养

1 植物名称 枇杷(Eriobotryajaponica)品种"冠玉"。 2 材料类别 顶芽。外植体的最佳采取时期是2～3月顶芽萌动季节。 3 培养条件 诱导休眠芽萌动及生长培养基(展芽培养基)：MS+6-BA 1.2 mg·L-1(单位下同)+NAA 0.4+GA 30.5;增殖培养基：MS+6-BA 1.75+NAA 0.3;生根培养基：1／2MS+NAA 0.5。以上培养基均含蔗糖3％、琼脂0.8％,pH 5.8;培养温度(25±1)℃,光照12 h·d-1,光照度1 500～2 000 lx。 4 生长与分化情况 4.1 诱导展芽 取长1.5 cm左右的顶芽,用刀片刮去表皮毛及外层芽鳞后,放入1％洗衣粉溶液中,用玻棒搅拌5 min后流水冲洗2 h,再用刀片切成1 cm左右长,在无菌条件下用75％酒精灭菌1.5 min,再用升汞灭菌11min,无菌水漂洗5次,剥取0.3～0.5 cm的顶端,接人展芽培养基,进行暗培养。在1～2 d内,有部分外植体会发生褐变,并使芽体周围的培养基染成浅褐色,必须及时把这部分芽转移到新鲜培养基上,否则将引起外植体的死亡。     

6-BA对杏胚萌发成苗的效应

剥去杏(Prunus armeniaca)果肉,砸开果核并小心取出种子放入消过毒的三角瓶中。接种前用70％酒精浸泡1min,再用0.1％升汞浸泡15min,最后用无菌水冲洗3次,随后在超净工作台上去掉种皮,将胚接种在附加不同浓度6-BA的改良MS培养基(1/2MS大量元素 1/2MS微量元素 1％蔗糖 0.8％琼脂)中。接种后不经低温处理直接放入培养室(26±2℃,3000lx,每天光照16h)培养,10d后调查幼苗生长情况,结果如下:     

鹭兰种子无菌繁殖球根

为建立鹭兰（Habenaria radiata）种子繁殖法,对无菌培养条件下的种子发芽和幼苗生长进行了观测,并对无菌繁殖获得的球根进行了种植试验。结果表明,鹭兰种子不进行处理难以无菌培养发芽,种子通过75%乙醇10 s+1% NaClO 10 min处理,或者40 kHz超声波2.5 min+1% NaClO 10 min处理,在1/2MS培养基的发芽率可达58%以上;在1/2MS培养基中,添加GA-3 1 mg·L^-1对叶片生长有促进作用,添加IAA 1 mg·L^-1对根生长和球根形成有促进作用,球根形成率达55%;无菌繁殖的球根贮存至春季盆栽,成苗率约72%。