有关免疫组织化学技术方法若干问题的探讨

免疫组织化学技术操作过程中经常可碰到的问题有：切片由于各种原因所引起的松动卷起甚至掉片,造成操作的失败;最后的结果背景较深,难与阳性物进行鉴别和判断;如何判断每一批免疫组织化学最后的反应结果的准确性和可靠性等等。本文根据上述问题,深入地探讨了其发生的原因以及提出了如何处理的方法,尤其是对如何判断免疫组织化学显色结果,并详细地介绍了各种方法     

微波免疫组织化学技术在宫颈癌涂片快速诊断中的应用

本文应用微波免疫组化ＡＢＣ技术检测了６７例宫颈涂片细胞中ＥＭＡ的分布。结果,Ｉ～Ｖ级宫颈涂片ＥＭＡ阳性率分别为３０％（３／１０）、５０％（５／１０）、７０％（７／１０）、９３．７％（１５／１６）和９５．２％（２０／２１）。Ⅰ、Ⅱ级与Ⅲ级,Ⅲ级与Ⅳ、Ⅴ级ＥＭＡ阳性率均有显著差异性（Ｐ＜０．０５）。结果提示：ＥＭＡ可作为宫颈涂片细胞的分化标志,有助于良恶性细胞的鉴别。同时对形态学不够恶性而ＥＭＡ呈强阳性者,有潜在恶变的物质基础。在抗体稀释度相同时,微波免疫组化较常规免疫组化具有特异性染色深。背景浅,反应时间显著缩短等特点。     

酶免疫组织化学技术

酶免疫组织化学技术,是以辣根过氧化物酶(Horsenadish peroxidase 简称HRP)结合在抗体、抗原或中间体上,对组织或细胞进行的免疫化学反应。由于酶对底物的对数放大作用和成色反应,增强了分辨力,使抗原抗体反应具有较高的的敏感性和特异性。本法具有操作简便,试剂稳定和不需用特殊设备等优点;在细胞涂片、冰冻切片和石腊切片中,均可在光镜或电镜下定位或定量组织细胞中的各种成份和研究细微结构等。因此,自1966年 Nakane 等建立酶免疫技术以来,发展很快。最初主要是通过化学交联剂将酶与抗体交联,用以检测组织中的相应抗原,相     

胎盘X细胞的免疫组织化学研究

胎盘Ｘ细胞为一种绒毛外滋养层细胞,作者对２５例晚期妊娠胎盘中Ｘ细胞进行了Ｋｅｒａｔｉｎ、ＥＭＡ、ＨＣＧ、ＨＰＬ、ＰＬＡＰ、Ｐｒｏｌａｃｔｉｎ等免疫组织化学研究,其中Ｋｅｒａｔｉｎ、ＥＭＡ、ＨＰＬ、ＰＬＡＰ等染色均示部分细胞呈阳性反应。上述结果表明Ｘ细胞介于合体滋养细胞与细胞滋养细胞之间,符合中间滋养细胞的光镜及免疫组织化学特征,而与蜕膜细胞完全不同。     

免疫组织化学切片质量的探讨

在大中型医院,免疫组织化学检测在临床病理诊断中已成为重要的辅助手段,对疾病的确诊、治疗方案的确定及预后评估等非常重要。免疫组织化学切片质量的好坏直接影响结果的判断。虽然免疫组化方法简单,但影响因素较多,常导致结果不稳定。以往有许多献从组织的固定、抗原修复及显     

骨组织的脱钙及其免疫组织化学技术的探讨

骨组织的免疫组织化学染色 (ＩＨＣＳ)技术不同于普通石蜡切片常用的ＩＨＣＳ技术 ,有许多特殊性。为了提高骨组织ＩＨＣＳ的质量 ,本文根据骨组织及其ＩＨＣＳ技术的特点 ,对影响ＩＨＣＳ质量的几个问题进行了探讨。免疫组织化学染色 (Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｓｔａｉｎｉｎｇ,ＩＨＣＳ)技术是用已知的标记的特异性抗体或抗原对组织内相应抗原或抗体进行定性、定位或定量检测 ,经组织化学反应 ,使标记于特异性抗体的酶、金属及荧光素等呈现出某种颜色 ,并借助于光镜、荧光显微镜及电子显微镜等观察所显示的颜色和变化 ,从…     

提高骨组织免疫组织化学方法质量的若干问题探讨

免疫组织化学方法 (Immunohistochemistrystaining,IHCS)技术是用已知标记的特异性抗体或抗原对组织内相应抗原或抗体定性、定位或定量检测 ,经组织化学反应 ,使标记于特异性抗体的酶、金属及荧光素等呈现出某种颜色 ,并借助于光镜 ,荧光显微镜及电子显微镜等观察其颜色变化 ,从而了解抗原抗体结合部位和数量的一门新兴检测技术 [1～ 2 ]。它具有敏感性高、特异性强、方法步骤统一等特点 ,能将形态、代谢和机能密切结合在一起 ,已广泛应用于临床病理诊断、鉴别诊断和相关学科的研究之中。近年来 ,我们针对骨及其 IHCS技术的特点 ,对如何…     

抗体形成细胞发育的免疫组织化学研究

本文采用辣根过氧化物酶(HRP)作为抗原,与福氏佐剂一起对雄性豚鼠进行二次免疫,追踪腘淋巴结中抗体形成细胞的发育和分化。在二次免疫后的早期(2—3天),淋巴结的皮质区(特别是淋巴滤泡间区)和髓质区几乎同时出现阳性反应的细胞,主要是淡棕色的小淋巴细胞和中淋巴细胞。至6—9天,这二个区域的阳性细胞数明显增加达到高峰,主要是棕色和棕褐色的前浆细胞和浆细胞,皮质区与髓质区的阳性细胞在某些区域相连接。从12天起这二个区域的阳性细胞开始下降,在27—49天,淋巴结中只存在少数分散的阳性细胞,部分细胞萎缩变形成残留的浆细胞。在同一切片视野中除了看到棕褐色浆细胞和淡棕色小淋巴细胞外,还可以看到包括中淋巴细胞和前浆细胞等过渡型细胞。因此,我们认为浆细胞是分别在皮质区和髓质区由淋巴细胞发育而成。     

红腹锦鸡胃肠道内分泌细胞的免疫组织化学定位

应用ABC免疫组织化学方法,对红腹锦鸡(Chrysolophus pictus)胃肠道5-羟色胺(5-hydroxtryptamine,5-HT)、胃泌素(gastfin,GAS)、生长抑素(somatostatin,ss)3种内分泌细胞的分布密度和形态进行了观察.结果显示,5-HT细胞在空肠和直肠分布密度最高,回肠和盲肠次之,十二指肠较少,腺胃和肌胃最少;GAS细胞在十二指肠和直肠分布密度最高,其次是空肠和盲肠,腺胃部最低,肌胃则呈免疫阴性;SS细胞数量较少,在直肠、盲肠处分布密度相对高,其次是十二指肠和空肠,腺胃部最低,肌胃则呈免疫阴性.3种内分泌细胞的形态多样,有圆形、椭圆形、锥体形、杆状和不规则形,其中以圆形、椭圆形为主.细胞分布于固有膜、黏膜上皮细胞基部、黏膜上皮细胞之间、腺泡上皮细胞基部或腺泡上皮细胞之间.红腹锦鸡胃肠道内分泌细胞的形态与其内、外分泌功能是相适应的.     

日本林蛙胃肠道内分泌细胞的免疫组织化学

应用7种胃肠激素抗血清对日本林蛙胃肠道内分泌细胞的形态和分布进行了免疫组织化学研究。5-羟色胺(5-HT)免疫活性(-IR)细胞分布于胃肠道各段,其在胃肠道中的分布密度为：十二指肠、空肠处最高,胃中各段居中,回肠和直肠处最低。生长抑素(sS)-IR细胞分布于胃贲门至空肠的胃肠道段,其分布密度自前向后呈递减趋势。胃泌素(Gas)-IR细胞在十二指肠和空肠处有少量分布。高血糖素(Glu)-IR细胞仅见胃体部位较少分布。P_物质(SP)-IR细胞在回肠和直肠中有分布。胃肠道各段均未检出胰多肽(PP)-IR细胞和胰岛素(Ins)-IR细胞。与其它动物相比较,对日本林蛙胃肠道内分泌细胞的分布型进行了讨论。     

乌鳢胃肠内分泌细胞的免疫组织化学研究

乌鳢胃肠内分泌细胞的免疫组织化学研究夏立群,王庆堂（同济医科大学组织胚胎学教研室武汉４３００３０）关键词乌鳢,内分泌细胞,免疫组织化学ＰＡＰ方法ＩＭＭＵＮＯＣＹＴＯＣＨＥＭＩＣＡＬＳＴＵＤＹＯＦＴＨＥＥＮＤＯＣＲＩＮＥＣＥＬＬＳＩＮＴＨＥＧＡＳＴＲＯ...     

扬子鳄消化道内分泌细胞的免疫组织化学研究

应用７种特异性胃肠激素抗血清对扬子鳄消化道内分泌细胞进行了免疫组织化学定位。５－羟色胺细胞在消化道各段都有分布,以十二指肠密度最高,食道、直肠其次。生长抑素细胞在胃幽门部非常密集,胃体中等,胃贲门部较少,十二指肠偶见。胃泌素细胞主要分布于十二指肠前段,空肠、回肠和直肠偶见。许多血管活性肠肽细胞分布于胃贲门部,胃体和胃幽门部少数。胰高血糖素、胰多肽和Ｐ－物质在消化道各段均未检出阳性细胞。结合扬子鳄的     

胃印戒细胞癌的粘液组织化学和免疫组织化学研究

应用粘液组化及免疫组化技术对１５例胃印戒细胞癌进行了研究。结果：癌细胞可分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三型,三型细胞常混合存在;癌细胞以分泌酸性粘液为主,部分癌细胞分泌中性粘液,全部含有硫酸粘液;胃印戒细胞癌ＣＥＡ阳性率１００％,ＣＥＡ分布丧失了极性;电镜下癌细胞ＣＥＡ同时分布于细胞膜及胞浆内膜结构中。上述结果进一步支持了癌细胞起源于胃原始干细胞的看法;而癌细胞分泌的大量粘液及ＣＥＡ的异常分布可能易于导致印戒细胞癌的浸润及转移。     

免疫组织化学中的抗原修复技术

概述了免疫组织化学中固定对组织抗原性的影响,综述了抗原修复的方法及其原理。组织块的大小、固定液的种类、浓度及固定时间的长度都影响组织的抗原性。免疫组织化学实践中常用酶消化法、酸水解法、微波金属盐法、高压锅加热法等修复组织的抗原性。     

胸腹水脱落细胞学瘤包石蜡切片免疫组织化学染色的应用

胸腹水脱落细胞学涂片做免疫组织化学染色,因具有取材方便、易行,病人痛苦小等优点而适用于临床[1]。脱落细胞学涂片免疫组织化学染色技术最需要注意的问题是背景染色和涂片粘附的牢固程度。因为背景的存在会影响阳性结果的判断,尤其是抗原表达少的弱阳性病例;而涂片涂的不好、厚薄     

Ramos免疫组织化学技术的敏感性研究

观察快速微波一步法（Ｒａｍｏｓ法）免疫组织化学技术的敏感性。选用１５种辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记的特异性抗体（ＥＰＯＳ）,对５９例相应的恶性肿瘤组织进行快速微波免疫组织化学一步法标记。结果显示５８例为阳性（９８．３％）,其中弱阳性４例,中度阳性和强阳性为５４例。结果表明,Ｒａｍｏｓ法具有敏感性高、特异性强、快速而简便等特点,有广阔的应用前景     

白yuan胃肠道内分泌细胞的免疫组织化学定位

为了解白yuan的消化生理过程,利用ABC免疫组织化学方法,对白yuan胃肠道5种内分泌细胞：5-羟色胺(5-HT)、脑啡肽、P物质、胃动素和抑胃素的分布进行了研究。结果表明：5-HT细胞主要分布于十二指肠及其以下部位,尤其是盲肠和直肠;而腺胃、肌胃和幽门中均未发现该类细胞。脑啡肽和P物质细胞数量明显较5-HT少,它们稀疏分布于十二指肠及其以下部位,无显著的分布积聚区。抑胃素和胃动素在整个胃肠道中均无分布。分析表明白yuan胃肠道5种内分泌细胞的分布与其他鸟类相似,但与其他脊椎动物明显不同。     

蝘蜒消化管内分泌细胞的免疫组织化学定位

目的阐明爬行动物蝘蜒消化管各段内分泌细胞的类型、局部分布、分布密度和形态学特征。方法应用免疫组织化学技术中链霉卵白素一过氧化物酶（S-P）法。结果在蝘蜒消化管内鉴别出5种内分泌细胞,即：5—羟色胺（5-hydroxytryptamine,5-HT）、生长抑素（somatostatin,SS）、胃泌素（gastrin,GAS）、高血糖素（glucagon,GLU）、P-物质（substance P,SP）免疫活性（immnoreactive,IR）细胞。5-羟色胺免疫活性细胞是消化管中最主要的内分泌细胞类型,以不同密度分布于消化管各段,其中胃幽门部位分布密度最高。生长抑素免疫活性细胞在消化管内仅局限分布于胃部。胃泌素免疫活性细胞仅见于幽门和十二指肠部位。高血糖素免疫活性细胞仅分布于回肠和直肠。P-物质免疫活性细胞仅出现在直肠部位。蝘蜒消化管内分泌细胞形态多样：圆形、椭圆形、纺锤形、梭形、楔形、锥形以及不规则形。胃部多数内分泌细胞分布于胃腺中,食管和肠管中多数内分泌细胞则分布于上皮细胞间。结论蝘蜒和其它爬行动物胃肠内分泌细胞的分布存在一定共同特征,然而也存在着一些特有的差异。