健康妇女阴道乳酸杆菌定性与定量研究

本文运用微生态学研究方法,对健康妇女阴道乳酸杆菌的分布情况进行调查。结果表明:健康妇女阴道乳酸杆菌的分离率75.44％,平均活菌数均值(log10~n±SD)7.2810±1.1618。常见的阴道乳酸杆菌种的分离率及活菌对数值为:嗜酸乳杆菌(33.3％,7.6883±1.4076),唾液乳杆菌(10.53％,6.4949±1.4254),乳酸乳杆菌(8.8％,8.0687±1.7102),德氏乳杆菌(7.0％,8.1134±0.6311),赖氏乳杆菌(7.0％,7.3349±0.9052)。揭示这几种乳杆菌可能是健康妇女阴道乳酸杆菌属的重要成员,其生理学意义及种类、数量变化的临床意义,值得进一步研究。     

乳酸杆菌代谢产物对一些常见菌黏附阴道上皮细胞的抑制作用的初步探讨

目的 探讨乳酸杆菌代谢产物对大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌黏附阴道上皮细胞的抑制作用.方法 刮取健康妇女阴道上皮细胞进行体外培养,观察在乳酸杆菌代谢产物的干预下大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌黏附阴道上皮细胞的情况.结果 和结论 乳酸杆菌代谢产物能够明显抑制大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌对阴道上皮细胞的黏附.     

细菌性阴道病患者阴道分泌物16SrDNA序列分析

目的分析健康妇女及细菌性阴道病(Bacterial vaginosis,BV)患者阴道分泌物16S rDNA序列。方法提取20例健康妇女及40例BV患者阴道分泌物标本中的总DNA,针对细菌16S rDNA保守区设计通用引物进行PCR扩增、克隆、测序,将获得的16S rDNA序列与美国国立生物技术信息中心(NCBI)数据库中的发表序列进行比对,分析克隆群中细菌种类和比例。结果通过阴道分泌物16S rDNA序列分析,发现健康妇女阴道分泌物中以卷曲乳酸杆菌(Lactobacillus crispatus),惰性乳酸杆菌(Lactobacillus iners),加氏乳酸杆菌(Lactobacillus gasseri)为优势菌种,而BV患者阴道菌群种类繁多,以加德纳菌属(Gardnerella)和奇异菌属(Atopobium vaginae)克隆子占较大比例,仅4例患者可见卷曲乳酸杆菌(Lactobacillus crispatus),其他患者均未见有乳酸杆菌克隆子且奇异菌属阴道病患者甲硝唑治疗疗效较差。结论健康妇女和BV患者阴道分泌物菌群种类有较大区别,BV患者在治疗前进行16S rDNA序列分析检测有较大的临床意义。     

健康妇女及3例细菌性阴道病患者阴道菌群的非培养分析

根据Amsel标准及Nugent标准, 确诊筛选健康妇女及细菌性阴道病(bacterial vaginosis, BV)患者各3例。提取其阴道分泌物样本的总DNA, 构建16S rRNA基因克隆文库, 并对阳性克隆进行ARDRA和测序分析。结果表明, 健康妇女样本的基因文库中, 分别以卷曲乳酸杆菌(L. crispatus)和惰性乳酸杆菌(L. iners)的克隆子占较大比例, 另外存在少量的阴道乳酸杆菌(L. vaginalis)或詹氏乳酸杆菌(L. jensenii)的克隆子。BV患者样本的基因文库中, 克隆子所代表的菌种类型明显增多, 但均以阴道加德纳氏菌(Gardnerella vaginalis)和阴道阿托波氏菌(Atopobium vaginae)的克隆子占较大比例, 且无乳酸杆菌克隆子。说明健康妇女阴道菌群的种类单一, 以乳酸杆菌占优势, L. iners为优势菌种之一; BV患者阴道菌群的种类复杂多样, 但均以Gardnerella vaginalis及Atopobium vaginae共同占优势。     

健康妇女及3例细菌性阴道病患者阴道菌群的非培养分析

根据Amsel标准及Nugent标准,确诊筛选健康妇女及细菌性阴道病(bacterial vaginosis,BV)患者各3例.提取其阴道分泌物样本的总DNA,构建16S rRNA基因克隆文库,并对阳性克隆进行ARDRA和测序分析.结果表明,健康妇女样本的基因文库中,分别以卷曲乳酸杆菌(L.crispatus)和惰性乳酸杆菌(L. iners)的克隆子占较大比例,另外存在少量的阴道乳酸杆菌(L.vaginalis)或詹氏乳酸杆菌(L.jensenii)的克隆子.BV患者样本的基因文库中,克隆子所代表的菌种类型明显增多,但均以阴道加德纳氏菌(Gardnerella vaginalis)和阴道阿托波氏菌(Atopobium vaginae)的克隆子占较大比例,且无乳酸杆菌克隆子.说明健康妇女阴道菌群的种类单一,以乳酸杆菌占优势,L. iners为优势菌种之一;BV患者阴道菌群的种类复杂多样,但均以Gardnerella vaginalis及Atopobium vaginae共同占优势.     

青岛地区成年人肠菌群正常值的调查

本文采用６种选择性培养基和２种非选择性培养基,应用形态学,常规生化反应,酶学反应等技术,对青岛地区的３０例健康青年人和３０例健康老年人的粪便菌群中肠杆菌、肠球菌、葡萄球菌及厌氧菌群中的拟杆菌、双歧杆菌、乳杆菌等６种细菌进行分离、培养、计数和鉴定。结果显示：健康青年人粪便菌群中６类菌活菌范围是：肠杆菌９．２１±０．３９,肠球菌７．７４±０．５３,葡萄球菌５．１３±１．５７,拟杆于菌１０．４１±０．５４,双歧杆菌１０．８４±０．４８,乳杆菌７．８４±０．４９。健康老年人粪便菌群中６类菌的活菌范围分别是：肠杆菌８．６１±０．４８,肠球菌７．５４±０．８２,葡萄球菌５．４６±１．７７,拟杆菌９．４１±０．３７,双歧杆菌９．８２±０．５０,乳杆菌８．２２±０．６５（ＬｏｇＮ／克）。     

健康妊娠妇女阴道乳酸杆菌及pH变化的研究

目的研究健康妊娠妇女阴道乳酸菌数量及pH的变化与妊娠时间的关系。方法选择20例健康非妊娠妇女,60例健康妊娠妇女(其中早期妊娠、中期妊娠及晚期妊娠各20例)阴道分泌物进行乳酸杆菌数量检测及pH测定,并对乳酸杆菌产生过氧化氢的情况进行检测。结果随着妊娠时间的增加,乳酸杆菌的数量明显增高,伴随阴道分泌物的pH逐渐降低。结论乳酸杆菌与健康妊娠妇女阴道的生物屏障和酸性环境的维持有重要关系。     

激素替代治疗对阴道菌群的影响

目的 研究更年期综合征妇女激素替代治疗前后阴道菌群的变化。方法 更年期综合征病人进行激素替代治疗者共２５例,于治疗前及第３个月０．２ｍｌ定量刮匙取阴道穹隆部分泌物,进行菌群分析。结果 ２５例中有１８例坚持治疗３个月,７例因症状有缓解或其他原因只用药１～２个月即停止治疗。１８例坚持治疗者中有１０例阴道乳酸杆菌数量明显增加,成为阴道菌群中的优势菌。６例乳酸杆菌明显下降或无法检出,由其他细菌取代为绝对优势而出现菌群失调。２例阴道菌群无明显变化。７例治疗间断者有３例出现菌群失调。结论 短期激素替代治疗对阴道菌群有较大影响,多数情况能使乳酸杆菌数目增加至绝对优势,其他细菌的数目下降。但不论是否坚持激素替代治疗,均出现了部分病例菌群失调的现象。     

体检妇女阴道分泌物微生态学变化与年龄关系的探讨

为探讨不同妇女阴道分泌物微生态学变化规律,以形态学方法检出２６８名教工及干部体检妇女阴道分泌物中的细菌群态及原体,并以试纸法测定ｐＨ。结果经年龄分组统计,发现年龄在２５岁－６０岁范围内,阴道分泌物中乳酸杆菌样菌、ｐＨ＜４．５值以及念珠菌和细菌性阴道病（ＢＶ）的检出率均随着年龄的增长在明显下降。提示在体检妇女阴道分泌物中,乳酸杆菌、ｐＨ＜４．５值、念珠菌和ＢＶ的检出率与年龄有关。     

烧伤猪肠道膜菌群的微生态失调研究

本研究定量地分析了烧伤猪山莨菪碱治疗组和对照组的肠道粘膜及内容物中５类菌群,对内脏标本进行了细菌培养。其中治疗组猪的空肠膜菌群,肠杆菌的活菌计数（Ｌｇ１０￣（ｘ±ｓ））为５．６７±０．８５,肠球菌为２．６０±０．２３,双歧杆菌为５．２７±０．７１,类杆菌为３．９１±０．８３,乳杆菌为２．２０±０．１３;回肠膜菌群中５类菌活菌计数分别为５．８３±０．４２,２．５８±０．２１,５．６３±１．０２,４．０３±１．１１,２．５８±０．２１,５．６３±１．０２,４．０３±１．１１,２．５８±０．２;盲肠菌膜群依次为６．６２±１．２７,２．７１±０．４５,６．２３±１．５２,６．６７±１．２９,３．４３±１．２９;而盲肠内容物的５类菌数分别为８．０５±０．３１,３．５７±０．６５,７．７８±０．６２,６．９１±０．９６,５．４４±１．９８。内脏组织发生了细菌移位．对照组与治疗组都出现了微生态失调。结果显示山莨菪碱不能调整菌群失调症。     

乳酸杆菌对大鼠细菌性阴道感染动物模型疗效观察

目的探讨乳酸杆菌对大鼠阴道菌群抑制及阴道菌群的调理作用。方法通过大鼠阴道混合感染葡萄球菌和大肠埃希菌的动物模型,以阴道分泌物的菌群分析和阴道黏膜炎症的治愈程度为指标,观察乳酸杆菌治疗组的治疗效果,用乳酸杆菌菌液冲洗治疗来去除大肠埃希菌和葡萄球菌在大鼠阴道的定植。结果通过各组大鼠阴道冲洗液检出的平均对数值比较,乳酸杆菌治疗组的大鼠阴道内大肠埃希菌和葡萄球菌的数量明显较对照组的数量减少（P〈0．05）,而且治疗组黏膜炎症的治愈程度显著好于对照组。结论乳酸杆菌能有效地去除大肠埃希菌和葡萄球菌的大鼠阴道定植和改善大鼠外阴的炎症症状。     

细菌性阴道病的诊治进展

正常阴道内有需氧菌和厌氧菌寄居形成阴道正常菌群．阴道与这些菌群之间形成生态平衡．因此并不致病。一旦生态平衡被打破或外源性病原体侵入,即可导致炎症的发生。长期应用抗生素抑制乳酸杆菌的生长或机体免疫力低下亦可使其他致病菌成为优势菌,引起炎症。大量研究表明。细菌性阴道病(曾被命名为嗜血杆菌性阴道炎)已成为生育期妇女发病率最高的阴道感染性疾病。     

用PCR法快速半定量阴道分泌物中的乳酸杆菌

目的 通过对PCR引物、反应条件及样本处理条件的摸索,建立一种不经过分离培养和DNA提取纯化步骤,直接用乳酸杆菌特异性引物快速定性、半定量妇女阴道分泌物标本中乳酸杆菌的方法.方法 设计乳酸杆菌属特异性引物;对样本处理方法和PCR反应条件进行摸索;比较用PCR法定量阴道分泌物中乳酸杆菌的结果和稀释滴种法定量结果的相关性.结果 （1）用浓度为2%的Tritonx-100处理阴道标本后可在220 bp的位置得到最佳的特异性扩增区带;（2）将MgCl2在PCR反应体系中的终浓度调节至2.5 mmol/L时,可以产生最强的特异性反应扩增带;（3）用PCR法分析阴道分泌物所得菌数与培养所得菌数之间明显相关（P＜0.05）;用PCR法分析阴道分泌物所得灰度值与培养所得菌数之间明显相关（P＜0.05）.结论 将阴道分泌物标本经过简单的离心、洗涤处理后,直接应用PCR法,就可以快速地定性和半定量妇女阴道分泌物标本中的乳酸杆菌.     

定君生调整自然分娩后阴道菌群失调的临床探讨

目的了解自然分娩后阴道菌群的改变及其危害,探讨定君生用于恢复自然分娩后阴道菌群失调的效果。方法分别对57例正常体检妇女、50例晚期妊娠妇女和45例自然分娩产后妇女进行阴道pH检测,同时取阴道分泌物进行细菌培养。另外,选择产后42d来我院复查的产妇72例,随机分为两组,定君生组42例,连续应用定君生10d,对照组30例,对其中已存在阴道感染的患者应用达克宁栓或复方甲硝唑栓进行治疗,疗程均为10d,对比分析两组的阴道炎发生情况。结果产后阴道乳酸杆菌检出率明显低于孕前期和妊娠期（P〈0．01）,产后阴道pH高于孕前期,两者之间差异有非常显著性（P〈0．01）。产后阴道厌氧菌的比例下降,非正常菌和条件致病菌增多。产后42d细菌和念珠菌性阴道病的发生率为15．3％,产后3个月定君生组细菌和念珠菌性阴道病的发生率均明显低于对照组（P〈0．05）。结论自然分娩可导致阴道菌群失调,使产后妇女易患细菌和念珠菌性阴道病,应用定君生可恢复阴道内乳酸杆菌的优势地位,对于防治产后细菌和念珠菌性阴道病具有重要作用。     

30例妊娠妇女阴道微生态改变

目的 探讨妊娠妇女的阴道微生态变化.方法 采用检测妊娠妇女雌、孕激素水平、阴道理化指标及部分阴道常见菌群来分析阴道微生态的改变.结果 (1)孕妇组阴道白细胞数较高,与育龄健康组妇女相比,差异有统计学意义(P＜0.01);唾液酸酶在两组间相比,差异无统计学意义(P＞0.05);育龄妇女组阴道内的乳酸杆菌含量最高,与孕妇组相比,差异有统计学意义(P＜0.01);大肠埃希菌含量在育龄妇女组最少,与孕妇组相比,差异有统计学意义(P＜0.05);两组加德纳菌相比,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 育龄妇女与妊娠妇女的阴道微生态环境不同,与其体内的雌、孕激素水平有关.     

阴道卷曲乳酸杆菌对阴道致病菌的体外生物拮抗作用

目的研究阴道卷曲乳酸杆菌对阴道致病菌的体外生物拮抗作用。方法将阴道卷曲乳酸杆菌分别与3株阴道致病菌（金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、粪肠球菌）混合接种于GAM液体培养基中进行厌氧培养,通过平板菌落计数法计算阴道致病菌的菌数。结果经混合培养后阴道致病菌的菌数明显下降。结论阴道卷曲乳酸杆菌A7在体外能明显抑制3株肠道致病菌的生长繁殖。     

乳酸杆菌活菌制剂用于治疗老年性阴道炎合并细菌性阴道病临床探讨

目的探讨乳酸杆菌活菌制剂用于治疗老年性阴道炎合并细菌性阴道病的临床疗效。方法对118例老年性阴道炎合并细菌性阴道病患者随机分3组,分别予以乳酸杆菌活菌制剂局部用药和（或）口服甲硝唑,进行疗效比较。结果乳酸杆菌活菌制剂和甲硝唑联合应用对治疗老年性阴道炎合并细菌性阴道病疗效显著高于单一用药的疗效,组间差异具有显著性（P〈0.05）;复发率低于单一用药。结论乳酸杆菌活菌制剂与甲硝唑联合治疗老年性阴道炎合并细菌性阴道病有比较好的治疗效果,不易复发。     

阴道乳杆菌胶囊调整产后阴道菌群失衡的临床研究

目的研究产后6~8周妇女阴道微生物环境的变化特征及阴道菌群失衡的发病率,探讨应用阴道乳杆菌胶囊恢复产后妇女阴道内环境,预防生殖道感染发生的临床意义。方法收集1 053例产妇产后6~8周回访就诊时阴道分泌物,采用革兰染色法检查,进行Nugent评分,按Nugent评分系统对菌群分类,进一步诊断细菌性阴道病(BV),并与其孕早期产检时情况比对。结果 1 053例产后6~8周妇女Nugent评分正常521例,临界242例,有290例发生阴道炎症,细菌性阴道病205例,阴道假丝酵母菌74例和滴虫11例。疾病构成比以非特异性阴道炎为主,特异性阴道炎较为少见。所有妇女阴道p H均在5.0以上。在所有涂片中,被认为在维持正常阴道微生态平衡中起关键作用的乳杆菌数量和比例明显不足。产后BV的发病率(31.36%)高于孕早期产检时,产后妇女BV发病率较高,差异有统计学意义(P0.05)。予300例患者阴道内放置乳酸杆菌活菌胶囊,结果显示研究组阴道p H明显降低,接近正常女性阴道p H水平(P0.05),且阴道乳酸杆菌数量明显增多(P0.05);同时产后3个月、6个月阴道炎的发生率均明显低于对照组(P0.05)。结论产后妇女阴道乳酸杆菌量减少,菌群比例明显失调。阴道炎症以非特异性阴道炎为主,细菌性阴道病、真菌性阴道炎和滴虫性阴道炎较少见。乳杆菌胶囊作为生态治疗的活菌制剂,既能预防、治疗阴道感染,又无不良反应,还可以减少产后妇女阴道炎的复发率,值得临床推广应用。     

云南省怒江州少数民族农村妇女阴道微生态研究

目的了解云南省怒江州少数民族农村妇女阴道微生态状况,针对现状加强对云南少数民族农村妇女生殖健康教育,改善其生活习惯。方法选取云南省怒江州3个自然村106名少数民族农村妇女作为研究对象,同期体检的120名昆明市健康妇女作对照。常规妇检采集阴道分泌物,进行H2O2含量检测、革兰染色后10×100倍油镜下观察,进行阴道微生态学评价(包括阴道菌群密集度、多样性、炎性反应状况)。结果对106例受检者筛查发现,阴道微生态正常者19例(占17.92%),阴道微生态失衡者(菌群异常、菌群抑制及菌群增殖过度)87例(占82.07%),乳酸杆菌检出率为16.04%;120名昆明健康体检妇女微生态正常者70例(占58.33%),阴道微生态失调50例(占41.66%),乳酸杆菌检出率为59.17%,经比较差异有统计学意义(P0.05)。结论云南省怒江州少数民族农村妇女阴道微生态状况较城市人群差,应加强对云南农村少数民族妇女生殖健康知识的普及,改善其生殖健康状况。     

不同生理阶段、避孕方式和感染状态对阴道乳酸杆菌影响的研究

目的调查不同生理阶段、避孕方式、感染因素对女性阴道乳酸杆菌数量的影响。方法收集南昌大学第二附院妇产科就诊的176例妇女的主要资料并采用qPCR方法定量分析阴道分泌物中乳酸杆菌数量,分泌物涂片和革兰染色后在显微镜下观察记录其感染状态。结果非绝经期组不同年龄段乳酸杆菌数量差异无统计学意义,绝经期组乳酸杆菌数量减少;不同避孕方式组的阴道乳酸杆菌数量差异无统计学意义;细菌性阴道病和假丝酵母菌感染组阴道乳酸杆菌数量较正常组差异均有统计学意义。结论生理阶段、细菌性阴道病和假丝酵母菌感染是影响女性阴道乳酸杆菌数量的主要因素。