肺腺癌细胞中EGFR蛋白的表达与细胞内胶原化的相关性研究

目的探讨表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）在肺腺癌细胞中的表达及与细胞发生胶原化的相关性。方法从胸水中提取肺腺癌细胞为研究对象,以32例良性胸水中的增生上皮细胞、炎性细胞为对照,采用免疫细胞化学方法检测细胞中EGFR、E钙粘素蛋白、Vimentin、TTF-1和胶原蛋白亚型I的表达。Masson染色方法检测胶原纤维表达。结果78例胸水标本中,EGFR在肺腺癌细胞中的阳性率为79．5％,胶原蛋白亚型I为32．1％,Masson染色的阳性率为70．5％,明显高于对照组且EGFR和Masson染色的阳性表达结果的相关性具有统计学意义（P〈0．01）。结论EG—FR在肺腺癌细胞中阳性表达,可能与细胞内基质胶原蛋白形成有关。     

免疫细胞化学方法对胸腔积液中恶性肿瘤细胞的分类与诊断

目的应用免疫细胞化学对胸腔积液中的肺非小细胞癌分类与恶性间皮瘤的鉴别诊断。方法利用液基薄层细胞学自动涂片技术方法对筛查出的胸腔积液可疑瘤细胞及瘤细胞标本1158例进行细胞包埋连续切片,分别作肺非小细胞癌（NSCLC）肿瘤细胞标记物CK7、CK5＆6、TTF-1、E—Ca及恶性间皮瘤标记物MC（MesothelialCell,MC）、CR（Calfetinin,CR）、P53、Vimentin免疫细胞化学染色。结果1158例胸腔积液患者确诊为肺腺癌581例,鳞癌509例,腺鳞癌48例,恶性间皮瘤20例。TTF-1在腺癌中有明显高表达,阳性表达率为92．43％;CK58L6在鳞癌中有明显高表达,阳性表达率为97．45％;MC、CR在恶性间皮瘤中有明显高表达,阳性表达率为100．00％和95．00％。结论液基细胞学与免疫细胞化学技术相结合在胸腔积液鉴别诊断中有很重要的临床意义,CK7、CK58L6、TTF-1、E—ca联合应用可用于胸腔积液中NSCLC之间的分类与诊断,CK58L6、MC、CR、P53、Vimentin联合应用可用于胸腔积液中间皮瘤的定性诊断,值得在临床细胞病理学诊断中推广应用。     

肺癌性胸腔积液中生存素基因检测的诊断意义探讨

目的：生存素基因（survivin）是一种新近发现的抗凋亡基因,在肿瘤组织中呈现表达。本文旨在探讨和比较肺癌性胸腔积液和结核性胸腔积液中生存素基因的表达情况,以及其联合细胞学检查对判断肺癌性胸腔积液的敏感度。方法：应用逆转录酶-聚合酶链反应法（RT-PCR）检测2007年06月～2008年03月42例肺癌患者癌性胸腔积液标本,及同时期28例结核性胸腔积液标本的生存素mRNA表达情况,并联合细胞学检查结果进行对比分析。结果：42例肺癌患者胸腔积液标本中生存素mRNA的阳性率为52138％（22／42）;癌细胞的检出率为30．95％（13／42）;生存素mRNA检测联合细胞学检查诊断肺癌的敏感性为61．90％（26／42）,显著高于单独胸腔积液细胞学检测的敏感性（P〈0．001）。28例结核性胸腔积液标本的生存素mRNA阳性率为7．14％（2／28）,显著低于肺癌患者胸腔积液标本生存素mRNA的阳性率（P〈0．001）。结论：运用RT—PCR方法检测胸腔积液中生存素mRNA的表达在判断肺癌性胸腔积液中具有一定的敏感性和特异性,可能作为肺癌辅助诊断的一个新检测指标。     

恶性胸腔积液中肺腺癌的EGFR、VEGF和P53的表达及分子生物学意义

目的探讨在恶性胸腔积液中肺腺癌细胞中EGFR、VEGF、P53表达的状态和关系及对临床治疗的分子生物学意义。方法利用液基薄层细胞学自动涂片技术方法和免疫化学方法筛查出恶性胸腔积液中肺腺癌77例和良性胸水10例,在用免疫细胞化学染色检测EGFR、VEGF、P53的表达情况。结果免疫细胞化学染色显示EGFR在肿瘤细胞中阳性表达55例,表达率为71.4%;VEGF和P53在恶性肿瘤细胞中阳性表达分别为57和31例,表达率分别为74%和40.3%,EGFR与VEGF表达具有相关性(r=0.609;P=0.000)。结论 EGFR、VEGF和P53在恶性胸腔积液的肺腺癌细胞中具有较高的表达率,且表达具有紧密联系,并可以对临床治疗有一定参考性。     

ILK在肺鳞状细胞癌和肺腺癌的表达及其与临床病理特征和预后的关系

目的 探讨ILK在肺鳞状细胞癌和肺腺癌组织中的表达情况,及其与病理分型、肿瘤分化、分期、淋巴结转移及预后的关系。方法采用S-P免疫组织化学方法和Western Blot法,检测肺鳞状细胞癌和肺腺癌组织及相应癌旁肺组织中整合连接激酶（integrin-linkedkinase,ILK）的表达情况,并结合临床和病理资料进行分析。结果免疫组化结果显示：ILK在53／76（70％）的肺癌组织中阳性表达。其中鳞状细胞癌阳性率75％（33／44）,腺癌阳性率62．5％（20／32）,其表达与肺鳞状细胞癌的分化呈负相关（P〈0．01）,与临床分期（P〈0．01）、淋巴结转移（P〈0．01）呈正相关;与肺腺癌的临床分期（P〈0．01）和淋巴结转移（P〈0．01）正相关,与分化程度无相关性（P〉0．05）。同时,其表达与患者的生存时间呈负相关（P〈0．01）,与年龄、性别、肿瘤大小和组织类型等因素无关。Western Blot法进一步证实ILK在肺癌组织中的表达显著高于癌旁正常肺组织（P〈0．01）,其表达与肺癌的分化（P〈0．01）显著负相关。结论肺鳞状细胞癌和肺腺癌中,ILK与肺癌的侵袭和转移有关。ILK可作为判断肺鳞状细胞癌和肺腺癌预后的参考指标。     

MMP-2 VEGF在肺腺癌细胞中的表达及其意义

目的研究探讨基质金属蛋白酶2(MMP-2)及血管内皮生长因子(VEGF)在胸腔积液、痰液中肺腺癌细胞的不同表达及二者在肺癌细胞侵袭转移过程中的相互关系。方法选择胸腔积液、痰液共计264例癌性及异型增生细胞标本经免疫细胞化学方法分别检测MMP-2 VEGF的表达情况。结果免疫细胞化学结果显示:MMP-2在胸腔积液中腺癌细胞、异型增生上皮细胞的表达率分别为71.7%(99/138)、16.7%(6/36),在胸膜炎和结核病变典型良性胸腔积液增生上皮细胞中不表达;在痰腺癌细胞中的表达率为39.1%(27/69),统计结果显示MMP-2在恶性胸腔积液腺癌细胞中的表达率明显高于在异型增生的上皮、增生的上皮及痰腺癌细胞的表达率(P均0.05)。VEGF在胸腔积液中腺癌细胞、异型增生上皮细胞的表达率分别为89.1%(123/138)、33.3%(12/36),在胸膜炎和结核病变典型良性胸腔积液增生上皮细胞中不表达;在痰腺癌细胞中的表达率为47.8%(33/69),VEGF在恶性胸腔积液腺癌细胞中表达率明显高于在异型增生的上皮细胞、增生的上皮细胞及痰腺癌细胞的表达率(P均0.05),且MMP-2同VEGF总阳性表达率之间成正相关(r=0.867,P=0.049)。结果 MMP-2 VEGF在胸水腺癌细胞中高表达,可能与肺腺癌的转移、侵袭有关;两者联合做免疫细胞化学检查对肺腺癌细胞病理诊断有辅助意义。     

人肺鳞癌和腺癌组织中c-erbB-2癌基因蛋白表达与细胞增殖及预后的关系

用S－P免疫组织化学方法,用c－erbB－2多克隆抗体及PCNA单克隆抗体对50例肺鳞癌和30例腺癌组织石蜡包埋标本进行检测。结果显示：c－erbB－2染色总阳性率为46．25％,鳞癌阳性率为40％,腺癌阳性率为56．67％,两者之间无显著性差异。伴有淋巴结转移的肺癌组织中c－erbB－2阳性表达率较高（66．67％）,并且与肺癌预后有关。PCNA表达阳性级别与患者的术后生存期呈负相关（P＜0．05）,与c－erbB－2表达阳性级别呈正相关（P＜0．05）。本研究提示,用免疫组织化学方法检查,c－erbB－2蛋白和PCNA共同表达可作为临床判断肺鳞癌和腺癌预后的较好指标之一。     

腺苷脱氨酶在结核性胸膜炎和恶性胸腔积液的对比临床分析

目的：探究腺苷脱氨酶在结核性胸腔积液和恶性胸腔积液中的含量规律。方法：回顾分析自2010年3月至2012年5月于本院胸心外科住院的胸腔积液患者,对穿刺获得的胸腔积液,用比色法测定胸腔积液中腺苷脱氨酶的水平。测量血中腺苷脱氨酶的水平进行对比。结果：结核性胸膜炎组患者胸腔积液ADA测定值为89．67±47．85IU／L,癌性胸腔积液组水平为24．56±11．491U／L,胸腔积液ADA水平在结核性胸膜炎与癌性胸腔积液组之间存在显著性差异（P〈0．05）;以ADA〉45IU／L诊断结核性胸膜炎：则敏感性为（48／51）94．1,特异性为（48／52）88．9％,以ADA〈45IU／L一诊断恶性胸腔积水：则敏感性（（51／55）89．4％,特异性为（51／54）94．4％;结核性胸膜炎中胸腔积液ADA／血清中ADA比值为2．25±0．72,癌性胸腔积液组水平0．43＋0．1,结核性胸膜炎与癌性胸腔积液组之间存在显著性差异（P〈0．05）;以胸腔积液ADA／血清中ADA比值〉1．0为界诊断结核性胸膜炎：则敏感性为（46／51）90．1,特异性为（45／55）81．8．％,以胸腔积液ADA／血清中ADA比值〈1．0诊断恶性胸腔积水：则敏感性（47／57）82．4％,特异性为（47／53）88．7％。结论：腺苷脱氨酶在结核性胸膜炎和恶性胸腔积液中的含量有明显差异。     

肺癌组织和肿瘤细胞系中BRG1的表达分析

BRG1（brahma—related gene 1）是进化上高度保守的SWI／SNF染色质重塑复合物的成员之一．研究表明：BRG1具有抑瘤基因的特征,可能与肿瘤的发生发展有关．我们采用RT—PCR、Northern杂交和Western blotting证实：肺腺癌细胞系A549和鼻咽癌细胞系HNE2、HNE3、CNE1中无BRG1的表达,而肺鳞癌细胞系NCI-H520、永生化正常人支气管上皮细胞系HBE和鼻咽癌细胞系HONE1、HNE1、CNE2中有BRG1的表达．同时,通过RT—PCR检测10例肺癌组织标本．发现60％（6／10）的肺癌组织中日RGG1的mRNA水平明显下调,而配对正常肺组织中BRG1的mRNA表达未见改变．对29例肺癌组织和10例配对正常肺组织切片进行免疫组化染色,结果显示：肺癌组织中BRG1蛋白表达的阳性率为37．9％（11／29）,配对正常肺组织中BRG1蛋白表达的阳性率为90％（9／10）,两者的差异有显著性（P〈0．05）．这提示BRG1确实在肺癌组织及多种肿瘤细胞系中表达下调或缺失,在肺癌发病过程中可能起一定的作用．     

恶性胸腔积液中肺腺癌细胞的EGFR、ERCC1、TYMS、TUBB3和RRM1的表达及分子生物学意义

目的探讨EGFR、ERCCl、TYMS、TUBB3和RRMl在肺腺癌中的表达及分子生物学意义,为晚期肺癌患者的联合化疗提供参考。方法选取恶性胸腔积液中肺腺癌患者112例,采用免疫细胞化学方法对其进行EGFR、ERCCl、TYMS、RRMl、TUBB3的表达检测并根据EGFR不同的表达强度来统计ERCCl、TYMS、TUBB3和RRMl表达率的差异。结果在112例恶性胸腔积液中EGFR的阴性表达率为0．9％,弱阳性表达率为15．2％,阳性表达率为40．2％,强阳性表达率为43．7％,ERCCl的阳性表达率为40．2％,TYMS的阳性表达率为41．1％,TUBB3的阳性表达率为75％,RRMl的阳性表达率为83％。在不同EGFR表达强度下,ERCCl、TYMS和TUBB3各蛋白表达率不同且具有差异性。结论根据上述蛋白表达情况的不同,可对临床选择不同化疗方案提供参考意见。     

Survivin在肺鳞癌、腺癌中的表达及其与Ki67和p53表达的关系

目的探讨survivin在肺鳞癌、腺癌中的表达和意义及其与Ki67、p53表达的相关性。方法采用免疫组织化学SP法检测survivin、Ki67和p53在112例肺鳞癌、腺癌中的表达情况。结果Survivin、Ki67和p53的阳性率分别为59．8％（67／112）、46．4％（52／112）和51．8％（58／112）,survivin的表达与肺癌的低分化（P=0．009）和淋巴结转移正相关（P=0．014）;Ki67和p53的表达分别与肺鳞癌、腺癌的低分化程度负相关（P〈0．05）。Survivin与Ki67和p53在肺鳞癌、腺癌中的表达分别正相关（P〈0．01）。结论Survivin的表达与肺鳞癌、腺癌的低分化和淋巴结转移正相关;Ki67和p53的表达分别与肺鳞癌和腺癌的低分化程度相关,survivin、Ki67和p53三者的协同表达可能是促进肺癌的恶性进展的重要因素。     

钠／碘同向转运体在人不同组织学分型胃癌中的表达

目的研究钠／碘同向转运体（sodium-iodide symporter,NIS）在人不同组织学分型胃癌组织中的表达,分析NIS表达与胃癌组织学分型的关系。方法选取于中国医科大学附属第一医院肿瘤外科行手术治疗的180例患者的胃癌组织为研究对象。依据胃癌的组织学分型分为6组,其中乳头状腺癌30例,管状腺癌30例,低分化腺癌30例,黏液腺癌30例,印戒细胞癌30例,未分化癌30例。选取上述180例患者的癌旁组织及30例慢性胃炎患者的胃组织作为对照。采取免疫组织化学SP法对上述组织的石蜡切片进行染色。结果在人胃癌组织、人胃癌旁组织及人慢性胃炎组织中,NIS阳性细胞率分别为10．6％（19／180）、28．3％（51／180）和90％（27／30）。人胃癌组织与人胃癌旁组织相比（P〈0．01）、人胃癌组织与人慢性胃炎组织相比（P〈0．01）、人胃癌旁组织与人慢性胃炎组织相比（P〈0．01）,NIS阳性细胞率均具有显著统计学差异。在人乳头状腺癌、管状腺癌、低分化腺癌、黏液腺癌、印戒细胞癌及未分化癌中,NIS阳性细胞率分别为30％（9／30）、10％（3／30）、13．3％（4／30）、6．7％（2／30）、3．3％（1／30）和0（0／30）。人乳头状腺癌与人黏液腺癌相比（P〈0．05）、人乳头状腺癌与人印戒细胞癌相比（PGO．01）以及人乳头状腺癌与人未分化癌相比（P〈0．01）,NIS阳性细胞率均具有统计学差异。在人慢性胃炎组织及人胃癌旁组织中,NIS仅表达于胃黏膜细胞的细胞膜上,而在人胃癌组织中,NIS在癌细胞膜有表达,在细胞质也有较明显的表达。结论在人胃癌组织、癌旁组织、慢性胃炎组织中,NIS阳性细胞率依次增高。在本研究人各种组织学分型的胃癌中,随着胃癌恶性程度的增高,NIS表达呈现出减少的趋势。人胃癌组织NIS在癌细胞的细胞膜和细胞质均有表达,而?     

脑脊液中转移性腺癌细胞免疫表型的变化

目的探讨脑脊液中转移腺癌细胞在没有血供的条件下的生长特征,是否有血管内皮标记物CD34,CD105,FⅧ,淋巴管内皮标记物D2_40及碱性成纤维生长因子(b-FGF)的表达,并促进肺癌的脑转移及肿瘤细胞自我生存的调控。方法采集109例腺癌脑转移患者的脑脊液为研究对象,其中肺癌脑转移107例(包括49例肺癌术后5年内脑转移,58例无肺癌病史直接经脑脊液穿刺发现肺癌脑转移),乳腺癌2例。以40例主要成分为炎性细胞的脑脊液及40例原发性肺腺癌组织标本为对照,采用免疫化学染色方法检测脑转移腺癌细胞及腺癌组织中CD34,CD105,FⅧ,D2_40,b-FGF,VEGF及vimentin的表达。结果 109例脑脊液标本中,CD34,CD105,FⅧ,D2_40,b-FGF及VEGF在转移癌细胞中的阳性率分别为64.2%,67.9%,66.9%,63.8%,56.8%,70.6%明显高于脑脊液对照组(阳性率均为0)且差异具有统计学意义(P0.05)。vimentin在脑脊液转移腺癌细胞中阳性表达,表达率为88.1%。在原发肺癌标本中,CD34,CD105,FⅧ和VEGF表达较弱或不表达。D2-40在癌中不表达。B-FGF与Vimentin在原发肺腺癌中的表达率分别为50.1%和29.3%。结论在肺癌脑转移过程中,肿瘤细胞能够表达不同的血管生长因子,提示可能具备内皮细胞的生物学特性,可能有助于增强肿瘤细胞的转移能力和对环境的耐受能力。     

胃腺癌血管生成拟态和HIF—1α的表达及意义

目的探讨在人胃腺癌组织中是否存在血管生成拟态（Vasculogenic mimicry,VM）及VM与HIF-1α表达的关系,以及HIF—1α表达的临床病理意义。方法收集临床病例资料完整的胃腺癌121例,利用CD34和PAS双重染色观察是否存在VM,然后对VM阳性组和阴性组进行HIF-1α染色,分析VM与HIF-1α表达的关系及HIF—1α表达与患者临床病理指标的关系。结果121例胃腺癌组织中有44例（36．36％）存在VM。VM阳性组和VM阴性组HIF-1α蛋白表达阳性率分别为77．27％（34／44）和54．55％（42／77）,两组间的差异有统计学意义（P〈0．05）;有、无淋巴结转移的胃腺癌组织HIF-1α表达阳性率分别为76．74％（66／86）和28．57％（10／35）,两组间的差异有显著性（P〈0．01）;中、低分化胃腺癌组织中HIF-1α表达阳性率分别为50．85％（30／59）、74．19％（46／62）,两组间的差异有显著性（P〈0．01）。结论胃腺癌组织中存在VM,HIF-1α的表达可能促进VM的形成。VM与HIF-1α的表达可能是胃腺癌浸润、转移的重要生物学标志。     

survivin和caspase-3在非小细胞肺癌中的表达及相关性研究

目的：研究survivin和caspase-3蛋白在非小细胞肺癌中的表达情况,分析二者的作用机制及相关性。方法：采用免疫组化KIT染色法,检测survivin和caspase-3在60例NSCLC组织和20例正常肺组织中的表达情况。结果：肺癌组织中的survivin阳性表达率（61．67％）明显高于正常肺组织（5％）;Ⅲ期的survivin阳性表达率（76．92％）明显高于Ⅰ＋Ⅱ期（50％）;均有显著性差异（P〈0．05）;而与年龄,病理类型,组织分化程度,淋巴结转移情况无关。肺癌组织中caspase-3阳性表达率（43．33％）明显低于正常组织（85％）;高＋中分化组的caspase-3阳性表达率（58．06％）明显高于低分化的（27．59％）;鳞癌组织中的caspase-3阳性表达率（56．25％）高于腺癌组织（28．57％）;均有显著性差异（P〈0．05）;而与年龄,TNM分期,淋巴结转移情况无关。结论：survivin在非小细胞肺癌中表达上调,而caspase-3却下降,且二者的表达呈负相关,提示survivin可能参与肺癌的发生发展,且抑制caspase-3的激活而抑制凋亡;caspase-3的失活可能导致肿瘤细胞的增殖。     

EGFR在晚期肺腺癌患者中的表达及临床意义

目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)在晚期肺腺癌患者中的表达及其意义。方法收集60例晚期肺腺癌患者的胸腔积液及活检肺癌组织,采用免疫组化检测EGFR的表达,并探讨其表达与临床病理特征的关系。结果 EGFR在胸腔积液及肺癌组织中的阳性表达率分别为75.0%(45/60)、63.3%(38/60),两者差异无统计学意义(P0.05)。结论 EGFR均高表达于肺腺癌胸腔积液及腺癌组织,且与年龄、性别、吸烟史、分化程度及肿瘤的大小无明显相关,可指导肺腺癌患者的靶向治疗。     

肺癌细胞多向分化与异质性的研究

探讨肺癌细胞多向分化与异质性。用光镜、免疫组化方法观察了87例肺癌手术标本组织切片,30例细胞涂片。（1）标本取材块数与病理分型种类多少里显著性正相关。（r=0．407,P＜0．01）;（2）作为单一类型的小细胞癌、鳞癌、腺癌、大细胞癌及类癌仅占27．6％、20％鳞癌、16．7％腺癌、23．3％大细胞癌KER、VIM双表达。66．7％有鳞、腺、神经内分泌三向分化;（3）在混合类型肺癌中,细胞学与组织学分型符合率为56．7％。肺癌细胞类型有明显异质性,其发生分子基础尚待进一步研究。     

HMGB1、NF-kBp65、MMP2在子宫内膜腺癌组织中的表达及相关性研究

目的探讨高迁移率族蛋白B1（HMGBl）、核因子-kBp65（NF-kBp65）和基质金属蛋白酶2（MMP2）在子宫内膜腺癌的表达及三者在子宫内膜腺癌的相关性。方法收集本地医院妇科手术的子宫内膜组织存档蜡块126个,其中子宫内膜癌66例,不典型增生性子宫内膜36例,同期其他原因进行诊断性刮宫获得正常增生期子宫内膜24例,采用免疫组化法检测子宫内膜癌,不典型增生性子宫内膜和正常增生期子宫内膜的组织标本中HMGBl、NF-kBp65和MMP2的表达并分析其相关性。结果HMGBl蛋白和NF-kBp65均在子宫内膜细胞的胞核和胞浆中有表达,HMGBl在肿瘤样本、增生样本和正常样本中阳性表达率分别为78．79％、55．56％和25．00％,P％0．05;NF-kBp65在肿瘤样本、增生样本和正常样本阳性表达率分别63．64％,38．89％和0．00％,P％0．05;MMP2主要在细胞胞浆中表达,MMP2在肿瘤样本、增生样本和正常样本阳性表达率分别71．2l％、50．00％和8．33％,P〈O．05。此外,HMGBl在子宫内膜癌的表达与NF-kBp65的表达呈正相关（r=0．67,P〈0．05）,且HMGBl、NF-kBp65的表达均与MMP2的表达呈正相关（r=0．41,r=0．36,P〈0．05）。结论HMGBl、NF-kBp65和MMP2在子宫内膜癌组织高表达,且两两表达成正相关,HMGBl、NF-kBp65和MMP2在子宫内膜癌的发生、发展中起促进作用。     

原代培养鼠肺成纤维细胞中α-平滑肌肌动蛋白的表达

目的：观察原代培养大鼠肺成纤维细胞（FB）中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达情况。方法：24只雌性Wistar大鼠,随机分为正常组和模型组,气管内注入博莱霉素A2（BLM-A2）（5mg／kg）建立大鼠肺间质纤维化（PF）模型,正常组气管内注入等量生理盐水。实验周期第28d腹主动脉放血法处死,肺组织HE染色和透射电镜检查。体外原代培养FB,传3-5代后流式细胞术检测α-SMA表达的细胞阳性率。结果：HE染色28d模型组大片肺泡结构破坏,肺泡腔消失,有成纤维细胞灶形成,电镜观察肺组织超微结构发生改变,肺间质中可见胞浆内有微丝样结构的MF。流式细胞分析结果：正常组α-SMA表达的细胞阳性率为95．5％±4．68％,模型组α-SMA表达的细胞阳性率为96．2％±2．14％,与正常组相比P〉0．05。结论：原代培养的大鼠肺FB中α-SMA的阳性表达率正常组和模型组均显著增高,体外培养的大鼠肺FB传3—5代后可能有部分已经转化为肌纤维母细胞（MF）。     

RNA干扰沉默缺氧诱导因子1α逆转肺癌细胞耐药性

目的：观察RNA干扰沉默缺氧诱导因子1α（HIF-1α）对肺癌细胞耐药性的影响。方法：构建靶向HIF-1α小干扰RNA基因,并转染到人肺腺癌耐顺铂细胞株A549／DDP细胞中。逆转录聚合酶链反应RT—PCR）检测细胞的HIF-1α、多药耐药基因-（MDR-1）以多药耐药相关蛋白基因（MRP）mRNA变化,免疫细胞化学法观察干扰后HIF-1α、P-糖蛋白以及MRP蛋白的变化。MTT法检测不同浓度的顺铂作用下细胞死亡率。结果：HIF-1αsiRNA组中H1F-1α、MDR—1、MRPmRNA水平显著降低（P〈0．05）。且蛋白水平也显著下降（P〈0．05）。HIF-1αsiRNA组细胞死亡率较未转染组均明显增高（P〈0．05）,转染siRNA阴性组不影响肿瘤细胞的耐药性。结论：HIF-1αsiRNA可显著降低A549／DDP细胞中H1F-1α、MDR-1、MRP表达,从而起到逆转肺腺癌A549／DDP细胞的耐药作用。