PCR结合反向斑点杂交法检测石蜡包埋组织中的曲霉感染

目的评价PCR结合反向斑点杂交法检测福尔马林固定、石蜡包埋组织中曲霉感染的可行性。方法选取39例病理证实曲霉感染的患者活检标本（21例为鼻窦感染标本、18例为尸检标本）,以1对真菌特有的28SrRNA保守序列结构作为真菌通用引物,以临床常见的4个曲霉菌种：烟曲霉、黄曲霉、黑曲霉、土曲霉的种特异性序列为种特异性探针,与扩增产物进行反向斑点杂交。结果尸检标本阳性率为55．6％（10／18）,鼻窦标本阳性率为76．2％（16／21）,特异性均为100％。在这些曲霉所致的系统性感染中,烟曲霉是主要的致病真菌。结论该方法能对临床无法培养的石蜡组织块进行回顾性病原学研究,并可以鉴定常见的曲霉菌种,有良好的特异性和敏感性,适用于临床曲霉感染的检测。     

PCR结合反向斑点杂交法检测侵袭性曲霉感染的初步实验研究

目的评价PCR结合反向斑点杂交法检测动物模型和临床免疫抑制患者的侵袭性曲霉感染的可行性。方法建立侵袭性曲霉感染动物模型,收集动物血清和健康人群、免疫抑制患者的血清,进行PCR-种特异性探针检测。以1对真菌特有的28S rRNA保守序列结构作为真菌通用引物,以临床常见的4个曲霉菌种,即烟曲霉、黄曲霉、黑曲霉、土曲霉的种特异性序列为种特异性探针,与扩增产物进行反向斑点杂交。结果PCR-探针杂交检测动物接种后24h时阳性血清为16/24,48h为18/24,72h为19/24,96h为24/24。阳性率为80%,特异性为95.8%。同时取血行真菌培养,烟曲霉阳性率仅为5%。临床标本显示两例确诊IA患者血清均为阳性,且能鉴定菌种。健康对照人群标本检测显,阴性38例,假阳性2例。结论PCR-探针杂交法较传统血培养法能更快速、灵敏地检测动物模型的侵袭性曲霉感染,并可用于对IA高危患者的监测。     

临床罕见曲霉菌属的研究进展

全世界每年有超过20万例危及生命的曲霉病感染,其中以烟曲霉感染最为多见。近年来,分子技术的进步发现曲霉病也可以由表型与烟曲霉相似,遗传上截然不同的新菌种引起。临床上,超过20%的曲霉分离株是未被识别的或不常见的菌种,我们称其为罕见曲霉菌种。越来越多侵袭性曲霉病(invasive aspergillosis, IA)的病例报道与它们相关。这些菌种表现出与烟曲霉不同的毒力和药物敏感性,其临床菌株基因组序列和表型图谱的缺乏,导致其研究受到阻碍。本文就临床罕见曲霉菌属的流行病学、鉴定方法、药敏情况等方面进行文献综述。     

肿瘤患者深部真菌感染的菌株分布及耐药性分析

探讨肿瘤患者深部真菌医院感染的病原菌分布特点及耐药现状。回顾性分析2008年1月至2009年12月哈尔滨医科大学第一临床医学院住院肿瘤患者送检标本分离出的173株真菌的分布及耐药情况。肿瘤患者深部真菌医院感染以下呼吸道感染为主,占76.3%,真菌种类主要是白假丝酵母菌(74.6%);真菌药敏试验结果表明,深部真菌对两性霉素B和5-氟胞嘧啶耐药率均5%;对伊曲康唑及伏立康唑的耐药率为0~6.5%;对氟康唑耐药率有上升趋势,为2.5%~25.0%。临床分离的真菌主要集中在呼吸道标本,以白假丝酵母菌为主,对抗真菌药物普遍敏感,应积极治疗,合理利用抗真菌药物,改善患者预后,减少耐药菌株的产生。     

医院内深部真菌感染分布及耐药性分析

目的探讨大连医科大学附属第一医院深部真菌感染的常见菌种,临床病区分布及其耐药性。方法对2008年1月1日至2008年12月31日749例住院患者深部真菌感染进行分析。结果常见菌种为白色假丝酵母菌,热带假丝酵母菌,近平滑假丝酵母菌,克柔假丝酵母菌,光滑球拟酵母菌。主要病区为ICU。从标本的来源看,痰标本中真菌检出率最高,占61.1%。两性霉素B抗菌作用最强,耐药率只有3.6%。结论医院内深部真菌感染分布广泛,非白色假丝酵母菌感染明显增多,耐药菌株增多,部分治疗需联合用药。     

8a间院内深部真菌感染的临床分布特点及耐药性分析

了解深部真菌感染的临床分布特点及耐药情况,以指导临床合理应用抗真菌药物。回顾性分析近8a自住院患者送检标本分离的深部感染真菌,利用ATB FUNGUS3真菌药敏卡进行体外药敏试验。2003年至2010年共检出9 854株假丝酵母菌,检出率呈上升趋势,由2003年的19.9%上升至2010年的34.3%。院内深部感染的真菌主要分布于内科（55.9%）;主要感染部位为呼吸道（84.6%）;主要菌种为白色念珠菌（60.9%）;非白色念珠菌比例逐年增高。真菌药敏试验结果表明,深部真菌对两性霉素B、伏立康唑和5-氟胞嘧啶耐药率分别为0.9%、4.0%和4.6%;对伊曲康唑的耐药率有上升趋势,为28%。临床深部真菌感染逐年增加,对唑类药物的耐药情况日趋严重。应重视临床真菌感染的病原学检查和耐药性监测,才能有效地控制深部真菌院内感染。     

重症监护病房真菌谱及耐药性6年变化趋势

目的 调查我院重症监护室（ICU）近6 a临床分离真菌株的菌种结构及耐药性变化.方法 2007 ～2012年从我院1435例ICU患者中分离出的1 435株真菌均为首次分离的菌株.采用Cox-Stuart趋势检验回顾性分析了分离真菌株的菌种结构和主要真菌对常用抗真菌药物耐药率的变化趋势.结果 2007 ～2012年间,我院tCU真菌检出阳性标本总数从159株/a逐年增加至396株/a.其中,白念珠菌、近平滑念珠菌、曲霉的构成比波动范围分别为34.6％ ～ 50.3％、6.3％～9.6％、1.3％～3.2％,2010 ～2012年较2007 ～2009年构成比总体均有上升趋势,P=0.02.热带念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌构成比波动范围分别为13.6％ ～ 17.3％、9.4％ ～ 22.6％、1.4％ ～5.2％,P=0.18,构成比均无明显上升或下降趋势.2010 ～2012年较2007 ～2009年,白念珠菌对氟康唑和伊曲康唑耐药率的变化均呈降低趋势,P=0.02.热带念珠菌对氟康唑和伊曲康唑耐药率的变化均呈降低趋势,P =0.02;光滑念珠菌对伊曲康唑耐药率的变化总体呈上升趋势,P =0.02.结论 我院ICU近6 a来白念珠菌仍然为临床最常见的真菌分离株,白念珠菌、近平滑念珠菌及曲霉占总真菌分离株的百分比有上升趋势.白念珠菌及热带念珠菌对氟康唑和伊曲康唑耐药率均呈降低趋势,光滑念珠菌对伊曲康唑耐药率呈上升趋势.     

深部真菌感染临床特点分析

目的了解深部真菌感染患者的性别、年龄、感染部位、住院科室、菌种分布及真菌耐药情况,为临床防治真菌感染提供研究依据。方法收集荆州市中心医院2009年1月至2009年12月微生物实验室分离的真菌446株,采用科马嘉显色琼脂及API220C Aux鉴定系统鉴定,并使用ATMTMFUNGUS3真菌药敏卡进行体外药敏试验。结果临床真菌感染男性占72%,以老年患者为主,大于60岁者占54.9%;感染的真菌主要分布于呼吸内科和ICU,分别占35.5%、24.9%;主要感染部位为呼吸道,占91.3%;主要菌种为白假丝酵母菌、热带念株菌、近平滑假丝酵母菌、光滑念株菌和克柔念株菌,分别占64.2%、13.2%、9.6%、7.6%和5.4%;合并细菌感染的感染真菌100株,占22.2%,细菌中以革兰阴杆性菌为主,占96%;药敏试验结果显示真菌对各抗真菌药具有较好的敏感性。结论临床真菌感染已日益突出,以呼吸科及ICU患者老年男性为主,儿童真菌感染亦不容忽视,感染菌种以白假丝酵母菌和热带念株菌为主,临床应加强对这些真菌感染的预防和监测,防止真菌感染。     

肿瘤与非肿瘤患者深部主要酵母菌感染与药敏分析

深部真菌引起的人体深部感染,可侵及真皮、黏膜、肌肉及内脏组织和器官,称为深部真菌感染[1]。由于免疫抑制剂、激素、广谱抗生素的大量应用,器官移植技术的开展,导管的介入及肿瘤患者的放疗、化疗等致深部真菌感染尤其是念珠菌感染日趋增多,严重危害患者的健康,甚至危及生命。本文就我院355例深部主要酵母菌感染患者进行回顾性分析,从而指导临床合理使用抗真菌药物,控制真菌感染。1材料和方法1.1试验菌株2004年4月~2006年7月我院送检的痰液、血液、尿液、创面分泌物等355例肿瘤与非肿瘤患者标本真菌培养及药敏实验结果进行分析。1.2试剂和…     

真菌通用引物Its1和Its4在丝状真菌鉴定中的价值评价

目的 对真菌通用引物Its1和Its4在丝状真菌鉴定中的价值进行评价.方法 收集中山大学附属第一医院2012年1月至2012年8月间分离的丝状真菌11株,使用真菌通用引物Its1和Its4采用PCR法扩增核糖体基因,对PCR产物进行序列测定,将测序结果与GenBank中已知标准或临床菌株DNA序列比对,确定丝状真菌的菌种;同时与传统形态学鉴定方法进行比较,从而对真菌通用引物Its1和Its4在丝状真菌鉴定中的价值进行评价.结果 从DNA提取到序列测定结束,在2个工作日内即可完成.所有菌株均测序成功,测序结果与GenBank中的序列比对,烟曲霉、杂色曲霉、橘青霉、溜曲霉可以鉴定到种;黄曲霉和米曲霉、阿姆斯特丹散囊菌和冠突散囊菌由于高度同源性无法区分鉴定到种.结论 利用真菌通用引物Its1和Its4结合PCR技术和测序技术,可快速、准确将大部分丝状真菌鉴定到种.     

烟曲霉引起肺部感染致患者死亡2例

近年来,随着新药物和新方法的广泛应用,医院内部深部菌感染（DFI）的发病率目益增高。就曲霉病而言,在过去的10年里,发病率上升了300％,其中烟曲霉是主要的致病菌,占曲霉类真菌所致人类感染的80％～90％。由于烟曲霉病无特异的临床表现,CT扫描和X片无明显特异性。通常的感染途径是通过呼吸道吸入侵入肺部,在免疫缺陷患者中可进一步播散,导致全身多个系统受损。烟曲霉毒力大,且容易被忽视,以致误诊漏诊,危及患者生命。2004年嵊州市人民医院收治2例肺部烟曲霉感染患者,现报道如下。     

329株深部真菌感染菌种分布及药敏试验分析

近年来临床上随着广谱抗生素、化疗药物和免疫抑制剂大量应用、艾滋病的流行以及放射治疗和器官移植的广泛进行,深部真菌病发病率大幅上升;唑类药物作为当前临床抗真菌治疗的主要药物,其使用量的增加导致临床深部真菌分离株耐药性增强、感染菌种发生变化^[1]。为了解近年来临床深部真菌感染的分布与耐药状况、分析真菌感染的流行趋势,对我院2004～2008年5年间临床深部真菌感染的病原学资料进行回顾性分析。     

应用反向线点杂交技术鉴定临床常见曲霉属和毛霉目真菌

目的应用反向线点杂交技术(reverse line blot hybridization,RLB)快速鉴定临床常见的曲霉属和毛霉目真菌。方法收集我院真菌和真菌病研究中心保存的5种曲霉菌(烟曲霉、黄曲霉、黑曲霉、土曲霉、构巢曲霉)和7种毛霉目真菌(冻土毛霉菌、总状毛霉菌、卷枝毛霉菌、少根根霉、小孢根霉、微小根毛霉、伞状犁头霉),共计98株菌株。利用真菌通用引物ITS1和ITS4对菌株进行PCR扩增,用12个真菌种特异性探针与扩增后产物进行反向线点杂交。将RLB结果与真菌传统形态学鉴定结果、ITS区DNA测序结果进行比较。结果 RLB可以正确鉴定98株实验菌株,与形态学方法和ITS区测序方法鉴定结果100%一致,种特异性探针之间未见交叉杂交,显示出该方法的高度敏感性和特异性。8株阴性对照菌株(白念珠菌、茄病镰刀菌、尖端赛多孢、马尔尼菲青霉、疣状瓶霉、棒曲霉、日本曲霉以及雅致小克银汉霉),使用RLB方法无法鉴定。通过烟曲霉基因组DNA浓度10倍倍比稀释法验证RLB的敏感性为1.8×10-3 ng/μL。结论 RLB技术为实验室早期快速诊断、鉴定临床常见的曲霉属和毛霉目真菌提供参考。     

烟曲霉再鉴定、标准化CSP分型及体外药物敏感性

目的 了解烟曲霉复合体临床株菌种分布,经典烟曲霉临床株CSP基因型及对常见抗真菌药物敏感性状况.方法 菌株来源:北京大学真菌和真菌病研究中心保存分离自125名患者的162株烟曲霉复合体菌株.通过形态学,最高生长温度及分子生物学测序分步鉴定;对CSP基因进行扩增、测序,采用国际化命名体系进行CSP分型;采用微量液基稀释法测定经典烟曲霉对伊曲康唑(ITC)、两性霉素B(AMB)、伏立康唑(VRC)及卡泊芬净(CAS)的敏感性.结果 所有烟曲霉复合体菌株均为经典烟曲霉;共分为16个CSP基因型,最常见为t04A、t03和t01;分离自4名患者的13株菌对ITC的MICs≥4 μg/mL,其中2株菌AMB和VRC的MICa分别为4μg/mL和16 μg/mL.CAS的MECs最高为4μg/mL,仅1株.结论 未检出烟曲霉相关新种;经典烟曲霉临床株共16个CSP基因型,分布与国际研究结果基本一致,其中5个为新型.我国经典烟曲霉临床株ITC耐药率为3.2％,个别菌株AMB,VRC和CAS耐药.     

慢性阻塞性肺疾病继发肺部真菌感染的菌种分布及其危险因素

目的 了解慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)患者继发肺部真菌感染的菌种分布及其危险因素。方法 对2018年12月—2021年12月某三甲医院收治的63例慢阻肺继发肺部真菌感染患者的临床资料进行回顾性分析,将其作为观察组,统计其致病真菌分布情况。另随机选取同时期收治的慢阻肺未发生肺部真菌感染的63例作为对照组,统计两组一般资料,经单因素、多因素logistic回归分析慢阻肺继发肺部真菌感染的危险因素。结果 观察组共分离出63株真菌,其中以白念珠菌(68.25%)为主,其次为烟曲霉(12.70%);经多项logistic回归分析证实,抗生素使用时间≥14 d、联合使用抗生素、合并低蛋白血症、静脉使用糖皮质激素、合并糖尿病、合并肺结核、合并Ⅱ呼吸衰竭均为慢阻肺患者继发肺部真菌感染的独立危险因素(OR>1,P<0.05)。结论 观察组主要感染真菌为白念珠菌,其次为烟曲霉。抗生素使用时间≥14 d、联合使用抗生素、合并低蛋白血症、静脉使用糖皮质激素、合并糖尿病、合并肺结核、合并Ⅱ呼吸衰竭是慢阻肺继发肺部真菌感染的独立危险因素。     

院内念珠菌血液感染的菌种分布及药敏分析

目的分析我院念珠菌血液感染的菌种比例、科室分布和体外药敏情况,为临床抗真菌药物的选择提供支持。方法回顾性分析无锡市第二人民医院在2013~2016年间血培养结果为念珠菌的病例,统计菌种分布及药敏结果等。结果血培养标本中念珠菌阳性病例共有56例,其中白念珠菌比例为57%(32/56),非白念珠菌占43%(24/56)。非白念珠菌菌株主要为近平滑念珠菌(20%,11/56)和光滑念珠菌(15.8%,9/56)。念珠菌感染病例主要分布在重症监护科(23.2%,13/56)和肾内科(17.9%,10/56)。白念珠菌与非白念珠菌对临床最常用的抗真菌药物氟康唑的敏感率差别最大,分别为93.8%和62.5%;56株念珠菌菌株对抗真菌药物两性霉素B和5-氟尿嘧啶的敏感性均为100%;55.6%的光滑念珠菌和72.7%的近平滑念珠菌对氟康唑敏感,所有克柔念珠菌株对氟康唑均耐药。结论本院近几年念珠菌血液感染的病原菌仍以白念珠菌为主,但非白念珠菌对一线抗真菌药物氟康唑的耐药性更高,临床上抗真菌的药物选择应充分考虑耐药问题。     

肺部感染近平滑念珠菌的临床分布与耐药性分析

<正>随着广谱抗菌药物长期滥用和机械通气等创伤性治疗手段的增加,肺部念球菌感染尤其是近平滑念珠菌感染逐年增加[1-2]。了解肺部感染近平滑念珠菌的分布及药敏情况,可为临床防治近平滑念珠菌肺部感染提供参考。1资料与方法1.1菌株来源收集2012年1月~2014年7月医院感染管理科微生物实验室与检验科细菌室从本院临床各科标本中分离的近平滑念珠菌菌株及患者资料。剔除同一名患者同一部位多次分离到的相同菌株。     

老年患者导尿管相关念珠菌泌尿系感染菌株分布及药敏分析

正据统计~([1]),泌尿系统是仅次于呼吸系统的深部真菌的感染部位,而留置导尿管是泌尿系统感染最重要的危险因素之一。老年人因基础疾病多、免疫抑制及侵入性操作增多等因素是导尿管伴随尿路感染的高发人群~([2]);在老年患者中,念珠菌属是仅次于肠杆菌引起导尿管伴随尿路感染的菌群~([3])。以往文献中,鲜有专门介绍老年导尿管相关念珠菌尿路感染的报道,为及时统计该类人群的致病菌及药敏情况,为临床合理用药提供参考,本研究收集2013～2018年228例老年患者导尿管伴随尿路念珠菌感染的菌种分布、耐药性情况分析如下。     

ICU医院内深部真菌感染临床分析

目的研究ICU深部真菌感染的临床及病原学特点。方法收集129例ICU深部真菌患者的血、痰、粪便、尿、腹腔引流液培养结果及其临床资料。结果129例ICU深部真菌患者中共分离出152株真菌,以白色念珠菌及热带念珠菌为主,其中白色念珠菌占55．92％,热带念珠菌占21．71％。感染部位以尿路感染最常见,占50．66％,其次为呼吸道感染,占29．61％。结论ICU深部真菌感染菌种和部位有自己的特点,并且有一定的诱发因素,应予以高度重视。     

不同科室生殖道解脲支原体与人型支原体感染与药敏结果分析

目的分析皮肤科、妇产科、不育与性医学科及泌尿外科解脲支原体(Uu)与人型支原体(Mh)的感染情况及药物敏感结果。方法收集中山大学附属第三医院皮肤科、妇产科、不育与性医学科及泌尿外科患者的泌尿生殖道支原体培养及药敏试验结果并进行分析。结果 2012年6月至2014年6月共收集支原体培养阳性标本3 537例,单独Uu、单独Mh及混合感染分别为3 392例、45例、278例。不同科室支原体菌种构成比存在差异,对阿奇霉素、克拉霉素及强力霉素敏感性也存在差异。Mh对阿奇霉素、克拉霉素的敏感率明显低于Uu。结论不同科室泌尿生殖道支原体菌种的分布及药物敏感率存在一定的差异,临床上应注意根据药敏结果选择抗菌药物。