生物防治因子

真菌寄生菌寡雄腐霉(p.oligandru爪)和土壤放射形土壤杆菌(A.radiob川e:)B6可保护甜菜苗期植株,免于固抱腔菌尸leo:-pora beta。、终极腐霉(P.ultfmum)及其它植物病原菌引起的甜菜黑根。将上述两种微生物同时用于种子处理,可以在不同的气候条件下提供更好的保护,这些气候条件影响它们在植株根际与病原菌的相互作用。在玻管试验中,土壤放射形杆菌抑制终极腐霉和尸.betae,不抑     

农业其它

<正> 852803促进供体菌株Tn5转座子的定性和根癌土壤杆菌的一种染色体连锁图的发展[英]/Pischl,D.L.…//J.Bacteriol.-1984,159(1).-1～8[译自D BA,1984,3(19),84-09209]对根癌土壤杆菌15955已开展的促进染色体基因转移Tn5转座子系统做了进一步定     

植物细胞、组织及原生质体培养

960095 外源激素对转化根培养物生长和次生代谢物形成的影响[会,英]/Rhodes,M.J.C.…∥PlantCell' Tissue Organ Culture.-1994,38(2～3).-143～151[译自DBA,1995,14(5),95-02957] 用发根土壤杆菌LBA9402的农杆碱菌株感染产生转化的根培养物。切下从受伤部分出现的根,除去污染的细菌,并以单独系列进行培养。根系保持在B50(Gamborg B5盐和3％蔗糖)培养基上。用     

多功能固氮菌筛选及其在土壤生态修复中的应用

以固氮酶和ACC(1-aminocyclopropane-1-carboxylate,1-氨基环丙烷-1-羧酸)脱氨酶活性为指标筛选功能菌株,研制菌剂,用于修复生荒地土壤生态。采用乙炔还原法测定菌株固氮酶活性;比色法定量测定ACC脱氨酶活性;PCR扩增得到菌株16S r RNA,通过序列分析、比对研究菌株的系统发育地位;通过形态、生理生化特征和16S r DNA序列比对鉴定菌种。结果显示,筛选到固氮酶活性大于9 nmol/(h·mg)的菌株共计47株,其中43株的固氮酶活性大于阳性对照固氮菌剂生产菌株圆褐固氮菌ACCC11103。筛选到产生ACC脱氨酶的菌株20株,ACC脱氨酶活性为0.326-21.980μmol/(h·mg)。将筛选到的功能菌株接种小白菜测试促生效应,其中47株使普通白菜(Brassica campestris)鲜重增加。16S r RNA测序鉴定显示筛选到的51株功能菌株系统发育地位上属于农杆菌、节杆菌、芽孢杆菌、伯克氏菌、鞘氨醇杆菌、屈挠杆菌、剑菌、肠杆菌、溶杆菌、微球菌、类芽孢杆菌、叶杆菌、假单胞菌、根瘤菌、中华根瘤菌、芽孢乳杆菌等16属31种。选取高效菌株7012、7134、7144和7164作为核心菌株制备了固氮多功能菌剂,应用于生荒地,试验地土壤微生物数量显著提高,土壤蔗糖酶、过氧化氢酶、脲酶、磷酸酶、纤维素酶、木聚糖酶活性极显著高于未施用菌剂的对照处理。多功能固氮菌制剂对于提高生荒地土壤生物活性、改善土壤生态环境具有重要作用和应用价值。     

激素和活性多肽

<正> 854119霉菌孢子转化甾类:Ⅲ.雅致小克银汉霉(Cunninhamella elegans)孢囊孢子在萌芽和营养生长不同时间的11-羟化酶活性[英]/Jaworshi,A.…//Appl.Micro-biol.Biotechnol.-1984,20(5).-313～317[译自DNA,1985,4(2),85-     

鱼腥藻(Anabaena 7120)DNA的转化作用

用化学方法从固氮蓝藻鱼腥藻(Anabaena 7120)细胞中有效地提取了DNA,以此为供体DNA,用它的氧敏感固氮突变种鱼腥藻一1(Anabaena-l)为受体进行转化实验。在大量的转化实验中,仅有两次获得转化后的突变种在空气中、在无氮培养基上能生长,其转化频率为10~(-6)—10~(-5)。转化子在有氧条件下的乙炔还原活力相当于野生种。它表明突变种的除氧系统通过转化而得到恢复。推测鱼腥藻7120突变种可能具有吸收和整合外源DNA的能力。对丝状蓝藻转化困难的原因进行了探讨,结果表明受体藻胞外DNA酶活力水平高于其他单细胞蓝藻,这可能是影响有效地转化作用的重要原因之一。     

基因工程

<正> 853411 枯草芽孢杆菌精氨酸基因以开始不稳定的杂合质粒形式被克隆到大肠杆菌后的转录分析[英]/Mann,N.H.…∥Mol.Gen.Genet.-1984,197(1).-75～81[译自 DBA,1984,3(25),84-11993]用鸟枪法在大肠杆菌中将枯草芽孢杆菌染色体 DNA 的 EcoR Ⅰ片段克隆到 pBR322     

生物固氮

922582 光合同氮菌深红红螺菌人工DNA介导的遗传转化[英]/Fitzmaurice,W.P.…∥Arch.Microbiol.-1991,156(2).-142～144[译自DBA,1992,10(25),91-14770] 用CaCl_2、CaCl_2-PEG6000和冻融法,以载体质粒pSa4转化深红红螺菌(Rhodospirillumrubrum)VR2(一种天然的链霉素抗性突变株)。DNA浓度低时,转化频率呈线性增加,较高浓度时则达到饱和。在用抗生素筛选前,用对数生长早期和静止生长早期的细胞,1～2分钟热激、37℃、200mM CaCl_2、表达5小时的转化最佳。     

Burkholderia pickettii中D-乙内酰脲酶基因(dha)的克隆、测序及表达

对一株能转化D,L-对羟基苯乙内酰脲为D-对羟基苯甘氨酸的菌株MMR003进行了细菌分类学鉴定,该菌为皮氏伯克霍尔德氏菌(Burkholderia pickettii)。实验通过Southern杂交,部分文库构建和筛选,并经一系列亚克隆测序分析,获得一长度为1374bp的完整开放阅读框,编码458个氨基酸的D-乙内酰脲酶基因。用该基因序列构建的高表达质粒pXZPH2转化E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导后,检测到D-乙内酰脲酶活性。该基因编码的氨基酸序列经Blast同源比较分析与放射形土壤杆菌NRRL B11291所产相应酶有85%的同源性。以D,L-对羟基苯乙内酰脲为底物测得的表达酶的活力为0.66u/mL,比相同条件下所测出发菌株MMR003的酶活提高了2倍。     

植物遗传工程

922617 香瓜转化及花椰菜花叶病毒35S启动子在转基因香瓜植物中的表达[英]/Dong,J.Z.…∥Bio/Technology.-1991,9(9).-858～863[译自DBA,1991,10(25),91-14786] 香瓜(Cucumis melo L.Cv.Orientsweet)繁殖过程是:(1)在加0.5mg/l BA的MS培养基上诱导丛生苗;(2)在加0.1mg/l BA和2 mg/l GA的MS培养基上使芽伸长;(3)在加0.1mg/lNAA的MS培养基上发根。总的再生率高于90%。此方法与根癌土壤杆菌介导转化结合使     

土壤杆菌固氮生理特性研究

对根癌土壤杆菌C58/pGV3850菌株的固氮生理特性研究结果表明,该菌具有自生固氮活性,其固氮活性的最适pH为8.0,温度为30℃.固氮活性在对数生长后期(14h)最高,延缓期和静止期乙炔还原活性较低.该菌株好氧,通过氧呼吸和吸氢酶的作用达到避氧固氮.当通入氧气超过呼吸耗氧时,对固氮活性产生抑制作用.在培养过程中增加NH_4~+浓度,固氮活性会降低,当达到15mmol/L时完全丧失固氮活性,表现NH_4~+阻遏固氮酶蛋白合成.在乙炔还原测定系统中加入NH_4~+并不影响乙炔还原反应,说明没有NH_4~+关闭现象.培养过程中加入MSX(2.5mg/ml)能解除10mmol/L NH_4~+对固氮酶合成的阻遏作用.固定的游离氮不能以NH_4~+形式分泌于胞外.固氮过程中放出大量氢气,培养16小时产氢量达65μmol H_2/mg蛋白.在限碳条件下(0.2%蔗糖)其吸氢酶活力可达520nmol H_2·ml~(-1)·h~(-1).     

固氮作用

<正> 853632 离体固氮根瘤菌中谷氨酰胺合成酶Ⅰ的腺苷酰化作用状态和铵输出之间的关系[英]/Evans,W.R.…∥Arch.Microbiol.-1984,138(1).-26～30[译自 DBA,1984,3(20),84-09679]     

一种简易的分离根癌土壤杆菌质粒的方法（简报）

土壤杆菌属的一些菌含有分子量达100兆道尔顿的大质粒。根癌土壤杆菌的Ti质粒是潜在的植物遗传工程载体。目前制备这类大质粒主要用Currier＆Nester[1]和van Larebeke ＆ Schell[2]的方法。一般认为土壤杆菌破壁困难,需用溶菌酶、蛋白酶。虽然Currier＆Nester[1]把DNA变性后以酚和氯仿-异戊醇清除了一些染色质,但残存染色质仍多。两法最后都靠密度梯度离心法获得纯质粒。这样,就限制了制备Ti质粒的规模。我们采用Hensen＆Olsen[3]4 ％SDS和热冲击方法破壁,在控制温菌量和破壁液比例的条件下,不用酶也能破壁。然后,用酚和氯仿-异戊醇抽提去蛋白;不经 DNA变性,用Zasloff等人的酸酚法去染色质DNA; 再用Humphreys等人的方法,以PGA6000沉淀浓缩质粒DNA.经琼脂糖电泳鉴定,得单一DNA带,无染色质扩散带。这就为大规模制备根癌土壤杆菌Ti质粒提供了可能。目前正在进一步工作。     

北京地区水稻根际联合固氮菌的分离鉴定及其固氮酶活性的研究

从北京地区16个水稻品种的根际分离筛选出两株固氮酶活性较高的菌株D-12和D-25。对这两个菌株进行了分类鉴定和固氮酶活性的测定。根据形态特征和理化特性的测定,菌株D-12属于肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae),菌株D-25类似于克雷伯氏菌但又有区别,因此暂放在胁杆菌科(Enterobacteriaceae)。两个菌株均在厌氧条件下固氮酶活性最高。在Hill's无氮蔗糖培养基中30℃条件下,其固氮酶活性的高峰出现在第16至第18小时。     

放射形土壤杆菌突变株发酵条件及其可溶性胞外多糖结构的研究

目的:提高放射形土壤杆菌X1166101突变株发酵生产可溶性胞外多糖的产量,并探明所产多糖的化学结构。方法:采用单因素分析的方法对X1166101株的发酵产多糖条件进行了优化,采用色谱分析与波谱分析相结合的方法对多糖的结构进行了初步研究。结果:放射形土壤杆菌X1166101株产糖的最佳发酵条件为温度30℃、pH7.0、转速200r/min、装液量100mL(500mL摇瓶)、接种量8%,多糖产量达24.2g/L。该多糖是由葡萄糖单体以β-1,6糖苷键连接而成的带有丙酮酸分枝的高聚物。结论:放射形土壤杆菌X1166101突变株所产多糖极有可能是一种新型的细菌胞外多糖,具有较好的研发价值。     

酶和发酵工程

<正> 854776 在 D-木糖中生长时各种酵母的木酮糖-5-磷酸盐-磷酸酮糖酶的诱导,木糖代谢的关键[英]/Evans,C.T.…//Arch.Microbiol.-1984,139(1).-48～52[译自 D-BA,1985,4(1),85-00045]测定了25种酵母,包括假丝酵母、汉逊     

腐婢根化学成分研究

从马鞭草科腐婢属植物腐婢(Premna microphylla)的根中分离鉴定出7种化合物,其结构分别为β-谷甾醇(1).棕榈酸(2).反式-对甲氧基肉桂酸(3).丁香色酮(4).木犀草素(5).木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖甙(6)和胡麻素(7).这些成分均为首次从腐婢根中分离得到.     

农杆菌介导的携带egfp基因载体转化寡雄腐霉

【目的】寡雄腐霉(Pythium oligandrum Drechsler)是一种对动、植物和环境无害,兼具杀菌和增产效果的生防真菌。通过研究建立农杆菌介导的寡雄腐霉遗传转化体系。【方法】选用EHA105、AGL-1、LBA4404三种农杆菌菌株对寡雄腐霉进行遗传转化研究,通过对影响遗传转化效果的条件参数试验优化,确立适宜寡雄腐霉遗传转化的农杆菌菌株及转化条件,建立农杆菌介导的寡雄腐霉遗传转化体系。【结果】经研究发现,所选3种农杆菌菌株中EHA105菌株对寡雄腐霉的遗传转化效果最好,其次是AGL-1菌株,LBA4404菌株转化效果不好。EHA105菌株经IM(含300μmol/L AS)诱导培养至OD_(600)=0.6时,与浓度为10~6–10~7个/m L的寡雄腐霉孢子悬浮液以1–10:1的比例混合,在25–26°C以液体振荡的方式避光共培养72 h(pH 5.0,含300μmol/L AS),寡雄腐霉菌体液体振荡恢复培养24 h,涂布抗性选择平板筛选寡雄腐霉转化子,即可得到寡雄腐霉基因工程菌株,其转化率可达到130个转化子/106个孢子。【结论】本研究首次构建了农杆菌介导的寡雄腐霉遗传转化体系,研究结果可为寡雄腐霉的生防机制及分子育种研究提供技术支撑。     

体外培养和遗传育种

<正> 854455 用发根农杆菌(Agrobacterium rh-izogenes)转化几种高等植物[英]/Tepfer,D.//Cell.-1984,37(3).-959～967[译自DBA,1984,3(25),84-12254]胡萝卜片、田旋花(Convolvulus arve-     

攀西高原不同轮作制度下土壤固氮微生物nifH基因多样性与群落结构特征

[背景]关于高原生境轮作制度对土壤固氮微生物群落组成及多样性的影响研究尚少。[目的]深入认识攀西高原不同轮作制度对农田土壤肥力及土壤固氮微生物nifH基因群落结构与多样性的影响,以期建立合理的轮作制度。[方法]以凉山州冕宁县不同作物轮作制度[包括光叶紫花苕-烤烟(分轮作15年和20年两种,分别为G1和G2)、苦荞-烤烟(KQ)、大麦-烤烟(DM)和撂荒(CK)]的土壤为研究对象,通过化学分析和Illumina MiSeq技术,对土壤理化性质、土壤固氮微生物nifH基因多样性及群落组成进行分析。[结果]撂荒土壤全氮、铵态氮、硝态氮、有机碳和含水量最显著(P<0.05)。KQ轮作下土壤有效磷和速效钾分别提高了43.0%和2.60%,而DM轮作下的土壤理化性质均下降。土壤固氮酶活以撂荒土壤最高,G2轮作最低。土壤固氮微生物nifH基因多样性以G1轮作最高、G2轮作最低,门水平上以变形菌门(Proteobacteria)是优势共有nifH基因类群,相对丰度占群落的63.0%-92.4%;属水平上,偶氮氢单胞菌属(Azohydromonas)是不同轮作制度下的优势物种,慢生根瘤属(Brad...