产苯乙醇胺醇脱氢酶菌种筛选与发酵条件研究

A Arachnia sp.P163 producing alcohol dehydrogenase which is able to reduce aminoacetophenone to R\|1\|phenyl\|2\|aminoethanol was obtained from soil and cultures.The maximum activity of enzyme was produced by the LB medium containing 1% sodium citrate and peptone,0 1% phenylaminoethanol as inducer at 30℃ for 48 hs.     

产胞外邻苯二酚1.2—双加氧酶的菌种筛选和发酵条件的研究

Two strains of Pseudomonus sp. having the extracellular catechol 1, 2-dioxygenase activity were selected from 112 bacterial strains. The conditions for enzyme production of the strains were examined. The optimal temperature and pH for enzyme formation were 30 degrees C and pH 6.8-7.0 respectively. Enzyme formation was enhanced by sodium benzoate, and was markedly inhibited by glucose, maltose and glycerol. Ammoniacal nitrogen sources were essential for cell growth and enzyme production. Sodium succinate was an effective inducer for enzyme formation. When the organism was grown in 0.15% sodium benzoate medium (pH 6.8-7.0) at 30 degrees C for 72 hours, about 10 units of catechol 1,2 dioxygenase per ml was obtained.     

产L—肉碱的菌种筛选及发酵条件优化

将D,L-肉碱(carnitine,β-羟基-γ-三甲胺丁酸)用浓硫酸脱水获得反-巴豆甜菜碱(trans-crotonobetaine),从本室保藏的菌株中筛选出1株能将反-巴豆甜菜碱非对称合成L-肉碱的菌株E.coliK74.利用它的休止细胞立体选择性地水合反-巴豆甜菜碱产生L-肉碱,起催化作用的酶是L-肉碱脱水酶,是一种可诱导的胞内酶,当培养基中加入反-巴豆甜菜碱并在部分厌氧条件下可诱导产生.如培养基中含有葡萄糖、硝酸盐或氧时,酶的合成受到抑制,在磷酸缓冲液中,E.coliK74休止细胞的最适反应条件是pH为7.8,温度为37～42℃.     

产弹性蛋白酶菌种的筛选及发酵条件优化研究

从合肥肉联厂附近的土壤和污水中分离得到19株产弹性蛋白酶菌株,初步鉴定该菌株属于假单胞菌属.经过发酵复筛有三株产酶能力超过15u/mL.实验对菌株最佳产酶发酵条件进行了优化2%干酪素、0.5%葡萄糖、0.4%酵母膏、0.2% K2HPO4、0.01% MgSO4·7H2O;起始pH值7.0;最适发酵温度为30℃;装液量为25mL/250mL;该菌株在28h左右产弹性蛋白酶的量达18u/mL.     

利用完整细胞不对称合成R-苯乙醇胺的研究

Effects of various factors on asymmetric synthesis of R-phenylaminoethanol from aminoacetophenone by the whole cells of Arachnia sp. P163 producing alcohol dehydrogenase for phenylethanol amine was investigated. It found that, although the reduction was inhibited by the substrate and the product, but it has the very high stereoselectivity. The reduction was normaly carried out with 2% glucose for reproduction of coenzyme in the reaction system without oxygen. The conversion yield and ee value of the product achieved 65% and 100%, respectively.     

产海因酶的菌种筛选和产酶条件的研究

利用5-苄海因作为唯一氮源法筛选高产海因酶的菌种,从本实验室保存的221株菌种中筛选出12株具有不对称水解5-苄海因生成N-氨甲酰基-苯丙氨酸的菌株,其中假单胞菌（Pseudomonassp.)X4-49具有较高的产酶活力,对此菌的产酶条件的研究表明,产酶的最佳碳源为甘油,最佳氮源为蛋白胨,最佳诱导物为苄海因,尿嘧啶,苄海因作为诱导物的有效浓度为0.2%,产酶的最适培养基的初始pH为7.0。培养条件为33℃,13h。     

二十碳五烯酸的菌种选育及发酵条件

利用含亚麻子油的斜面培养基连续传工和逐渐降低培养温度,诱导筛选的方法,从大量丝状真菌中选育到一株产二十碳五烯酸（ａｌｌ－ｃｉｓ－５、８、１１、１４、１７－ｅｉｃｏｓａｐｅｎｔａｅｎｏｉｃ ａｃｉｄ）较高的被孢霉菌（Ｍｏｔｉｅｒｅｌｌａ ｓｐ．）ＳＭ４８１。研究得到最适培养基及最适培养条件。在最适培养及产二十碳五烯酸条件下,细胞干重和二十碳五烯酸产量分别为２８．８ｇ／Ｌ和０．１２７ｇ／Ｌ。     

产酯酶微生物菌种的筛选研究

研究了产酯酶微生物的筛选,包括筛选模型、酶活力检测方法及菌株的分布。对30多份土样以及实验室保存的菌种进行了大量的筛选,以添加三醋酸甘油酯、乳酸乙酯酯类物质对土样等样品富集,采用添加显色剂溴甲酚紫的快速简便平板显色法,观察水解变色圈直径和菌落直径的大小进行初筛。获得两者直径之比相对大的菌株174株,采用平板打孔检测法和摇瓶发酵比色法测酶活力相结合进行复筛,最终得到酯酶活力较高的24株菌株。就初筛和复筛方法及结果加以比较分析,复筛菌株做不同底物的酶活力检测,建立了一个有效、简便及快速的微生物酯酶的筛选模型。并对酯酶产生菌的立体选择专一性进行了初步考察。     

谷氨酰胺转胺酶发酵条件的优化研究

通过优化种子培养条件和发酵培养基组分使谷氨酰胺转胺酵产酶水平有了很大的提高,确定种龄为20－24h,接种量8％左右。发酵培养基含淀粉15g/L、葡萄糖15g/L、蛋白胨25g/L、酵母膏3g/L、无水硫酸镁2g/L、磷酸氢二2g/L,无水磷酸二氢钾2g/L,24－28h添加质量浓度为0．5％的硫酸铵,在10L发酵罐实验中,验证了溶解氧对MTG合成至关重要,确定较适宜通气量1：1．25vvm,搅拌转速300mr/min,最高产酶单位最终稳定在3．2u/mL,放罐时间在44－46h左右较适宜。     

弹性蛋白酶生产菌种的筛选及发酵条件的研究

通过科学的采样、初筛、复筛等合理的试验设计和大量研究工作,筛选到1株弹性蛋白酶高产菌株EL112,该菌株鉴定为Bacillus pseudofirmus。试验采用正交试验得出产弹性蛋白酶菌株的的最佳发酵条件：温度37℃,pH7．5,转速150r／min。     

极端微生物产碱性蛋白酶菌株的筛选及发酵条件研究

从深海的38份水样和泥样中筛选到一株产蛋白酶的菌株DY－A,其最适生长温度为10℃,能适应较大范围的pH值和盐度,此菌株只在酵母膏存在的情况下产酶,不利用单一氮源,最适产酶条件为,pH10.0,10℃,接种量0．5％,200r/min摇床培养40－72h,粗酶液的最适作用温度为40℃,最适pH值为10,在pH9-12内稳定,是一碱性蛋白酶。     

海藻糖产生菌的筛选及其发酵条件研究

通过液体发酵筛选,从土壤中分离的241株菌株及保藏的95株菌株中得到15株海藻糖生产菌,对这些菌株进一步筛选得到产海藻糖最多的一株菌Bacillus sp。其发酵最适合条件为：以麦芽糖为碳源,发酵初始pH值7.0,接种量为6%,30℃条件下培养48h,另外该菌株在分别以葡萄糖和蔗糖为碳源的培养基中都能产生海藻糖。     

产碱性木聚糖酶芽孢杆菌HSⅠ的筛选及发酵条件研究

通过碱性培养基分离到耐碱的芽孢杆菌HSⅠ,研究了碳源,氮源,培养温度,培养基起始pH,培养时间,接种量,通气量,添加物对HSⅠ菌产木聚糖酶的影响。测定出其产酶最佳培养条件;麸皮6%,（NH4）2SO40。2%,NaNO30.4%。蛋白胨0.6%,起始pH为10.5,接种量为5%,250mL三角瓶装液量为50mL。最佳培养温度为37℃,培养时间为96h,其酶活力最高达54IU/mL。     

1株阿魏酸酯酶产生菌的筛选鉴定及发酵条件优化

从浙江绍兴鉴湖附近土样中分离筛选到1株产阿魏酸酯酶(ferulic acid esterase,FAE)的菌株FD-8,通过菌落形态、分生孢子梗形态对比和ITS/18S rDNA分子生物学同源性分析,鉴定该菌株为溜曲霉,命名为Aspergillus tamarii FD-8。FD-8生长最适碳源和氮源分别为蔗糖和酵母浸提物,最适生长温度和pH分别为32℃和5.0,最适产酶条件为32℃、pH 6.0,发酵周期为120 h。在最适培养基中、分阶段控制pH培养条件下,FAE比酶活达到231.34 mU/mg。去淀粉麸皮可诱导FAE的合成,在发酵48 h添加20.0 g/L去淀粉麸皮,FAE最高比酶活可达到573.61 mU/mg,比对照提高1.48倍。     

微生物絮凝剂的菌种分离筛选及其产生条件的选择

本研究采用根瘤菌选择性培养基和稀释平板法,从广西大学校园罗汉松和相思树植物根瘤中总共分离出20株菌落光滑型菌株,并分别对其发酵物作絮凝试验.研究结果表明,从罗汉松根瘤中筛选出一株絮凝率较高的菌株,暂编号为P2.对P2进行形态学观察结果表明:其菌落圆形、凸起、光滑、无色透明,其细胞杆状、菌体大小为0.5×(1～2)μm,该类细菌为革兰氏阴性细菌、有糖被、无芽孢,周生鞭毛;测序分析表明其16S rDNA序列与Rhizobium sp.DV8 16S rDNA(DQ873665.1)同源性达98%以上;生长和产絮凝剂最佳条件如下:配方为甘露醇10%,K_2HPO_4 0.3%,酵母膏0.03%,NaCl 0.5%,(NH_4)_2SO_4 0.01%,脲0.03%液体培养基中,30℃,起始pH为7.0,转速为200 r/min条件下培养发酵72 h,产生的絮凝剂可使浓度为5 000 mg/L高岭土悬浮液在20 min内絮凝率最高为92%.     

发酵白酒糟生产饲料蛋白的优良菌种的筛选

采用常规方法从1000多株菌(包括丝状真菌、酵母菌、链霉菌、细菌)中筛选到一批优良菌种,并进行了单菌发酵、多菌株组合发酵,不同原料配方发酵试验。在实验室条件下,发酵产物的粗蛋白含量高达35.9％,比原料本身的粗蛋白含量高50％以上,比所用培养基的粗蛋白含量高30％,发酵产物的粗纤维含量降低率为15％;粗脂肪含量为5.5％左右;产率达80％以上。结果证明,筛选到的菌株确是发酵白酒糟生产饲料蛋白的优良菌种。     

己酸菌的分离筛选及发酵条件的研究

己酸菌所生成的己酸是生产浓香型白酒主体香气己酸乙酯的主要成分,将其应用于白酒的生产,可提高白酒的香气和质量．从我省富裕酒厂的窖泥中分离到一株高产己酸的菌株,通过发酵条件的研究,该菌株己酸最高产量可达540mg／100ml。     

磷酸甘油氧化酶的菌种选育及发酵条件

利用含甘油的斜面培养基连续传代、诱导筛选的方法,从大量链球菌中选育到一株产磷酸甘油氧化酶(L-α-Glycerophosphate Oxidase EC 1.1.3.21)活性较高的粪链球菌(Streptococcus faecalis) GPO 605。培养及产酶最佳条件表明,最适培养基组成(％):酪蛋白胨1,酵母提取物1.5,甘油0.2,葡萄糖0.1,K_2HPO_40.5,无机盐0.25ml,pH7.5。最适培养条件:250ml三角瓶中装100ml培养基,30℃,200r/min旋转摇床振荡培养8h。在最适培养及产酶条件下,每毫升发酵液的酶活力提高10倍以上。