枸杞过氧化物酶的提取工艺优化及其酶学特性研究CSCD

枸杞为常用“药食同源”中药材,在加工、贮藏、运输等过程中易发生褐变,严重影响枸杞的外观和质量。前期研究发现枸杞中具有较高的过氧化物酶(peroxidase, POD)活性,而过氧化物酶在植物的酶促褐变中发挥着重要作用。为更好地控制枸杞酶促褐变的发生,本研究采用响应面法对枸杞过氧化物酶提取工艺进行优化,对枸杞过氧化物酶的性质进行了研究。结果显示枸杞过氧化物酶最佳提取工艺为料液比1∶3,浸提时间5 h,缓冲液pH为6.0,枸杞过氧化物酶活力为(5 148.59±50.00)U,与模型预测值接近,拟合性好,表明所得响应面模型可以很好地预测和分析枸杞过氧化物酶提取工艺条件。枸杞过氧化物酶最适温度为50℃,最适pH为6.0,金属离子Na~+、Ca~(2+)、K~+、Zn~(2+)、Cu~(2+)和柠檬酸对枸杞过氧化物酶起激活作用,抗坏血酸和亚硫酸能抑制枸杞过氧化物酶活性;该酶酶促反应动力学符合米氏方程,过氧化氢浓度一定时,酶对愈创木酚的K_m=21.52 mmol/L,V_(max)=115.47 U/mL;愈创木酚浓度一定时,酶对H_(2)O_(2)的K_m=1.41 mmol/L,V_(max)=148.81 U/mL。本研究可为后续枸杞加工过程中褐变的控制提供参考。     

江西蒌蒿的生物学特性与栽培技术

本文研究了江西蒌蒿的生物学特性与繁殖方法，为人工栽培蒌蒿提供依据。     

荔枝果皮过氧化物酶的纯化及部分酶学性质研究

经硫酸铵分级盐析、DEAE-Sepharose和Sephadex G-75柱层析分离,从荔枝果皮中分离提纯了过氧化物酶(POD),该酶被纯化了12．5倍,产率为1．9％。经SDS-PAGE确定为单一条带。该酶最适反应温度为35℃,对热具有较强的稳定性,经75℃处理30min,酶活性只损失50％。最适pH约为6．5,但在pH4．0—8．0范围内活力仍比较稳定。该酶在25℃和0．05mol／L磷酸缓冲液(pH7．0)条件下对愈创木酚、邻苯二酚和没食子酸的Km分别是2．75、12．4和12．8mmol／L。二硫苏糖醇和抗坏血酸能完全抑制POD活性,L-半胱氨酸、柠檬酸、FeS04、GSH、SDS和ZnS04对POD活性有一定的抑制作用,而FeCl,和CuSOt对POD则有较好的激活作用。     

菖蒲过氧化物酶测定条件的研究

过氧化物酶是植物在低温等逆境条件下酶促防御系统的关键酶之一,其活性可以作为植物抗寒性的一个指标。以菖蒲为材料比较了反应体系、H2O2浓度、pH值及反应时间对过氧化物酶活性测定的影响。结果表明:过氧化物活性测定的较佳反应体系是3 mL;最佳H2O2浓度为0.1%;最佳磷酸缓冲液pH值为6.0;最佳反应时间为4min。该研究结果为人工湿地污水处理系统冬季植物的筛选与评价研究提供参考,对植物生理实验教学和相关科学研究有一定的参考价值。     

硬脂酸修饰辣根过氧化物酶的制备及其主要特性研究

一种修饰ＨＲＰ的方法。用硬脂酸修饰的ＨＲＰ对温度、ｐＨ、蛋白质变性剂及蛋白酶水解的稳定性比天然的ＨＲＰ有不同程度的增强     

芒果过氧化物酶活性的研究

从新鲜芒果中提取酶液,进行过氧化物酶活性的测定,结果表明：芒果酶提取液中过氧化物酶最适ＰＨ值为４．７５,米氏常数Ｋｍ值为３．２３×１０＾－３ｍｍｏｌＨ２Ｏ２／ｍＬ最大反应速度Ｖｍａｘ＝０．２４４Ｏ．Ｄ／ｍｉｎ。在７５℃下加热处理２０ｍｉｎ或８０℃下处理５ｍｉｎ,可使过氧化物酶完全失活。     

过氧化物酶和PeroxiBase过氧化物酶数据库

过氧化物酶是存在于生物体中的一大类以过氧化物为电子受体催化底物氧化的酶,在生物体的生命活动中发挥着重要作用.过氧化物酶由多态性丰富的多基因家族所编码,其结构和功能具有多样性.近年来,随着研究和应用的深入,过氧化物酶领域迫切需要建立一个专业的信息交流平台.PeroxiBase数据库收集了大量的过氧化物酶数据,并进行生物信息学加工,为生命科学研究人员免费共享、最大化利用与综合开发过氧化物酶资源搭建了信息平台,在过氧化物酶的研究与应用中发挥着重要作用.     

辣根过氧化物酶模拟酶研究进展

辣根过氧化物酶 (HRP)是一种常用的工具酶 ,对其模拟酶的研究是近年来生物化学和有机化学的重要课题 ,具有重要的理论意义和应用价值。本文评述了近十年来HRP模拟酶的研究进展。     

芦蒿不同浸提物化感活性的比较研究

采用水、甲醇、乙醇、丙酮和乙酸乙酯等不同溶剂对整株芦蒿进行浸提,并用生菜和紫花苜蓿作为受试植物,对不同浸提物进行了化感活性的比较研究。5种不同溶剂的芦蒿浸提物对种子的萌发率和幼苗生长均表现出化感潜势,与对照组相比,0.005 g/mL的芦蒿甲醇提取物对生菜和紫花苜蓿种子的萌发具有轻微的促进作用,当浓度达到0.04 g/mL以上时,对生菜和紫花苜蓿种子的萌发和幼苗生长均具有不同程度的抑制作用（p〈0.05）。不同浓度的提取液对植物的化感作用强度不同,对种子萌发率、根长、芽长均有不同程度的影响。根据比较,甲醇溶剂提取物的化感活性最强,其是深入研究芦蒿化感物质有效的提取剂。     

鄱阳湖野生藜蒿的化学成分研究

对鄱阳湖新鲜野生藜蒿的化学成分进行了研究。采用有机溶剂提取、萃取和柱层析等方法进行提取分离和纯化,根据化合物的理化性质和波谱学特征鉴定化合物的化学结构,分离并鉴定了5个化合物：（-谷甾醇（（-sitosterol,Ⅰ）、5-羟基-7,4’-二甲氧基二氢黄酮（5-hydroxy-7,4’dimethoxyflavanone,Ⅱ）、5,4’-二羟基-7-甲氧基二氢黄酮（5,4’-dihydroxy-7-methoxyflavanone,Ⅲ）、5,3：4’-三羟基-7-甲氧基黄酮（5,3：4’-trihy-dmxy-7-methoxyflavone,Ⅳ）、胡萝卜苷（daucosterol,Ⅴ）。     

藜蒿总黄酮提取工艺研究

本文采用单因素实验和正交实验设计,对藜蒿总黄酮的乙醇提取工艺和水提工艺分别进行了系统考察。结果发现,以总黄酮得率作为考察指标,藜蒿总黄酮的乙醇最佳提取工艺条件为：70℃用20倍量45％乙醇提取2次,每次1．75h。藜蒿总黄酮的最佳水提工艺条件为：95℃用25倍量的水提取2次,每次1．5h。醇提法0．412％的得率比水提法得率0．372％略高。     

芦蒿花总黄酮提取工艺的研究

采用正交试验,以芦蒿总黄酮得率为考察指标,对影响芦蒿总黄酮提取工艺的因素进行了探讨和研究,得出了芦蒿花总黄酮提取过程的优化条件。     

微波辅助法从黎蒿中提取黄酮类化合物的研究

本文介绍了一种有效利用微波辅助从藜蒿(Artemisia selengnesisTurcz)中提取黄酮类化合物的方法。通过考察了微波辐射时间、功率、料液比及提取溶剂等因素对提取率的影响,得出的结论为:以75%乙醇做提取溶剂,密封条件下,功率200 W,料液比1 g∶25 mL,辐射时间20 s/次×3次,提取率最高。与传统提取方法相比,该方法不仅工艺简单,而且可以提高产率,缩短提取时间。     

鲜切芦蒿贮藏过程中叶绿素、纤维素及相关酶的变化

芦蒿去除不可食部分、冰水清洗、切分后于 0℃下贮藏。贮藏期间定期测定芦蒿的叶绿素、纤维素含量及其相关酶的活性。结果表明 :鲜切芦蒿贮藏过程中 ,叶绿素含量贮藏后期略有下降 ( <15 % ) ;叶绿素酶活性呈稳定增加趋势。鲜切芦蒿贮藏期间纤维素含量逐步增加 ,贮藏至第 15天比入贮时增加了 37.7% ;纤维素酶则持续下降 ,贮藏结束时活性仅为入贮时的 1/ 14。     

蒌蒿多酚氧化酶的活性及其影响因素的研究

蒌蒿Artemisia selengensis Turcz.菊科蒿属,别名芦蒿、藜蒿,狭叶艾水蒿等为风味野菜,在南京有"早春第一时鲜"的美誉.蒌蒿在保藏过程中,在多酚氧化酶和O2的参与下将酚类化合物氧化成醌,醌再聚合成有色物质,使其切口氧化褐变,本实验主要对多酚氧化酶活性进行研究,以便为蒌蒿的保鲜提供参考.     

青蒿过氧化物酶的克隆及其在体外对青蒿素生物合成的影响

用RACE方法从青蒿(Artemisia annua L.)高产株系001中克隆了一个过氧化物酶。将此基因在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS细胞中进行原核表达得到重组蛋白(APOD1),表达的蛋白分别以抗坏血酸、愈创木酚为底物进行过氧化反应,结果显示,APOD1催化愈创木酚的活力是抗坏血酸的1.8倍左右,由此表明,克隆的APOD1类属于植物经典过氧化物酶(第三大类过氧化物酶)。经与其他植物过氧化物酶同源性比较分析,推测APOD1的氨基酸序列与白羽扇豆(Lupinus albus)、辣根菜(Armoracia rusticana)、小麦(Triticum aestivum)、烟草(Nicotiana tabacum)和蕃茄(Lycopersicon esculentum)的一致性分别为42.0％、36.2％、38.9％、33.6％和32.8％。Northern杂交分析表明,此基因在青蒿的根、茎和叶中均有表达。加入APOD1至青蒿细胞提取液有利于青蒿酸向青蒿素的生物转化,但APOD1并不能直接以青蒿酸作为氧化底物。     

青蒿过氧化物酶的克隆及其在体外对青蒿素生物合成的影响

用RACE方法从青蒿(Artemisia annua L.)高产株系001中克隆了一个过氧化物酶.将此基因在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS细胞中进行原核表达得到重组蛋白(APOD1),表达的蛋白分别以抗坏血酸、愈创木酚为底物进行过氧化反应,结果显示,APOD1催化愈创木酚的活力是抗坏血酸的1.8倍左右,由此表明,克隆的APOD1类属于植物经典过氧化物酶(第三大类过氧化物酶).经与其他植物过氧化物酶同源性比较分析,推测APOD1的氨基酸序列与白羽扇豆(Lupinus albus)、辣根菜(Armoracia rusticana)、小麦(Triticum aestivum)、烟草(Nicotiana tabacum)和蕃茄(Lycopersicon esculentum)的一致性分别为42.0%、36.2%、38.9%、33.6%和32.8%.Northern杂交分析表明,此基因在青蒿的根、茎和叶中均有表达.加入APOD1至青蒿细胞提取液有利于青蒿酸向青蒿素的生物转化,但APOD1并不能直接以青蒿酸作为氧化底物.     

藜蒿提取物抑菌作用的初步研究

采用榨汁、水提、醇提等 3种不同的方法 ,提取藜蒿中的抗菌有效成分。测定了各种提取物对 14种食品腐败菌的最低抑菌浓度 ( MIC) ,结果表明 :1.藜蒿汁的 MIC:痢疾杆菌为 2 5% ,大肠杆菌为 2 5% ,巨大芽孢杆菌为 50 % ,面包酵母为 5% ;2 .藜蒿水提物的 MIC:痢疾杆菌为 2 .5% ,大肠杆菌为 5% ,巨大芽孢杆菌为 5% ,面包酵母为 10 % ;3.黎蒿醇提物的 MIC:痢疾杆菌、巨大芽孢杆菌、大肠杆菌均为 5% ,蜡状芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、面包酵母、黄曲霉均为 10 % ,产朊酵母、裂殖酵母、异常汉逊酵母、白地霉、桔青霉、镰刀霉均为 2 0 %