高压脉冲电场辅助酶法提取鹿托盘胶原蛋白

为了提高鹿托盘中胶原蛋白的提取率,采用高压脉冲电场技术辅助胃蛋白酶的方法提取胶原蛋白。以胶原蛋白提取率为指标,通过对胃蛋白酶添加量、脉冲数和电场强度进行单因素考察,采用正交实验对胶原蛋白提取条件进行优化。优选出鹿托盘胶原蛋白的最佳提取条件为:胃蛋白酶添加量2%、脉冲数8、电场强度20k V.cm-1,在该条件下鹿托盘胶原蛋白的提取率可达到(73.27±0.73)%。与普通酶法相比,高压脉冲电场辅助提取胶原蛋白的得率比普通酶法提高了10.34%,且处理时间较短。聚丙烯酰氨凝胶电泳结果表明所提取的胶原蛋白由α1、α2和β-亚基组成,结构特征表明胶原蛋白具有完整的螺旋结构和Ⅰ型胶原蛋白的特性。该研究可为高压脉冲电场用于胶原蛋白的提取提供理论参考。     

高压脉冲电场法快速提取北五味子中五味子醇甲的工艺研究

本文采用正交实验优化提取方法,HPLC法测定五味子醇甲含量,对五味子的快速提取工艺方法进行了研究。结果表明:以80%乙醇作为提取液,电场强度10 kv/cm,脉冲数为10,料液比1∶10为最佳提取工艺;影响因素的大小依次为:电场强度、料液比、脉冲数。此法提取五味子中的五味子醇甲,提取率可达0.76%,得膏率达27.886%。本提取工艺可行,经济、省时、回收率高。     

高压脉冲电场法提取干松针总黄酮及其体外抗氧化性检测

主要研究了高压脉冲电场法提取干松针总黄酮的工艺条件,并对松针总黄酮体外抗氧化性能进行初步分析.结果表明,最优的高压脉冲电场提取条件为:电场强度20 kV/cm,脉冲数8个,料液比1:50.松针总黄酮提取率的影响因素:料液比＞电场强度＞脉冲数.松针落叶中总黄酮物质对自由基清除能力随浓度的增加而升高,松针总黄酮对Fe~(3+)的还原能力比抗坏血酸强.     

重组胶原蛋白的产业发展历程和生物医学应用前景展望北大核心CSCD

重组胶原蛋白作为天然动物组织胶原的替代物具有广泛应用于生物材料、生物医学等领域的潜力。种类繁多的重组胶原蛋白类型及其衍生体在多种表达系统中可实现一定规模的产业化生产,为探索和拓展重组胶原蛋白的临床应用奠定了基础。文中简述了重组胶原蛋白的不同表达体系,如大肠杆菌、酵母、植物、昆虫、哺乳动物和人类细胞表达体系,重组胶原蛋白的优势及潜在的应用和局限。着重介绍了目前重组胶原蛋白生产,包括不同表达体系的构建策略和重组胶原蛋白羟基化修饰等方面的研究进展,总结了重组胶原蛋白在生物医药领域的应用及应用基础研究和应用前景展望。     

高乌头活性成分提取工艺的优化北大核心CSCD

为开发并优化高乌头(Aconitum sinomontanum)中有效成分高乌甲素及冉乌头碱的提取工艺,采用高效液相色谱法测定高乌甲素及冉乌头碱含量,以二者综合提取率为考察指标,采用正交实验设计优选最佳提取工艺。结果表明,优选工艺为药材粉末加10倍量的80%甲醇及2%药材量的浓盐酸,在75°C下回流提取6小时。经验证,优选所得的工艺稳定可行,可作为高乌头活性成分提取的新工艺。     

牛蛙皮胶原蛋白酸提取条件优化及其对细胞生长和粘附性的影响

应用羟脯氨酸法测定了牛蛙皮胶原蛋白含量,通过正交实验对牛蛙皮胶原蛋白酸法提取条件进行了优化,并结合MTT法测定了胶原蛋白对细胞生长和粘附性的影响。结果显示,牛蛙皮胶原蛋白的含量约为45．1％;温度条件对提取率影响最大,其次依次为酸种、时间和浓度,最优组合为乙酸、1．5mol／L、37℃、24h;在低浓度时,牛蛙皮胶原蛋白对正常人类肝细胞的生长和粘附性无显著影响,当浓度升高到一定值时,对细胞生长和粘附性有显著促进作用。     

HIF-1调控低氧性肺动脉高压北大核心CSCD

低氧性肺动脉高压(hypoxia-induced pulmonary hypertension,HPH)是多种慢性病高原病发病的中心环节,严重影响疾病的病程和预后。其主要特点是低氧刺激下诱发过度的肺血管收缩反应和异常的肺血管结构重塑,导致慢性肺源性心脏病的发生。低氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)被认为是低氧环境下感受氧变化的重要转录调控因子,可调控多种低氧相关靶基因表达,影响肺血管重塑过程。本文就低氧下HIF-1在低氧性肺动脉高压形成中的研究进展做一综述。     

超声波辅助大米草总黄酮提取及抗氧化活性研究北大核心CSCD

应用超声波技术,以大米草为原料提取黄酮类化合物,设计正交实验,研究乙醇浓度、料液比、超声处理温度和提取时间对总黄酮提取效果的影响,分析得出最佳提取工艺条件。并测定大米草黄酮体外抗氧化活性。结果表明:大米草总黄酮提取的最佳工艺条件为:乙醇浓度80%,提取时间20 min,料液比1∶30(g·mL-1),提取温度45℃。影响大米草黄酮提取率的主次因素是:料液比>乙醇浓度>提取温度>提取时间。大米草黄酮总抗氧化活性和抗超氧阴离子活力随着浓度的增加逐渐增加,呈明显的量效关系,并且能有效清除氧化脂质(MDA)。     

乌梅等三味具有抑菌活性中药的最佳提取工艺研究北大核心CSCD

优选乌梅等三味具有抗胸膜肺炎放线杆菌活性中药的有效物质提取工艺。以浸膏得率、最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)为指标,采用正交设计实验,综合考虑溶剂浓度、料液比、提取次数、提取时间、提取温度等影响因素,对三味中药有效物质提取工艺进行优选研究。优选出的最佳提取工艺为:黄连粗粉70%乙醇浓度(8倍量),加热回流提取2次,每次2 h;乌梅粗粉95%乙醇浓度(10倍量),90℃加热回流提取1次,每次8 h;虎杖粗粉60%乙醇浓度(6倍量),90℃加热回流提取3次,每次2 h。最佳提取工艺下,黄连、乌梅和虎杖三种提取物浸膏对胸膜肺炎放线杆菌的MIC值分别为15.60、10.40、15.60 mg/m L,MBC值分别为26.00、18.20、15.60 mg/m L。     

多囊蛋白2对低频脉冲电磁场促进成骨细胞分化成熟的影响北大核心CSCD

已知低频脉冲电磁场(pulsed electromagnetic fields,PEMFs)可以促进体外培养大鼠颅骨成骨细胞(rat calvarial osteoblasts,ROBs)的分化成熟,但ROBs感知PEMFs物理信号并启动成骨性分化的机制至今不明。本研究探究了0.6 mT 50 Hz PEMFs促进ROBs成骨性分化与位于ROBs表面的初级纤毛上的多囊蛋白2(polycystin2,PC2)的关系。首先用免疫荧光染色法研究了PC2是否位于ROBs初级纤毛内,然后通过Western blotting检测了经PEMFs处理不同时间后,ROBs内PC2蛋白表达的变化情况。接着用PC2阻断剂盐酸阿米洛利(amiloride HCl,AMI)预处理ROBs,检测碱性磷酸酶(alkline phosphatase,ALP)活性和PC2蛋白表达受PEMFs处理的影响情况,以及与骨形成相关的Runx-2、Bmp-2、Col-1、Osx的蛋白及基因表达的变化情况。再用RNA干扰法抑制ROBs内PC2的表达后,检测与骨形成相关基因表达情况。结果发现,PC2被定位于ROBs初级纤毛上,PEMFs处理增加了PC2蛋白表达量。PC2被AMI阻断后,PEMFs不再能提高PC2蛋白表达水平及ALP活性,PEMFs对成骨相关蛋白和基因表达的促进作用也被抵消。使用RNA干扰法抑制PC2的表达后,PEMFs也不再能提高骨形成相关基因的表达。结果表明:存在于成骨细胞初级纤毛表面的PC2在感知并传递PEMFs发出的物理信号中扮演着不可或缺的角色,PEMFs促进ROBs成骨性分化依赖于PC2的存在。本研究为阐明低频脉冲电磁场促进骨形成及治疗骨质疏松的机制研究奠定了基础。     

响应面优化野生樱桃李叶总黄酮的超声辅助提取工艺北大核心CSCD

以具有地域特色的野生樱桃李叶为实验材料,在单因素试验基础上,以乙醇体积分数、提取温度、料液比为自变量,总黄酮提取量为响应值,利用响应面法优化野生樱桃李叶总黄酮的超声辅助提取最佳条件为乙醇体积分数51%、提取温度72℃、料液比1∶45 g/m L,在300 W功率下超声提取30 min,提取次数2次,总黄酮提取量为38.27 mg/g,达到预测值的98.3%。超声辅助提取较传统索氏提取操作简单,耗时少,提取效率高,是野生樱桃李叶总黄酮提取的一种有效方法。     

微波辅助萃取法提取玄参中哈巴苷和哈巴俄苷的工艺研究北大核心CSCD

本文研究微波辅助萃取法提取玄参中哈巴苷和哈巴俄苷的最佳工艺条件,应用微波辅助萃取法提取玄参中的哈巴苷和哈巴俄苷,采用高效液相色谱法测定哈巴苷和哈巴俄苷的含量。结果表明微波辅助萃取法提取玄参中哈巴苷和哈巴俄苷的最佳工艺参数:纯水作提取剂、料液比为1∶20、微波温度为50℃、微波时间为30min、微波功率为600 W。在此最佳工艺条件下玄参中哈巴苷和哈巴俄苷的总提取率为1.1172%。     

离子液体-微波辅助提取黄芩饮片中四种黄酮类成分(英文)北大核心CSCD

采用HPLC法建立黄芩饮片中黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素四种黄酮类化合物同时测定的方法;并且优选离子液体-微波辅助提取（IL-MAE）黄芩饮片中四种黄酮类成分的最佳工艺。优选的色谱分离条件为：Aglient TC-C18（250×4.6 mm,5.0μm）色谱柱,流动相为0.4%磷酸水（A）和甲醇（B）,梯度洗脱程序为0-10min,40%-50%B;10-20 min,50%B;20-30 min,50%-60%B;30-40 min,60%-80%B;50 min,80%B,检测波长280 nm。优选的最佳的黄芩饮片IL-MAE条件为：以溴化-1-丁基-3-甲基咪唑盐为溶剂,固-液比为1∶100,提取时间为3 min,微波功率为264 W;将该工艺所得四种成分的含量与采用中国药典（2010版）所收载的＂回流提取法＂所得含量进行对比,IL-MAE显著地提高了黄芩饮片中四种黄酮类成分的含量并且缩短了提取时间。研究结果表明,所建立的HPLC分析方法灵敏、准确,可用于黄芩饮片的质量控制;所优选的黄芩饮片的IL-MAE简单,高效,快速,无污染。     

‘章姬'草莓茎段愈伤组织诱导及高频植株再生体系的建立北大核心CSCD

In order to cultivate an improved variety with higher potential yield and establish an efficient in vitro regeneration system of strawberry ‘Akihim'(Fragaria × ananassa), callus induction and plant regeneration protocol was designed for solve browning problem. A formal L9(34)orthogonal experiment was designed to investigate the browning research in primary culture using explants of creeping stems excised from aseptic seedlings. Based on the improved medium above, single-factor experiments were conducted to select effective plant growth regulators and appropriate concentrations on blank MS medium. A L9(34)orthogonal experiment was designed to study effects of types and concentrations of plant growth regulators on callus induction, adventitious shoot formation, and plant regeneration. The results indicated that MS medium was inferior to B5 and 1/2MS in inhibiting browning condition. The browning rate was dramatically reduced while the callus still survived on the medium with the addition of 20 g·L-1 Na2S2O3. The callus induction and shoot formation of the explants were observed on MS + 0.1 mg· L-1 6-BA + 0.05 mg·L-1 2, 4-D + 0.1 mg·L-1 NAA with effective inhibiting browning. The optimal medium protocol for multiple shoots proliferation was MS + 0.1 mg·L-1 6-BA + 0.1 mg·L-1 NAA where the proliferation coefficient was 12.86 after 30 d. Healthily regenerated plants were yielded on culture medium 1/2MS + 1.0 g·L-1 AC after 35 d, with a rooting rate of 92.50%. More than 95% of plantlets survived after transplanting into field. The rapid propagation system is helpful to provide homogeneous progeny and high quality seedlings for cultivation of strawberry ‘Akihime' as well as a technical reference for other strawberry species in vitro regeneration. [ABSTRACT FROM AUTHOR]