巨噬细胞的FC受体及其与吞噬功能的关系

本文用EA花环试验及体外吞噬实验检测了小鼠腹腔巨噬细胞(Macrophage,Mφ)的EA 花环率及吞噬功能,结果发现昆明小鼠比同龄C_(57)BL/6、BALB/c及NIH小鼠Mφ的EA花环率高。在昆明及BALB/c小鼠中青年鼠的EA花环率又较老年鼠为高。用黄芪水,黄芪多糖及巯基乙醇酸钠处理后Mφ的EA花环率升高,用秋水仙碱及氢化可的松处理后Mφ的EA花环率降低。MφEA花环率的高低与Mφ吞噬功能的高低相平行。Mφ对抗体包被的CRBC的吞噬能力比对CRBC的吞噬为高,吞噬效应随抗体浓度而改变,表明FC受体介导的吞噬作用大于非特异性吞噬作用。MφFC受体的数目及其功能与Mφ的激活状态及机体的免疫功能状态密切相关。     

丙酸杆菌细胞壁骨架(P—CWS)对小鼠肺癌抗瘤效应及其机制初步研究

本文研究了P—CWS对小鼠肺腺癌的抗瘤效应,并通过Winn试验及一系列Mφ细胞毒功能的检测,对P—CWS的抗癌机制进行了初步研究。结果表明,P—CWS对小鼠肺腺癌的发生、发展及肺部转移均具有明显的抑制效应;经P—CWS激活的小鼠腹腔渗出细胞能抑制肿瘤的发生,且杀瘤活性明显增强,体外研究发现,P—CWS为一有效的Mφ活化因子,可使Mφ的吞噬、Mφ介导的抗体依赖性细胞毒功能及增殖抑制功能明显增强。     

低氧对巨噬细胞分泌TNF-α和IL-6的影响及其机制

目的:观察低氧对巨噬细胞(Mφ)前炎症因子TNF-α和IL-6分泌的影响及其机制.方法:收集分离小鼠腹腔Mφ,建立Mφ的低氧(1% O2,5%CO2)培养模型,并用非特异性酯酶染色法进行鉴定;ELISA法检测上清液中TNF-α和IL-6的含量;RT-PCR法检测TNF-α和IL-6的转录物水平;用Western blot法检测Mφ核内NF-κB的激活量;通过在培养液中加入氢化可的松(5 mg/L),观察低氧时TNF-α和IL-6分泌量的变化.结果:TNF-α和IL-6分泌量在低氧12 h时明显增加(P＜0.01);低氧6 h时,TNF-α mRNA和IL-6 mRNA表达量明显高于对照组(P＜0.01);M中核内NF-κB的激活量在低氧2 h时明显增高(P＜0.05),低氧5 h内持续存在;而当培养液中加入氢化可的松抑制NF-κB活性后,TNF-α和IL-6的分泌水平无明显变化.结论:低氧可通过核转录因子NF-κB途径促进细胞因子TNF-α和IL-6基因的表达和分泌.     

一种微量巨噬细胞吞噬功能定量检测技术

利用96孔细胞培养板作小鼠腹腔Mφ培养,观察其对抗体包被羊红细胞(EA)的吞噬能力,并以冰醋酸和SDS混合液破坏Mφ,同时使胞内红细胞溶胀,释放Hb,然后在微量板上直接作联苯胺氧化试验,在国产酶标仪上以520nm波长比色。其吸光值高低可作为Mφ吞噬功能的定量指标。用该检测系统可同时进行各种免疫调节因子的功能研究,是一个较理想的体外实验技术。     

SL-益生素对小白鼠体重及其单核吞噬细胞功能的影响

研究了SL-益生素(SL-P)对小白鼠体重和单核吞噬细胞功能的影响。经急性毒性实验检查,该益生素无急性毒性,无急性致病作用。灌服SL-P10d后,小鼠体重较对照组有明显提高。经过SL-P处理后,小鼠腹腔巨噬细胞(PMφ)的吞噬率和吞噬指数较对照组有显著提高。灌服SL-P10d后,小鼠单核吞噬细胞的水解酶类:血清溶菌酶(血清LSZ),腹腔巨噬细胞溶菌酶(PMφLSZ),腹腔巨噬细胞酸性磷酸酶(PMφACP)的活性均有不同程度的提高,并呈现一定的剂量依赖关系,表明SL-P对小鼠单核吞噬细胞的吞噬和杀菌功能有明显的促进作用。     

SL-益生素对小白鼠体重及其单核吞噬细胞功能的影响

研究了SL-益生素(SL-P)对小白鼠体重和单核吞噬细胞功能的影响。经急性毒性实验检查,该益生素无急性毒性,无急性致病作用。灌服SL-P10d后,小鼠体重较对照组有明显提高。经过SL-P处理后,小鼠腹腔巨噬细胞(PMφ)的吞噬率和吞噬指数较对照组有显著提高。灌服SL-P10d后,小鼠单核吞噬细胞的水解酶类:血清溶菌酶(血清LSZ),腹腔巨噬细胞溶菌酶(PMφLSZ),腹腔巨噬细胞酸性磷酸酶(PMφACP)的活性均有不同程度的提高,并呈现一定的剂量依赖关系,表明SL-P对小鼠单核吞噬细胞的吞噬和杀菌功能有明显的促进作用。     

免疫巨噬细胞在抗肾综合征出血热病毒感染中作用的初步研究

本文报道免疫小鼠腹腔巨噬细胞（ＰＭφ）在体内外抗肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）病毒杂中的作用，用ＭＴＴ法测定细胞活力表明：ＨＦＲＳ病毒在体外对非免疫ＰＭφ具有明显的抑制作用，而免疫ＰＭφ受病毒的抑制不明显，应用直接免疫荧光技术证实，ＨＦＲＳ病毒能在非免疫ＰＭφ胞浆内增殖，并能释放细胞外；而免疫ＰＭφ能杀灭入侵的病毒，细胞转输实验表明，腹腔转输免疫ＰＭφ对乳鼠的致死性感染具有完全或部分保护作用，对用环磷     

脂多糖通过诱导白细胞介素-1的生成引起迷走传入神经活动

为探讨脂多糖（liopoplysaccharide,LPS）引起迷走传入神经活动是否可能通过白细胞介素-1（interleukin-1,IL-1）的作用,将Wistar大鼠随机分为LPS实验组和生理盐水对照组,用免疫组织化学方法检测迷走神经结状神经节c-Fos及CD14的表达以及腹腔迷走神经周围Mac-1阳性巨噬细胞（macrophage,Mφ）。用L929细胞增殖法检测LPS刺激Mφ上清IL-1的生物活性。用原位杂交的方法检测迷走神经结状神经节I型白细胞介素-1受体（IL-1R I）mRNA的表达。结果显示,LPS组迷走神经结状神经节神经元c-Fos蛋白表达为阳性,而对照组迷走神经结状神经节神经元c-Fos蛋白表达为阴性。LPS注射后1h,见腹腔迷走神经周围Mφ数量明显增多。Mφ在LPS刺激后45min、1h和2h时,IL-1生成明显增高,LPS组迷走神经结状神经节IL-1R I mRNA表达为阳性。以上结果提示,LPS引起迷走传入神经活动可能通过IL-1的作用。     

液氮浅冻对小鼠免疫功能的影响

近十余年来冷冻医学已在我国广泛应用。为了探讨液氮浅部冷冻作为应激手段是否能引起机体免疫反应及其影响规律,本实验观察了液氮浅冻对小鼠腹腔Mφ吞噬功能以及对小鼠外周血淋巴细胞转化的影响。     

Ⅱ类MHC在接种流感疫苗后诱导保护性免疫应答中的作用

<正>MHCⅡ类缺陷(MHC-II KO;Aβ-/-)小鼠用于评价MHC-II类分子在接种疫苗后诱导保护性免疫应答中的作用。接种流感A/PR8病毒样颗粒(VLP)疫苗后,完全不同于CD4 T细胞缺陷小鼠,在MHCⅡ类分子缺陷小鼠体内外均未检测到疫苗特异性免疫球蛋白Ig G抗体。缺乏MHCⅡ类分子并没有明显影响血清中诱导产生特异性Ig M抗体。用     

苦瓜提取物抗病毒作用及其有效成份的研究

本实验发现,小鼠皮下感染乙型脑炎病毒前腹腔注射苦瓜提取物(简称E.M.c.)有显著的保护作用,其保护率平均为66％;以E.M.c.静脉注射家兔后2小时,血清中的干扰素达高峰,其干扰素为I型干扰素;E.M.c.对小鼠NK细胞有明显的激活作用;经鉴定,E.M.c.中的有效成份主要是dsRNA,此外,还含有多糖类物质。     

有机锗对巨噬细胞激活与磷脂代谢转换的影响

有机锗(CGS、DGS、Ge-132)于活体内能激活小鼠腹腔巨噬细胞(Mφ),后者于体外对肿瘤细胞Hca-16H₃和J6-2表达Mφ介导的肿瘤细胞毒(MTC),CGS与DGS的激活效应高于Ge-132,CGS为最强.它们激活的Mφ磷脂PC代谢转换较常驻Mφ(R-Mφ)明显增高,表现在［³H］胆碱掺入PC增加,CGS的增加效应最强.Ge-132激活的Mφ(Ge-12-Mφ)与R-Mφ比较,增加［³²P］Pi掺入PC,降低［³²P］Pi或［³H］肌醇掺入PI,但［³²P］Pi或［³H］肌醇掺入PIP、PIP₂未有显著差异.PC代谢转换的增加很可能是有机锗激活Mφ表达MTC的信息传递所需要的.     

四种阿片受体激动剂对大鼠腹腔巨噬细胞释放过氧化氢的影响

本实验观察了四种阿片受体亚型的激动剂对大鼠腹腔巨噬细胞(Mφ)释放过氧化氢(H_2O_2的影响。吗啡、β-内啡肽和κ受体激动剂NDAP能抑制Mφ释放H_2O_2。纳洛酮能翻转吗啡和β-内啡肽的这一作用,κ受体阻断剂nor-BNI能拮抗NDAP的作用。δ受体激动剂DADLE仅在高浓度时才抑制Mφ释放H_2O_2。以上结果表明,Mφ上可能存在若干类型阿片受体,其中μ、ε和κ受体对Mφ释放H_2O_2具有明显的调节作用。     

白细胞介素2(IL-2)基因和γ干扰素(IFN-γ)基因体内转染巨噬细胞对恢复化疗所致免疫功能损伤的研究

用磷酸钙——ＤＮＡ共沉淀法, 将ｐＲＥＰ８ＩＦＮγ真核表达质粒或／和ρＲＥＰ８ＩＬ２ 真核表达质粒直接注射至经大剂量化疗后的小鼠腹腔内, 成功地转染腹腔巨噬细胞（Ｍφ）。ＩＬ２ 基因和ＩＦＮγ基因联合转染Ｍφ较ＩＬ２ 或ＩＦＮγ基因转染Ｍφ, 其基因表达产物水平更高, 显著地刺激脾脏增生, 增强淋巴细胞的增殖, 增强腹腔Ｍφ的细胞毒活性, 促使腹腔Ｍφ分泌白细胞介素１ （ＩＬ１）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ） 和ＮＯ。结果表明, 双基因转染效果优于单基因转染, ＩＬ２ 和ＩＦＮγ基因联合转染Ｍφ更有助于由放疗、化疗所致受损的免疫功能恢复。     

LPS对冷应激大鼠Mφ、Sertoli细胞分泌IL-1的影响

目的 为探讨LPS对冷应激大鼠外周血巨噬细胞（Mφ）和睾丸支持细胞（Sertoli）分泌IL-1的影响,本文检测了大鼠Mφ细胞和Sertoli细胞IL-1的含量。方法体外分离培养大鼠Mφ细胞、大鼠睾丸Sertoli细胞和小鼠胸腺细胞,设37℃对照组与0℃、-4℃冷应激实验组,IL-1含量测定采用放免分析方法。结果外周血MφIL-1含量：0℃组高于37℃对照组,分别为20444.7±8936.3和10281.2±1435.8,差异有显著性（P〈0.05）;-4℃和37℃对照组分别为10307.2±2648.6和10281.2±1435.8,差异无显著性（P〉0.05）。睾丸Sertoli细胞IL-1含量：0℃组高于37℃对照组,LPS-和LPS＋分别为54.31±0.35和41.52±0.42与99.74±0.09和82.96±0.33,差异有显著性（P〈0.05）;-4℃和37℃对照组分别为38.11±0.14和41.52±0.42与45.84±0.11和82.96±0.33,差异有显著性（P〈0.05）。结论冷应激抑制LPS诱导Mφ和Sertoli细胞的IL-1含量分泌,但在早期Mφ和Sertoli细胞均出现免疫系统激活的过程,其作用机制有待深入研究。     

金黄色葡萄球菌对小鼠产生一氧化氮及一氧化氮合酶的影响

目的 :探讨金黄色葡萄球菌对小鼠产生一氧化氮 (NO)及一氧化氮合酶 (NOS)的影响 ,以进一步研究 NO及 NOS在抗感染免疫中的作用。方法 :将不同剂量的金黄色葡萄球菌注入小鼠腹腔 ,10 d后取小鼠血清和腹腔巨噬细胞培养上清 ,用硝酸还原酶法检测其 NO的含量 ,同时测定血清中 NOS的水平及抗金黄色葡萄球菌抗体的效价。结果 :金黄色葡萄球菌注射小鼠后 ,血清中 NO及 NOS的水平明显高于对照组 (P<0 .0 1) ,各组间两两比较亦差异有显著性 (P<0 .0 1)。腹腔巨噬细胞培养上清 NO的水平明显高于对照组 (P<0 .0 1) ,但不同剂量实验组之间差异无显著性 (P>0 .0 5)。结论 :金黄色葡萄球菌可引起小鼠血清中 NO、NOS升高 ,NO及 NOS可能在抗微生物感染免疫中起着重要的作用     

纳米复合佐剂的抗肿瘤免疫调控作用及效果研究

目的:探究纳米复合佐剂在肿瘤内的免疫调控作用及抗肿瘤效果。方法:制备包载CpG的β葡聚糖纳米颗粒(CNP),体外培养小鼠骨髓来源的树突细胞(BMDC),分5组进行体外免疫处理,分别为PBS对照组、β葡聚糖组、β葡聚糖纳米载体(NP)组、CpG组和CNP组,利用流式仪分析BMDC成熟情况。将体外培养的黑色素瘤B16F10细胞接种于C57BL/6N小鼠右后肢皮下,建立肿瘤模型,第6 d挑选肿瘤大小相对一致的24只小鼠均分为4组,即PBS组、NP组、CpG组、CNP组进行治疗,后颈部皮下注射给药,共给药4次,每次间隔3 d,期间隔天测量肿瘤体积,最后一次给药后第3 d眼眶取血,测定血浆中γ干扰素(IFN-γ)浓度,处死小鼠后分离肿瘤及脾脏,流式细胞术检测瘤内浸润性T淋巴细胞比例及脾脏内T细胞比例。结果:CNP佐剂处理后BMDC成熟比例约为CpG佐剂组的2.8倍。在小鼠体内接种肿瘤15 d后,CNP治疗组肿瘤体积较其他组均减小,血浆中IFN-γ含量显著高于其他实验组,约为CpG组的1.5倍,肿瘤浸润性T淋巴细胞与其他组相比也有明显升高。结论:构建的葡聚糖-CpG纳米复合佐剂能够有效激活BMDC,改善肿瘤微环境,具有良好的体内抗肿瘤效果。     

旋转磁场对^60Coγ射线放射损伤小鼠肺损伤影响

目的：探讨旋转磁场对放射损伤小鼠肺损伤的影响。方法：132只雄性BALB／c小鼠随机分为正常组（N）,单纯磁疗组（M）,单纯照射组（R）和照射磁疗组（IHM）4组,R组和R＋M组小鼠接受吸收剂量6．0Gy的^60Coγ射线全身一次照射,M组及N组不予以照射,M组及R＋M组予以磁场处理30d,每天2次,每次1．5h,分别于第9,23、30d测定小鼠湿肺羟脯氨酸含量,并进行小鼠肺光镜、电镜超微结构的观察。结果：N组和M组肺羟脯氨酸含量在3个时间点上都低于R组和R＋M组,有明显差别（P均〈0．05）。R组和R＋M组肺羟脯氨酸含量在3个时间点均无明显差别（P均〈0．05）。苏木精-伊红染色结果显示,N组肺组织结构正常;照射后d9,R组及R＋M组肺泡壁轻度增厚,普遍肺毛细血管扩张、充血,少量淋巴细胞、中性粒细胞浸润。小鼠肺组织透射电镜观察结果显示,照射后d30,N组及M组肺间质胶原纤维正常无增生;R组及R＋M组肺可见肺间质胶原纤维较N组及M组明显增多,但R＋M组与R组比较差别不明显。结论：6．0Cy的^60Coγ射线照射后小鼠的肺受到了损伤,但磁场没有加重这种损伤且磁疗对正常小鼠无明显肺损伤。     

枇杷核提取物对小鼠免疫功能及肠道菌群影响的研究

以肠道菌群检测与免疫学腹腔Mφ吞噬功能测定、溶血空斑试验、淋巴细胞转化试验和NK细胞活性测定等方法,初步探讨了中药枇杷核提取物对抗生素造成的菌群失调性腹泻小鼠肠道菌群及免疫功能的影响。结果表明枇杷核提取物对小鼠免疫功能及肠道正常菌群（双歧杆菌、乳酸菌、肠球菌、肠杆菌和类杆菌）具有双重调节作用。     

Cdc25B在小鼠受精卵的表达和定位

为阐明细胞分裂周期(Cdc)25B调控小鼠受精卵发育的机制,利用Western印迹检测小鼠受精卵各时期Cdc25B的表达及Cdc2-Tyr15的磷酸化状态。利用间接免疫荧光技术观察Cdc25B在小鼠受精卵的定位。构建pEGFP-Cdc25B融合表达载体并显微注射到受精卵中,观察Cdc25B在受精卵M期的定位变化。结果表明Cdc25B在G1和S期被磷酸化,在G2和M期去磷酸化。Cdc2-Tyr15在G1和S期处于磷酸化状态,G2期只检测到Cdc2-Tyr15轻微的磷酸化信号,M期未检测到任何Cdc2-Tyr15的磷酸化信号。Cdc25B在G1期定位于细胞质和细胞核中,S和G2期定位于细胞质的皮质部分,M期由细胞质转向核区。证明Cdc25B核输出后激活有丝分裂促进因子,从而启动小鼠受精卵的有丝分裂。