细菌产木聚糖酶发酵条件的研究*

研究了碳源、氮源以及其他因子对木聚糖酶高产菌ＷＬＵＮ０２４（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐ．）产酶的影响,结果表明在麸皮６ｇ／Ｌ、（ＮＨ４）２ＳＯ４ ０．８ｇ／Ｌ、Ｋ２ＨＰＯ４ ０．４ｇ／Ｌ、接种量５％－１０％的条件下,３７℃培养３６ｈ,其木聚糖酶活力可达６００ＩＵ／ｍＬ。同时研究了在较优条件下该菌的摇瓶产酶曲线。     

能利用五碳糖和六碳糖生产乙醇的基因工程菌菌株的构建

燃料乙醇是一种极具前景的燃油代用品,近年来发展尤为迅速,为了推广这种能源和满足日益增长的需求,我们有必要开发更为高效的生产工艺和寻找更为廉价的原料。解决此问题的关键在于获得高效的工程菌,使其能利用木质纤维素水解液中的五碳糖和六碳糖发酵生产乙醇。通过代谢工程的研究和基因重组技术,几种重组细菌显示出良好的开发前景,它们是运动发酵单胞菌、大肠杆菌、产酸克雷伯氏菌和菊欧文氏菌。本文就这四种细菌的研究进展以及基因重组过程进行了介绍和评价。     

水生细菌生物量的估算方法*

细菌的生物量是海洋微生物研究的关键参数之一。目前,细菌生物量估算方法主要根据其体积的大小进行换算,但换算的方式也不尽一致。对细菌体积和细菌碳含量主要的测定方法、体积与生物量之间换算系数、换算模式进行介绍,评述。认为流式细胞术是测定细菌体积较为合适的方法,X-射线微量分析法是测定单个细菌生物量(碳含量)最合适的方法,异速生长模式是目前生物量换算过程较为常用的模式。     

新型生物杀虫剂——刺糖菌素*

刺糖菌素是由土壤放线菌多刺糖多孢菌 (Saccharopolysporaspinosa)产生的次级代谢产物 ,是一种具有触杀及摄食毒性的广谱杀虫剂。对鳞翅目害虫而言 ,刺糖菌素是目前已发现的杀虫剂中选择性最高的化合物之一。文中就刺糖菌素的结构、生物合成、性质以及生产方法进行了综述。     

细菌质粒的消除*

利用化学消除剂或改变生长条件可以消除细菌中的质粒。除宿主菌的特性及其所含质粒分子量大小之外 ,消除率还与消除剂浓度、作用时间有关。嵌合染料适用于消除大肠杆菌中的质粒。十二烷基硫酸钠对具有性纤毛的细菌作用效果较好。适当提高培养温度可消除一些细菌中的质粒 ,胸腺嘧啶限量法仅适用于其营养缺陷型菌株的质粒消除。利用原生质体的形成与再生及反复冻融菌体均可消除细菌中的质粒。     

荧光素酶研究进展*

荧光素酶 (Luciferase)可以分为萤火虫荧光素酶和细菌荧光素酶两大类。萤火虫荧光素酶是分子量为 60～ 64kD的多肽链 ,在Mg²⁺、ATP、O₂ 存在时 ,催化D 荧光素 (D Luciferin)氧化脱羧 ,发出光 (λ =550～580nm)。细菌荧光素酶是含α、β两个多肽亚基的加单氧酶 ,它催化长链脂肪醛、FMNH₂ 和O₂ 的氧化反应 ,发出绿蓝光 (λ =490nm)。萤火虫荧光素酶和细菌荧光素酶     

丰田汽车公司开发出能同时利用六碳糖和五碳糖的转基因酵母

2011年10月3日,丰田汽车公司公开了生物技术绿化研究所,公布了生物燃料生产用酵母、停车场和墙面用城市绿化资材、模拟绿化效果的“coolspot”形成技术等生物技术及绿化事业行动。     

植物伴生细菌数量应答系统的研究进展*

N-酰基高丝氨酸内酯(AHLs)作为信号分子介导的细菌数量应答系统参与许多生物学功能的调节,当侵染动植物寄主组织的病原菌繁殖到一定量时,细菌本身产生的AHLs积累到临界浓度,AHLs与胞内特异受体结合,启动致病因子的表达。利用AIRs降解酶和AHLs类似物的特性,干扰和破坏病原菌的AHLs数量应答系统,将为利用现代生物技术防治细菌病害开辟了一条全新的途径。     

溶藻细菌杀藻物质的研究进展*

溶藻细菌作为防治有害藻类水华的一种可能微生物,已引起了众多科研人员的关注。大多数溶藻细菌分泌的生物活性杀藻物质对宿主藻类具有强烈的杀灭作用。首先讨论了细菌活性杀藻物质的生态作用,重点阐述了目前已经报道的细菌杀藻物质的种类及其提取和分离方法,最后对细菌杀藻物质的进一步研究提出几点看法。     

酿酒酵母呼吸缺陷型和野生型酒精发酵特性的比较分析*

比较了酒精发酵生产菌株IFFI1300及其呼吸缺陷型突变株在酒精产量、发酵动力学、耐酒精能力及与酒精发酵相关的乙醇脱氢酶活性等方面的特性。结果表明：1)发酵终期的酒精产量,45株呼吸缺陷型的平均值与野生型没有显著性差异;但部分缺陷型的酒精产量高于野生型。2)酒精发酵动力学结果显示,呼吸缺陷型酒精产生速度略高于野生型。3)单位重量干菌体的乙醇脱氢酶活性,呼吸缺陷型高于野生型。以上结果提示：呼吸缺陷型用于酒精发酵以提高酒精产量和缩短发酵周期是有潜力的。4)单位体积发酵液的乙醇脱氢酶活性则野生型高于呼吸缺陷型,主要原因在于呼吸缺陷型的生物量明显低于野生型。5)呼吸缺陷型菌株之间的耐酒精能力差别很小,耐酒精能力的高低与酒精产量的高低没有明显的正相关性。一般的,酒精产量高的菌株耐酒精能力较强。在实验结果的基础上,对呼吸缺陷型用于酒精发酵的优越性和可行性进行了讨论。     

乙醇消耗菌的分离鉴定及其对基因工程集胞藻乙醇产量的影响

为研究产乙醇基因工程集胞藻培养液中的乙醇消耗菌污染情况及其对乙醇产量的影响,从污染的培养液中分离出4株乙醇消耗菌,通过16S rDNA、26S rDNA序列分析对分离出的菌株进行鉴定,并研究其乙醇消耗能力及对基因工程集胞藻乙醇产量的影响。结果表明,分离出的4株菌分别为红酵母(Rhodotorula sp.)、季也蒙酵母(Meyerozyma guilliermondii)、短波单胞菌(Brevundimonas sp.)、微杆菌(Microbacterium sp.)。其中乙醇消耗能力最强的是红酵母,乙醇比消耗速率达到391 g/(1015 cfu?d);其次为季也蒙酵母,乙醇比消耗速率为80.1 g/(1015 cfu?d);短波单胞菌和微杆菌的乙醇比消耗速率远低于红酵母和季也蒙酵母。将分离出的菌株与产乙醇集胞藻共培养7d后,污染红酵母、季也蒙酵母、短波单胞菌、微杆菌的实验组乙醇产量分别下降了53.8%、23.6%、40.7%、27.3%。4株菌对基因工程集胞藻的生长无明显影响,均通过直接消耗乙醇而降低集胞藻的乙醇产量。     

普通脱硫弧菌产氢化酶条件及提取贮存因素研究

普通脱硫弧菌D-2氧化酶在培养基N上产量较高。金属螯合剂EDTA能增加菌体酶含量,其最适浓度为0.02g/L。碱性缓冲液(含有EDTA)在30℃、15分钟内能抽提约90%的周质氢化酶。该酶在低温、充氮条件下能保持很高的起始酶活,且牛血清白蛋白(BSA)能明显增加酶在空气中的稳定性,但还原的氢化酶纯样品氧失活比较明显。     

工程菌人溶菌酶的纯化和性质

将人溶菌酶工程菌株在发酵培养、菌体经超声破碎、变性和复性后所得的粗酶液经ExpressIon S阳离子交换柱层析,得到电泳纯的酶,比活达到48KG*4]000u/mg。此酶的最适pH为6.5;等电点为8.91;对溶壁微球菌的米氏常数Km=0.0311mg/mL;60℃保温30〖KG*4]min,酶活力剩余48.3%。N末端氨基酸序列除了第一个Met,其余4个与预期相符。一些重金属离子对酶的活性影响不尽相同,在0.01     

ENHANCEMENT OF ETHANOL PRODUCTION BY SIMULTANEOUS SACCHARIFICATION AND FERMENTATION (SSF) OF RICE STRAW USING ETHOXYLATED SPAN 20

In this work, four nonionic surfactants based on sorbitan monolaurate (Span 20) were synthesized by introducing ethylene oxide gas (n = 20, 40, 60, 80 ethylene oxide units) into Span 20 to give four new surfactants with different hydrophilic–lipophilic balance (HLB), namely, E(20), E(40), E(60), and E(80). The structures of the prepared nonionic surfactants were elucidated using Fourier-transform infrared (FT-IR) and ¹H-nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy. The surface-tension measurements were recorded. The effects of the prepared nonionic surfactants on the simultaneous saccharification and fermentation (SSF) of microwave/alkali-pretreated rice straw to produce ethanol were investigated. From the obtained data, it was found that the addition of the nonionic surfactants at 2.5 g/L had a positive effect on SSF. The maximum ethanol yield (76 and 55%) was obtained after 72 hr for rice straw using Kluyveromyces marxianus and Saccharomyces cerevisiae, respectively. Also, it was found that the ethanol yield increases with increasing HLB of the prepared nonionic surfactants by increasing ethylene oxide units. The adsorption of nonionic surfactants on lignocelluloses is proposed to be due to hydrophobic and hydrogen bonding interactions between nonionic surfactants and the lignin part in the lignocelulose. It can be concluded that additions of surface-active compounds, such as nonionic surfactants, increase enzymatic conversion of rice straw for bioethanol purposes.