层粘连蛋白在人子宫内膜月经周期中变化的研究

本实验观察了人正常子宫内膜中层粘连蛋白（Ｌａｍｉｎｉｎ;ＬＭ）在月经周期中的变化,以此进一步探讨着床窗口（Ｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎｗｉｎｄｏｗ）。实验使用手术搞出的人子宫标本４０例。根据患者主述与子宫标本的ＨＥ染色的结果,将子宫标本分成８个期,免疫组织化学方法进行子宫内膜各期ＬＭ的染色。结果表明：ＬＭ主要分布在表面上皮、晚上皮和血管基底膜等部位。表面上皮和血管内皮基底膜中的ＬＭ在分泌初期开始增加。细胞外基质中的ＬＭ在分泌中期增加。ＬＭ是在细胞增殖、移动、分化等等方面起作用的生物活性物质现已被公认。与着床有密切关系的子宫表面上皮和血管内皮基底膜;细胞外基质中的ＬＭ的分泌期开始明显增加,这一结果说明ＬＭ量的变化是与着床有某种密切的关系。     

着床期小鼠子宫内膜Le^y糖蛋白的动态变化

为了解子宫内膜Ｌｅ＾ｙ糖蛋白在胚泡着床期间的变化,以及与胚泡表面阶段特异性Ｌｅ＾ｙ抗原出现的关系,应用对Ｌｅ＾ｙ寡糖特的ＡＨ－６单抗为探针,通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ免疫酶标染色,观察了小鼠子宫内膜Ｌｅ＾ｙ糖蛋白在着床期的动态变化和分布特点,结果表明：（１）未孕及着床前后的小鼠子宫内膜均含Ｌｅ＾ｙ糖蛋白Ｍｒ５０～２００ｋＤ,未孕内膜的含量明显高于着床期间的样品;（２）在着床日（Ｄ     

子宫内膜蜕膜化的特征及其调节因素

子宫内膜向蜕膜的转化是正常着床和妊娠的一个重要特征,对于胚泡着床是必不可少的。在蜕膜化过程中,子宫内膜基质细胞在形态和生理等方面都发生了很大的变化。蜕膜化过程受多种因素的调节,包括cAMP、胰岛素样生长因子结合蛋白-1(IGFBP-1)、自然杀伤细胞、同源盒基因-10(HOXA10)、激活素等。但对蜕膜化的机制及调节等仍不清楚。     

小鼠胚泡着床期子宫内膜LongSAGE基因文库构建

按照LongSAGE文库构建原理,先后经子宫内膜总RNA提取、cDNA合成、130bp双标签的产生、PCR扩增、34bp双标签形成、连接成串联体、与载体连接、转化大肠杆菌等相关步骤构建小鼠胚泡着床期子宫内膜LongSAGE基因文库。经证实所构建文库的阳性克隆率达100%,克隆中插入的串联体长度介于400￣500bp之间,成功构建了小鼠胚泡着床期子宫内膜LongSAGE基因文库。     

着床期小鼠子宫内膜Le~y糖蛋白的动态变化

为了解子宫内膜Ｌｅ~ｙ糖蛋白在胚泡着床期间的变化,以及与胚泡表面阶段特异性Ｌｅ~ｙ抗原出现的关系,应用对Ｌｅ~ｙ寡糖特异的ＡＨ－６单抗为探针,通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ免疫酶标染色,观察了小鼠子宫内膜Ｌｅ~ｙ糖蛋白在着床期的动态变化和分布特点。结果表明：（１）未孕及着床前后的小鼠子宫内膜均含Ｌｅ~ｙ糖蛋白Ｍｒ５０～２００ｋＤ）,未孕内膜的含量明显高于着床期间的样品;（２）在着床日（Ｄ４）样品可见微量１６ｋＤ的Ｌｅ~ｙ糖蛋白条带;（３）未孕至Ｄ４的子宫内膜均有Ｌｅ~ｙ糖蛋白分泌至宫腔,但呈渐减趋势,未孕样品Ｌｅ~ｙ糖蛋白主要为分泌型,而Ｄ４样品Ｌｅ~ｙ糖蛋白主要存在于子宫内膜,宫腔液含量很少;结果提示子宫内膜Ｌｅ~ｙ糖蛋白在着床期间具有含量、组成和分布上的动态变化,这些变化可能与胚泡着床以及胚泡在宫腔内其表面Ｌｅ~ｙ糖抗原转为阳性密切有关。     

诱导子宫内膜异位症患者子宫内膜上皮细胞调亡研究

目的:研究促性腺激素释放激素激动剂(GnRHα)对子宫内膜异位症(EMs)患者在位内膜蛋白表达的影响,为EMs的治疗提供依据。方法:94例EMs患者随机分为两组,每组47例,均实施腹腔镜手术治疗,对照组未给予药物治疗,观察组给予曲普瑞林皮下注射,28日/次,注射3次,术中及治疗三个月后观察组分别用取内膜器取少量子宫内膜组织标本,采用免疫组化法法、TUNEL染色法和Western blot检测组织内Bcl-2、Caspase3、GRP78等表达情况,并观察治疗效果。结果:治疗后观察组疼痛视觉模拟评分(VAS)为(2.13±0.69)分,低于对照组的(2.62±0.71)分(P0.05);观察组1年内妊娠率及总妊娠率分别为38.30%、51.06%,均高于对照组的19.15%、29.79%(P0.05);治疗后观察组Bcl-2、Caspase3表达量分别为(1.54±0.28)、(3.20±0.65),均高于对照组的(1.38±0.15)、(1.24±0.27)(P0.05);治疗后观察组GRP78表达量为(0.46±0.17),低于对照组的(0.61±0.24)(P0.05)。结论:GnRHα可缓解EMs患者下腹痛、痛经、性交痛等症状,提高妊娠率,其机制可能与GnRHα调控上皮细胞Bcl-2、Caspase3、GRP78等的表达有关。     

极具潜力的子宫内膜容受性形态学标志-胞饮突的研究进展

胞饮突是种植窗期在扫描电镜（Scanning electron microscopy,SEM）下子宫内膜上皮细胞膜顶端出现的大而平滑的膜突起。近年胞饮突被认为子宫内膜容受性的一个标志性结构,其功能可能是直接或间接参与囊胚与子宫内膜的黏附反应。本文就胞饮突的形态、功能及与其他子宫内膜容受性相关因子相互作用作一综述。     

极具潜力的子宫内膜容受性形态学标志——胞饮突的研究进展

胞饮突是种植窗期在扫描电镜(Scanning electron microscopy,SEM)下子宫内膜上皮细胞膜顶端出现的大而平滑的膜突起.近年胞饮突被认为子宫内膜容受性的一个标志性结构.其功能可能是直接或间接参与囊胚与子宫内膜的黏附反应.本文就胞饮突的形态、功能及与其他子宫内膜容受性相关因子相互作用作一综述.     

人蜕膜组织子宫内膜干细胞的分离、培养及鉴定

目的:研究人蜕膜组织中子宫内膜干细胞(endometrial stem cells,EnSCs)的分离、培养及鉴定方法。方法:取人工流产患者的蜕膜组织,用胰酶和II型胶原酶消化分离子宫内膜细胞,计数后,以极低密度接种于10 cm培养皿,分离单克隆贴壁细胞。倒置显微镜观察EnSCs形态变化及克隆形成情况;CCK-8法绘制EnSCs生长曲线,计算倍增时间;流式细胞仪分析EnSCs细胞周期及表面抗原CD29、CD31、CD34、CD44、CD45、CD73、CD90、CD105、CD146表达情况。结果:EnSCs呈长梭形,成纤维细胞样,可见粗细不等的胞质突起,增殖至80-90%呈漩涡状生长,其克隆形成率分别为3.91%和9.14%;EnSCs生长曲线呈"S"型,接种48 h至60 h后进入对数生长期,于第9天达到平台期,倍增时间为37-52 h;流式细胞仪测定EnSCs表面抗原CD29(99.13%),CD44(97.39%),CD73(99.68%),CD90(96.76%),CD105(89.64%),CD146(77.96%)呈阳性表达,而CD31(1.30%),CD34(0.68%),CD45(1.26%)呈阴性表达,有61.79%的细胞处于G0/G1期,22.37%的细胞处于S+G2/M期。结论:采用组织消化法分离单克隆贴壁的子宫内膜细胞,能够获得纯化的EnSCs。     

子宫内膜糖原代谢在胚胎着床中的作用研究进展

糖原的合成与分解可动态调节体内葡萄糖含量以维持细胞内变化的能量需求。胰岛素作为体内唯一降血糖的激素,通过作用于磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K)/蛋白激酶B (Akt)信号通路,促进葡萄糖转运体转位以促进糖原合成,也可抑制糖异生以降低血糖。而子宫内膜糖代谢有其特殊性,不发生糖异生,尚未被利用的葡萄糖均以糖原形式储存。子宫内膜的糖原代谢除受经典糖代谢激素调控外,还受卵巢激素调控。子宫内膜在着床窗口期发生的与着床有关的功能活动都需要葡萄糖供给能量。着床前子宫内膜上皮细胞内大量葡萄糖合成糖原,在着床窗口期分解为葡萄糖,以满足增加的能量需求,保证胚胎着床的顺利进行。糖尿病时子宫内膜糖原代谢受损,糖原合成或分解异常可导致胚胎着床失败、早期流产。本文就子宫内膜的糖原代谢及其在胚胎着床中的作用等方面进行综述,以期为胚胎着床的研究及不孕诊断和治疗提供新思路。     

米非司酮对大白鼠子宫内膜抗着床作用的组织化学观察

３０只雌性ＳＤ大鼠分为五组,即Ａ组（阴性对照组）,Ｂ组（孕三烯酮阳性对照组１ｍｇ／ｋｇ）,Ｃ组（米非司酮实验组,Ｃｌ１２ｍｇ／ｋｇ,Ｃ２６ｍｇ／ｋｇ,Ｃ３３ｍｇ／ｋｇ）。用组织化学方法观察米非司酮对子宫内膜一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）、琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、酸性磷酸酶（ＡＣＰ）、硷性磷酸酶（ＡＬＰ）活性和糖原含量的影响。实验结果显示：ＮＯＳ,ＳＤＨ和ＡＬＰ活性较阴性对照组弱,ＬＤＨ和ＡＣＰ活性较阴性对照组强,糖原含量略低于阴性对照组。     

着床期家兔子宫内膜糖蛋白的动态研究

本文以~3H-glucosamine(~3H-GlcNH_2)为前体,观察了着床期家兔子宫内膜糖蛋白的生物合成及分泌功能的变化,并利用Triton X-100提取膜蛋白,采用凝集素亲和电泳技术对三种不同性质糖蛋白进行了动态分析。结果表明,着床期家兔子宫内膜糖蛋白的合成与分泌功能均于妊娠第六天(D_6)明显增强,其中合成糖蛋白的变化以Triton溶解蛋白部分为主;井发现着床期WGA、RCA-Ⅰ、SBA结合蛋白均于着床前(D_6)明显增加,着床后(D_9)WGA结合蛋白略有降低,RCA-Ⅰ、SBA结合蛋白明显降低,接近未孕水平。着床期子宫内膜总体及不同种类糖蛋白的阶段特异性变化表明,在子宫内膜由对胚泡的非接受状态转变为接受态的过程中,阶段特异性糖蛋白可能具有重要作用。     

人滋养细胞表面抗原（Trop-2）在病变子宫内膜中表达的研究

摘要 目的：探讨人滋养细胞表面抗原（trophoblast cell-surface antigens2,Trop-2）在病变子宫内膜中的表达及其临床相关性。方法：采用免疫组化法检测100例正常子宫内膜或病变子宫内膜组织中Trop-2蛋白的表达,其中单纯增生子宫内膜患者26例,复杂或不典型增生子宫内膜患者34例,子宫内膜腺癌患者20例,对照组为20例增生期子宫内膜患者。结果：免疫组织化学法研究结果显示,Trop-2蛋白在正常增生子宫内膜和单纯性增生子宫内膜中几乎不表达,在复杂或不典型增生子宫内膜组织中以及子宫内膜腺癌呈阳性表达。主要分布在细胞膜上,阳性率分别为35.29 %和65.00 %,经过对比子宫内膜癌组的阳性表达率显著高于复杂型或伴不典型增生子宫内膜组的阳性表达率（P<0.05）,且复杂型或伴不典型增生子宫内膜组的阳性表达率显著高于单纯性增生子宫内膜组（P<0.05）,其表达水平随内膜病变程度的加重而升高,呈正相关关系（P＜0.05）。结论：Trop-2蛋白在子宫内膜病变中的表达与其严重程度一致,可反映子宫内膜病变的发生发展,或可作为判断其严重程度的指标。     

人子宫内膜异位症裸鼠模型的建立

目的建立人子宫内膜异位症裸鼠模型。方法通过开腹手术方法将人子宫内膜组织块种植于裸鼠盆腹腔,观察其生长情况,并进行病理检查。结果成功建立人子宫内膜异位症裸鼠模型,种植病灶能保持原有内膜组织的形态结构,并可见血管生成明显。结论子宫内膜异位症裸鼠模型的建立是子宫内膜异位症早期临床研究的理想模型。     

沙眼衣原体感染对大鼠着床期间子宫内膜E-cadherin的影响

目的 研究沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis,CT）感染后大鼠着床期间子宫内膜上皮钙粘蛋白（E-cad-herin,E-cad）的变化。方法 大鼠雌雄合笼建立早孕模型,取正常和CT感染后妊娠4-7d的子宫组织,免疫组化SP法检测E-cad的表达。结果 正常和感染后妊娠组E-cad的表达均存在先上升后下降的趋势,表达峰值均在妊娠第6d,CT感染组低于正常组,且存在显著性差异（P〈0.05）;其表达部位在子宫内膜上皮细胞的胞膜或/和胞浆,蜕膜细胞无或少量表达。结论 沙眼衣原体感染后可能通过影响子宫内膜黏附分子E-cad的表达,破坏子宫内膜微环境,进而干扰早期妊娠。     

子宫内膜异位症与子宫内膜息肉发病机制的相关性研究进展

子宫内膜异位症(endometriosis,EMT)和子宫内膜息肉(endometrial polyp,EP)是两类常见的良性妇科疾病,以子宫内膜组织的异常种植或增生为主要病理特征。流行病学数据显示,EMT患者的EP发生率攀升,EP患者合并EMT的风险也增加,提示二者可能存在密切关系与潜在的关联机制。尽管EMT和EP的发病机制尚未完全明确,但近年研究表明,EMT和EP的发生可能与长期高水平雌激素刺激、雌激素受体与孕激素受体表达失衡、细胞凋亡与增殖异常、细胞因子的表达、局部慢性炎症刺激、免疫系统失调、氧化应激、微生物群紊乱、代谢异常等因素有关。两者共有多种危险因素,可能参与彼此的疾病进程,从而在临床治疗上显示出消极的相互作用。本文通过对EMT和EP发病机制的相关性进行综述,为二者的基础研究和临床治疗提供更多理论依据。     

小鼠胚泡黏附时子宫内膜nm23-M1／NDPK A的表达

nm23家族除与肿瘤转移抑制有关,它还参与调节正常细胞的发育、增殖、分化及凋亡等过程。运用RT-PCR、Western blot和免疫组织化学技术,分析小鼠胚泡黏附时子宫内膜着床点和着床旁组织nm23-M1／NDPK A的表达,以未交配鼠作对照,为进一步阐明胚泡着床的机制提供有意义的实验依据。RT-pCR结果显示,小鼠胚泡黏附时子宫内膜nm23-M1／NDPK A mRNA表达明显高于对照组,并且着床点明显高于着床旁,Western blot和免疫组织化学分析nm23-M1／NDPK A蛋白表达,也得到一致的结果。提示nm23-M1／NDPK A参与胚泡着床这一重要生命活动过程。     

人子宫内膜纤蛋白溶酶元激活因子及其抑制因子...

Two types of plasminogen activator (PAs) are present in human endometrium, and their contents vary with the different phases of menstrual cycle, i.e. high in the proliferative phase and low in the secretory phase. In the present study by immunohistochemical technique, both uPA and tPA antigens were demonstrated in the stromal and glandular cells of the endometrium. In cell culture, tPA was released only from stromal cells and uPA only from glandular cells as determined by SDS-PAGE followed by fibrin overlay technique, but PA inhibitor type-1 (PAI-1) was secreted by both stromal and glandular cells. Furthermore, secretion of PAs from endometrial cells was enhanced by adding estradiol and markedly inhibited by progesterone in a dose dependent manner, while the PAI reacted just in the opposite way. The effect of the peptide hormones, hCG, GnRH, PRL, as well as cAMP in cell culture on the secretion of PAs and PAI was similar to that of estradiol, while forskolin demonstrated definitely more stimulative effect on tPA than uPA. Taking into account of the finding of the present study, it appears that, under hormonal control, a balance between PAs and PAI in the endometrium exists. The physiological roles of the PAs and PAI in the endometrium were discussed.