软骨基质来源定向结构支架复合软骨细胞体外构建组织工程软骨的研究

目的：探讨采用软骨细胞外基质材料制备的定向结构软骨支架复合软骨细胞,在体外静态培养条件下生成组织工程软骨的可能性。方法：制备牛关节软骨细胞外基质材料,利用温度梯度热诱导相分离技术构建具备垂直定向孔道结构的软骨支架,同时采用传统冷冻干燥方法制备非定向支架,检测两组支架的力学性能;提取兔关节软骨细胞,分别接种两组支架,体外静态培养2周及4周后取材,对构建的组织工程软骨进行组织切片染色、生物化学分析及生物力学检测。结果：定向软骨支架的压缩弹性模量数值明显高于非定向软骨支架,体外培养时定向支架上种子细胞在3-9d内增殖高于非定向支架,差异有统计学意义（P〈0．05）;体外静态培养4周后形成的两组新生组织工程软骨进行软骨特异性染色均呈阳性,在定向组新生软骨切片中在垂直方向上可见大量呈规则平行排列的粗大胶原纤维,两组新生软骨的生物化学检测包括总DNA、总GAG及总胶原含量差异无统计学意义（P〉0．05）。定向组织工程软骨压缩弹性模量在2周及4周时均高于非定向组织工程软骨,差异有统计学意义（P〈0．05）。但两组组织工程软骨上述指标均显著低于正常关节软骨（P〈0．05）。结论：软骨细胞外基质材料制备的定向结构软骨支架复合软骨细胞,在体外静态培养条件下能够成功生成具有定向纤维结构的组织工程软骨,并可以有效促进新生软骨组织力学性能的提升,在软骨组织工程中具有良好的应用前景。     

自由基与软骨基质胶原蛋白类型改变

本文利用ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,定量研究了体外培养的软骨细胞和软骨组织基质中Ⅱ型胶原蛋白的含量。结果表明氧自由基（·Ｏ－２和·ＯＨ）和具有自由基性质的物质（黄腐酸,镰刀菌毒素）可使软骨细胞合成,分泌异常的非Ⅱ型的胶原蛋白,同时,硒化合物可明显地抑制此种效应。     

细胞外基质力学性质对实体肿瘤血管生成影响的数值模拟

考虑细胞外基质ECM力学性质对实体肿瘤血管生成的影响,数值模拟肿瘤内外血管网络。将肿瘤外正常组织ECM和肿瘤组织ECM均设为线弹性体,考虑内皮细胞的扩散运动、对肿瘤血管生成因子TAF的趋化性响应、对粘连蛋白FIN趋触性响应以及对流运动,进行数值模拟。计算结果表明模型能够获得较为真实的分层毛细血管网络。     

运动负荷对骨基质有机成分的影响及其可能机制

骨基质的有机成分主要为骨Ⅰ型胶原基质金属蛋白酶,该酶是细胞外基质降解的重要酶类;基质金属蛋白酶抑制因子则是基质金属蛋白酶活性的抑制剂,它们均为骨代谢过程中的重要标志性物质。本文通过查阅文献资料,对生理、部分病理状态及运动干预条件下,骨基质的Ⅰ型胶原和基质金属蛋白酶及其抑制因子的变化情况进行综述,并对其变化的机制予以阐释。     

基质力学微环境对血管平滑肌细胞功能的影响

血管平滑肌细胞是血管壁中的主要细胞类型,处于复杂的基质微环境中.微环境中的力学因素(包括基质刚度、基质微纳拓扑结构以及基质对细胞的几何约束等)可影响平滑肌细胞表型与功能.平滑肌细胞通过特定的机械力感受器感知基质微环境中的机械力刺激,并将机械信号转化为生物化学信号,调控下游基因表达与活性,从而影响平滑肌细胞的各种行为.血...     

特殊理化微环境的构建及其在生物医学领域的应用

生物医学领域中的微环境是指在实质细胞周围参与组织细胞生理及病理过程的微小特殊区域,它对于调控细胞的运动、增殖、分化、分泌及代谢功能具有重要作用。本文在介绍体内微环境及其组成的基础上,重点阐述了体外微环境构建技术及其在生物医学领域的应用,展望了微环境生理作用机制研究的发展趋势。     

基质力学对肿瘤发生发展及肿瘤细胞生物学行为影响的研究进展

实体瘤的发生发展常伴随着细胞外基质的异常沉积、交联和基质刚度增加.基质刚度增加和肿瘤细胞软化引起肿瘤微环境的力学异质性.基质力学通过影响肿瘤细胞的增殖、迁移、转移、上皮间质转换、肿瘤干细胞特性和耐药性等调控肿瘤的发生、恶性转变和转移.研究基质力学对肿瘤发生发展的影响不仅可深化对肿瘤发展的认识,也可为研究新的诊治方法提供理论基础.本文论述了细胞外基质力学特性对肿瘤发生发展及肿瘤细胞生物学行为影响的研究进展,并展望了其发展前景.     

细胞外基质对体外培养心肌细胞铺展作用的影响

本研究用分离的新生大鼠心肌细胞,观察不同的细胞外基质,在培养不同时间对心肌细胞铺展的影响。结果表明,不同的细胞外基质影响心肌细胞铺展,在培养8小时即出现差别,48小时差异明显,其中FN促进心肌细胞铺展,而FN的片段延缓心肌细胞的铺展。     

低浓度戊二醛对红细胞膜力学特性的影响

采用显微动态图像分析技术无扰、实时、在位地研究了低于0．005％浓度的戊二醛对年轻、老龄红细胞膜变形能力的作用．实验结果表明随着戊二醛浓度的增加,年轻、老龄红细胞膜的弯曲弹性模量明显变大,而老龄红细胞增加幅度更大;且随着戊二醛固定时间的延长,年轻、老龄红细胞膜变形能力的差距越来越大．说明作为免疫分析中常用固定剂的戊二醛对年轻、老龄红细胞细胞骨架的影响差异较大。研究结果可为适当选取在免疫分析测定中,以及以年轻红细胞作为药物载体时需采用的戊二醛浓度提供依据。     

激光辐照对绵羊精子代谢和体外获能的影响

本文采用He—Ne激光处理绵羊精液,通过测试精于超弱化学发光强度、TST染色,以了解精子代谢的变化,观察精子顶体反应的发生情况,进一步从受精学角度了解激光的辐照效应。     

硬脑膜细胞体外培养模型的建立

目的：建立兔硬脑膜缺损的体外培养模型,观察不同细胞外基质对其愈合过程的影响,研究硬脑膜修复的机制,为以后检测硬脑膜移植物提供理论基础。方法：兔硬脑膜体外培养,再用免疫细胞化学方法和扫描电镜进行观察。结果：预先铺过胶原的培养板中培养8～10d后有细胞从硬脑膜缺损的边缘逸出、增殖,13～15d硬脑膜缺损愈合;而以多聚赖氨酸及层粘连蛋白铺底的培养板中没有看到细胞逸出的现象。硬脑膜细胞对波形蛋白抗体呈强阳性反应,对第Ⅶ因子抗体则为阴性反应;在电镜下可以看到新生胶原的生成。结论：成功建立一种硬脑膜缺损的体外培养模型;成纤维细胞从硬脑膜创缘的逸出、增殖是硬脑膜缺损愈合的重要机制。     

家畜类腔前卵泡体外分离方法及其影响因素研究进展

回顾腔前卵泡体外分离方法的研究历史,着重论述牛、羊、猪等家畜的腔前卵泡体外分离方法及其影响因素,以期为建立一种更为有效的分离方法提供理论基础.     

碱性成纤维生长因子（bFGF）对软骨生物学的影响

bFGF的生物学作用极其广泛,特别在促进创伤愈合与组织修复、组织再生起着十分重要的作用,它作为重要的有丝分裂促进因子,可传递发育的信号促进软骨细胞分裂,同时也是软骨细胞形态发生和分化的诱导因子,参与软骨的生长发育和组织损伤修复过程,特别是在软骨细胞的增殖分化起到重要作用,在解决软骨工程中面临的问题以及治疗骨关节炎等研究中具有的参考意义。本文对bFGF对软骨的分化、增殖、凋亡等不同生物学阶段的影响作用做一个综述。     

碱性成纤维生长因子(bFGF)对软骨生物学的影响

bFGF的生物学作用极其广泛,特别在促进创伤愈合与组织修复、组织再生起着十分重要的作用,它作为重要的有丝分裂促进因子,可传递发育的信号促进软骨细胞分裂,同时也是软骨细胞形态发生和分化的诱导因子,参与软骨的生长发育和组织损伤修复过程,特别是在软骨细胞的增殖分化起到重要作用,在解决软骨工程中面临的问题以及治疗骨关节炎等研究中具有的参考意义。本文对bFGF对软骨的分化、增殖、凋亡等不同生物学阶段的影响作用做一个综述。     

三种猪源性细胞外基质体内降解规律的实验研究

目的:研究本实验以小鼠腹壁缺损为模型,通过对三种猪源性细胞外基质(ECM)—猪脱细胞小肠粘膜下层(P-SIS)、猪脱细胞心包(P-PC)以及猪脱细胞真皮(P-ADM),进行体内弹性纤维和葡糖氨基聚糖类(GAGs)的含量测定,然后通过三组材料中弹性纤维和GAGs在术后第4周、第8周时再生或降解的数量,来对比研究三种生物材料植入体内后的降解规律,从而为寻找性能优良的生物补片提供理论依据,为生物补片的临床应用以及避免术后并发症方面提供指导方向。方法:BALB/c小鼠60只,体重18~20 g,手术造成1 cm×1 cm的腹壁全层缺损,随机分为3组(n=20),分别以等面积的P-ADM、P-PC以及P-SIS进行修复,于术后4周、8周进行取材评估。结果:术后P-SIS组的腹腔内粘连评分均低于同时期内的其余两组。术后4、8周比较:P-ADM组,GAGs含量减少(P0.01);P-PC组,弹性纤维(P0.01)、GAGs(P0.05)含量均有所增加;P-SIS组,弹性纤维(P0.001)、GAGs(P0.05)含量均增加。结论:P-SIS材料中,弹性纤维和GAGs的再生状况优于其他两组,且P-SIS材料不易引起腹腔内粘连,故P-SIS能够更好的应用于组织缺损的治疗,P-SIS在组织工程学领域相对而言是更加理想的修复材料。     

体外培养成骨细胞的影响因素

成骨细胞是骨形成和骨代谢的核心部分,成骨细胞体外培养是研究骨代谢和成骨机制的重要手段。本从物理因素,微量元素,生长因子和激素等四个方面综述了体外培养成骨细胞的影响因素,以期有助于研究有效的体外培养成骨细胞的方法应用于组织工程学的研究。     

软骨复合物对小鼠类风湿性关节炎的预防作用

目的观察口服软骨复合物对类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis,RA）的预防作用。方法口服软骨复合物两周后,再注射弗氏完全佐剂（Freund’s complete adjuvant,FCA）诱发小鼠RA模型,通过观察小鼠关节炎分数的变化,测定小鼠各器官的指数,检测小鼠血清中一氧化氮（nitric oxide,NO）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平以及关节组织病理学的变化来评价口服软骨复合物对类风湿性关节炎的预防作用。结果软骨复合物能较有效的改善关节的肿胀度,并显著地提高小鼠的胸腺指数（P〈0．01）,显著地提高脾指数（P〈0．05）,明显降低NO和TNF-α水平;组织病理学显示给药组关节的变形破坏得到减轻。结论软骨复合物能有效地起到预防佐剂性关节炎的作用,然而其治疗作用还有待进一步研究。     

卵泡内环境对猪卵泡卵体外成熟和发育的影响

研究卵泡内环境对猪卵母细胞体外成熟、受精及受精卵体外发育的影响。主要结果如下：直径≥5mm、4－4.9mm、3－3.9mm和2－2.9mm的卵泡卵母细胞体外成熟率分别为90.5%、89.7%、85.4%和67.4%,体外受精后,卵母细胞的发育能力随卵泡直径的增大而增强,直径≥5mm和4－4.9mm卵泡卵的2－细胞、3－4－细胞发育率显著高于直径2－2.9mm的卵泡卵（P＜0.05或0.01）。体外成熟培养36h、42h和48h,直径2－2.9mm卵泡卵的体外成熟率,体外受精后的卵裂率差异不显著（P＞0.05）。在体外成熟培养液中添加5％或15％的不同直径卵泡的卵泡液,各组间卵母细胞的体外成熟率,受精卵的体外发育率均无显著差异,结果表明：卵泡大小对猪卵母细胞体外成熟、受精及受精卵体外发育有重要影响。     

机械拉伸对骨髓间充质干细胞迁移行为的影响

目的:研究机械拉伸刺激对大鼠骨髓间充质干细胞迁移行为的影响并探讨其相关分子机制。方法:应用单轴机械拉伸加载装置考察不同条件的周期拉伸刺激对大鼠骨髓间充质干细胞迁移行为的影响,采用Transwell和划痕法评价细胞迁移能力,采用明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶-2,-9(MMP-2,-9)表达的变化。结果:适宜的拉伸刺激可以明显促进大鼠骨髓间充质干细胞的迁移能力,1 Hz、10%应变拉伸8 h后可以使细胞迁移数量增加到对照组的1.58倍。拉伸刺激诱导骨髓间充质干细胞基质金属蛋白酶-2,-9(MMP-2,-9)表达。抑制剂GM6001抑制了拉伸诱导的MMP-2,-9分泌增加,同时抑制了拉伸刺激对细胞迁移的促进作用。结论:机械拉伸刺激影响大鼠骨髓间充质干细胞的迁移行为,MMP-2,-9在此过程中可能起着重要介导作用。