蛇足石杉内生真菌g5的乙酰胆碱酯酶抑制活性初步研究

为了初步研究蛇足石杉内生真菌g5发酵产物的乙酰胆碱酯酶(ACHE)抑制动力学以及对该株真菌做初步形态学鉴定,采用DTNB显色法检测g5发酵液醇提物抑制AChE活性的效果,并采用玻片培养法进行真菌鉴定.结果发现g5菌株属于半知菌目丛梗孢科青霉属;其发酵液醇提物对AChE的抑制作用表现为混合竞争型可逆抑制,其对游离酶的抑制常数KI>与对酶底物络合物的抑制常数KIS>分别为0.0789mL和1.1352mL,因此g5菌株代谢产物可作为开发AChE抑制剂类药物的潜在资源.     

蒙古栎根内及根围土壤中共生真菌和细菌群落组成分析

为探究中国东北地区森林根系和根围土壤中共生真菌的分布状况,分析了黑龙江省五大连池市蒙古栎Quercus mongolica纯林中根内及根围土壤中共生真菌和细菌群落的组成。结果表明,根内真菌的1 295个OTUs中有209个OTUs为共生真菌,隶属于36属,相对丰度25.46%;根围土壤真菌1 513个OTUs中有285个OTUs为共生真菌,隶属于40属,相对丰度59.91%;根内与根围土壤共同拥有共生真菌33属,根内特有3属,根围土壤特有7属。其中,外生菌根真菌为根内和根围土壤中共生真菌的主要类群,分别占共生真菌的98.82%和99.80%。定殖根内的细菌共获得5 550个OTUs,隶属于400属;根围土壤细菌获得8 406个OTUs,隶属于436属,根内细菌群落的Shannon指数和Chao1指数均低于根围土壤的。PICRUSt功能预测分析结果表明,根内的信号转导通路与信号分子和相互作用通路（包括CAM配体、ECM-受体相互作用等通路）的丰度低于根围土壤,而膜运输通路与信号分子和相互作用通路（包括细菌毒素、细胞抗原等通路）的丰度高于根围土壤。根内与根围土壤中菌根辅助细菌组成差异分析结果表明,除慢生根瘤菌属 Bradyrhizobium外,根内其余9属的相对丰度均高于根围土壤,尤其假单胞菌属 Pseudomonas的相对丰度远高于根围土壤。     

Unveiling the origin of Quercus serrata subsp. mongolicoides found in Honshu,Japan, by using genetic and morphological analyses

Quercus mongolica is a tree found in temperate deciduous forests in east Asia. In Japan, Q. mongolica var. crispula is commonly found; moreover, an oak whose morphology is similar to that of Q. mongolica var. mongolica of the Asian continent has been found in certain areas of Honshu and Hokkaido. Recently, the oak found in Honshu was described as Q. serrata subsp. mongolicoides (QSM). However, genetic comparison between this oak and Q. mongolica var. mongolica of the Asian continent has not been performed; the origin of QSM is thus unknown. Therefore, we aimed to determine the origin of QSM by conducting nuclear microsatellite (nSSR), chloroplast DNA (cpDNA) and leaf morphology analyses for the three taxa, as well as other congeners. The cpDNA variation overlapped among the three taxa, suggesting low discrimination ability for these taxa. Although morphological congruency was found between QSM and Q. mongolica var. mongolica, results of nSSR analyses showed that QSM contained a genetic admixture of Q. mongolica var. mongolica of the Asian continent and Q. mongolica var. crispula of Japan, bolstering an admixture hypothesis. The nSSR and cpDNA analyses suggested that Q. mongolica var. crispula can be the progenitor of Q. mongolica var. mongolica and harbors the ancestral cpDNA haplotypes. Therefore, we concluded that QSM might have been created by an admixture that likely occurred within Japan between Q. mongolica var. crispula and putative relict Q. mongolica var. mongolica, which might have diverged in or around Japan from Q. mongolica var. crispula during the late Pleistocene.     

千层塔内生真菌的分离与鉴定

目的：为从千层塔中分离具有药用价值的内生真菌奠定基础。方法：新鲜千层塔茎段,经酒精和升汞消毒后,接种于PDA平板培养基上进行内生真菌的分离、纯化;根据菌落形态和孢子等形态特征,结合核糖体基因居间序列（ITS序列）进行菌株鉴定。结果：从千层塔的茎中分离出4株内生真菌。内生真菌I菌落形态和孢子特征与枝状枝孢霉属的特征相符合,ITS序列与GenBank中多条属于枝状枝孢霉的ITS序列相似,鉴定该菌株属于枝状枝孢霉;内生真菌II菌落形态和孢子特征与黄青霉的特征相符合,鉴定该菌株属于黄青霉;内生真菌III菌落形态和孢子特征与尖孢镰刀菌的特征相符合,ITS序列与GenBank中多条属于尖孢镰刀菌的ITS序列相似程度高,鉴定该菌株属于尖孢镰刀菌;内生真菌Ⅳ菌落形态与盾壳霉相似,ITS序列与GenBank中6条属于盾壳霉的ITS序列具有较高的相似性,鉴定该菌株属于盾壳霉。结论：从千层塔中分离和鉴定出4株内生真菌,分别属于枝状枝孢霉、黄青霉、尖孢镰刀茵和盾壳霉。     

不同地点蒙古栎群落相似性的研究

通过１３个地点蒙古栎群落物种相似性与两地之间距离的回归比较,发现蒙古栎群落物种相似性的大小一般决定于不同地点之间的地理位置,两地之间距离越近,其相似性越高,反之则越低,但是群落不同的演替阶段也影响群落的相似性。通过分析蒙古栎群落物种组成的差异及物种相似性系数的比较,蒙古栎群落可分为大兴安岭蒙古栎群落、长白山蒙古栎群落、辽西蒙古栎群落和辽冀蒙古栎群落等几种类型。     

四种植物内生真菌的分离及其抗肿瘤活性的筛选

从银杏、合欢、臭椿和苦楝的树皮中分离到61株内生真菌。MTT法检测显示在45.9%的菌株发酵液粗提物在200 μg/mL时对人食道癌细胞EC109的生长抑制率大于50%。其中6株内生真菌(YX5, YX17, YX36, KL1, CC1, CC5)在50 μg/mL时仍具有较高的细胞毒活性, 且活性成分主要分布在菌株的发酵液中。合欢内生真菌中的活性菌株比例最小, 在50 μg/mL时均未显示任何对EC109细胞的抑制作用。银杏中的高活性菌株比例最大, 占银杏内生真菌的15.8%。银杏分离菌株YX5的活性最为突出, 其发酵液粗提物对3种肿瘤细胞EC109, HONE1和HeLa的抑制率IC50分别是18.3 μg/mL、3.6 μg/mL和6.5 μg/mL。研究结果表明, 作为抗肿瘤药物的潜在来源银杏内生真菌值得关注。     

蒙古栎次生林的生长更新与林下植被多样性对林分密度的响应

以辽宁省抚顺市清源县蒙古栎天然次生林为对象,在2018年对6块面积为0.1 hm²的蒙古栎样地进行疏伐,并于2020年调查样地内植被的生长情况,研究疏伐后形成的600(低密度)、720(中密度)、900株·hm^-2(高密度)3种密度对林木生长、林下实生苗更新与林下植被多样性的影响。结果表明: 由于疏伐后间隔年份较短,不同密度下树高、胸径无显著差异。但低密度下林冠对称指数显著高于高密度,表明树冠生长对于林分密度的响应比树干生长更迅速。中密度下实生更新苗数量最多,且相同苗高的实生苗地径显著高于其他两个密度,中密度下实生苗更新与幼苗生长都好于高、低密度。林中共有植物70种,隶属于41科67属,其中木本植物蒙古栎、胡枝子与草本植物山罗花、三叶委陵菜占优势地位。灌木层与草本层的优势度指数、均匀度指数和多样性指数在中密度下表现最佳,表明该立地条件下林分密度保持在720株·hm^-2时更有助于辽东山区蒙古栎次生林的可持续发展。     

Isolation and characterization of microsatellite loci from Quercus mongolica var. crispula

Microsatellites were isolated and characterized for the Japanese oak species, Quercus mongolica var. crispula, distributed in temperate deciduous forests of Japan. Eleven of the 48 primer pairs designed successfully amplified unambiguous and polymorphic single loci among 67 Q. mongolica var. crispula individuals within a plot in southwestern Japan. The observed and expected heterozygosities of the 11 microsatellite markers ranged from 0.522 to 0.896 and from 0.536 to 0.882, respectively. These polymorphic microsatellite markers are useful for estimating pollen‐mediated gene flow in Q. mongolica var. crispula.     

蒙古栎伴生种及邻体物种多样性的研究

采用点样地法对四个地点蒙古栎树种的邻体多样性进行了研究,结果表明,随着调查样点数的增加,蒙古栎邻体的物种丰富度和Shannon -Wiener(H′）物种多样性指数逐渐增加,最后趋于一固定值。用物种共同出现百分率测定了蒙古栎与其伴生种的种间联结值（PC值）,并引入LS值来测定单株蒙古栎相邻物种的平均个体数目,结果发现,不同地点蒙古栎邻体多样性不同,其相邻乔木和灌木种类也有较大差异,联结系数各有高低,比较PC值的大小,得出了蒙古栎的主要伴生乔木和主要伴生灌木物种（结构和组成）。物种（乔木和灌木）与蒙古栎伴生的原因主要是相似的环境需求和互惠互利,说明蒙古栎处在不同的群落演替阶段。     

内生真菌与两种兜兰共培养过程中的相互作用

由硬叶兜兰（Paphiopedilum micranthum）和杏黄兜兰（P.armeniacum）根中分别分离得到瘤菌根菌属（Epulorhiza）真菌PM 1和美孢胶膜菌（Tulasnella calospora）PA 1。在DE培养基上,PM 1分别与硬叶兜兰和杏黄兜兰共培养,两种兜兰接菌苗的生物量以及Ca、Mn元素含量比对照组显著增加,表明PM 1能促进两种兜兰生长;PA 1对两种兜兰生长的影响不显著,但从干物重增长的百分率来看,PA 1对杏黄兜兰有一定的促进作用。PM 1对硬叶兜兰的影响高于杏黄兜兰,PA 1对杏黄兜兰的影响高于硬叶兜兰,表明真菌对宿主植物生长的促进作用更强。PM 1和PA 1在Harvais培养基上与杏黄兜兰共培养,两种真菌均对杏黄兜兰幼苗产生不利影响。结果表明,不同培养基养分水平能显著影响内生真菌与杏黄兜兰的共生关系,营养相对贫瘠的DE培养基有利于两者共生,而营养丰富的Harvais培养基不利于共生。     

一株拮抗真菌的蛇足石杉内生细菌分离鉴定及培养条件优化

从蛇足石杉(Huperzia serrata)叶片中分离到一株对小麦赤霉(Fusarium graminearum)等多种植物病原真菌有强拮抗作用的内生细菌H-6。通过形态和培养特性观察、生理生化实验及16S rDNA序列分析, 初步鉴定该菌属于伯克霍尔德属, 命名为Burkholderia sp. H-6。同时还对该菌培养条件进行了优化, 得出马铃薯浸出液中添加2.5%的甘露醇和0.1% NaNO3有利于细胞生长和抑菌活性的产生, 最适培养温度为28℃, 最佳初始pH4.0。     

一株拮抗真菌的蛇足石杉内生细菌分离鉴定及培养条件优化

从蛇足石杉(Huperzia serrata)叶片中分离到一株对小麦赤霉(Fusarium graminearum)等多种植物病原真菌有强拮抗作用的内生细菌 H-6.通过形态和培养特性观察、生理生化实验及 16S rDNA 序列分析,初步鉴定该茵属于伯克霍尔德属,命名为 Burkholderia sp.H-6.同时还对该菌培养条件进行了优化,得出马铃薯浸出液中添加 2.5%的甘露醇和 0.1% NaNO3 有利于细胞生长和抑菌活性的产生,最适培养温度为 28℃.最佳初始 pH4.0.     

Interaction between Endophytic Fungi and Seedlings of Two Species of Paphiopedilum during Symbiotic Culture

Two fungi PM 1 and PA 1 were isolated from P.micranthum and P.armeniacum, respectively, the former belonged to Epulorhiza while the latter belonged to Tulasnella calospora. In this study, seedlings of P.armeniacum and P.micranthum were inoculated with PM 1 on DE medium, the biomass and the content of Ca, Mn of both P.armeniacum and P.micranthum seedlings were higher than those in the control seedlings, which indicated that PM 1 could improve the growth of those species. Seedlings of P.armeniacum and P.micranthum were inoculated with PA 1 on DE medium, the biomass in both species was no difference with those in the control ones. But PA 1 enhanced the dry weight of P.armeniacum according to the rate of dry weight increase. The impact of PM 1 on P.micranthum was higher than on P.armeniacum, while PA 1 impacted conversely, which demonstrated that fungi had stronger improving effect only on its own host plants instead of any other orchids. P.armeniacum seedlings wereinoculated with PM 1 and PA 1 on Harvais medium. The growth of seedlings was inhibited by fungi. The results indicated that nutrient level of medium played an important role in affecting the symbiotic relationship between P.armeniacum seedings and endophytic fungi. Poor nutrient medium was beneficial to the symbiotic relationship and nutrient rich medium was not conducive to the symbiosis.     

红花尔基不同龄级天然樟子松外生菌根真菌群落结构特征

红花尔基被誉为樟子松Pinus sylvestris var. mongolica的故乡,樟子松是我国北方主要的造林树种之一,也是典型的菌根依赖型树种。研究樟子松根围外生菌根真菌（ectomycorrhizal fungi,ECMF）群落结构特征对红花尔基沙地樟子松生态系统的保护具有重要意义。本研究以红花尔基天然樟子松根围土壤为研究对象,采用Illumina MiSeq测序技术研究了4个龄级（<10、11-20、21-30和31-40年,分别称作Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ龄级）天然樟子松根围土壤ECMF群落结构特征。结果表明：（1）测序共获得87 516条ECMF序列,划分为177个OTUs（operational taxonomic units,OTU）,隶属于2个门,4个纲,12个目,26个科,43个属。（2）Ⅳ龄级中Ace丰富度指数和Shannon-Wiener多样性指数均显著高于Ⅰ龄级（P<0.05）。（3）不同龄级根围ECMF优势属占比不同,Ⅰ龄级中占比最大的为Inocybe（42.55%）;Ⅱ和Ⅲ龄级中占比最大的均为Tricholoma,分别为31.64%和27.69%;Ⅳ龄级中占比最大的为Cortinarius（28.80%）。（4）冗余分析表明,土壤pH值对ECMF的影响程度最大,其次为速效钾和碱解氮;同时,不同理化因子对群落中优势属的影响也存在差异。     

蒙古栎次生林群落结构及优势种群点格局分析

为探求大小兴安岭过渡区物种共存、生物多样性保护与维持机制,以黑龙江中央站黑嘴松鸡国家级自然保护区蒙古栎天然次生林25 hm²固定样地调查数据为基础,从群落物种组成、结构特征、径级结构以及优势种群的空间点格局分析对该样地进行分析。结果表明：样地内共有胸径≥1 cm的维管植物10种,活立木共 34 778株,平均密度1 392株·hm^-2。其中,重要值大于10%的物种共计4种,依次为蒙古栎（Quercus mongolica Fisch.ex Ledeb.）、黑桦（Betula dahurica Pall.）、白桦（Betula platyphylla Suk.）、兴安落叶松（Larix gmelinii（Rupr.）Kuzen）,占全样地的89.65%。该样地的Shannon-Wiener多样性H′、Simpson多样性D、Pielou均匀度指数J分别为1.577、0.760、0.685。表明该群落稀有物种较少,常见种比例较大,群落结构较为简单。样地内所有树种平均胸径10.77 cm。群落内总径级分布呈“倒J型”,符合典型异龄林的分布特征。黑桦、白桦径级分布近似“倒J型”,属于增长种群,蒙古栎种群径级结构为双峰型。兴安落叶松种群径级近似正态分布,有随演替进行逐渐消失的趋势,属于该群落的衰退种。在CSR模型下,4种优势种群的空间格局主要表现为聚集分布,且聚集程度随尺度增加聚集程度减弱,最终呈现随机或均匀分布趋势。在NS模型下,除兴安落叶松外,其余3种植株在小尺度（0~5 m）表现聚集性,可能是受种子的扩散限制的影响。对比4种优势种群,聚集强度表现为黑桦＞白桦＞蒙古栎＞兴安落叶松,因此我们推断群落内不同种群的聚集强度不仅与研究尺度相关,与种群的多度也存在一定的相关关系。     

白花泡桐内生真菌的分离鉴定及抗菌活性筛选

从白花泡桐根、茎、叶中分离出19株内生真菌,对分离出的真菌分别利用琼脂块法和纸片扩散法进行初选和复选,通过形态学特征观察和rRNA基因ITS序列系统发育分析对抗菌活性菌株进行鉴定。抑菌试验结果显示JSD-8、JM-1和JM-10等3株内生真菌对枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)CGMCC1.769、大肠杆菌(Escherichia coli)CGMCC1.1103和白色念珠菌(Candida albi-cans)ATCC10123均有一定的抗菌活性。鉴定结果表明,JSD-8、JM-1、JM-10分别属于串珠赤霉菌(Gibberella moniliformis)、长柄链格孢菌(Alternaria longipes)和托姆青霉菌(Penicilium thomii)。     

都江堰地区灌丛内袍栎橡子的捕食和搬运

从2000年9月至2002年12月,以四川都江堰常绿阔叶林灌丛内的优势种--枹栎(Quercus serrata)为研究对象,研究了昆虫、鼠类和真菌对枹栎橡子的捕食和搬运.结果表明(1)取食橡子的鼠类的群落结构和数量在年间差异较小,这可能与三年间袍栎橡子的产量相对稳定有关;(2)袍栎橡子的虫蛀率在三年间存在显著性差异,范围在14.17%-32.49%之间;(3)鼠类的就地取食和搬运是影响种子库内橡子命运的主要因素;(4)橡子虫蛀率的变化影响鼠类的觅食活动.鼠类对饱满橡子和虫蛀橡子的选择性取食和搬运可能影响许多坚果植物(栎树)的自然更新过程[动物学报50(4)535-540,2004].     

都江堰地区灌丛内迺栎橡子的捕食和搬运(英文)

从 2 0 0 0年 9月至 2 0 0 2年 1 2月 ,以四川都江堰常绿阔叶林灌丛内的优势种———栎 (Quercusserrata)为研究对象 ,研究了昆虫、鼠类和真菌对栎橡子的捕食和搬运。结果表明 :(1 )取食橡子的鼠类的群落结构和数量在年间差异较小 ,这可能与三年间栎橡子的产量相对稳定有关 ;(2 )栎橡子的虫蛀率在三年间存在显著性差异 ,范围在 1 4 1 7% - 32 4 9%之间 ;(3)鼠类的就地取食和搬运是影响种子库内橡子命运的主要因素 ;(4 )橡子虫蛀率的变化影响鼠类的觅食活动。鼠类对饱满橡子和虫蛀橡子的选择性取食和搬运可能影响许多坚果植物 (栎树 )的自然更新过程     

雾灵山蒙古栎林生物生产量的研究

雾灵山蒙古栎林生物生产量的研究王德艺蔡万波李东义冯学全（河北农业大学林学院,保定０７１０００）（雾灵山国家级自然保护区,兴隆县０６７３００）冯天杰李永宁（河北农业大学林学院,保定０７１０００）ＳｔｕｄｙｏｆＢｉｏｍａｓａｎｄＰｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆ...