耐氧双歧杆菌及其B-CW对荷瘤鼠TNF-α的体内诱导

本文采用放射免疫方法（ＲＩＡ）,检测荷Ｓ１８０肿瘤小鼠外周血中ＴＮＦ－α的含量,观察双歧杆菌（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）及其细菌壁（ＣｅｌＷａｌｓｏｆＢｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ,Ｂ－ＣＷ）的免疫调节作用,探讨其抗肿瘤机制。结果表明该菌及其Ｂ－ＣＷ均可明显地促进机体产生ＴＮＦ－α,发挥抗肿瘤作用     

肿瘤坏死因子－α（TNF－α）及白细胞介素1β（IL1－β）对胶质增生的影响及机理

本文利用小鼠大脑机械损伤模型及体外培养的胶质细胞,采用同位素渗入法观察了细胞介素及其抗体对胶质细胞增生的影响。结果表明：体外培养时ＴＮＦ－α在浓度为１０～２００ｕ／ｍｌ培养液时均能促进胶质细胞增生（Ｐ＜０．０５）,ＩＬ１－β在浓度为５～２００ｕ／ｍｌ培养液时能促进胶质细胞增生,ＴＮＦ－α＋ＩＬ１－β其促进胶质细胞增生作用更强烈,ＴＮＦ－α抗体能完全阻断ＴＮＦ－α的促增生作用,部分阻断ＴＮＦ－α＋ＩＬ１－β的促增生作用。在体实验时,ＩＬ１－β及ＴＮＦ－α的作用与离体时相似,ＩＬ１－β及ＴＮＦ－α亦能促进胶质细胞增生,二者共同作用时促细胞增生作用更强。以上结果提示,外源性ＴＮＦ－α及ＩＬ１－β能促进中枢神经损伤后胶质细胞增生且具有协同作用。     

NF—κB与TNF诱导的细胞凋亡

不同类型的细胞对于ＴＮＦ－α诱志的细胞凋亡的敏感性可以有很大差别,但是多数的细胞在同时给予蛋白质合成抑制处理时会对ＴＮＦ－α变得非常敏感。有学者认为有一个基因或一组基因在ＴＮＦ受体活化后被诱导而传导细胞凋亡信号。近期的研究表明,一种被ＴＮＦ激活的ＮＦ－κＢ转录因子在这一过程中起部分的作用。     

重组人白细胞介素—6与肿瘤坏死因子突变体融合蛋白的构建及表达

针对肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）在肿瘤治疗剂量下产生的严重毒副作用及一些肿瘤细胞上的白细胞介素－６（ＩＬ－６）受体明显增高的事实,根据ＴＮＦ结构与功能研究的最新信息,利用ＰＣＲ技术,对人ＴＮＦα基因进行了改造,并将共与ＩＬ－６成熟肽编码区ｃＤＮＡ通过人工接头进行融合,融合蛋白在大肠杆菌表达后,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析表明,分子量约为３７ｋＤ,活性检测结果证实,该融合蛋白兼具有ＴＮＦ抗肿瘤活性和结合ＩＬ     

膜结合型淋巴毒素及其LP—β亚基

淋巴毒素（ＬＴ）存在分泌型及膜结合型两种表达形式。膜型ＬＴ早由分泌型亚单位ＬＴ－α通过跨膜亚单位ＬＴ－β连续接在细胞膜上,构成一个异源三聚体结构。ＬＴ－β亚基为ＴＮＦ配体超家族成员之一,其相应的特异笥受体为ＴＮＦ受体相关蛋白（ＴＮＦＲｒｐ）,称作ＬＴ－β受体。膜型ＬＴ可能具有独特的生物学功能,特别是对正常淋巴结的发育形成可能起着重要作用。     

p38 MAPK参与LPS诱导RAW细胞TNF—α基因表达的调控

构建ＴＮＦ－α启动子驱动的荧光酶报告基因系统,研究ｐ３８ＭＡＰＫ信号转导系统对ＴＮＦ－α基因表达的影响,ＲＡＷ２６４．７细胞共转染实验发现,ＬＰＳ对ｐ３８的激活作用与其诱导ＴＮＦ－α转录活性的作用显著相关,虽然单纯转染ｐ３８未见明显诱导ＴＮＦ－α报告基因系统的转录活性。     

内皮细胞E—选择蛋白的表达及p53基因的影响

为探讨血管内皮细胞Ｅ－选择蛋白的表达及野生型ｐ５３基因对其表达的影响,采用流式细胞术及ＲＴ－ＰＣＲ法分别测定其Ｅ－选择蛋白及其ｍＲＮＡ水平。结果表明：静息状态的内皮细胞表面检测不到Ｅ－选择蛋白的表达,尽管此时细胞内存在Ｅ－选择蛋白的ｍＲＮＡ。肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）可浓度依赖性地诱导内皮细胞表达Ｅ－选择蛋白,内皮细胞表面Ｅ－选择蛋白表达的增加伴随着细胞内Ｅ－选择蛋白ｍＲＮＡ水平的升高。ＴＮＦα刺     

人类疱疹病毒6型可诱生TNF－α

用生物活性法和双抗体夹心桥联酶免疫吸附（ＥＬＩＳＡ）法检测了人类疱疹病素６型（ＨＨＶ－６）ＧＳ株和南京地方株ＣＮ５,８,１０感染的淋巴细胞培养上清中的肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）的水平,发现培养２４ｈ即可检出高水平的ＴＮＦ,４８～７２ｈ述到峰值,此后逐渐下降,与未感染耐照组比较有及其显著的差异（Ｐ＜０．００１）。ＧＳ株与地方株同诱生ＴＮＦ水平无儿著性差异（Ｐ＞０．１）,三株地方株诱生ＴＮＦ也无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。ＴＮＦ－α单抗可以完全中和培养上清中ＴＮＦ的活性,证实上清中有ＴＮＦ－α。与ＬＰＳ比较,ＨＨＶ－６诱生ＴＮＦ－α的能力要强得多。     

TNF—α—IL—1β及LPS对血管平滑肌细胞一氧化氮合酶基因表达的…

通过ＲＮＡ印迹分析和亚硝酸盐含量测定检查ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β和ＬＰＳ对大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）诱导型一氧化氮合酶基因表达及ＮＯ生成的影响,结果表明,ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β和ＬＰＳ均能显诱导ＶＳＭＣｉＳ基因表达和促进ＮＯ生成,其作用强度与浓度和作用时间有关;双因素（ＴＮＦ－α＋ＬＰＳ,ＬＰＳ＋ＩＬ－１β）对诱导ｉＮＯＳ基因表达及ＮＯ生成产生协同作用,ＰｏｌｙｍｙｘｉｎＢ和地塞米松可部分凶制     

bcl—2和IL—1和TNFα表达的调节作用初探

通过将反义ｂｃｌ－２基因转梁于Ｕ９３７细胞,建立了Ｂｃｌ－２蛋白表达受抑的Ｕ９３７细胞模型,证实了模型细胞的增殖和存活表型授课和线菌素Ｄ－结晶紫试验和ＥＬＩＳＡ检测表明模型细胞上清中ＴＮＦα的活性和含量无明显变化,小鼠胸腺细胞增殖试验表明模型细胞上清中ＩＬ－１活性升高,提示ｂｃｌ－２的表达对ＴＮＦα的表达无明显影响,但可能在一定程度上抑制了ＩＬ－１的表达或活性。     

抗氧化剂对牛主动脉内皮细胞NF—kB激活的抑制作用

利用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法考查了过氧化氢和肿瘤坏死因子诱导的ＩｋＢ－α蛋白质降解结果表明这两种物质能在相近的作用时间内诱导牛主动脉内皮细胞发生ＩｋＢ－α蛋白质降解，但是其作用其强度有明显差异。结合荧光染色技术检查ＮＦ－ｋＢ的激活即核转位情况，考查了不同抗氧化剂对全外培养的牛主动脉血管内皮细胞转录因子ＮＦ－ｋＢ激活现象的影响。结果表明吡咯烷二硫代氨基甲酸酯（ＰＤＴＣ）能够明显抑制肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－     

肿瘤坏死因子－α（TNF－α）对常见呼吸道病毒的抑制作用

用人重组肿瘤坏死因子－α（Ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ－α,ＴＮＦ－α）和人天然α干扰素（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ－α－,ＩＦＮ－α）在人胚胎肺纤维母细胞（ＨＥＦ）和Ｈｅｐ－２细胞系上对常见呼吸道病毒所致细胞病变抑制进行比较观察。病毒包括不同型别的腺病毒５株,单疱病毒Ⅰ型（ＨＳＶ－Ｉ）１株,鼻病毒１株,仙台病毒１株,ＶＳＶ１株。结果提示ＴＮＦ－α和ＩＦＮ－α均具有广谱抗病毒活性。ＴＮＦ－α的抑毒作用能被ＴＮＦ－α申抗和ＩＦＮ－β单抗完全去除,被ＩＦＮ－α单抗部分去除ＴＮＦ－α的抗病毒效应。ＴＮＦ－－α中和试验的结果提示：ＴＮＦ抗病毒活性仍为ＩＦＮ－β诱生所介导。     

重组人白细胞介素－6与肿瘤坏死因子突变体融合蛋白的构建及表达

针对肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）在肿瘤治疗剂量下产生的严重毒副作用及一些肿瘤细胞上白细胞介素－６（ＩＬ－６）受体明显增高的事实,根据ＴＮＦ结构与功能研究的最新信息,利用ＰＣＲ技术,对人ＴＮＦα基因进行了改造,并将其与人ＩＬ－６成熟肽编码区ｃＤＮＡ通过人工接头进行融合。融合蛋白在大肠杆菌中表达后,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析表明,分子量约为３７ｋＤ;活性检测结果证实,该融合蛋白兼具有ＴＮＦ抗肿瘤活性和结合ＩＬ－６受体的能力,在高表达ＩＬ－６受体的人骨髓瘤细胞上测得的细胞毒活性较同样位点突变的ＴＮＦ高约３倍。     

TNF—α在PMA和IFN—γ诱导U937细胞生长和分化过程中的作用

本文报道了佛波酯（ＰＭＡ）和γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）对Ｕ９３７细胞生长和分化的调控作用及其机制。ＰＭＡ和ＩＦＮ－γ能以剂量依赖的方式诱导Ｕ９３７细胞向成熟单核／巨噬细胞样细胞分化,同时抑制其细胞的生长。实验发现ＰＭＡ和ＩＦＮ－γ可诱导Ｕ９３７细胞表达ＴＮＦ－α特异性ｍＲＮＡ和蛋白质。Ｕ９３７细胞培养中加入特异性抗ＴＮＦ－α抗体可以抑制ＰＭＡ和ＩＦＮ－γ诱导Ｕ９３７细胞的分化和生长。这说明内源性的Ｔ     

4—1BB及其配体的分子生物学研究进展

４－１ＢＢ是激活的Ｔ淋巴细胞表面抗原,属神经生长因子受体（ＮＧＦ－Ｒ）／肿瘤坏死因子受体（ＴＮＦ－Ｒ）家族,４－１ＢＢ通过与其相应配体（４－１ＢＢ－Ｌ）结合,不仅能调节Ｔ淋巴细胞的激活和生长,而且还能促进抗μ激活的Ｂ淋巴细胞的增殖。抗４－１ＢＢ抗体能诱导Ｔ淋巴细胞增殖,其抗肿瘤作用比抗ＣＤ２８单抗和抗ＣＴＬＡ４单抗作用更强,以４－１ＢＢ为基础的免疫基因治疗有望成为临床治疗某些低免疫原性肿瘤的有效策     

细胞信号转导分子在TNF—α诱导c—jun基因表达中的作用

前期研究表明ｐ３８丝裂原活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）通过磷酸化心肌细胞增强因子２（ｍｙｏｃｙｔｅ ｅｎｈａｎｃｅｒ ｆａｃｔｏｒ２,ＭＥＦ２）转录因子家族成员调节ｃ－Ｊｕｎ蛋白表达。ｃ－ｊｕｎ的启动子区存在ＭＥＦ２位点,ＭＥＦ２转录因子家族成员以同源或异源二聚体形式与其结合。研究了ｐ３８和ＢＭＫ１（ｂｉｇ ＭＡＰ ｋｉｎａｓｅ１）在ＴＮＦ－α诱导ｃ－ｊｕｎ基因表达中的调控作用。ｐ３８上调ＭＥＦ２Ａ的转     

单核／巨噬细胞分泌TNF—α的调控及在老年时的改变

肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）是一种主要由单核／巨噬细胞分泌的细胞因子。它不仅有杀伤肿瘤细胞的特性,还在炎症、休克和自身免疫等病理过程中起重要作用。刺激巨噬细胞分泌ＴＮＦ－α的主要物质有内毒素、病毒、某些细胞因子和有丝分裂原以及神经肽等。而前列腺素Ｅ（ＰＧＥ）、ｃＡＭＰ类似物和肾上腺素类等可抑制其分泌。很多文献报道ＴＮＦ－α在老年时单核／巨噬细胞的分泌有改变。     

TNF—α转换酶的结构特征及抑制剂

肿瘤环因子－α转换酶（ｔｕｍｏｒ ｎｒｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ－α ｃｏｎｖｅ ｒｔｉｎｇ ｅｎｚｙｍｅ,ＴＡＣＥ）将２６ｋＤ膜结合型ＴＮＦ－α前体水解为具有生物活性的可溶性１７ｋＤ ＴＮＦ－α。ＴＡＣＥ基因克隆的成功,主宰其为金属水解蛋白（ａｄａｍａｌｙｓｉｎ）家族的膜结合型异整合素金属蛋白酶。发现许多金属蛋白酶抑制剂ｈｙｄｒｏｘａｍａｔｅ类化全物能抑制ＴＡＣＥ活性阻断ＴＮＦ－α释放,并保护脓毒     

通过构建轻链二级库对人源抗TNF-α抗体进行亲和力成熟

通过构建轻链二级库的方法,对人源抗ＴＮＦ－α单抗Ｆａｂ进行轻链置换,并筛选出具有更高亲和力的人源抗ＴＮＦ－α单抗的Ｆａｂ。首先用ＲＴ－ＰＣＲ技术扩增正常人全套抗体轻链基因,并与已获得的人源抗ＴＮＦ－α单抗的重链基因配对,构建人源抗ＴＮＦ－α噬菌体抗体轻链二级库,然后筛选与ＴＮＦ－α具有更高亲和力的克隆,经过三轮的生物淘筛（ｂｉｏｐａｎｎｉｎｇ）,获得了比原来的人源抗ＴＮＦ－α单抗Ｆａｂ具有更高亲和     

老年大鼠单核／巨噬细胞分泌和表达肿瘤坏死因子增多

为研究老年时肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）分泌及表达的改变,在内毒素（ＬＰＳ）１．０μｇ／ｍｌ刺激大鼠单核／巨噬细胞后,用酶联免疫法（ＥＬＩＳＡ）测定培养液中ＴＮＦ－α含量,用半定量逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＫ）测定ＴＮＦ－αｍＲＮＡ。同时测定培养液中一氧化氮（ＮＯ）和前列腺素Ｉ２（ＰＧＩ２）的含量。结果显示：老年鼠ＴＮＦ－α分泌量及其ｍＲ－ＮＡ明显高于青年鼠。ＮＯ产量在老年鼠与青年鼠之间无明显差异。老年鼠ＰＧＩ２分泌明显低于青年鼠。由于ＰＧ能抑制ＴＮＦ－α释放,从而推测,ＰＧＩ２产生能力的降低可能是老年大鼠单核／巨噬细胞ＴＮＦ－α分泌量明显高于青年鼠的原因之一。