雷公藤提取物中主要物质基础及其抗肿瘤活性研究北大核心CSCD

为进一步阐明雷公藤中的主要物质基础,并评价其抗肿瘤活性。该研究采用柱层析、HPLC等技术,对雷公藤提取物进行研究。结果表明:(1)从雷公藤95%乙醇提取物中分离得到12个化合物,根据理化性质及波谱数据鉴定各化合物的结构分别为α,β-amyrenone(1)、3β-acetoxyolean-12-en-28-oic acid(2)、antriptolactone(3)、ω-hydroxypropioquaiacone(4)、3-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-propenal(5)、3-methoxy-4-hydroxy phenylethanol(6)、vanillin(7)、3,4,5-三甲氧基苯酚(8)、对羟基苯甲酸(9)、对羟基苯甲醛(10)、vanillyl alcohol(11)、2,6-dimethxy-1,4-benzoquinone(12)。其中,化合物1、2、5、12为首次在该属植物中分离得到。(2)采用噻唑蓝(MTT)法对12个化合物进行抗SH-SY5Y细胞株、K562细胞株和Hel细胞株3种肿瘤细胞系细胞增殖活性的筛选,并对活性较好的化合物12进行Hoechst荧光染色和促凋亡作用的检测发现,化合物2、3、5、12具有一定的抗肿瘤活性,其中化合物12的抗肿瘤活性最为显著(SH-SY5Y细胞、Hel细胞、K562细胞的IC_(50)值分别为35.6、14.3、28.8μmol·L^(-1))。该研究结果进一步丰富了雷公藤的化学成分,发现了1个具有明显抗肿瘤活性的单体物质,为雷公藤的进一步开发提供了科学依据。     

17β-雌二醇对谷氨酸诱导的SH-SY5Y细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨17β-雌二醇对谷氨酸诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及可能机制。方法:选取SH-SY5Y细胞传代培养,分为四组:(1)阴性对照组;(2)氧化损伤组:0.1 mmol·L~(-1)谷氨酸作用24 h;(3)17β-雌二醇低、高浓度组:加入(1.0×10~(-4) mmol·L~(-1)和1.0×10~(-3)mmol·L~(-1))17β-雌二醇作用24 h之后,加入谷氨酸作用24 h。采用MTT比色法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞活性氧(ROS)水平,Hoechst-PI染色观查细胞凋亡,分光光度计检测上清液中Caspase-3及Caspase-9含量。结果:7β-雌二醇能明显抑制谷氨酸诱导的细胞活性的下降,减少谷氨酸所致SH-SY5Y细胞内ROS的生成,降低细胞凋亡率,减少凋亡因子的活性。结论:17β-雌二醇对神经细胞损伤具有保护作用,这可能与其抗氧化作用有关。     

17beta-雌二醇对谷氨酸诱导的SH-SY5Y细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨17β-雌二醇对谷氨酸诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及可能机制。方法：选取SH-SY5Y细胞传代培养, 分为四组：(1)阴性对照组;(2)氧化损伤组：0.1 mmol·L-1谷氨酸作用24 h;(3)17β- 雌二醇低、高浓度组：加入(1.0× 10-4mmol·L-1和 1.0× 10-3 mmol·L-1)17β- 雌二醇作用24 h之后,加入谷氨酸作用24 h。采用MTT 比色法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞活 性氧(ROS)水平,Hoechst-PI染色观查细胞凋亡,分光光度计检测上清液中Caspase-3 及Caspase-9 含量。结果：7β- 雌二醇能明显 抑制谷氨酸诱导的细胞活性的下降,减少谷氨酸所致SH-SY5Y 细胞内ROS 的生成,降低细胞凋亡率,减少凋亡因子的活性。结 论：17β-雌二醇对神经细胞损伤具有保护作用,这可能与其抗氧化作用有关。     

色钉菇粗多糖对MPP~+损伤的SH-SY5Y细胞的保护作用

本文旨在研究色钉菇(Chroogomphus rutilus)粗多糖对多巴胺能神经元的保护作用。用浓度为200、400和800μg/mL的色钉菇粗多糖对SH-SY5Y细胞进行预处理后,加入1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium,MPP+)处理48h。采用MTT法检测MPP+损伤的SH-SY5Y细胞的存活率,用Annexin V-FITC染色和流式细胞术检测细胞凋亡率。结果显示,400μg/mL和800μg/mL的色钉菇粗多糖预处理可显著提高MPP+损伤的SH-SY5Y细胞存活率,降低细胞凋亡率。为了排除色钉菇粗多糖通过直接结合来降低MPP+实际浓度的可能性,将多糖洗净后,再予以细胞MPP+处理,MTT结果显示800μg/mL的色钉菇粗多糖预处理仍可提高细胞存活率。以上结果提示,色钉菇粗多糖对SH-SY5Y细胞起到有效的保护作用,其保护作用的大部分与多糖和MPP+的直接结合无明显关系,而是源于多糖对细胞的直接作用,因此色钉菇多糖有开发成防治帕金森病药物的应用前景。     

阿魏酸钠生物学活性——对高糖诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用

探讨阿魏酸钠对高糖诱导的人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞凋亡的保护作用及其机制。分别通过葡萄糖培养液,以及具有阶梯阿魏酸钠含量的葡萄糖混合培养液进行SH-SY5Y细胞培养,持续时间为48 h。对其中细胞的存活率使用MTT比色法检测;通过Hoechst33258染色观察细胞核形态改变;细胞凋亡率引入流式细胞仪进行测验;离心获得细胞上清液后,使用对其中含有的8-羟基脱氧鸟苷酸(8-OHd G)组分使用酶联免疫吸附法检测。结果显示阿魏酸钠保护组细胞存活率明显升高,细胞核形态明显改善,组细胞早期凋亡率、上清液中8-OHd G的分泌量均明显降低。结果可见,阿魏酸钠对高糖诱导的SH-SY5Y细胞凋亡具有保护作用,其机制可能与阿魏酸钠的抗氧化作用有关。     

稳定表达β-synuclein的SH-SY5Y细胞株的构建

目的构建稳定表达β-synuclein的SH-SY5Y细胞株。方法利用脂质体转染技术将质粒pcD-NA3.1-β-synuclein转染SH-SY5Y细胞,通过Zeocin进行抗性筛选。采用原位免疫荧光、免疫组织化学染色及Western blot杂交检测β-synuclein在SH-SY5Y细胞中的表达情况;通过MTT比色法检测β-synuclein稳定表达对SH-SY5Y细胞增殖的影响。结果原位免疫荧光、免疫组织化学染色及Western blot检测结果显示β-synuclein在SH-SY5Y细胞中的表达水平较对照组明显升高;稳定表达β-synuclein的细胞增殖程度较对照组明显增高(P<0.05)。结论β-synuclein在SH-SY5Y细胞中稳定表达,为后续的研究提供有用的细胞模型。为进一步研究β-sy-nuclein对帕金森病发病神经保护作用的研究奠定了良好的基础。     

醉鱼草果实水部位化学成分及神经保护活性研究

为研究醉鱼草果实水部位化学成分及其神经保护作用,利用多种色谱分离技术从醉鱼草果实水部位中分离得到10个化合物。结合现代光谱技术对分离得到的化合物进行结构鉴定,分别为密蒙花苷C(1)、异毛蕊花糖苷(2)、毛蕊花糖苷(3)、4′-hydroxyphenyl ethyl vanillate(4)、6-O-香草酰筋骨草苷(5)、syringaresinol-4′-O-β-D-glucopyranoside(6)、刺五加苷B(7)、松柏苷(8)、醉鱼草皂苷Ⅳb(9)、6-O-(3"-O-p-coumaroyl-α-L-rhamnopyranosyl)catalpol(10),其中化合物4、6、7、8、10为首次从醉鱼草属植物中分离得到,化合物2、3为首次从醉鱼草果实中分离得到;利用MPP+诱导的SH-SY5Y细胞模型对化合物1、5、6、7的神经保护作用进行活性筛选,结果显示四个化合物均能使细胞存活率显著提高。     

Neuroligin对SH-SY5Y细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨Neuroligin(NLG)对人神经母细胞瘤SH-SY5Y增殖和凋亡的影响。方法:体外培养SH-SY5Y细胞24 h后,分别用浓度为50,100,200μmol/L的NLG siRNA转染SH-SY5Y细胞并共孵育24 h,然后采用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度NLG siRNA对SHSY5Y细胞增殖率的影响,以及Real-time PCR法检测SH-SY5Y细胞中凋亡基因Bax、Bcl-2、Bcl-x L和caspase-9基因表达水平的变化。结果:与空白对照组及siRNA阴性对照组相比,转染NLG siRNA后SH-SY5Y细胞增殖率显著下降,细胞凋亡相关基因被激活,导致细胞凋亡。结论:NLG对神经元细胞具有保护作用,抑制神经细胞凋亡。     

异叶三宝木叶的化学成分研究(英文)

从异叶三宝木(Trigonostemon flavidus)叶中分离得到9个化合物,经波谱数据分析鉴定为robustic acid(1),1-[6-hydroxy-2-methoxy-2″,2″-dimethylpyrano-(5″,6″:3,4)]-2-(4’-methoxyphenyl)-1,2-ethanedione(2),3β-ursolic acid(3),(6S,7E)-6-hydroxy-4,7-megastigmadien-3,9-dione(4),3(-hydroxy-5,6-epoxy-7-megastigmen-9-one(5),(3R,6R,7E)-3-hydroxy-4,7-megastigmadien-9-one(6),loliolide(7),methyl P-coumarate(8),和methyl si-napate(9)。化合物1～7和9为首次从三宝木属(Trigonostemon)植物中分离得到。     

彝族虫类药日本琵琶甲的化学成分研究

采用多种分离材料包括硅胶、Sephadex LH-20和RP-18从日本琵琶甲的50%乙醇提取物的正丁醇部位分离得到10个化合物,经过波谱学方法分别鉴定为Bracteanolide A(1)、3,4-Dihydroxyphenylacetic acid methyl ester(2)、Hydroxytyrosol(3)、3,4-Dihydroxy-β-methoxyphenethyl alcohol(4)、(S)-(+)-2-(3,4-Dihydroxy phenyl)-2-ethoxyl-ethanol(5)、3-Hydroxy-4-methoxy-phenylmethylcarbinol(6)、4-Hydroxybenzoic acid(7)、原儿茶醛(8)、Ethylβ-D-xylobioside(9)和Butylβ-D-xylobioside(10)。所有化合物均系从该种中首次分离。其中化合物1具有抑制脂多糖诱导的巨噬细胞一氧化氮产生的作用,可能为该昆虫消炎、消包块的物质基础之一。