SLE带状疱疹患者外周血CD4~+CD28~+和CD4~+CD25~+FoxP3~+调节性T细胞的表达及相关性研究

目的:检测系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)合并带状疱疹患者外周血CD4~+CD28~+和CD4~+CD25~+Fox P3~+调节性T细胞的表达及相关性,探讨其在SLE合并带状疱疹发病中的临床意义。方法:采用流式细胞术检测30例SLE患者、30例SLE合并带状疱疹患者及30例健康对照者外周血中CD4~+/CD8~+T淋巴细胞亚群表面CD28的表达及CD4~+CD25~+Fox P3~+Treg细胞的表达水平,并分析SLE合并带状疱疹患者外周血CD4~+CD28~+和CD4~+CD25~+Fox P3~+调节性T细胞表达的相关性。结果:SLE合并带状疱疹组患者急性期外周血CD4~+T淋巴细胞比率、绝对计数显著降低,CD4~+、CD8~+T淋巴细胞表面的CD28表达下调,CD4~+CD25~+Fox P3~+Treg细胞水平显著高于SLE组及健康对照组,SLE合并带状疱疹组患者外周血CD4~+CD25~+Fox P3~+Treg水平与CD4~+CD28~+水平成负相关(P均0.05)。结论:SLE合并带状疱疹患者CD4~+、CD8~+T细胞活化异常,CD4~+CD25~+Fox P3~+Treg细胞可能参与抑制了T细胞的活化。     

胃癌患者外周血调节性T细胞水平与免疫抑制状态及病理特征的关系研究

目的:探讨胃癌患者外周血中CD4~+CD25~+调节性T细胞(Treg)水平与免疫抑制状态和病理特征的关系。方法:选择2016年1月至2017年6月我院收治的胃癌患者73例作为胃癌组,另选同期在本院进行体格检查的健康者41例作为对照组,采用流式细胞仪检测其外周血中CD4~+CD25~+Treg水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)水平,分析CD4~+CD25~+Treg水平与IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10的相关性及与病理特征的关系。结果:胃癌组CD4~+CD25~+Treg比例、IL-4和IL-10水平为(19.43±4.36)%、(9.76±2.41)pg/mL和(22.18±5.26)pg/mL,高于对照组的(10.34±2.16)%、(7.16±2.07)pg/mL和(9.52±3.47)pg/mL,差异有统计学意义(P0.05);胃癌组IFN-γ和IL-2水平为(6.87±2.24)pg/mL和(2.43±0.54)pg/mL,低于对照组的(13.86±3.18)pg/mL和(12.79±2.16)pg/mL,差异有统计学意义(P0.05)。CD4~+CD25~+Treg比例与IFN-γ和IL-2呈负相关关系(P0.05),与IL-4和IL-10呈正相关关系(P0.05)。CD4~+CD25~+Treg比例与胃癌患者的TNM分期、淋巴结转移有关(P0.05),与病理类型、肿瘤直径、分化程度和肿瘤位置无关(P0.05)。结论:胃癌患者外周血Treg水平增高,与免疫状态有明显的相关性,其参与了肿瘤的发生与发展过程。     

慢性丙型肝炎患者CD4~+CD25~+Treg细胞对树突状细胞的作用

目的探讨慢性丙型肝炎(HCV)患者CD4+CD25+Treg细胞对外周血树突状细胞的作用。方法对35例HCV患者和35例健康对照各抽取外周血,采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC),采用特异性免疫磁珠分选获得CD4+CD25+Treg细胞,并体外诱导培养获得树突状细胞(DCs);将CD4+CD25+Treg细胞与DC共培养5d后,采用流式细胞仪检测DC表面标志CD83、CD80、HLADR的表达,同时酶联免疫吸附法检测上清液中IL-10和TGF-β含量。结果与健康对照组相比,HCV患者CD83、CD80和HLA-DR的表达均显著下降,差异有统计学意义(P0.01);HCV组患者CD4+CD25+Treg分泌IL-10和TGF-β的水平均高于健康组(P0.01)。结论 HCV患者外周血Treg细胞能够抑制DC的成熟,细胞因子参与了免疫应答的调节。     

喘息性支气管炎患儿外周血CD4+CD25+CD127low 调节性T细胞及淋巴细胞亚群的改变与临床意义

目的探讨喘息性支气管炎患儿外周血CD4~+CD25~+CD127~(low)调节性T细胞及淋巴细胞亚群数量变化与临床意义。方法选取我院16例喘息性支气管炎患儿、同期住院的25例支气管肺炎患儿和18例患有肾结石等非感染性疾病患儿为研究对象,采用流式细胞术分别检测3组患儿外周血中CD4~+CD25~+CD127~(low)调节性T细胞及淋巴细胞亚群百分比。结果喘息性支气管炎患儿外周血中CD4~+CD25~+CD127~(low)/CD4~+(Treg)比例(9.2%±2.1%)高于支气管肺炎组(6.9%±1.4%)和对照组(5.8%±2.2%),差异有统计学意义(F=16.5、17.7,均P0.01)。喘息性支气管炎患儿CD8~+百分比(19.7%±7.8%)低于支气管肺炎组(27.0%±8.8%)和对照组(30.7%±4.4%),差异有统计学意义(F=6.6、22.4,均P0.01)。喘息性支气管炎患儿B淋巴细胞百分比(33.4%±15.2%)高于支气管肺炎组(22.7%±6.9%)和对照组(17.7%±9.9%),差异有统计学意义(F=9.2、10.9,均P0.01)。结论喘息性支气管炎患儿外周血淋巴细胞亚群比例异常,体内存在免疫功能紊乱,CD4~+CD25~+CD127~(low)调节性T细胞可能参与喘息性支气管炎的发生发展。     

重楼皂甙Ⅱ对狼疮性肾炎患者外周血CD4+CD25+T调节细胞表达的细胞因子的影响

目的:研究重楼皂甙Ⅱ对狼疮性肾炎患者外周血CD4+CD25+Treg分泌的细胞因子IL-10和TGF-β的影响。方法:10例健康人为正常对照组,20例LN病人随机分为四组:LN对照组(n=5)、重楼干预组1(n=5,接种细胞数为1×105/1.5ml/孔)、重楼干预组2(n=5,接种细胞数为2×105/1.5ml/孔)、重楼干预组3(n=5,接种细胞数为5×105/1.5ml/孔)。分离外周血单个核细胞,利用免疫磁珠法分离CD4+CD25+Treg。重楼干预组予重楼皂甙Ⅱ干预,正常对照组和LN对照组不予处理,各组培养72h。取各组上清,用ELISA分别检测IL-10和TGF-β的水平。结果:与正常组比较,其余各组TGF-β和IL-10的水平明显降低(P<0.01)。与LN对照组比较,重楼皂甙Ⅱ干预后各组TGF-β和IL-10的水平升高(P<0.05)。重楼干预组之间比较,重楼干预组2的TGF-β和IL-10水平较其他两组明显升高(P<0.01),而重楼干预组1和3的TGF-β和IL-10水平变化无显著性差异(P>0.05)。结论:重楼皂甙Ⅱ可上调LN患者TGF-β和IL-10的水平,上调的幅度受接种细胞数量的...     

CD4~+CD25~+ Treg细胞与移植免疫耐受

诱导器官移植受者对供者抗原的免疫耐受是防治同种异型移植排斥反应的最理想途径。目前认为,免疫耐受形成的主要机制包括:胸腺及骨髓阴性选择引起的克隆清除(Clonal deletion)、组织特异性自身抗原低表达引起的克隆忽视(Clonal ignorance)、阻断T细胞共刺激信号引起的克隆无能(Clonal anergy)、嵌合体(Chimerism)的形成、调节性T细胞(Regulatory Tcell,Treg)介导的克隆抑制(Clonal suppression)等。近年来CD4+CD25+ Treg细胞的研究已成为免疫学界的热门课题之一。已知CD4+CD25+ Treg细胞存在于小鼠、大鼠和人体中,是机体自然存在的具有主动调节活性的T细胞,对维持自我耐受和控制自身免疫病发挥着重要作用。本文着重就CD4+CD25+ Treg细胞的免疫调节机制及其在诱导移植免疫耐受方面的研究进展做一综述。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞与肿瘤免疫研究进展

调节性T细胞(Treg)是一类具有免疫调节功能的细胞群,在机体的免疫耐受中起着关键性作用。它们主要通过细胞-细胞直接接触的方式抑制CD4+和CD8+效应性T细胞的活化和增殖,来调节获得性免疫系统,阻止自身免疫疾病的发生。Treg中以自然产生的CD4+CD25+调节性T细胞(固有Treg细胞)研究最多。在人类,调控效能主要限于CD4+CD25high亚型。由于Treg独特的生物学功能,它在自身免疫性疾病的发生、移植耐受和肿瘤的发生和转归上越来越受到重视。该文就该类细胞的特点及其与肿瘤关系的研究进展作一综述。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞在临床中的应用

CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)是近年来发现的一类能够抑制免疫应答的重要调节性免疫细胞。近年来,因其在自身免疫性疾病、肿瘤免疫及器官移植耐受诱导中具有广泛的应用前景而备受瞩目。本文就CD4+CD25+Treg的分类、来源、特征及在人类疾病中的临床应用进行综述。     

幽门螺杆菌感染者CD4~+ CD25~+调节性T细胞的检测及其相关性分析

目的检测幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染阳性的胃部疾病患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(Treg细胞)的百分含量及转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的水平,探讨CD4+CD25+调节性T细胞在H.pylori感染中的免疫调节作用及意义。方法采用流式细胞术检测H.pylori感染的慢性浅表性胃炎、胃癌前病变和胃癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的含量、CD4+CD25+T细胞中表达FOXP3的细胞比例;并采用ELISA方法检测H.pylori感染者血清中TGF-β1的含量,无H.pylori感染的患者作为阴性对照。结果 H.pylori感染的患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的百分含量及TGF-β1的水平较不伴有H.pylori感染的患者显著升高(P<0.05);H.pylori感染的浅表性胃炎、胃癌前病变及胃癌患者外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞的百分含量及CD4+CD25+T细胞中表达FOXP3的细胞比例随病变严重程度的进展逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05);H.pylori感染的患者血清中TGF-β1水平也随病变严重程度的进展逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 H.pylori感染可增加CD4+CD25+调节性T细胞的含量和TGF-β1的水平;随着病变严重程度的进展,CD4+CD25+调节性T细胞的含量和TGF-β1的水平逐渐升高,CD4+CD25+调节性T细胞百分含量和TGF-β1水平可作为临床判断病情进展的指标。     

脐血干细胞移植对失代偿期肝硬化患者TNF-α浓度和CD45RO~+粒细胞表达的影响

目的探究对失代偿期肝硬化患者进行脐血干细胞移植的临床疗效,并检测患者TNF-α浓度和CD45RO~+粒细胞表达的影响,为失代偿期肝硬化的诊治提供理论依据。方法回顾性分析2015年7月至2016年7月湖北医药学院附属人民医院消化内科治疗的80例失代偿期肝硬化患者。将40例在常规对症、支持治疗的基础加用通过肝动脉灌注性脐血干细胞移植治疗的患者设为观察组,40例常规治疗的患者设为对照组。比较患者治疗前与治疗后2个月、4个月、6个月肝功能总胆红素(TBIL)、谷丙转氨酶(ALT)、血清白蛋白(ALB)、谷草转氨酶(AST)水平,同时检测相关肝纤维化指标,包括层粘连蛋白(LN)、透明质酸酶(HA)、Ⅳ型胶原(ⅣCol)、Ⅲ型前胶原(ⅢNP),检测治疗前后肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)等细胞因子水平,并CD45RO~+淋巴细胞以及粒细胞表达水平。组间比较采用独立t检验。结果两组治疗后TBIL、ALT、AST水平低于治疗前(33.65±10.26)μmol/L vs(38.65±10.08)μmol/L,(56.76±14.27)U/L vs(64.23±14.56)U/L,(48.54±17.04)U/L vs(58.21±17.02)U/L,ALB高于治疗后(36.65±8.32)μg/L vs(32.56±8.12)μg/L,治疗后组间比较差异具有统计学意义(t=2.199、2.652、2.199、2.225,P=0.031、0.010、0.032、0.029);两组治疗后LN、HA、IVCol、IIINP低于治疗前(126.67±15.65)μg/L vs(143.65±15.21)μg/L,(231.67±34.43)μg/L vs(248.64±34.87)μg/L,(172.67±25.43)μg/L vs(188.67±26.56)μg/L,(32.54±5.43)μg/L vs(38.54±6.41)μg/L,且治疗后组间比较差异具有统计学意义(t=4.920、2.190、2.752、4.517;P=0.000、0.032、0.007、0.000);两组治疗后TNF-α、IL-6均逐渐降低(14.78±4.05)pg/ml vs(16.78±4.32)pg/ml,(15.87±6.05)pg/ml vs(19.09±6.12)pg/ml,且治疗后组间比较差异具有统计学意义(t=2.136、2.367;P=0.036、0.020);治疗后CD45RO~+淋巴细胞以及粒细胞表达水平均低于治疗前(22.54±3.65)% vs(25.11±3.38)% ,(22.54±6.54)% vs(25.54±6.37)% ,且组间比较差异具有统计学意义(t=3.267、2.078,P=0.002、0.041)。结论失代偿期肝硬化通过脐血干细胞移植治疗能够改善肝功能,降低相关肝纤维化指标,显著降低TNF-α、IL-6等细胞因子的水平以及CD45RO~+淋巴细胞以及粒细胞表达水平,可作为新型治疗失代偿期肝硬化有效方案。     

CD4~+CD25~+Treg细胞在类风湿关节炎中的研究进展

调节性T细胞(Tregs)是近年来发现的一群具有免疫调节作用的CD4+T细胞亚群,如Th3、Tr1细胞等。因其能够产生多种具有免疫抑制作用的细胞因子而发挥其免疫负调节作用,不但在维持机体自身耐受方面发挥重要作用,在预防自身免疫性疾病方面也占据重要位置。其中CD4+CD25+Treg因其具有独特的作用方式及功能特征,而被学者广泛关注。近年来,关于CD4+CD25+Treg在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)发病机制中的作用以及在RA治疗方面的应用也越来越受到人们的关注,认为其数目减少或功能失调与RA发病密切相关。RA是一种以关节破坏为主要表现的慢性炎症性疾病,病理早期主要表现为毛细血管生成,滑膜增生,后期主要表现为炎性细胞浸润,血管翳形成,并出现关节软骨以及骨的破坏,最终导致关节畸形及功能障碍。本文现将CD4+CD25+Treg与RA的研究进展做一综述。     

CD4~+T、CD8~+T、CD4~+/CD8~+与慢性乙肝不同中医体质存在相关性

探讨外周血CD4~+、CD8~+T水平与慢性乙型肝炎不同中医体质的关系。选取2016年2月至2017年3月在我院治疗的慢性乙型感染患者143例,其中平和质35例、气虚质40例、阴虚质21例、湿热质20例,气郁质16例、其他11例,采用流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群。不同中医体质患者性别、年龄、病程及HBV-DNA含量比较差异无统计学意义(p0.05);平和质患者AST为342.21(142.42,513.46)U/L,明显低于其他患者(p0.05);气虚质患者AST为512.40(322.81,726.50)U/L,明显高于其他患者(p0.05);气郁质及其他体质患者ALT分别为381.64(210.41,501.72)U/L和370.43(200.41,470.63)U/L,明显高于平和质、气虚质、阴虚质和湿热质患者(p0.05);平和质和气虚质患者外周血CD4~+T细胞分别为(39.10±2.01)%和(39.10±2.01)%,明显低于阴虚质、湿热质、气郁质及其他体质患者(p0.05);气郁质及其他体质患者CD8~+T细胞分别为(25.43±1.33)%和(25.24±1.31)%,明显低于平和质、气虚质、阴虚质和湿热质患者(p0.05);阴虚质、气郁质及其他体质患者分别为(1.71±0.09)、(1.75±0.08)和(1.78±0.09),明显高于平和质、气虚质和湿热质患者(p0.05)。慢性乙肝不同中医体质与CD4~+T、CD8~+T和以及肝功能有密切关系。关键词     

CD4~+CD25~+调节性T细胞在病毒感染中的免疫调节机制

CD4+CD25+调节性T细胞的主要功能是抑制自身反应性T细胞,主要通过细胞与细胞间直接接触和分泌抑制性细胞因子发挥作用,其在维持机体T细胞内环境稳定、调节和保持对自身抗原耐受之间的平衡以及移植免疫耐受方面具有重要作用。新近研究发现,CD4+CD25+Treg数量和功能异常与病毒感染性疾病的发生、发展关系密切。本文就CD4+CD25+Treg作用机制及其在病毒感染性疾病中的作用进行综述。     

非霍奇金淋巴瘤患者外周血中CD4+CD25+ 调节性T 细胞 亚群变化初探

目的:检测非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin’s lymphoma,NHL)患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+regulatoryT cell,Treg)的改变,探讨Treg与NHL的相关性。方法:病例组(n=60)为本院收治的初诊NHL患者,对照组(n=60)为本院健康体检者,用流式细胞技术联合标记CD4、CD25检测对照组及病例组化疗前、化疗后的外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的分布特点。结果:(1)病例组化疗前外周血中CD4+细胞比例显著低于对照组(P<0.05),CD4+CD25+调节性T细胞比例显著高于对照组(P<0.05);(2)病例组化疗后,CD4+细胞比例明显高于化疗前(P<0.05),CD4+CD25+调节性T细胞比例明显低于化疗前(P<0.05);(3)病例组化疗后CD4+细胞比例与对照组无显著差异(P>0.05),而CD4+CD25+调节性T细胞比例显著高于对照组(P<0.05)。结论:非霍奇金淋巴瘤患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞比例升高,存在机体免疫抑制,化疗可降低CD4+CD25+调节性T细胞比例。     

Graves病患者外周血中CD4+CD25+Treg细胞上的PD-1/PD-L1的表达及意义

目的:探究Graves病患者外周血中CD4+CD25+Treg细胞上的PD-1/P-L1的表达及意义。方法:收集2017年6月至2017年12月就诊于西南医科大学附属医院内分泌科的Graves病、Graves眼病及体检中心的健康者的外周血进行流式检测。结果:与正常对照组相比,Graves病及Graves眼病组CD4+CD25+Treg细胞比例明显降低(P0.05);PD-1+Treg、PD-L1+Treg、PD-1+/PD-L1+Treg细胞比例均较正常组明显降低(P0.05);此外,Graves眼病组的结果较Graves病组更低(P0.05)。结论:CD4+CD25+Treg的降低会导致Graves病和Graves眼病患者的免疫状态活化,甲状腺自身抗体的增加和活化,促进疾病的发生。此外于PD-1和PD-L1阳性细胞比例的减少对于其对免疫的负向调节有所减弱,从而导致患者体内免疫耐受的降低和免疫稳态的打破,可能导致机体对甲状腺抗原的耐受消失,导致GD及眼病的发生发展。     

miR-30a-5p对CD133~+ Huh7人肝癌干细胞侵袭和迁移能力的影响

目的本研究采用磁珠法对肝癌干细胞进行分选,进而使用mi R-30a-5p模拟物和抑制物进行基因治疗,观察其对肝癌干细胞侵袭和迁移能力的影响,并探讨其可能的分子生物学机制。方法采用免疫磁珠分选法分选CD133+Huh7肝癌干细胞,流式细胞术检测分选后CD133+细胞比例,分别采用mi R-30a-5p模拟物或抑制物转染肝癌干细胞设为模拟物转染组(30a M组)和抑制物转染组(30a I组),并设立空白对照组(NC组)。采用RT-PCR法检测细胞mi R-30a表达水平,Transwell法测细胞侵袭和迁移能力,western blot法检测功能蛋白表达量,荧光素酶报告基因实验测定Wnt/β-catenin信号通路荧光素酶活性,每组实验重复3次。肝癌干细胞分选效率、mi R-30a-5p表达水平实验数据的比较采用单因素方差分析和t检验。结果磁珠分选后的Huh7细胞中CD133阳性率为(84.6±0.56)﹪,明显高于未进行分选的Huh7肝癌细胞的CD133阳性率(1.38±0.12)﹪,差异具有统计学意义(t=-16.41,P=0.01)。30a M组CD133+Huh7肝癌干细胞中的相对表达水平(6.23±0.12)较NC组的(1.00±0.04)明显上调;mi R-30a-5p抑制物转染组(30a I组)的相对表达水平(0.07±0.01)较NC组明显下调,差异均具有统计学意义(t=15.98,-7.76,P=0.00,0.00)。Transwell侵袭实验显示,NC组、30a M组和30a I组的CD133+Huh7肝癌干细胞的穿膜细胞数量分别为(28.33±2.10)个/孔、(12.52±1.03)个/孔和(72.09±7.11)个/孔,差异具有统计学意义(t=15.00,-23.01,P=0.01,0.00)。Transwell迁移实验结果显示,NC组、30a M组和30a I组的CD133+Huh7肝癌干细胞的穿膜细胞数量分别为(21.76±1.21)个/孔、(8.74±1.96)个/孔和(145.51±11.23)个/孔,差异具有统计学意义(t=8.09,-33.10,P=0.02,0.00)。Western blot实验结果显示,30a M组的兔抗人波形蛋白(Vimentin)、wnt1、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP3蛋白的表达量较NC组低,上皮-钙粘素(E-cadherin)蛋白的表达量较NC组高,神经-钙粘素(N-cadherin)、锌指转录因子(Snail)、MMP9蛋白的表达量没有明显差异;30a I组的Vimentin、wnt1、MMP2、MMP3蛋白的表达量较NC组高,E-cadherin蛋白的表达量较NC组低,N-cadherin、Snail、MMP9蛋白的表达量没有明显差异。荧光素酶报告基因实验结果显示,30a M组Wnt/β-catenin信号通路的转录活性(3.23±0.51)明显低于NC组的(16.45±1.22)(t=-16.33,P=0.01)。30a I组Wnt/β-catenin信号通路的转录活性(27.16±0.96)与NC组相比,差异具有统计学意义(t=20.94,P=0.00)。30a M组Vimentin的转录活性(4.98±0.33)明显低于NC组的(7.80±0.64)(t=-13.01,P=0.02)。30a I组Vimentin的转录活性(9.31±1.50)与NC组相比,差异具有统计学意义(t=12.39,P=0.02)。结论 mi R-30a-5p对CD133+Huh7肝癌干细胞的侵袭和迁移具有明显的抑制效果,有望通过对肝癌干细胞的治疗提高肝癌基因治疗的效果。     

嗜血细胞综合征患儿外周血CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞变化及临床意义

目的观察嗜血细胞综合征(hemophagocytic syndrome,HPS)患儿外周血中调节性T细胞(RegulatoryTcells,Treg细胞)的变化,探讨其在HPS发病中的作用及临床意义。方法应用流式细胞仪检测17例初诊HPS患者(初诊组)、11例经诱导治疗后临床缓解者(缓解组)及20例健康人群(对照组)外周血中CD4+CD25+调节性T细胞。结果与对照组相比较,HPS患者初诊组及缓解组外周血CD4+CD25+调节性T细胞均升高(P0.05)。与初诊组相比较,缓解组CD4+CD25+Treg细胞降低(P0.05),但仍高于正常对照组(P0.05)。结论CD4+CD25+Treg细胞增多可能是HPS患者免疫功能受抑的重要原因之一,其变化对于HPS的预后判断有一定的意义。     

口服益生菌对妊娠期糖尿病小鼠肠道菌群及调节性免疫细胞的影响

目的探讨口服益生菌对妊娠期糖尿病小鼠肠道菌群及调节性免疫细胞的影响。方法 C57BL/6小鼠30只,分为对照妊娠组(正常妊娠小鼠)、妊娠期糖尿病组(妊娠期糖尿病小鼠)和益生菌组(妊娠期糖尿病小鼠每日在食物中添加益生菌),每组10只。妊娠期糖尿病组和益生菌组20只小鼠构建妊娠期糖尿病小鼠模型;ATB半自动微生物检测系统检测粪便中双歧杆菌、大肠埃希菌和乳杆菌的含量;收集小鼠的心脏血,流式细胞术检测CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞(Treg细胞)、CD4~+CXCR5~+Foxp3~+滤泡调节性T细胞(Tfr细胞)和CD19~+IL-10~+调节性B细胞(Breg细胞)在淋巴细胞中的比例;ELISA检测血清中IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素10(IL-10)和转化生长因子-β(TGF-β)的浓度。结果妊娠期糖尿病组小鼠粪便中双歧杆菌、大肠埃希菌和乳杆菌的含量分别为(5.600±0.922 3)、(10.050±0.769 3)和(4.750±0.621 2)LgCFU(每克粪便湿重中菌落形成单位数的对数值),益生菌组分别为(12.770±1.764 0)、(6.667±0.691 2)和(7.367±0.373 9)LgCFU,两组之间差异有统计学意义(t=3.600,P=0.004 9;t=3.271,P=0.008 4;t=3.609,P=0.004 8);妊娠期糖尿病组淋巴细胞中Treg细胞、Tfr细胞和Breg细胞比例分别为(0.032 0±0.005 35)%、(0.338 7±0.045 51)%和(0.058 8±0.015 81)%,益生菌组为(0.185 0±0.064 33)%、(0.600 3±0.083 26)%和(0.118 2±0.012 90)%,两组之间差异有统计学意义(t=2.370,P=0.039 3;t=2.758,P=0.020 2;t=2.907,P=0.015 6);ELISA结果显示妊娠期糖尿病组小鼠血清中IL-6、TNF-α、IL-10和TGF-β浓度分别为(45.33±5.649)、(470.00±50.130)、(3.43±0.541)和(0.33±0.055)ng/mL,益生菌组为(22.33±4.128)、(223.30±41.280)、(9.05±1.953)和(1.35±0.366)ng/mL,两组之间差异有统计学意义(t=3.287,P=0.008 2;t=3.798,P=0.003 5;t=2.771,P=0.019 8;t=2.766,P=0.019 9)。结论调控肠道菌群可促进妊娠期糖尿病小鼠Treg细胞、Tfr细胞和Breg细胞比例增加,减少炎症反应和维持正常妊娠,研究为妊娠期糖尿病的治疗提供了一个新的方法。     

重楼皂甙Ⅱ对狼疮性肾炎患者外周血CD4~＋CD25~＋T调节细胞表达的细胞因子的影响

目的：研究重楼皂甙Ⅱ对狼疮性肾炎患者外周血CD4＋CD25＋Treg分泌的细胞因子IL-10和TGF-β的影响。方法：10例健康人为正常对照组,20例LN病人随机分为四组：LN对照组（n=5）、重楼干预组1（n=5,接种细胞数为1×105/1.5ml/孔）、重楼干预组2（n=5,接种细胞数为2×105/1.5ml/孔）、重楼干预组3（n=5,接种细胞数为5×105/1.5ml/孔）。分离外周血单个核细胞,利用免疫磁珠法分离CD4＋CD25＋Treg。重楼干预组予重楼皂甙Ⅱ干预,正常对照组和LN对照组不予处理,各组培养72h。取各组上清,用ELISA分别检测IL-10和TGF-β的水平。结果：与正常组比较,其余各组TGF-β和IL-10的水平明显降低（P〈0.01）。与LN对照组比较,重楼皂甙Ⅱ干预后各组TGF-β和IL-10的水平升高（P〈0.05）。重楼干预组之间比较,重楼干预组2的TGF-β和IL-10水平较其他两组明显升高（P〈0.01）,而重楼干预组1和3的TGF-β和IL-10水平变化无显著性差异（P〉0.05）。结论：重楼皂甙Ⅱ可上调LN患者TGF-β和IL-10的水平,上调的幅度受接种细胞数量的影响。     

人脐带间充质干细胞对小鼠实验性溃疡性结肠炎的疗效

目的探讨人脐带间充质干细胞移植术对溃疡性结肠炎(UC)小鼠的疗效,以及对血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)水平的影响。方法选用雄性小鼠48只,完全随机分为正常对照组、模型对照组、脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)治疗组,每组16只。模型对照组与hUC-MSCs治疗组通过口服5﹪葡聚糖硫酸钠诱导UC模型。对hUC-MSCs治疗组小鼠经尾静脉注射脐带间充质干细胞。观察各组疾病活动指数评分;采用酶联免疫吸附(ELISA)法测量各组小鼠血清中TNF-α、IL-8的表达水平,各组数据两组比较采用t检验,多组比较使用重复测量资料的方差分析对结果进行统计分析。结果模型对照组与hUC-MSCs治疗组DAI评分从第2天开始上升,直至实验结束分别为8.72±0.71、4.01±0.35均高于正常对照组0.21±0.20,且差异有统计学意义(F=1 300.66,P0.01);模型对照组与hUCMSCs治疗组比较,在造模期间及治疗的第4天DAI评分分别为7.95±0.71、8.01±0.73,差异无统计学意义(t=-0.24,P=0.08),在治疗的第5天hUC-MSCs治疗组DAI评分开始下降为7.23±0.82,且与模型对照组8.01±0.81相比,差异有统计学意义(t=-2.71,P=0.01)。造模第7天,模型对照组与hU C-MSCs治疗组两组TNF-α分别为(363.32±15.84)pg/ml、(375.52±16.21)pg/ml,均高于空白对照组(112.14±11.23)pg/ml(F=624.12,P0.01);模型对照组与hUC-MSCs治疗组两组IL-8分别为(65.32±10.12)pg/ml、(57.21±8.71)pg/ml均高于空白对照组(25.02±7.81)pg/ml(F=34.29,P0.01),但两组比较差异无统计学意义(P0.05);第2次干细胞注射7 d后即实验结束时,模型对照组与hUC-MSCs治疗组TNF-α分别为(453.23±15.63)pg/ml、(276.84±17.91)pg/ml,仍高于空白对照组(134.32±12.31)pg/ml(F=642.41,P0.01);模型对照组与hUC-MSCs治疗组两组IL-8分别为(75.23±6.72)pg/ml、(39.12±4.42)pg/ml仍高于空白对照组(27.12±5.91)pg/ml(F=113.90,P0.01),但hUC-MSCs治疗组水平较造模结束时有所下降,低于模型对照组(P0.05)。结论间充质干细胞移植术对UC小鼠有良好的治疗作用,且能降低血清中TNF-α、IL-8的水平。