L—谷氨酰胺高产菌株的选育

本文着重介绍了以野生型谷氨酸产生菌ATCC14067为亲株,经过亚硝基胍处理,筛选对磺胺胍具有抗性的突变株,再经过生长试验及稳定性试验,最后选育出两株稳定性好、付产物谷氨酸少的L—谷氨酰胺高产菌株。 L—谷氨酰胺(L—2—氨基戊二酸—酰胺)是L-谷氨酸的r-羧基酰胺化,在医药上是一种极有价值的氨基酸。自1952年用X光衍射确定了其分子结构后,对它的应用日益引起人们的关注。目前国外临床上主要用于治疗精神萎靡、酒精中毒及胃和十二指肠溃疡等疾病;它又是合成脑功能改善药N—乙酰谷酰胺的重要中间物。从谷氨酸产生菌的野生型菌株ATCC14067通过改变发酵条件直接发酵生产L-谷氨酰胺,我们以前曾有过报导。我们通过诱变选育到两株对磺胺胍具有抗性的变异株。变异株的谷氨酰胺产量提高,发酵付产品谷氨酸的量也有减少,为以后提取分离提供了方便。     

L—谷氨酰胺的化学合成

本文叙述了以L—谷氨酸为原料,经过酯化、氨解、酸解等工艺路线制备L—谷氨酰胺的方法。本工艺综合了德国和日本专利所报导的合成方法,结合我们的工作实践,在酰化反应后不将所生成的L—谷氨酸—r—甲酯分离出来,而采用低溫酯化以控制L—谷氨酸二甲酯的生成,并在产品精制过程中采用树脂方法,分离少量未反应完全而混入产品中的L—谷氨酸。此法优点是:中间产物不用分离,减少了工艺步骤;操作简便,易实施工业大生产;减少了设备投资。采用本法生产的L—谷氨酰胺质量符合日本味之素公司的质量标准,收率达到理论值的52.8%。本工艺于一九八三年十二月在武汉通过技术鉴定。     

L—谷氨酰胺的化学合成

本文叙述了以L—谷氨酸为原料,经过酯化、氨解、酸解等工艺路线制备L—谷氨酰胺的方法。本工艺综合了德国和日本专利所报导的合成方法,结合我们的工作实践,在酰化反应后不将所生成的L—谷氨酸—r—甲酯分离出来,而采用低溫酯化以控制L—谷氨酸二甲酯的生成,并在产品精制过程中采用树脂方法,分离少量未反应完全而混入产品中的L—谷氨酸。此法优点是:中间产物不用分离,减少了工艺步骤;操作简便,易实施工业大生产;减少了设备投资。采用本法生产的L—谷氨酰胺质量符合日本味之素公司的质量标准,收率达到理论值的52.8%。本工艺于一九八三年十二月在武汉通过技术鉴定。     

利用固定化原生质体生产L—谷氨酸

在含有生物素(50μg/L)的培养基中培养的黄色短杆菌(Brevibacterium flavum),经溶菌酶处理后制得其原生质体,再固定在琼脂—乙酰纤维素基质的滤器中。该固定化原生质体可用于葡萄糖、尿素为原料的间歇系统中生产L—谷氨酸。在最佳条件下,其L—谷氨酸的生产能力高于固定化细胞的2.5倍,最大生产能力开始可达到1.5mg/ml。该固定化原生质体能够重复使用六次,其生产能力还能保持初始生产能力的70%左右。     

免疫佐剂—胞壁酰二肽的合成

<正> N—乙酰基—胞壁酰—L—丙氨酰—D—异谷氨酰胺(MDP)是细菌细胞壁上具有免疫佐剂活性的最小结构单位。它的佐剂作用强而广泛,毒性低,水溶液口服有效。1974年法国Merser等人工合成以     

用黄色短杆菌ATCC 14067生产L—谷氨酰胺的培养基选择

<正> L—谷氨酰胺是L—谷氨酸的γ—羧基酰胺化,其分子式为H_2NCO·CH_2·CH_2·CH(NH_2)·COOH。熔点185℃～186℃。[(?)]_D~(20)=+31°～+33°,它作为药物,可以用来治疗神经薄弱,胃和十二指肠溃疡等疾病,疗效明显。我们用谷氨酸产生菌ATCC 14067,通过改变发酵条件,使谷氨酸发酵转向谷氨酰胺发酵。我们对发酵培养基作了选择,玉米浆、生物素、铵盐、尿素以及金属离子对菌体的生长     

由乳糖发酵短杆菌利用谷氨酸发酵生产L—脯氨酸

以乳糖发酵短杆菌ATCC13870作亲株,经诱变处理,在添加L—谷氨酸(GA)的培养基中筛选L—脯氨酸产生菌。在GA存在下选出了L—脯氨酸的高产菌株TA—20,该菌株的试管培养L—脯氨酸的积累量是:在不添加GA时,     

发酵法生产 L—酪氨酸

<正> 1、发明的名称:发酵法制备L—酪氨酸2、专利申请范围:采用谷氨酸棒状杆菌属的L—苯丙氨酸缺陷型,以及对L—苯丙氨酸类似物及磺酰胺有抗性的突变株制造酪氨酸的方法,该突变株在培养基中可以生成和积累L—酪氨酸。3、本发明的详细说明:本发明是关于发酵法制备L—酪氨酸。用发酵法生产L—酪氨酸已知的有谷氨酸微球菌的L—苯丙氨酸缺陷型的制造方法、短杆菌属等的对一氟苯丙氨酸抗性株或棒状杆菌属的L—酪氮酸及L—苯丙氨酸的类似物的抗性菌株的制造方法等。     

发酵法生产 L—酪氨酸

<正> 1、发明的名称:发酵法制备L—酪氨酸2、专利申请范围:采用谷氨酸棒状杆菌属的L—苯丙氨酸缺陷型,以及对L—苯丙氨酸类似物及磺酰胺有抗性的突变株制造酪氨酸的方法,该突变株在培养基中可以生成和积累L—酪氨酸。3、本发明的详细说明:本发明是关于发酵法制备L—酪氨酸。用发酵法生产L—酪氨酸已知的有谷氨酸微球菌的L—苯丙氨酸缺陷型的制造方法、短杆菌属等的对一氟苯丙氨酸抗性株或棒状杆菌属的L—酪氮酸及L—苯丙氨酸的类似物的抗性菌株的制造方法等。     

N~ω—硝基—L—精氨酸的抗肿瘤活性

<正> 氨基酸是构成蛋白质的基本单位,显然,与癌瘤细胞的生长有极为密切的关系。Eagle,H.等人用组织培养的方法,比较了癌瘤细胞和正常细胞对氨基酸的需要,实验发现,对于两类细胞的生长需要13种氨基酸即精、胱、谷氨酰胺、组、异亮、亮、赖、蛋、苯丙、苏、酪、缬、色等氨基酸。但是,癌瘤细胞对其中某些氨基酸即:胱、谷氨酰胺、异亮、赖、苯丙、缬等需要量是正常细胞的2—3倍。     

发酵法制取谷氨酸

由发酵法制取谷氨酸时,通过添加一个或多个N-甲基甘氨酸,N、N-二甲基甘氨酸,N、N、N-三甲基甘氨酸和三甲基铵于培养基中,显著地增加了L—     

谷氨酸氧化酶电极的研究

用戊二醛作交联剂将谷氨酸氧化酶和牛血清白蛋白共交联,置于内层醋酸纤维素抗干扰膜和外层聚碳酸酯扩散控制膜之间,制成酶膜,将其与过氧化氢探头复合制成了扩散控制型谷氨酸氧化酶电极,并构建了采用该电极的流动注射分析芽纺。酶电极红性范围0—1000mg／L。50s响应电流达稳态值的95％。流动注射分析系统响应时间20s,检测速度60次／h,线性范围5—8 000mg,L,酶膜使用寿命两周以上。系统选择性好,仅对干扰物L－谷氨酰胺和L－天冬氨酸有微弱响应。对同一样品连续测定41次的变异系数2．8％。测量味精发酵液和瓦勃呼吸计的结果相吻合。可望应用于味精发酵及食品工业中。     

对环二肽cyclo—(L—His—L—Thr)与水亲合特性的Monte Carlo模拟

本文给出了我们用Monte Carlo方法,采用E.Clementi等提出的水—肽相互作用势,O.Matsuoka等的水—水势,对不同数目的水分子与环二肽cyclo—(L—His—L—Thr)的亲合特性进行模拟计算的结果。比较了实验及理论计算有关连接环二肽两侧链的水桥水分子的结果,就水—水、水—肽相互作用对水—肽体系平衡构型的影响也进行了讨论。     

从鸡毛中分离 L—脯氨酸

羽毛中含有较多的L-脯氨酸。干鸡毛水解后用离子交换树脂层析分离可得到纯L—脯氨酸,产率5.6%左右。同时可以分离得到L—丙氨酸、L—丝氨酸和L—精氨酸。     

尿素对生成L—谷氨酰胺的影响

用谷氨酸产生菌通过改变发酵条件,可以使谷氨酸发酵转向谷氨酰胺发酵,从而在发酵液中积累起谷氨酰胺。我们用谷氨酸产生菌黄色短杆菌ATCC(1406),通过改变发酵条件,发酵65小时,在每毫升发酵液中积累了25毫克谷氨酰胺,同时观察了尿素对生成谷氨酰胺的影响。     

小分子免疫调节剂 L—2—(3—羟基—4—羟甲基苯基)—甘氨酸前体物 DL—2—(3—羟基—4—羟甲基苯基)—N—乙酰基甘氨酸的合成

本文通过对小分子免疲调节剂L—2—(3—羟基—4—羟甲基苯基)—甘氨酸(英文名:Forphenicinol)前体物DL—2—(3—羟基—4—羟甲基苯基)—N—乙酰基甘氨酸的合成方法研究,探索了终产物Forphenicinol 的合成路线及实验方法、并通过对各步产物之红外光谱分析,确证各步产物之主要特征吸收峰,为今后的合成工作打下良好之基础、     

离心法分离毛发水解物L—酪氨酸

<正> 关于从毛发水解物中分离L—酪氨酸,日本土屋氏曾报导盐酸分离法,但此法经实验证明所获得L—Tyr层析不纯。现在我们用离心分离法,将L—Cys和L—Tyr分离出来,并根据李政的方法,进一步提纯,获得旋光合格,层析纯的L-Tyr。此法亦同时提高了L—Cys的收率。     

L—酪氨酸

<正> 酪氨酸是芳香族含酚基的氨基酸,它在1847年首先被李比格(Libig)发现和分离出来。最早来沅于干酪素,因而取称为酪氨酸。De、La、Rue.W.第一个提出它的分析正确数据,指出其实验式为 C_8H_(11)NO_3,②1947-1957年期间及有博普(Bopp)等人。进一步多种蛋套质酸水解物中分出酪氨酸来。酪氨酸以蚕丝、蚕蛹、猪毛等含量较为丰富。除了为蛋白质组成存在外,尚有以溴代酪氨酸或碘代酪氨酸及 L—多巴等,酪氨酸的衍生物形存在于自然界。此外,还有作为新陈代谢调节剂的动物激素(催产素、释放素等)及某些菌素(放线菌素等)的组成而存在。酪氨酸是一种重要的生化试剂,也是合成二碘酪氨酸、L—多巴及含酪氨酸的多肽素,抗菌素等药物的原料。其用途正逐步扩大,需要量也日益增加。最近,我们用它进行小猪生长影响的试验。发现它能起促进小猪生长和节约蛋白质饲料的作用。③添加千分之一至千分之二的酪氨酸,就能比对照增27-65%。     

L—缬氨酸生物合成的研究——Ⅰ.钝齿棒状杆菌 AS1.1001发酵产生 L—缬氨酸的条件

从钝齿棒状杆茵A S1.542诱变获得L—缬氨酸产生茵A S1.1001(AHVr,ILeu~-)。摸索了各种糖类、核酸碱基、维生素、L—异白氨酸、α—酮丁酸及有机营养物等对缬氨酸积累的影响,在适宜条件下,缬氨酸积累可达3.6%。     

用旋光法测定L—脯氨酸含量

<正> L—脯氨酸是一种价格昂贵的中性氨基酸,是常州制药厂国内首先生产的治疗高血压和充血性心力衰竭的新药—血管紧张素转换酶抑制剂琉甲丙脯酸(Captoril;SQ—14225)的主要原料,此药并L—脯氨酸的回收工艺都于1983年7月通过鉴定。在琉甲丙脯酸的工业生产过程中,有一半以上的L—脯氨酸要通过水解与离子交换树脂予以提纯和回收,套用。而L—脯氨酸水溶液的含量分析工作是其一个重要环节。为了解决这一难题,我们通过多次摸索建立了一种新的快速有效的含量测定方法—用旋光测定L—脯氨酸含量。