反义RNA调控的不同方式

反义ＲＮＡ调控的不同方式宫明,宫锋（山东大学微生物系,济南２５０１００）关键词反义ＲＮＡ,调控方式反义ＲＮＡ最早发现于原核生物,但是１９８６年Ｗｉｌｌｉａｍｓ发现真核细胞中也存在天然反义ＲＮＡ。不同的反义ＲＮＡ其功能和作用方式不尽相同,它们控制着噬菌...     

基因治疗中的受体介民反义RNA转移技术

在调节特定基因的表达上,反义ＲＮＡ是一种重要的手段。但由于存在降解、非特异性转移及安全性等问题,反义ＲＮＡ在个体基因治疗中无法得到充分利用。受体介导的内吞作用为定向转移反义ＲＮＡ提供一种运载工具,它可以将反义ＲＮＡ定向、高效、低毒、高安全性地转移到靶细胞中发挥作用,因而将大大加快反义ＲＮＡ基因治疗的临床应用。     

爱滋病的反义抑制治疗

爱滋病的反义抑制治疗黄建生，王昌才，任大明（广州第一军医大学生物化学教研室，广州５１０５１５）（复旦大学遗传所国家重点实验室，上海２００４３３）关键词反义ＲＮＡ，爱滋病（ＡＩＤＳ）反义ＲＮＡ是一种与ｍＲＮＡ互补的ＲＮＡ分子，是反义基因的转录产物，它能...     

反义RNA调节肿瘤细胞O~6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶活性

报道了逆转录病毒载体介导的反义ＲＮＡ对肿瘤细胞Ｏ６－甲基鸟嘌呤－ＤＮＡ甲基转移酶（ＭＧＭＴ）活性的调节作用．构建了三个表达ＭＧＭＴ反义ＲＮＡ的逆转录病毒载体并用它们转染ＨｅＬａＳ３肿瘤细胞,观察细胞在转染前后ＭＧＭＴｍＲＮＡ水平、ＭＧＭＴ活性及其对ＡＣＮＵ抗药性的变化．发现针对ＭＧＭＴｍＲＮＡ５’端的反义ＲＮＡ能够有效地降低ＭＧＭＴｍＲＮＡ水平和ＭＧＭＴ活性并使细胞对ＡＣＮＵ的敏感性提高４．６倍;针对ＭＧＭＴｍＲＮＡ全长的反义ＲＮＡ也能在一定程度上调节细胞的ＭＧＭＴｍＲＮＡ水平和ＭＧＭＴ活性并增加细胞对ＡＣＮＵ的敏感性,而针对３’端序列的反义ＲＮＡ对ＭＧＭＴ活性没有调节作用．     

反义RNA及其在植物学研究中的应用

反义ＲＮＡ最初发现于细菌中,它们是一些较短的、散布的转录产物[1],本身缺乏编码能力,但可以通过碱基配对的方式与靶ＲＮＡ的特定互补区域结合,从而阻抑基因的正常表达,因此,反义ＲＮＡ是高度特异性的基因表达抑制因子。1　自然界中存在的反义ＲＮＡ参与基因表达调控的反义ＲＮＡ是在原核生物中发现的。一些实验结果表明,在质粒的复制、转座子的转座作用及噬菌体的发育进程中,反义ＲＮＡ的调控起着至关重要的作用。ＣｏｌＥ1以及其他相关质粒的复制过程中,ＤＮＡ的延伸起始于一种特殊引物的形成。而这一引物所在的区段,亦可产生与引物本身5…     

反义寡核苷酸研究进展

反义寡核苷酸可以通过与ｍＲＮＡ相互作用调节的基因表达，但是其作用的强弱受多种因素的影响。反义ＲＮＡ和反义ＤＮＡ在调节基因的表达方面各有优缺点；采取适当的方法增强反义寡核苷酸的摄取及促进其释放可以大大提高它们的作用效率；反义寡核苷酸在活体内主要经肾脏和肝脏代谢，有一定特异性和非特异性副作用。根据不同的目的，选择适当的反义寡核苷酸用于研究或疾病的治疗与预防，具有很重要的理论意义和现实意义。     

反义RNA对人胃癌细胞生长抑制及恶性表型的阻断作用

ｒａｓ原癌基因的点突变是人胃癌发生发展的重要机理之一。利用能表达ｃ－Ｈ－ｒａｓ癌基因反义ＲＮＡ的质粒,导入人胃癌细胞系ＢＧＣ－８２３,研究了ｒａｓ癌基因反义ＲＮＡ对人胃癌细胞生长及恶性表型的作用,结果表明,ｃ－Ｈ－ｒａｓ反义ＲＮＡ可引起ＢＧＣ－８２３生长速率及形态的变化,在半固体培养基中细胞集落形成能力减弱,部分地抑制了ＢＧＣ－８２３在裸鼠体内的致瘤性。ｃ－Ｈ－ｒａｓ反义ＲＮＡ对其ＲＮＡ的过量表达呈特异性抑制作用。     

反义RNA对人胃癌细胞生长抑制及恶性表型的阻断作用

ｒａｓ原癌基因的点突变是人胃癌发生发展的重要机理之一。利用能表达ｃ－Ｈ－ｒａｓ癌基因反义ＲＮＡ的质粒,导入人胃癌细胞系ＢＧＣ－８２３,研究了ｒａｓ癌基因反义ＲＮＡ对人胃癌细胞生长及恶性表型的作用,结果表明,ｃ－Ｈ－ｒａｓ反义ＲＮＡ可引起ＢＧＣ－８２３生长速率及形态的变化,在半固体培养基中细胞集落形成能力减弱,部分也抑制了ＢＧＣ－８２３在裸鼠体内的致瘤性。ｃ－Ｈ－ｒａｓ反义ＲＮＡ对其ＲＮＡ的过量表达     

端粒酶RNA的反义cDNA对乳腺癌细胞端区长度的影响

应用反义核酸技术,将端粒酶ＲＮＡ的ｃＤＮＡ反向插入整合型腺病毒载体ｐＡｄＥ１ＣＭＶＩＴＲＥＸｎｅｏ,与ｐＢ－ＨＧ１１Ｘ共转染２９３细胞反获得反义重组病毒。将此反义重组病毒感染乳腺癌细胞ＭＣＦ－７后,使细胞端区长度缩短。     

《基因调节：反义RNA和DNA生物学》

《基因调节：反义ＲＮＡ和ＤＮＡ生物学》《基因调节：反义ＲＮＡ和ＤＮＡ生物学,（Ｇｅｎｅｒｅｓｕｌａｔｉｏｎ：ｂｉｏｌｏｇｙｏｆａｎｔｉｓｅｎｓｅＲＮＡａｎｄＤＮＡ）由ＲｏｂｅｒｔＰ．Ｅｒｉｃｋｓｏｎ和ＪｏｎａｔｈａｎＧ．Ｉｚａｎｔ编著,１９９２年雷文...     

核酶的抗病毒作用

反义核酸技术（ａｎｔｉｓｅｎｓｅｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄｓｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）是根据核酸杂交原理设计的以选择性地抑制特定基因表达为目的的一类核酸研究新技术,它包括反义ＲＮＡ（ａｎｔｉｓｅｎｓｅＲＮＡ,ａｓＲＮＡ）、反义ＤＮＡ（ａｎｔｉｓｅｎｓｅＤＮＡ,ａｓＤＮＡ）及核酸（ｒｉｂｏｚｙｍｅ,Ｒｚ）三大技术领域,反义核酸技术同基因治疗一样已经成为一项引人瞩目研究领域。本文对核酸作用的原理和在抗病毒方面的研究进展作一综述     

反义凝血酶受体基因的表达对人ASMC增殖的影响

介入治疗后再狭窄的发生严重降低了该治疗手段的最终疗效．为探讨再狭窄的发生机理、寻找有效的预防手段,利用反义ＲＮＡ技术构建了含有部分反义凝血酶受体（ＡＴＲ）ｃＤＮＡ片段的真核表达质粒ｐｃＤＮＡ３／ＡＴＲ,并观察了其对培养的人主动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）增殖的影响．结果表明ｐｃＤＮＡ３／ＡＴＲ的瞬时转染即能显著抑制人ＡＳＭＣ的３Ｈ－ＴｄＲ参入量,且该作用与导入的ＤＮＡ量呈剂量依赖性．说明部分反义凝血酶受体基因的表达可以抑制ＡＳＭＣ的增殖     

反义基因治疗

除了反义核酸和核酶外,最近又发展了一种新型的反义药物－反义肽核酸（ＲＮＡ）。反义治疗的经验策略是阻断异常基因的表达;随着研究的深入,又发现了以反义药物调整基因表达比例（即调控基因治疗）的反义治疗途径。本文对反义基因治疗的策略,反义药物的设计及稳定性等方面的新思路和该领域的发展与应用前景作了概括介绍。     

IL-1预刺激对反义IRAK-1寡核苷酸抑制NF-κB活化的影响

实验分为白介素－１（ＩＬ－１）预处理组和非预处理组,脂质体介导反义ＩＬ－１ 受体相关激酶－１（ＩＲＡＫ－１）寡核苷酸（ＯＤＮ） 转染ＨｅｐＧ２ 细胞,用ｗ ｅｓｔｅｒｎ 杂交分析ＩＲＡＫ－１ 表达水平,以夹心酶联免疫吸附测定法检测ＮＦ－κＢ含量． 结果表明,ＩＬ－１ 非预处理组反义ＩＲＡＫ－１ ＯＤＮ不能抑制ＩＲＡＫ－１ 表达和ＮＦ－κＢ活化,而预处理组ＩＲＡＫ－１ 表达和ＮＦ－κＢ活化受到明显抑制． 反义ＩＲＡＫ－１ ＯＤＮ 对ＮＦ－κＢ活化的抑制作用具有时间（５～２４ ｈ）和剂量（１～８ μｇ）依赖性． 说明ＩＬ－１ 预刺激在反义ＩＲＡＫ－１ ＯＤＮ抑制ＩＬ－１ 诱导的ＮＦ－κＢ活化中起决定性作用．     

反义核酸的骨架修饰及其应用

反义核酸的发展经历了反义寡核苷酸,混合骨架寡核苷酸和多肽核酸等几个阶段。这３种不同类型的反义核酸均能与ＤＮＡ或ＲＮＡ结合,阻断目的基因的表达。３种反义核酸的结构有较大差异,各自的性质和反义作用机理也不尽相同。尽管作用机制还不十分明确,反义核酸已广泛应用于生物学和医学等领域,作为反义药物用于治疗癌症等疾病,或作为试剂研究生物大分子的功能。     

IL—1预刺激对反义IRAK—1寡核苷酸抑制NF—kB活化的影响

实验分为白介素１（ＩＬ－１）预处理组和非预处理组,脂质体介异反义ＩＬ－１受体相关激酶－１（ＩＲＡＫ－１）寡核苷酸（ＯＤＮ）转染ＨｅｐＧ２细胞,用ｗｅｓｔｅｒｎ杂交分析ＩＲＡＫ－１表达水平,以夹心酶联免疫吸附测定法测定ＮＦ－ｋＢ含量。结果表明,ＩＬ－１非预处理组反义ＩＲＡＫ－１ＯＤＮ不能抑制ＩＲＡＫ－１表达和ＮＦ－ｋＢ活化,而预处理组ＩＲＡＫ－１表达和ＮＦ－ｋＢ活化受到明显抑制,反义ＩＲＡＫ－１ＯＤ     

正义-反义多肽的相互作用

遗传学中心法则指出,ＤＮＡ有义链（即正义链,ｓｅｎｓｅＲＮＡｓｔｒａｎｄ）可转录为单链ｍＲＮＡ,其核苷酸序列决定蛋白质的氨基酸序列。虽然ＤＮＡ无义链（即反义ＤＮＡ链,ａｎｔｉｓｅｎｓｅＤＮＡｓｔｒａｎｄ）能以框转录方式转录成反义ｍＲＮＡ,甚至能以框翻...     

植物反义寡核苷酸的研究进展

本文介绍了近年来植物中反义寡核苷酸的研究现状,它包括反义ＤＮＡ、反义ＲＮＡ和Ｒｉｂｏｚｙｍｅ。反义寡核苷酸能特异地桔抗内源或外源基因的表达,这为研究某特定基因功能提供了更为有效的方法。此外也为培育抗病植株、建立植物反向筛选系统,次生代谢调控及农艺性状改良提供了可能途径。     

可随HeLa细胞传代而传递的反义RNA真核表达系统

为研究反义ＲＮＡ表达载体在细胞内的稳定性,构建了一个特异性针对β地中海贫血基因ＩＶＳ－２－６５４Ｃ→Ｔ（β６５４）突变ｍＲＮＡ前体异常剪接位点的反义ＲＮＡ表达载体ｐＣＭＶＡ．ｐＣＭＶＡ转染β６５４ＨｅＬａ细胞后,通过ＲＮＡ定量检测反义片段对β６５４ｍＲＮＡ异常剪接的纠正作用;再从转染后传代５次并冰冻保存１年的ＨｅＬａ细胞中回收反义表达载体,转染另外的β６５４ＨｅＬａ细胞,同样检测它对β６５４ｍＲＮＡ异常剪接的纠正作用．结果显示该载体在细胞传代前后均能阻断β６５４异常剪接,部分恢复其正常剪接途径：用回收的ｐＣＭＶＡ转染β６５４ＨｅＬａ细胞后,正常剪接的βｍＲＮＡ水平［β／（β＋β＊）］由０．０５上升到处理后１５ｄ的０．４８,而２种对照质粒处理后对这一比值影响不大．表明ｐＣＭＶＡ可在ＨｅＬａ细胞中随着细胞传代而传递下去,并保持结构与功能完整     

转异源abp基因烟草的叶外植体不同培养中的形态发生

以转正义和反义ａｂｐ基因「生长素结合蛋白的基因」烟草及对照的叶外植体为材料,在附加２ｍｇ／Ｌ或１ｍｇ／Ｌ的６－ＢＡ和不同浓度的ＮＡＡ的ＭＳ培养基上进行不定芽分化试验。在较低ＮＡＡ浓度条件下,转正义ａｂｐ基因烟草的叶外植体分化的不定芽数高于对照和转反义ａｂｐ基因烟草,说明ＳＥ２对生长素的敏感性比ＳＲ１和ＡＳ３高;而在较高ＮＡＡ浓度条件下,ＡＳ３分化的不定芽数大于ＳＥ２和ＳＲ１,说明ＡＳ３对生长素的敏