快中子辐射对红豆草愈伤组织细胞结构影响的电镜观察(简报)

近年来植物愈伤组织无性变异系的诱导和选择,已成为植物细胞工程中十分活跃的领域,快中子、γ射线等电离辐射也已开始被用于愈伤组织抗性变异系的诱导。观察不同剂量电离辐射在诱发植物愈伤组织变异中对细胞结构的影响,对于探讨辐射诱变的细胞学机理     

甘蔗体细胞诱变育种研究

用~60Co-γ射线,甲基磺酸乙酯(EMS)处理组培甘蔗愈伤组织,可提高再生植株的变异机率,处理愈伤组织再生植株性状:株高、茎径、锤度等明显偏离正常的正态分布,差异达1%显著标准,EMS处理较~60Co-γ射线变化大。连续试验观察表明:一些变异性状具有遗传性。用~60Co-γ射线或甲基磺酸乙酯处理甘蔗愈伤组织可作为一种甘蔗体细胞诱变育种手段加以利用。     

甘蔗体细胞诱变育种研究

用~60Co-γ射线,甲基磺酸乙酯(EMS)处理组培甘蔗愈伤组织,可提高再生植株的变异机率,处理愈伤组织再生植株性状:株高、茎径、锤度等明显偏离正常的正态分布,差异达1%显著标准,EMS处理较~60Co-γ射线变化大。连续试验观察表明:一些变异性状具有遗传性。用~60Co-γ射线或甲基磺酸乙酯处理甘蔗愈伤组织可作为一种甘蔗体细胞诱变育种手段加以利用。     

枸杞抗羟脯氨酸细胞变异系筛选及其耐盐特性的研究

试验以枸杞(Lycium barbarum L.)成熟胚诱导的胚性愈伤组织为材料研究了：(1)^60Co—γ射线诱变处理对愈伤组织的影响;(2)耐羟脯氨酸(HYP)愈伤组织变异系的筛选;(3)耐HYP愈伤组织变异系的耐盐性及稳定性分析;(4)耐HYP愈伤组织变异系生理生化特性;(5)变异系的分化和再生苗的生理生化特性。初究结果表明：由胚性愈伤组织经30Gy的^60Co—γ辐射处理,在含16mmol／L HYP选择培养基和无HYP培养基上交替培养4代,分离出耐HYP的愈伤组织变异体;该变异体游离脯氨酸含量比对照高3．3倍,其再生植株叶片游离脯氨酸比对照高13．5倍。     

放射线对水稻花药培养的影响

已有报告指出,低剂量的电离辐射能够促进水稻和芸苔(Brassica napus)花药培养中胚胎发生愈伤组织的诱导和生长。在1991年细胞和组织培养国际会议上,Young Il-Lee报道,用γ射线照射盆栽水稻的花药,愈伤形成率比非照射植株的高得多。国际水稻研究所的科学家R.R.Aldemita和F.J.Zapata用电离辐射照射水稻种子,使之生长并取其穗进行花药培养,发现辐射对难处理种花药培养的影响与敏感种类花药培养的相反。γ射线辐射处理     

γ射线刺激植物组织培养物生长、再生及产物合戍

罗马尼亚‘Stejarul’研究站研究发现,γ射线处理能刺激植物组织培养物生长、再生以及次生代谢产物的合成。照射剂量的作用似乎依处理品种而各不相同。照射剂量为20～30Gy 时,刺激颠茄器官发生愈伤生长和再生,产生大量的快速生长苗,20Gy 照射苗     

烟草组织培养过程中过氧化物同工酶的变化

在烟草的组织中,老叶的过氧化物酶,在迁移速率慢的酶区带对照植株比变异植株多二条酶带,但在幼龄叶片无差异。~(60)Coγ射线诱变的外植体与对照相比,酶谱有显著不同。在组织分化进程中,酶谱亦有显著变化。随着细胞分化进程,定期测定不同剂量γ射线处理的培养组织中酶谱的变化历程,观察到在分化前后酶谱无明显差异。只有在诱变植株生长状态表现明显差异时才见酶谱的变化。培养基中不同浓度组合的激动素、椰乳和2,4-D对细胞生长和分化有不同的调节作用,随着组织分化与脱分化历程,同工酶谱表现明显差异。在组织开始形成愈伤组织以后同工酶谱已有显著变化,但培养在分化培养基上的外植体,在分化前后,其同工酶谱未见明显变化。     

源于小孢子培养的大麦耐盐变异体获取

以大麦品种‘花30’作为供试材料,比较了甲基磺酸乙酯（EMS）和平阳霉素处理小孢子60Co γ-射线辐照处理离体穗和干种子,对300mg·L-1NaCl胁迫培养下游离小孢子的愈伤组织产量和愈伤组织在0.3％NaCl胁迫筛选下的绿苗产量的影响。结果表明,EMS处理离体小孢子和60Co γ-射线辐照千种子的愈伤组织产量和绿苗产量明显优于平阳霉素处理小孢子和60Co γ-射线辐照离体穗。以16份源于种子辐照处理的再生植株自交一代种子为供试材料,比较了在0．3％NaCl胁迫下种子的发芽率和幼苗的成活率以及植株的分蘖数、株高和单株产量。结果表明,‘花30’发芽率为0,供试的16份耐盐变异体中,有14份材料在NaCl胁迫下的发芽率优于‘花30’,鉴定出4份耐盐性明显优于‘花30’的变异体材料。选择耐盐变异体作为供试材料,测定了变异体中Na＋／H＋逆向转运蛋白基因NHXl、NHX2和NHX3和编码甜菜碱醛脱氢酶（BADH）的两个同工酶基因曰肋,和BBD2的表达模式和表达量,结果表明变异体耐盐性的提高与这些基因的表达量存在联系。     

芦苇耐盐变异植株及其细胞学鉴定

用甲基磺酸乙酯（ＥＭＳ）处理芦苇（Ｐｈｒａｇｍ ｉｔｅｓｃｏｍ ｍ ｕｎｉｓ Ｔｒｉｎ．）胚性愈伤组织。从处理后的愈伤组织诱导获得芦苇耐盐变异植株Ｒ５００２－１２。变异植株能在含有１％ ＮａＣｌ的ＭＳ培养基上生长。细胞学检查变异植株是混倍体,染色体数目变异范围在１００至３３ 之间。分蘖植株具有相似的形态学及染色体变异特性     

籼稻体细胞组织培养再生植株D_2代的性状变异

大量试验证明,组织培养过程中可以产生许多变异。Burk和Matzinger首先在烟草的46个体细胞再生植株中,发现了广泛的表型变异。尔后,其他作物如甘蔗、小麦等,均发现有体细胞再生植株的变异。在水稻组织培养研究中,Oono首先报道了利用水稻去壳种子诱导愈伤组织进而分化成的再生植株,在株高、抽穗期、小穗育     

γ辐射引起花生和水稻种胚非按时DNA合成效应的研究

用~3H-胸腺嘧啶核苷渗入法,研究受~(60)Co-γ射线各种剂量(10、20、30、40千伦,剂量率836伦/分)照射的花生和水稻种胚萌发早期DNA合成率的变动。结果表明,受γ辐射的花生和水稻种胚出现非按时的DNA合成,用咖啡碱能够抑制这种合成,这种非按时的DNA合成与γ辐射剂量有一定的关系。本研究工作证明了:在上述两种植物的细胞中具有修复DNA损伤的功能。     

药用植物组织培养的研究——Ⅴ.生长速率和东莨菪碱含量皆高而稳定的变异体

从4000R的~(60)Co,γ-射线照射过的第13代三分三根愈伤组织系获得一愈伤组织变异体。它的生长速率比亲本高3倍,东莨菪碱含量高30％,过氧化物酶同工酶谱也呈现差异。且愈伤组织变异体的这些特征在照射后到第14代(15个月)仍然是稳定的。愈伤组织变异体中的蔗糖酶和硝酸还原酶活性分别比亲本增加了近60％和145％。     

60Co-γ辐射‘石硖’龙眼接穗对嫁接成活率及生长的影响

探讨不同剂量60Co-γ射线辐射‘石硖’龙眼接穗后,辐射对嫁接成活率以及性状变异的影响。结果表明:不同剂量60Co-γ射线辐射对‘石硖’龙眼嫁接成活率和生长均有不同程度的影响,经60Co-γ射线处理后,嫁接成活率都比对照低,且各处理随剂量增大,成活率也随之降低,呈现一定的规律性,新梢生长受到一定程度的抑制。     

单倍性烟草Hyp抗性愈伤组织变异系的选择及其生理生化特性的研究I．Hyp抗性变异系的抗性表现

利用多步正筛选系统,对⁶⁰C0Y射线诱变的单倍性体细胞愈伤组织无性系经过连续八轮的分离与选择,获得了抗脯氨酸类似物Hyp(L－羟基脯氨酸)的烟草愈伤组织变异系C^r-2,H^r-4和X^r-1,并由之再生出了相应的抗性植株。离开选择压力的Hyp抗性变异体愈伤组织系、再生植株及其次生愈伤组织均具抗Hyp的抑制作用。变异系对苏氨酸的抑制作用不表现交叉抗性。在Hyp抑制培养基上,变异体小植株的发根能力高于其野生型。离开选择剂转代培养了七代的变异系对Hyp的抑制作用仍保持着相对稳定的抗性。     

60Co-γ射线对簇毛麦愈伤组织细胞的分裂及染色体的影响

为了探明^６０Ｃｏ-γ射线对簇毛麦愈伤组织的细胞分裂及染色体变异的影响,采用１０－３００Ｇｙ剂量辐照,结果表明７０～３００Ｇｙ引起细胞的间期致死,３０－６０Ｇｙ引起分裂致死。１０－６０Ｇｙ均能引起染色体的结构及数量变异,其中有利于融合双方染色体整合或重组的片段化在６０Ｇｙ辐射后第３天频率最高。愈伤组织在继代后的天数明显影响辐照效应     

白杄体细胞胚胎发生及其植株再生条件的优化研究

为建立白木千体细胞胚胎发生及其植株再生的高频率实验系统 ,对聚乙二醇及干化处理的影响进行了系统研究。结果表明 ,在分化培养基中附加 5 0 g/L聚乙二醇可显著提高愈伤组织的分化频率和每块愈伤组织产生的体细胞胚个数 ,而干化处理又能使体细胞胚的萌发率大幅度上升     

小麦—簇毛麦杂种幼胚无性系的建立及植株再生的研究

普通小麦与簇毛麦杂交十分困难,得到的植株很少。然而通过杂种幼胚无性系培养,不但能获得大量的再生植株,而且利用愈伤组织能较长时间保存杂种种质。经过继代培养十个月共九代,由四个杂种幼胚的愈伤组织获得试管苗1957株,其中秋水仙碱处理1350株,成活1122株。套袋自交后获种子664粒,并获得自然授粉种子508粒。对幼胚愈伤组织和再生植株根尖进行了细胞学观察,绝大多数染色体数目为2n=28,变异率分别为33.04%和12.90%。愈伤组织保存一年后,仍有很强的分化能力,幼苗分化率为85%。     

柑桔原生质体射诱变筛选抗寒再生植株

用１１６１Ｃ／ｋｇ软Ｘ－射线辐射“Ｐａｇｅ”桔柚胚性愈伤组织分离的原生质体,经－１１℃低温选择后,将存活的原生质体培养再生植株。研究表明,“Ｐａｇｅ”桔柚胚性愈伤组织原生质体在４１２８Ｃ／ｋｇ辐射剂量处理后几乎不能恢复分裂;２０６４Ｃ／ｋｇ辐射时分裂频率低,即使分裂也难以发育为胚状体;而１１６１Ｃ／ｋｇ辐射后,经－１１℃低温处理仍有１０．２％￣１６．９％的分裂频率,且部分细胞团能发育为胚状体。辐射     

两个苏丹草品系成熟种子的组织培养和植株再生研究

该研究以苏丹草品系S722和Sa的成熟种子为外植体、MS培养基为基础培养基,2,4-D和NAA各3个浓度共6个处理对这两个苏丹草品系成熟种子进行愈伤诱导,探讨不同品系在不同植物生长物质浓度及植物生长物质组合中诱导愈伤组织和继代培养以及分化的能力。结果表明：苏丹草S722和Sa成熟种子的愈伤诱导率差异不显著,平均诱导率为17.19％。诱导培养基中2,4-D浓度为0.5或1 mg?L-1时,诱导效果最佳,而添加NAA不能提高愈伤诱导率。在继代培养中,设定2,4-D和6-BA各两个浓度共4个处理组合,处理1(2,4-D 1 mg?L-1＋6-BA 0 mg?L-1)的继代培养效果最佳。为了解不同植物生长物质对愈伤分化的影响,设定6-BA、NAA 各两个不同浓度、KT 3个不同浓度共5个处理组合对继代培养的愈伤进行分化培养。在5个处理中,处理1(6-BA 2 mg?L-1＋NAA 0 mg?L-1＋KT 0 mg?L-1)对 S722成熟种子诱导的愈伤分化率最高,达33.3％。在这两个苏丹草品系中,S722更容易分化培养。综上结果表明,2,4-D浓度为1 mg?L-1时诱导愈伤和继代培养效果较好,6-BA浓度为2 mg?L-1时分化效果较好。另外,针对不同苏丹草品系进行组织培养和植株再生时,适当调整植物生长物质浓度能提高植株再生的成功率。     

烟草耐盐愈伤组织变异体对盐渍的适应性

用组织培养及逐步增加,NaCl浓度的方法,筛选出烟草耐盐愈伤组织变异体。能耐盐(2％ NaCl)的愈伤组织在2％ NaCl中继代29次,再移入无盐培养基中培养11和20代后不能保持提高的耐盐性,分别退化到只耐1.5％与1.0％ NaCl的水平。耐2％ NaCl愈伤组织产生的再生植株自交后代,其萌发种子、幼苗及成长植株均未能表现出耐盐性,说明用选择胁迫方法所筛选出的耐盐细胞系,其耐盐性的提高属于生理适应性。