抗H-Y抗原单克隆抗体的研究

H-Y抗原是由Y染色体编码的、雄性动物特有的组织相容性抗原,分布在细胞膜表面,利用抗H-Y抗体可以鉴别或杀伤早期的雄性胚胎,从而达到控制动物性别的目的。但是,用常规方法获得的H-Y抗体,产量很低,效价不高,无法大量应用。为此,我们采用单克隆抗体技术解决这一问题。 用雄性C57小鼠的脾细胞免疫雌性C57小鼠,经加强免疫后,取免疫雌鼠的脾细胞与骨     

血清学检测H-Y噬菌体Fab抗体阳性克隆的分析

目的 为分析H-Y噬菌体Fab抗体特异性,筛选用于抗体亲和力提高的H-Y噬菌体Fab抗体阳性克隆.方法 以从噬菌体Fab抗体库中筛选到具有雄性特异性结合活性的阳性克隆A6、A8、E6为基础,通过C57BL/6鼠脾细胞为抗原的ELISA分析3株阳性克隆的特异性,镜下观察亲和力较好的A8阳性克隆ELISA结果,利用生物信息学方法预测分析该克隆的抗体基因可变区序列和结构.结果 ELISA分析显示3株阳性克隆具有雄性特异性,其中A8阳性克隆具备较好的雄性特异性.A8克隆具有免疫球蛋白轻链和重链可变区结构,其重链、轻链可变区分别属于VHI和VκIV基因家族.结论 A8阳性克隆可用于后续的导向筛选和抗体基因改造等研究工作.     

哺乳动物精子性别特异膜蛋白的研究进展

在精子形成过程中,存在性染色体特异基因的表达,这是X、Y精子膜蛋白差异形成的基础。尽管精子形成过程中形成的细胞间桥可能使精子细胞间共享基因表达产物,但雄性传递偏移现象和性别偏移现象的发生又证明两类精子间存在非共享蛋白,同时H-Y抗原表位的成功鉴定、精子分离实验结果以及性别特异蛋白的检测结果都肯定了精子膜蛋白差异的存在,只是这种膜蛋白的差异很小。蛋白分离技术的进步及技术间的优化集成,为精子间细微差异膜蛋白的分离提供了可能。     

使雌性排斥雄性移植器官的基因

使雌性排斥雄性移植器官的基因在器官移植中,雄性可以接受雌性供体的器官,而雌性却排斥雄性供体的器官,因为雄性体内存在Ｈ－Ｙ抗原,而雌性体内没有这种抗原。科学家用高度近亲繁殖实验小鼠施行皮肤移植时首次发现了Ｈ－Ｙ抗原。《Ｎａｔｕｒｅ》今年８月２４日报导,...     

鼠源性抗雄性特异性抗原噬菌体Fab抗体的制备及分析

利用噬菌体抗体库筛选技术获得抗雄性特异性抗原的噬菌体Fab抗体,首次采用雄鼠脾细胞对鼠源性抗雄性特异性抗原噬菌体Fab抗体库进行3轮亲和富集和2轮雌鼠脾细胞吸附,对筛选后特异性噬菌体Fab抗体进行ELISA分析,重组率鉴定及基因测序分析。结果显示,5次筛选后的15个菌落中有9个能产生抗雄性特异性抗原特异性噬菌体抗体,噬菌体Fab抗体的基因重组率为60%,E5克隆的重链、轻链可变区序列分别属于VH1和VκⅣ基因家族,这为挑选出高亲和力的抗雄性特异性抗原噬菌体Fab抗体奠定了实验基础,将推进雄性特异性抗原及其抗体的研究进程,并为性别控制研究开创新途径。     

高效特异的抗日本血吸虫循环抗原免疫血清制备的研究

制备高效特异的抗血吸虫循环抗原的免疫血清,是提高检测循环抗原方法灵敏度的重要环节。Bawden(1974)曾用淀粉凝胶电泳分离循环抗原,用甲基化牛血清白蛋白作为载体致敏动物,但所得的抗血清特异性较差。平田瑞成(1976)用酚抽提循环抗原制备抗血清,但免疫源性较差。Deelder(1976)     

诺氏疟原虫不同组分的抗原抵抗疟疾感染的实验研究

我们用乳剂制造器崩解原虫,以分级离心的方法提纯抗原,并将不同组份的抗原分别进行动物实验,结果表明,此抗原可能属于原虫胞膜微粒体成分的l号抗原。在不加任何佐剂的条件下,对诺氏疟原虫的攻击感染有较强的抵抗能力。     

行为生态学(十五):动物的领域行为(2)

(2)无资源领域——求偶场有时,雄性动物既不保卫雌性动物,也不竞争雌性动物所需要的资源。这或许是因为资源过剩或资源的时空分布难以预测,或许是因为雄性动物为此需要付出的代价太大。在这种情况下,雄性动物往往聚集在一个传统的公共场地,各自占有一小块领域,并以自己的显示行为争取把雌性动物吸引到自己身边来。这种雄性动物求偶时聚集的场地就叫作求偶场     

环境决定爬行动物性别研究的进展

爬行动物的性别决定机制有两种,一种是由环境决定性别,另一种是异型性染色体决定性别。前者,在爬行动物中具有普遍性;未发现有异型性染色体的爬行动物,其性别由环境因子决定。剧烈的环境条件,可能压倒基因型性别决定。H-Y抗原,可检测未发现异型性染色体决定性别物种的遗传决定型。     

FMDV非结构蛋白2C主要表位区与3AB基因的组合表达与活性分析

近年的研究表明, 口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)2C在区分灭活疫苗免疫动物与自然感染动物方面具有潜在的价值, 为了建立敏感性更高的鉴别诊断方法, 将截取了2C蛋白N-端和C-端的主要B细胞表位区和完整3AB蛋白基因组合后, 进行了原核表达, 得到了分子量约为47.6 kD的目的蛋白2C￠3AB。通过Western blotting分析证明, 表达产物能被FMDV感染动物阳性血清识别, 具有很好的反应性。以通过电泳纯化的目的蛋白作抗原进行间接ELISA检测不同来源的动物血清, 结果表明, 该抗原仅与感染动物血清具有很好的反应活性, 而与健康动物与免疫动物血清无反应, 说明重组蛋白2C￠3AB可作为区分灭活疫苗免疫动物与感染动物的鉴别诊断抗原。用2C￠3AB和3ABC为抗原进行间接ELISA, 对比检测田间血清样品, 结果显示2C￠3AB-ELISA敏感性比3ABC-ELISA高。说明以重组蛋白2C￠3AB作为鉴别诊断抗原, 能进一步提高对临界值血清的检出率, 这对区分灭活疫苗免疫动物与FMDV隐性感染动物与带毒动物具有非常重要的意义。     

消减免疫法在单克隆抗体制备中的应用

单克隆抗体是现代生命科学研究的重要工具。常规的杂交瘤技术通常并不能获得特定目的抗原的单克隆抗体,而消减免疫法可在一定程度上弥补这一缺陷。消减免疫利用特殊的免疫耐受途径来大幅增加目的单抗的产生数目。它建立在宿主动物对免疫显性抗原或非目的抗原（耐受原）耐受的基础上,宿主动物可通过高区带耐受、新生期耐受和药物介导的耐受等3种方法获得耐受,然后再对已耐受的动物接种目的抗原（免疫原）,特异性抗体便随之产生。近20年来,用消减免疫法成功地制备了多种独特抗体。简要阐述了可用消减免疫法获得的单克隆抗体的制备。     

小鼠细胞减数分裂标本的制作

遗传学教材中,一般是用蝗虫做动物减数分裂实验材料的。本文介绍一种用雄性小鼠细胞制作减数分裂标本的方法,整个制作过程用时较短,方法也很简单,一般生物教学实验室都能完成。１方法和步骤（１）选雄性成年小鼠１只,腹腔注射秋水仙素溶液（约２μｇ／ｇ体重）。２～...     

火箭电泳法进行人用狂犬病疫苗抗原的检测

应用火箭电泳法(RIE)建立并优化了人用狂犬病疫苗抗原的检测方法。以传统的动物NIH法对电泳结果进行验证,实验结果显示该方法特异、重复性好、简便易行,与NIH法有较好的相关性。适用于人用狂犬病疫苗中间品抗原的检测,对人用狂犬病疫苗的生产及质量控制有重要意义。     

LCMV重组蛋白抗原应用研究

目的用重组蛋白抗原取代淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)抗原用于实验动物感染LCMV检测.方法合成LCMVsRNA第1816～2178位核苷酸序列编码的Np第380～500位氨基酸基因,克隆在Hisx6-GSTpET-28a载体中,表达产物经固定化金属配体亲和层析纯化,建立ELISA检测试剂.结果合成基因表达产物经Ni-NTA-Agarose纯化后纯度达到95%以上.ELISA检测小鼠、地鼠和豚鼠结果与全病毒抗原基本一致,而且特异性较强,操作简便.结论用合成基因表达产物取代LCMV抗原检测病毒抗体,不仅可以消除病毒传播可能,而且特异性强.为实验动物及生物材料质量控制提供安全有效方法.     

新型芋螺镇痛多肽SO3抗体产生的动态性观察

抗原的免疫原性不仅与抗原的分子结构大小、亲水性强弱有关 ,而且与免疫动物的种类、年龄、性别及免疫程序 ,以及抗原和载体蛋白的偶联率大小也有关。ＳＯ3是我们从中国南海线纹芋螺中发现的新的芋螺毒素[1 ] ,具有强烈的镇痛活性 ,目前已进入临床前动物实验。我们通过肽合成法 ,经裂解、纯化、折叠得到了纯度为 95 %的ＳＯ3,由于其分子量小 ,直接免疫动物极难产生抗体 ,因此我们将ＳＯ3与载体蛋白 (牛血清白蛋白、卵清白蛋白 )通过 5 0 %的戊二醛进行交联后 ,用人工抗原ＳＯ3 ＢＳＡ进行免疫 ,动态观察其抗体的形成过程。此实验为进一步研…     

双向血清抗原比测定可以用于动物学分类

为探讨新的生物学分类方法,以人、牛、羊、猪、鹿和鸡共计6种不同动物的血清为抗原分别制备了其相应的6种抗血清,并进行每两种动物间的双向交叉血清定量免疫反应,计算出每两种动物血清间的抗原比值,以抗原比值为量度绘出6种动物的树状分类图。结果表明：抗原比分类与和自然分类及文献报道的核苷酸序列分类相吻合,说明抗原比测定可以用于动物学分类,对其理论意义进行了讨论。     

大鼠催产素是一种应激激素

在雌性哺乳类动物,催产素在泌乳及分娩过程中起着十分重要的作用。雌、雄性哺乳类动物神经垂体催产素的浓度相同,但雄性动物催产素在生理条件下有什么重要作用还不清楚。Lang等的研究表明,大鼠催产素可能参与应激性反应。     

雌雄连锁基因的性别遗传

一、性别决定的研究概况美国遗传学家摩尔根在性别决定中指出,性染色体在生物界中比较普遍的类型有两种:XY型和ZW型.据此得出的结论是,出生的后代雌雄比值相等,但实际情况并非如此.例如有人做鳄类和人类胎儿的性别调查,均不符合1∶1规律.1976年研究哺乳类性别决定的美国免疫学家瓦赫特尔的H-Y抗原决定性别     

以牛痘病毒为载体的乙型肝炎病毒表面抗原基因的表达

乙型肝炎是一种严重危害人类健康的疾病,对它的防治国内外均十分重视。乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)感染所致。HBV是部分单链的DNA病毒,其基因组编码了表面抗原蛋白、核心抗原蛋白以及内源DNA聚合酶等蛋白质。乙肝表面抗原蛋白(HBsAg)是病毒的外壳蛋白,在乙肝病人的血液中能形成直径约22nm的表面抗原颗粒。用它作为抗原给动物注射,可使动物产生专一性抗体。     

胸腺内注射法诱导免疫耐受

胸腺内注射法诱导免疫耐受已被肯定。不同的诱导抗原（细胞性和可溶性）、不同移植模型（同种和异种）以及不同的动物模型（小动物和大动物）均能以此法诱导免疫耐受。以前认为在胸腺内注射抗原时需要短时加用抗淋巴细胞血清（ＡＬＳ）等免疫抑制剂,此观点最近受到挑战。作者认为耐受的诱导与注射的抗原剂量相关,而与抗原形式关系不大,对其临床应用可能性亦进行了探讨。