医药其它

921368由变铅资链娜菌分泌抗生蛋白链菌素〔俄〕/Bol。-tin,A.P.…1 Antibiot.Khimioter一1091,36(6)一s~12[译自DBA,i。。1,10(25),91一10410〕 构建T一种bireplieon载体质粒pVGi4o,其中含有编码dagA基因信号肤的表达单位。将质粒pAPS中的阿维T链霉菌(“,e尹￡o仍犷eesa”￡d‘-耐落、抗生蛋白链菌素基因克隆到质粒pVG140上,获得重组质粒p VG141和pVG142。用它们转化变铅青链霉菌(5.1畜公落da.‘)Tk64,以硫链丝菌肤抗性为基础,选择含有质粒的克隆。重组菌株能够分泌抗生蛋白链菌素。检测了培养基成分和碳源对该抗生素的影响。5.1…     

基因工程

890690制备棒状病毒表达载体的方法〔专,英〕/Smith,G.E.…/US Patent US4745051.Pub。17.05.88.ApPI.US498s5a,filed 27.05.83〔译自CBA,1955, (8),3152〕 酶切棒状病毒DNA,产生一个含多角体蛋白启动子以及充足的两翼序列(以利于同源重组)的棒状DNA。将此片段插人到一种克隆载体中,并将一外源基因置子该启动子的下游,形成重组穿梭载体。(主璋瑜)890691链霉菌分泌载体仁专,英〕/USPatent US 4745056,.Pob.17.05.38,Appl.US 66384母,f呈lod 23一0.84〔译自CBA,1988,(8),3153〕 能在链霉菌(s考呷户加呷馏。中产生所需蛋白的DN…     

疫苗

924009异源基因在牛分枝杆菌BCG中的表达:抗HIV一1Nef蛋白细饱反应的诱导〔英〕/Winter,N.…了Geue一1991,109(i)一47~54〔译自DBA,1992,11(8),92一04359〕 为了用牛分枝杆菌菌株BCG作保护性抗原载体,将编码Nef蛋白的H工V一病毒一1基因克隆于大肠杆菌一分枝杆菌穿梭载体(质粒pRR3)几中并导人BCG。质粒pRR3含一个在分枝杆菌中复制和保留必需的质粒pALSOo。片段、转座子Tn 903卡那霉素抗性基因和大肠杆菌复制原。n“f_基因在含白色链霉菌(St,epto哪歹ees albos)groES/groELi操纵子的启动子和合成核糖体结合位点的DNA表达框架(…     

医药其它

922175用皿组变铅青链霉菌生产可溶性CO4衍生物的发酵过程〔会,英〕/Gerber, R.G.“·了Abst:.Pap.Am。Chem.Soe。一1091,202 Meet.,Pt.1。一BIOTs6〔译自pBA,1991,10(23),,1-13493〕 研究了利用重组变铅青链霉菌(S汁即切饥夕-cesl‘”“aos)生产可溶性CD4(sCD4)衍生物。在一个10升规模的发酵罐里,改进发酵过程使胞外产物累积量比初始摇瓶里产生的增加10倍。此发酵过程的优化主要是研究pH、溶解氧浓度,培养基组成对胞外产物累积及其稳定性的影响。培养基研究揭示,在培养基里加入一种蛋白水解物可提高产物的累积,缺少葡萄糖降低了…     

动物遗传工程

924596用吸岭界素N一乙酸转移蔺(P AC)作为转基因动物中新的报道甚因〔英〕/Lah。:,E .G.“·,Nu-e leie Aeids Researeh。一1991,19(12)。一3465[译自ANI,1992,4(7),3321〕 PAC通过使嚷吟霉素酪氨酸部分的氨基乙酸化,可使嚷吟霉素失活。将白黑链霉菌pac基因与子宫珠蛋白5产侧区部分和SV40多聚腺普化信号一起导入小鼠。PAC在转基因小鼠子宫中表达,但不在家畜或家禽中表达。(朱遐)924587爪幼成体和招蚌专性珠蛋白基因在转基因小砚中的表达〔英〕/Dillon,N.…/Nueleie Aeids Re-seareh一1901,i。(22)一6227~6230〔译白ANI,1992,4(…     

抗生素和干扰素

924355能产生曲张链菌素复合物的链霉菌种〔英万Vesse-linova,N.…了Folia Mierobiol一1901,56 (6)。一535~541〔译自DBA,1992,11犷11),92一06133〕 研究了链霉菌菌株1000的形态学、培养和生理生化特性及其抗生素的产生。在菌丝体和培养滤液中均产生抗生素一1011和一1012,4天后抗生素的生物合成达最大值(4 109/1)。菌株1。。o的变种1011能产生10oomg/1抗生素一1021,将之与亲本菌株10。。的生产水平(41mg/l)进行比较。经鉴定抗生素一1011为曲张链菌素。在相同培养条件下,2株链霉菌的产物组分有不同。菌株100。和壮观链霉菌(5.。户ec‘ab￡…     

基因工程

862389链霉菌和相关徽生物中应用的克隆载体〔专,英〕/Fayerman,J.T.…//USP-atent US 4513086.Pub.23.o4.85.Appl.US 404082,filed 02.08.82〔译自CBA,1985,(7),2127〕一种rD NA载体含有功能性复制原点,这一复制原点含有质粒pEL102的内切酶切割片段和一个或几个至少能表现一种抗生素抗性的DNA片段。     

抗生素和干扰素

924003采用多价噬菌体减少土壤稀释板上的链霉菌〔英〕/Kurtboeke,D.I.…/J.Appl.Baeteriol一1992,72(2)一103~111〔译自DBA,1992-11(8),92一04243〕 本方法意在分离非链霉菌属的产抗生素放线菌菌株。接种之前,将土壤悬液置于链霉菌多价噬菌体91、12、73、22、99、82、94、85、34、88、93、64、70、95、11及102悬液中。噬菌体敏感性有效地控制了链霉菌数量,且效果持续很久。虽说在淀粉一酪蛋白琼脂板上减少量最显著,但噬菌体效应基本上与营养成份无关。用多种来源的样品检验了这一新方法的效率和实用性。评价了减少土壤稀释液中的链霉菌…     

抗生素和干扰素

920494氮素同化作用对调节抗生素生产的影响〔俄〕/Chi-peva,V.…产Antibiot.Khimioter一1991,36(3)一5~s〔译自DBA,1992,20(22),91-06742〕 研究了在发酵吸水链霉菌(尽加。川。。,。e。甸卯os““州“哪)生产抗生素期间,氮素同化作用途径中酶的活力,这些酶包括谷氨酸脱氢酶(GD-H)、谷氨酞胺合成酶(GS)、谷氨酸合酶(G-OGAT)和丙氨酸脱氢酶(ADH)。将吸水链霉菌155置于含各种N源的培养基(2 09/1葡萄糖、3 .59/IKH:PO‘、0.69/IMgSO‘·了H:O和zml微量元素溶液)中,于28℃、240印m搅拌下培养。没有观察到GDH活性,高浓度的钱和丙氨…     

质粒研究与载体构建

922767用于抗体筛选的农面表达载体〔英〕/Breitling,F.…/Gene。一1901,104(2),一i‘7~153仁译自DBA,1092,11(3),92一012凌03 构建了一种新载体(质粒噬菌体pSEX),它表达与大肠杆菌噬菌体基因一皿蛋白融合的单链抗体(Ab)。通过此载体可用少量抗原从大基因库中筛选出专性Abs。在无1 PTG存在下通过野生型一21一噬菌体在大肠杆菌JM101里诱导产生了抗溶菌酶Ab一plll融合蛋白。利用针对重链和轻链间衔接序列的表位的单克隆Ab,以及N一末端序列的抗血清 鉴定了这种融合蛋白。此融合蛋白能与上述抗原结 合,组合到侵染性质粒噬菌体粒子里(能…     

质粒研究与载体构建

922017含诱变白喉毒素A一链编码序列质一粒的构建和农达〔英」/F isher,K.S。…了Infeet.Immun一x991,69(20)一3562~3565〔译自DBA,1991,10(23),91一13322〕 用编码白喉棒杆菌(Co,鱿,e乙acte,￡“仍‘￡-尹hth。川““)白喉毒素一A链片段(DT一A)转染可杀死细胞。构建了含3种突变DT一A编码序列(用Asp、Ser或Gln置换Glu一145)的表达载体。突变毒素的体外ADP核糖基化活性降低到1/100~1/300。在用含虫荧光素酶报道基因质粒的HeLa和293细胞进行的共转染实验中测定了这些构建物的毒性。比较了3种新的DT一A突变质粒和含野生型DT一A的…     

医药其它

922949在特定杆状病毒表达系统中生产具生物学活性的跳胺化eeeropin〔英〕/Andersons,H.…2 Bioe-liem.J一1091,250,Pt.1一219~224〔译自DB-A,1992,11(3),92一01388〕 构建了表达质粒pVL941一22一ceoA,其中含有:组织血纤维蛋白溶酶原激活子(t一PA)的信号肤、从金黄色葡萄球菌蛋白一A(22)衍生的合成性抗体结合部分、编码cecropin一A天然部分的合成片段(附加C末端甘氨酸密码子)。将此融合基因转入首着银纹夜蛾核多角体病毒载体基因组,再用重组病毒感染草地贪夜蛾Sfg细胞。对从细胞培养基获取的蛋白进行SDS一PAGE和blotting检测。采…     

抗生素和干扰素

921721土.素生物合成途径基因的遗传操作〔会,英〕//Butler,M.J.…了Dev。Ind.Mierobiol。-1990,31一41~50〔译自DBA,1991,10(21),91一12139」 一种基因能在掩裂链霉菌(战,“,to,缪“es州哪。s,s)的土霉素生物合成途径中编码末端生物合成酶,利用逆向遗传方法证实了该基因位于早期途径的相同基因簇中。随后又证实了所有生物合成途径基因均位于染色体DNAI片段中,并赋予转化菌株产生土霉素的能力,该染色体DNA也可在其它链霉菌中表达。一种尝试是通过提高这些生物合成基因的剂量来提高土霉素的产量。上述方法需了解控制生物合成基因表达…     

医药其它

931310资白工程:作为血液代用品的改良血红蛋白〔英〕/Jessen,T.H.…1 Angew.Chem.Int.Ed。Engl一2902,31(7)。一545~549[译自DBA,1992,11(21),92一11833〕 在大肠杆菌、酿酒酵母及转基因的小鼠和猪中完成了全功能人血红蛋白的表达。这些重组的血红蛋白在未修饰的情况下不能作为血液代用品,因为在缺乏2,8一二确酸甘油酸时该蛋白具太高的氧亲和性,并分裂为二聚体。上述向题已通过蛋白工程解决了。通过甘氨酸残基将2个a链中的1个的C一末端与另一个相连接,这个C一末端的3一维结构与其它a蛋白链的N一末端相近。该融合子不能使血红蛋白的亲…     

激素和活性多肽

922142微生物生产的鱼生长激紊〔英〕/Kimura,A。厂Critieal Rev.Bioteehnol一19仑1,11(2)113~127〔译自DBA,1991,10(23),91-13460](李思经)922143借助于皿组杆状病澎使两种类型的子实体促性腺激素“亚基在昆虫细胞中表达〔英〕/Huang,C.J一尹Proe.Natl。Aead.Sei.U.S.A一1991,85(17)一7486~7490〔译自DBA,lggx,10(23),91一13连61〕(李思经)922144里氏木霉中凝乳酶一胰岛素融合物的分泌〔会,英〕/Lawler,5.E.一/Bioehem.Soe.Trans一1991,19(3)一2455〔译自DBA,1991,20 (23),91一13462〕(李思经)922145通过酿酒醉母分泌寡聚物V刻…     

核酸及蛋白质合成、提取、纯化

920401简化盆组蛋白纯化的遗传方法〔会,英〕/Moks,T.…j Abstr.Pap.Am。Chem.Soe一1991,ZoiMeet.Pt.z一BIOTS〔译自DBA,1991,10(13),91一07234〕 开发了以细菌血清蛋白受体如葡萄球菌蛋白一久和链球菌蛋自一G为基础的基因融合系统,以简化大规模和小规模的重组蛋白纯化。由于IgG和血清白蛋白间的强相互作用,可以一步回收基因融合产物,得到高产量和纯度。在融合蛋白的蛋白一A/G衍生物和目的蛋白之间导人不同专性酶促和化学裂解位点。这样可从纯化的融合蛋白上除去亲和性拖尾,放出生物活性分子。通过设计一种编码2个合成的1 gG一结…     

基因工程

862962装配型质粒克隆用载体〔专,英]Hunter,1.5.了European Patent Appl.EP 0146368.Pub.26.06.85.Appl.GB833659,filed 16.12.83〔译自CBA,1985, (9),2835」 构建了一个双功能的杂种装配型质粒克隆载体,它能够在大肠杆菌和链霉菌属中复制。这个载体叫pPZ74,它可能用于在大肠杆菌中构建基因文库,然后,可以下经进一步的DNA操作,即能被转回到链霉菌中。 (郭殿瑞)862963编码兔肿瘤坏死因子(TNF)的DNA,具有上述插人的DNA的运载体,用上述载体转化的寄生,兔TNF多肤和这种肚的生产方法〔专,日〕/Yamada,M一了European Patant Appl。…     

疫苗

941 060砂眼衣原体主要外膜蛋白在大肠杆菌中的表达〔英〕/Manoiog,D.S。…尹Infeet。Imm住n。-1993,61(10)。一4093~4095〔译自DBA,1993,12(22),93一12728〕 利用含主要外膜蛋白(MOMP)基因。mpl的质粒pTTQ一MOMP,在大肠杆菌DHS一a中表达砂眼衣原体MOMp。将DHS一a/pTTQ一MOMP培     

环境保护及农业废物利用

920384通过Phanerochaete和链霉菌菌种生物降解可降解的塑料聚乙烯〔英叮Lee,B.…尹Appl.En,-1 ron.Microbiol一1991,57(3)一678一685E译自DBA,2991,10(9),91一05411〕 采用含助氧化剂和6%淀粉的商品聚乙烯,探i」能降解木质素(fJ phane子oehaete eh勺505尹。,-落u哪EM446、和链霉菌种等(St,e尹to仍犷ees)分解可生物降解的塑料的能力。将1张塑料放人70cC的干燥炉中,在大气压或空气中。、4、8、12、1G或20天,助氧化剂活性增高。塑料经化学灭菌,与链霉菌菌种共培养在37“C,。.660%酵母膏培养从(pH7.1)的z25rpm摇瓶里,p无aoe,oe无a-。t…     

天蚕素A-蜂毒素杂合肽用pBV220载体的表达、纯化和活性测定

为提高抗菌肽的表达,在抗菌肽的N端融合了1段酸性小肽以中和表达产物对宿主的毒性;并将融合肽基因同向串连成多拷贝,在大肠杆菌中获得了较高的表达。用化学合成法分别合成了编码天蚕素A(1-8)-蜂毒素(1-10)杂合肽和酸性小肽的DNA片段,首先将其拼接成融合肽的完整基因,然后通过前后接头将融合肽基因连接成两侧具有EcoRI和SalI酶切位点的同向串连的多拷贝基因。将5份拷贝的基因克隆至pBV220表达载体,转化E.coliDH5α,温度诱导得到表达量为35%的融合蛋白。表达产物主要以包涵体形式存在,将包涵体溶解,经Ni²⁺-NTA琼脂糖亲和层析获得纯化的融合蛋白。融合蛋白再经CNBr切割和阳离子交换层析,得到纯化的抗菌肽,经蛋白质N端测序确认序列正确。琼脂糖扩散法和液相测定法证明了纯化的抗菌肽具有抗菌活性。