双歧杆菌地高辛标记寡核苷酸基因探针制备和应用研究

目的探讨地高辛标记寡核苷酸基因探针应用于微生态研究的可行性和实用性。方法制备双歧杆菌属和部分种的地高辛标记16S rRNA寡核苷酸探针,初步应用于微生态制剂鉴定和临床肠道微生态检测,评价寡核苷酸探针杂交在肠道微生态研究和检测中的应用价值。结果地高辛标记寡核苷酸探针具有较好的特异性与灵敏度：地高辛标记的双歧杆菌属和种的共6种寡核苷酸基因探针与标准菌株杂交后灵敏度和特异度分别为属探针95％、75％,青春双歧87．5％、90％,两歧双歧87．5％、87．5％,短双歧87．5％、92．5％,婴儿双歧75％、95％,长双歧75％、100％。结论寡核苷酸基因探针用于肠道细菌的鉴定显示出一定前景,加大探针的种类与扩大调查范围有可能使该技术替代现有细菌培养技术。     

双歧杆菌研究现状和应用前景

双歧杆菌作为人类肠道菌群的重要成员,在人体保健与疾病防治方面的作用引人瞩目。近年来,对双歧杆菌的分类地位及生物学作用进行了深入的研究,并在保健品及药品等方面进行着广泛的开发。     

寡核苷酸探针制备的优化

目的:探讨寡核苷酸微阵列制备中适合使用的探针浓度、探针缓冲液pH值、离子强度、优化杂交条件。方法:选取人白细胞抗原DQA1位点,针对多态性集中的外显子2设计一对保守引物及16条特异性分型探针;分别用ddH2O和0.1、0.2mol/L碳酸盐缓冲液(pH=7)稀释探针至100μmol/L;选取合适的缓冲液浓度后,调碳酸盐缓冲液为5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0等6种pH值,选取最优pH值及离子强度,分别溶解探针至20、50、100、200μmol/L,比较上述不同条件的杂交结果。结果:用0.1mol/L、pH9的碳酸盐缓冲液溶解探针杂交效果最佳;探针浓度为20μmol/L时信号弱,其他浓度下无显著差别。结论:通过探针制备的优化可以提高杂交效率,探针浓度与杂交信号强度无明显正相关。     

双歧杆菌及微生态制剂

自 Tissier于 1899首先发现双歧杆菌 (Bif idobacterrium)以来 ,双歧杆菌及其制品与人们的日常生活间的关系日趋紧密。已报道双歧杆菌属的 3 2个种 [1]栖居于人和动物 (牛、羊、兔、鼠、猪、鸡和蜜蜂等 )的肠道、反刍动物的瘤胃、人的齿缝和阴道等部位。其中除齿双歧杆菌可能是病原菌外 ,其他种尚无致病性的报道。近年 ,含有一定数目活菌的微生态制剂的研究取得了很大的进展 ,尤其是含有双歧杆菌的微生态制剂。据19 94年统计 ,国内约有 60多种含双歧杆菌的产品投入市场。在国外 ,含双歧杆菌的食品也十分流行 ,特别是在日本、欧洲和北美。据…     

双歧杆菌微生态调节作用的应用

人体的体表及其与外界相通的腔道中常有微生物存在 ,其中一部分为长期寄居的微生物 ,在机体防御机能正常时是无害的 ,称为“正常菌群”。人体的肠道中其回肠下部至结肠 ,由于蠕动减慢 ,食物流速小 ,p H较高 ,Eh较低 ,致使微生物数量增大 ,也是厌氧菌最为集中的地方。在肠道中有葡萄球菌、粪链球菌、大肠埃希菌、乳酸杆菌、产气荚膜杆菌、类杆菌、双歧杆菌等 ,以双歧杆菌和类杆菌占绝对优势的菌构成了正常菌群 ,其中 ,双歧杆菌是人体内重要的生理性有益菌 ,在调节肠道的微生态平衡过程起着重要的作用。目前从人体中分离到的双歧杆菌有 :婴儿…     

双歧杆菌的分子生物学研究进展

双歧杆菌的分子生物学研究进展重庆医科大学检验系重庆６３００４６蓝景刚,胡宏近年来,对双歧杆菌的研究十分活跃。本文将就双歧杆菌的表面结构、酶、细胞外分泌物质、颗粒和核酸等分子水平上的研究进展及其与微生态制剂的关系作一综述,以期对双歧杆菌的基础和应用研究...     

双歧杆菌的保健功能及其应用开发

双歧杆菌的保健功能及其应用开发施跃峰（浙江省农业科学院微生物研究所,杭州３１００２１）微生态学认为人类与其所处的外部环境发生密切联系外,还与其身体内所定居的微生物群相互依赖、相互制约,彼此保持着物质、能量和信息的交流。人体携带约有１０１４个微生物,而...     

双歧杆菌抗衰老作用的初步研究

本文用双歧杆菌活菌液喂养老龄大白鼠,观察其血中抗衰老生化指标（ＳＯＤ、ＧＳＨ－Ｐｘ）和衰老生化指标（ＬＰＯ）的变化。试验组大鼠用双歧杆菌喂养两个月后,与对照组相比,前者血中ＳＯＤ活性显著升高（ｐ〈０．０１）,ＬＰＯ的含量显著低于对照组（ｐ〈０．０５）。采用自身对照,试验组大鼠用双歧杆菌喂养后与喂养前相比,ＳＯＤ活性显著升高（ｐ〈０．０１）,而ＬＰＯ的变化无显著性（ｐ〉０．０５）;对照组大鼠在试验期     

双歧杆菌促生长因子的研究

双歧杆菌促生长因子的研究中国科学院大连化物所大连１１６０１２杜昱光,涂国云大连医科大学微生态所大连１１６０２７蒋寒青,康白双歧杆菌促生长因子（ｂｉｆｉｄｕｓｆａｃｔｏｒ简称ＢＦ）是能促进双歧杆菌生长繁殖的一大类天然及合成物质,近来也称之为生化药物。Ｂ...     

双歧杆菌微生态调节剂的人体服用效果实验

双歧杆菌微生态调节剂的人体服用效果实验中德联合研究院江西南昌３３００４７魏华付金衡佘世望江西乳品厂梅国和徐书升１材料与方法１．１菌种双歧杆菌ＢＤ－２,中德联合研究院生物工程室分离。１．２材料双歧杆菌试液（含１０９个／ｍｌ）;实验动物：１８－２２ｇ昆明...     

双歧杆菌的辐照育种研究

对生产活菌微生态制剂的双歧杆菌东方101号(df101)菌株进行了60CO辐照育种研究。通过4000～6000rad钴原2次24h循环辐照,选育出df104和df106两个菌株。鉴定结果表明,该两个菌株除在生化反应上略有改变外,其他特性未见任何改变。但选育株在液态培养物中,活存时间与存活率较原株有非常显著的提高。其培养物在室温(20～37℃)保存27个月,df104与df106尚有5.47×10     

双歧杆菌原生质体的制备与回复研究

进行了双歧杆菌原生质体的制备与回复相关技术研究 ,为其基因操作及相关研究提供技术基础。采用浓度分别为 1 ,5 ,1 0mg/LMutanolysin(变溶菌素 )对长双歧杆菌进行脱壁处理 ,以探讨其原生质体形成与时间和酶浓度的关系 ,然后选用较适宜的酶浓度 ( 5mg/LMutanolysin)制备其原生质体 ,并将其倾入自制的双层再生培养基上 ,观察其在不同环境条件下培养时的回复生长情况。结果表明 ,长双歧杆菌的细胞壁对Mu tanolysin较为敏感 ,用浓度为 5mg/L的Mutanolysin处理长双歧杆菌 40min ,在普通光学显微镜下即可见90 %的原生质体形成 ,当Mutanolysin浓度为 1 0mg/L时 ,只需 2 5min其原生质体形成率就达此值。制备的长双歧杆菌原生质体倾入自制的双层再生培养基中 ,在厌氧条件下能很好地回复生长。     

浅述双歧杆菌与微生态药品

双歧杆菌是健康人肠道正常菌丛中的优势菌之一,近年来开发的微生态药品中大部分以双歧杆菌为主。本文从双歧杆菌的生物拮抗、免疫调节及营养代谢调节等方面对其作用机理进行了阐述,并对国内已开发的微生态制剂作了简要的回顾。     

双歧杆菌在人工胃液中的存活率考查

双歧杆菌在人工胃液中的存活率考查大连医科大学科达药业有限公司大连１１６０２４刘文佐曲湘昆以双歧杆菌制成的微生态制剂近年来上市的品种较多,如硬胶囊剂、片剂、颗粒剂、液体制剂等。这些制剂均为胃溶型,口服后在胃部崩解、溶散。胃中ｐＨ值为１－３,双歧杆菌在此...     

双歧杆菌制剂对腹泻动物保护作用的观察

实验证明四联双歧活菌制剂大、中剂量对腹泻动作用达７１．２％，小剂量为５７．１％，３个剂量组都无动物死亡，而氟哌酸治疗组保护作用为２８．６％，生理盐水治疗组为１４．３％，死亡率分别为１４．３％和２８．６％，这提示双歧四联活菌制剂在维持宿主的正常免疫功能和提高定植抗力方面具重要作用。     

人类肠道双歧杆菌一新种的初步研究

在健康人群肠道双歧杆菌检索中,从中老年粪便先后分离出一种细胞形态呈环状双歧杆菌３株（编号为ＭＯ－５,ＭＯ－２及ＭＯ－１）。经生物学特征的常规鉴定,根据《伯杰系统细菌手册》第２卷１９８６＾［２］。及其他有关文献描述,该菌的生理生化特征与双歧杆菌属中的青春双歧杆菌相类似,但从该菌的细胞形态呈环状和水杨苷发酵反应的阴性结果,再与青春双歧杆菌相比有区别。故认为该菌可能归属于双歧杆菌属中一新种。暂称它为环状     

健康老年人肠道双歧杆菌和乳杆菌种群多样性分析

从31个60岁以上的符合中华医学会老年医学分会健康老年人标准的健康老人中随机选取4例作为研究对象,使用分子生物学方法,对他们的肠道双歧杆菌和乳杆菌种群多样性进行分析.研究结果表明,健康老人肠道中双歧杆菌的优势种群为长双歧杆菌（Bifi∥dobacterium longum）和假小链双歧杆菌（Bifidobacterium pseudocatenulatum）,分别占双歧杆菌种群的55%和45%;而肠道乳杆菌则有唾液乳杆菌（Lactobacillus salivarius）50%、Lactobacillus mocosae 31.1%、口腔乳杆菌（Lactobacillus oris）6.3%、鼠李糖乳杆菌（Lactobacillus rhamnosus）6.3%和瑞士乳杆菌（Lactobacillus helveticus）6.3%,其中唾液乳杆菌、Lactobacillus mocosae为健康老人肠道优势乳杆菌种群.     

儿童肠道双歧杆菌和乳杆菌种群结构分析

以21例2～5岁中国儿童的肠道菌群为研究对象,利用传统培养计数法和分子生物学技术,对此年龄段健康儿童的肠道菌群分布及其中关键益生菌的种群结构进行了定量研究。实验表明,儿童肠道厌氧菌的数量高达109CFUg(湿重),其肠道菌群的定植抗力(平均BE=2.38)较强;不同的个体之间所能检测到的关键益生菌的种类有所不同,一般能检测到其中的1～4种双歧杆菌和1～5种乳杆菌;长双歧杆菌和假小链双歧杆菌的平均数量多达107CFUg(湿重),检出率分别为90.48%和85.71%,为儿童肠道内双歧杆菌的优势菌种;L.mucosae和发酵乳杆菌的数量较多,平均为3.68log10CFUg(湿重)和3.97log10CFUg(湿重),检出率分别为71.43%和52.38%,为稳定定植于儿童肠道内的优势乳杆菌;不同种类的益生菌在不同样本之间的数量组成均存在有很大差异,双歧杆菌的样本差异为1.86～3.85,乳杆菌的为2.43～4.07。     

耐氧双歧杆菌抗肿瘤机理的研究

本研究应用耐氧双歧杆菌治疗荷Ｈ２２肿瘤鼻,结果发现该菌可通过激活巨噬细胞活性、增强Ｔｈ、细胞功能,发挥抗肿瘤效应。     

双歧杆菌的分子生物学研究进展

双歧杆菌是一种有重要生理功能的益生菌,近年逐渐成为微生态领域研究的热点,现对其生理、生化方面的研究已较成熟。随着研究深入,分子生物学又成为该菌的研究重点。本文从其基因组、质粒、分型鉴定、基因工程等方面,介绍双歧杆菌的分子生物学研究进展。