人胚胎三叉神经节细胞发育初步观察

目的:观察人胚胎三叉神经节细胞随胎龄增长变化发育规律.方法:取19-32周人胚胎三叉神经节,光镜观察,细胞计数,图像分析仪测量三叉神经节细胞面积、周长、直径.结果:随着胎龄增长三叉神经节细胞数目无显著性变化,直径随胎龄增长而增大,面积和周长明显增大.结论:人胚胎三叉神经节细胞形态发育在7-8个月(32周)时达成年水平.     

鱼类三叉神经节的形态及神经节细胞的分布

目的:观察三叉神经节的形态结构及神经节细胞的分布。方法:用罗非鱼,进行40g/L甲醛灌注固定,观察三叉神经节的位置及分支分布,取三叉神经节,根及分支进行连续切片制作三维立体图像,观察神经节细胞的分布。结果:①三叉神经根在菱脑高度进出脑。②三叉神经节位于眼眶与颅腔之间的骨组织中。③从神经节发出的第一支(眼神经)通过眼眶的背侧分布于吻侧部,第二支(上颌神经)通过眼眶的腹侧分布于上颌部,第三支(下颌神经)通过眼眶的最腹侧分布于下颌部。④神经节细胞在神经节内背腹方向排列的一群细胞团。结论:罗非鱼三叉神经节是独立存在的,与其它鱼类的神经节有明显差异。     

胚胎与成人三叉神经节细胞形态对比观察

目的：探讨胚胎与成人三叉神经节细胞的形态学特征。方法：采用常规HE染色,运用电子显微超微结构技术及特殊染色,对比观察二者的形态学特征。结果：胚胎与成人三叉神经节细胞大体分布及形态一致,与胚胎三叉神经节细胞相比,成人最突出的特点是节细胞大,核仁清晰,居中。电镜下节细胞的细胞器较丰富,发育完善。且成人三又神经节神细胞明暗区别明显。结论t三叉神经节细胞结构与功能完善是在成年之后,成人三又神经节细胞存在明暗两类细胞。     

胚胎与成人三叉神经节细胞形态对比观察*

摘要目的：探讨胚胎与成人三叉神经节细胞的形态学特征。方法：采用常规HE 染色,运用电子显微超微结构技术及特殊染色,对 比观察二者的形态学特征。结果：胚胎与成人三叉神经节细胞大体分布及形态一致,与胚胎三叉神经节细胞相比,成人最突出的 特点是节细胞大,核仁清晰,居中。电镜下节细胞的细胞器较丰富,发育完善。且成人三叉神经节神细胞明暗区别明显。结论：三 叉神经节细胞结构与功能完善是在成年之后,成人三叉神经节细胞存在明暗两类细胞。     

无血清培养鹌鹑胚胎骨骼肌细胞的光镜与电镜观察

用无血清、无胚胎抽提液培养液（Ｅａｇｌｅ’ｓ，ＭＥＭ）培养孵育８ｄ的鹌鹑胚胎骨骼肌细胞，接种后圆形的生肌细胞可发育、分化形成线状的肌管，历时４—６ｄ。对培养７２ｈ肌细胞苏木精－伊红染色光镜照相和电镜观察证明肌细胞在本实验条件下能分化形成肌细胞特有的横纹结构和肌丝结构。     

小鼠眼神经注入Dil后三叉神经节的形态学研究

目的：经眼神经注入DiI研究小鼠三叉神经节的形态学结构。方法：小鼠10只,体重25—30克,雌雄不拘,进行灌注固定后,在外科显微镜下开颅并确认三叉神经节和眼神经,分别于双侧眼神经植入DiI染色晶体。37℃恒温箱放置3个月,待DiI染色晶体扩散后,取出植入DiI染色晶体的眼神经和三叉神经节,再根据神经走向切片,通过荧光显微镜观察DiI染色晶体在三又神经节内的分布。结果：眼神经离三叉神经节约1cm处植入DiI染色晶体后,应用荧光显微镜明视野观察,均可见到高密度标记的眼神经纤维,行向后内,穿经眶上裂入颅。逐步靠近三叉神经节外上方,并进入三叉神经节内,眼神经标记的神经元位于三叉神经节的前内侧。在三叉神经节内可见到DiI标记的神经节细胞及神经纤维。神经纤维平行致密排列,并被神经节细胞神经纤维分隔成群或簇。神经节细胞呈圆形和卵圆形,大小不一,部分节细胞呈蜂窝状排列。亦可见神经元的突起,有的呈螺旋状连于胞体,有的呈线状连于胞体,并可见到双极神经元。结论：小鼠经眼神经注入DiI后,三叉神经节细胞和神经纤维的排列循序跟其他动物基本一致。     

下调PTEN基因对偏头痛大鼠三叉神经节CREB的调节作用

本研究利用RNAi重组腺病毒(AdR-siPTEN)下调偏头痛大鼠三叉神经节的PTEN(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten)基因,探讨其对偏头痛大鼠行为学的影响,以及经Akt(serine-threonine kinase)信号途径对CREB(cAMP responseelement-binding protein)的调控情况。实验采用健康雄性SD大鼠,随机分为假手术组(Sham)、硝酸甘油模型组(GTN)、Ad-RFP非特异siRNA处理空载体对照组(Vehicle+GTN)、AdR-siPTEN下调组(AdR-siPTEN+GTN)。用AdR-siPTEN重组腺病毒对大鼠进行预处理,然后通过硝酸甘油(glyceryl trinitrate,GTN)法建立大鼠偏头痛模型,进行大鼠挠头和爬笼次数的检测,并用RT-PCR和Western-blot法进行相关基因的mRNA和蛋白检测。结果表明,当PTEN基因表达下调时,有效缓解了偏头痛导致的挠头和爬笼行为,并激活Akt信号途径,增加其下游作用因子CREB的表达,进而可能经"PTEN/Akt/CREB"信号通路影响神经突触可塑性,参与了偏头痛的发病机制。     

人胚胎干细胞传代培养及细胞化学染色特性

目的 体外建立人胚胎干细胞传代培养方法,研究人胚胎干细胞细胞化学染色特性.方法 以小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层传代培养人胚胎干细胞,检测人胚胎干细胞、自发分化克隆及拟胚体的细胞化学染色特性.结果 人胚胎干细胞在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上传30代以上其形态保持不变;人胚胎十细胞碱性磷酸酶、过碘酸-雪夫反应、α-醋酸萘酚酯酶染色阳性,自发分化克隆细胞阳性程度明显减弱;人胚胎干细胞形成的拟胚体碱性磷酸酶染色弱阳性,过碘酸-雪夫反应、α-醋酸萘酚酯酶染色阳性.结论 小鼠胚胎成纤维细胞能支持人胚胎干细胞传代培养,细胞化学染色结果能初步鉴别人胚胎干细胞未分化特性.     

大鼠三叉神经节神经元膜P2X嘌呤受体的特征

采用全细胞膜片钳技术研究了大鼠三叉神经节（trigeminal ganglion,TG）神经元膜P2X嘌呤受体的特征。结果发现：大部分受检细胞（78．9％,142／180）对ATP敏感,ATP．激活电流有明显的浓度依赖性。少数细胞无反应（21．1％,38／180）。在对ATP敏感的142个细胞中,绝大部分引起一内向电流（95．1％,135／142）,少数为外向电流（2．1％,3／142）,另有部分细胞出现双相电流（2．8％,4／142）。引起的内向电流在小直径细胞（〈30μm）上多表现为快去敏感电流,对vanilloid高度敏感;在中等大小的细胞（30～40μm）上多表现为慢去敏感电流,对vanilloid不敏感：绝大多数大细胞（〉40μm）对ATP和vanilloid均不敏感。此外,电流的波形与细胞直径密切相关。无论小细胞还是中等细胞其I-V曲线均表现出明显的内向整流趋势。我们还研究了ATP-激活电流的动力学特征,并观察了P2嘌呤受体激动剂、拮抗剂的效应。结果提示：不同类型的ATP受体．离子通道在不同类型的TG神经元上的表达具有不同的特点。     

新疆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室

目的:观察国人胚胎三叉神经节细胞分化及发育过程。方法:取水囊引产18-36周国人胎儿三叉神经节,HE染色及透射电镜观察。结果:18-20周胎儿三叉神经节神经元排列紧密,胞质少,可见到数量不多的线粒体,且其内几乎看不到嵴,其它细胞器少。25周时,线粒体嵴变长,粗面内质网雏形出现,有纵形小管出现;27周时可观察到成熟的高尔基复合体,32周后,线粒体、粗面内质网等细胞器发育趋于成熟。到33周电镜下可见溶酶体;36周时细胞内各种细胞器结构和功能基本完善。结论:人胚胎三叉神经节细胞发育过程中随胎龄增加,其结构和功能逐步完善,32～36周(8～9月)是细胞的分化发育重要时期。     

A New Method for Studying Human Oocytes by Light and Electron Microscopy

Since ovarian follicles appear to be randomly oriented with respect to the plane of the section, the method of sectioning and examining follicles at their raimm diameter described here allows direct comparison between oocyte populations of women and small differences can be detected. Re-sectioning for EM allows selected follicles of interest to be examined at a higher resolution.     

Prevalence of Varicella-Zoster Virus DNA in Dissociated Human Trigeminal Ganglion Neurons and Nonneuronal Cells

Previous analyses using in situ hybridization alone or together with PCR have yielded conflicting results regarding the cell type in which latent varicella-zoster virus (VZV) resides. We separated human trigeminal ganglia (TG) into neuronal and nonneuronal fractions, followed by primary and nested PCR to quantitate VZV DNA at the single cell level. Both TG from each of eight cadavers were dissociated and separated into neuronal and nonneuronal cell suspensions by differential filtration. Analysis of the neuron fraction (5,000 neurons per sample) revealed VZV DNA in 9 of 16 samples, with copy numbers ranging from 1 to 12, whereas only 2 of 16 nonneuronal cell samples were positive for VZV DNA, with 1 copy each. Further analysis of 10 samples of 100 neurons and the corresponding nonneuronal cell fractions from each TG of a single subject revealed VZV DNA in 3 of 10 samples of the left TG (range, 2 to 5 copies) and in 1 of 10 samples of the right TG (2 copies) but in none of the 20 nonneuronal cell fractions. These data indicate that latent VZV DNA is present primarily, if not exclusively, in neurons, at a frequency of two to five copies per latently infected neuron.     

Light Microscopic Autoradiography Followed by Electron Microscopy

We have developed a technique whereby sections processed for autoradiography to localize a labelled cell can then be re-sectioned for examination of the same cell under the electron microscope (Fig. 1). The benefits of this method are 1) positive ultrastructural identification of the tagged cell, as the cell is visible throughout the re-sectioning procedure, 2) no unnecessary sectioning, as each block is known to contain tagged cells, and 3) rapid tissue processing and examination.     

豫医无毛小鼠皮肤透射电镜观察

采用透射电镜技术对12～28日龄豫医无毛小鼠(YYHL)背部皮肤超微结构进行了观察.结果 发现:12日龄时,无毛小鼠皮肤毛囊上皮细胞簇集成团,占据毛球的位置;14日龄时,毛囊上皮细胞出现不同程度的凋亡形态学改变,核染色质凝聚呈"新月形"或形成圆形或椭圆形的凋亡小体;18日龄时,毛囊上皮细胞胞核部分区域退变形成大小不一的类似脂滴的空泡;21日龄时,毛囊上皮细胞退变消失,角化成纤维样的物质;到28日龄时,毛囊上皮细胞完全退变成空洞样结构.由此推断,无毛基因的突变诱发了豫医无毛小鼠皮肤毛囊上皮细胞的凋亡,从而引起小鼠的脱发.     

免疫脂质体对白血病细胞杀伤的扫描电镜观察

采用脂质体技术包裹中华眼镜蛇膜毒素(CT)并与抗人T细胞单克隆抗体结合制备成pH敏感型免疫脂质体.它在pH8.0～7.0间十分稳定,但在接近细胞浆微酸性环境(pH<6.0)时很容易破裂而释出包裹之内容物.用这一免疫脂质体处理人白血病T淋巴细胞系CEM细胞并用扫描电镜观察脂质体对靶细胞的作用,显示这一免疫脂质体可特异性杀灭靶细胞而对抗原阴性细胞影响不大．     

AFM对人乳腺癌细胞外纤连蛋白原纤维的形态学观察

探讨原子力显微镜在研究细胞和细胞外基质间的相互作用及细胞外基质的功能等方面的应用前景。应用原子力显微镜观察培养的人乳腺癌MCF 7 R细胞分泌的纤连蛋白原纤维的分布和排列规律 ,并与其他常规观察技术进行比较。应用原子力显微镜获得了多个乳腺癌细胞和细胞外纤连蛋白原纤维的整体和局部形貌图像 ,发现这些原纤维的分布和排列方式非常有规律 ,而且这些规律与其功能相适应。由于样品制备简单和分辨率较高等优点 ,原子力显微镜较适合于细胞外基质的原位观察