miRNA-181在肝癌中表达变化的研究

目的:观察微小RNA(miRNA)-181在正常人肝细胞L02、肝癌细胞株SMMC7221和Hep3B中的表达,以及在正常肝脏组织和肝癌组织中的表达,探讨其与肝癌发生发展的关系.方法:应用荧光实时定量PCR方法检测miRNA-181,包括miRNA-181a、miRNA-181b、miRNA-181c、miRNA-181d,在正常肝细胞和肝癌细胞的含量.同时收集并检测肝细胞癌患者术中取得的正常肝脏组织和癌症组织的含量.结果:MiRNA-181在肝癌细胞株中的表达明显高于正常人肝细胞(P＜0.05或P＜0.001).MiRNA-181在肝癌组织中表达明显高于正常肝脏组织(P＜0.05).结论:MiRNA-181在不同肝癌细胞株中表达不同,但都高于正常肝细胞,并且miRNA-181在肝癌组织中的表达高于正常肝脏组织.这说明miRNA-181与肝癌的发生发展有相关性,可能成为肝癌诊断和预后的一个指标.     

miRNA-492在肝癌中表达变化的研究

目的:通过观察miRNA-492在肝细胞株L02、肝胚细胞瘤HepT1细胞株和肝癌SMMC-7721细胞株中的表达差异,以及在正常肝脏组织、肝母细胞瘤组织和原发性肝癌组织中的含量差异,探讨其与不同类型肝脏肿瘤发生发展的关系.方法:应用Real time-PCR方法检测miRNA-492在正常L02肝细胞株和肝癌HepT1、SMMC-7721细胞株的含量.同时采集和检测原发性肝癌患者术中取得的正常肝脏组织和癌症组织,以及肝母细胞瘤患者瘤组织的含量.结果:1)与正常人L02肝细胞相比,miRNA-492在肝癌HepT1细胞株中的表达显著升高(P＜0.001),但在SMMC-7721细胞株中略升高,无统计学差异.2)与正常肝脏组织相比,miRNA-492在肝母细胞瘤的瘤组织中含量显著升高(P＜0.01),但原发性肝癌的癌组织略升高,无统计学差异.结论:miRNA-492在不同肝癌细胞株中表达不同,在肝胚细胞瘤中表达升高,且在肝母细胞瘤瘤组织中的表达高于正常肝脏组织.但原发性肝癌癌组织中变化不明显,这说明miRNA-492与某些类型肝癌,特别是肝母细胞瘤的发生发展有关.     

假基因HMGA1L2在甲状腺肿瘤中的表达

应用RT-PCR技术检测假基因HMGA1L2在50例良、恶性甲状腺病变中HMGA1L2 mRNA的表达。结果显示HMGA1L2 mRNA在12例结节性甲状腺肿、9例甲状腺腺瘤和15例甲状腺乳头状癌中的阳性表达率均为100%, 而在14例甲状腺滤泡癌中的阳性率为35.7%, 与前3者差异有显著性。该研究首次报告了假基因HMGA1L2 mRNA在良、恶性甲状腺病变中的表达, 并且提示其在甲状腺滤泡癌与腺瘤的鉴别诊断中具有潜在的价值。     

CT灌注成像在鉴别肝细胞癌和肝局灶性结节增生中的价值分析

目的探讨CT灌注成像在鉴别肝细胞癌和肝局灶性结节增生中的临床价值。方法选取我院2016年1月~2017年12月收治的30例肝细胞癌患者为实验组,30例肝局灶性结节增生患者为对照组,两组患者均行CT平扫及全肝灌注扫描,并对两组患者实性部分CT灌注值、肝细胞癌实性成分、灶周组织、远处肝组织CT灌注值以及肝局灶性结节增生实性部分、远处肝组织CT灌注值进行分析比较。结果实验组患者实性部分肝动脉灌注量、肝动脉灌注指数明显低于对照组,门静脉灌注量明显高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。在实验组中,与灶周、远处肝组织比较,病灶肝动脉灌注量、肝动脉灌注指数明显升高,门静脉灌注量明显降低,差异均有统计学意义(P0.05)。在对照组中,与远处肝组织比较,病灶肝动脉灌注量、肝动脉灌注指数明显升高,门静脉灌注量明显降低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论通过对比分析肝细胞癌与肝局灶性结节增生的CT灌注值,可知CT灌注成像对二者鉴别诊断有着十分积极的临床价值。     

肝脏局灶性结节的超声造影诊断

目的:分析探讨超声造影在肝脏局灶性结节中的应用价值,为以后的临床诊断提供可靠性参考。方法:回顾性分析2011.10-2013.9期间来我院门诊以及住院的40例经病理证实为肝脏局灶性结节患者的超声造影表现,通过二维灰阶超声检查,40名患者共发现50个结节。患者先后进行肝脏超声造影检查及超声引导下经皮肝穿刺活检术。总结病例之间的相关关系以及造影表现的特殊性与一般性。结果:超声造影对肝脏良恶性病灶的诊断能力很好,对结节的敏感性85.8%,特异性99%、阳性预测值95%,阴性预测值96%,准确率95%。结论:肝脏局灶性结节的超声造影诊断有助于临床上判定局灶性结节良恶性,可以为临床提供更好的诊断依据,但是,由于许多假阳性的原因,故对于某些缺乏特异性的超声造影表现,需要其他方法或是穿刺活检进行辅助检查。     

CD90在肝细胞肝癌组织中的表达及其与肝癌临床病理特征的关系

目的:探讨CD90在肝细胞肝癌(HCC)患者肿瘤组织中的表达及其与临床病理参数的关系,为HCC的临床治疗提供参考。方法:选择2014年3月-2015年3月在我院接受治疗的HCC患者80例,收集患者肿瘤组织及癌旁组织,另选择同期就诊的80例正常肝脏组织作为对照组。观察并比较CD90在肝癌组织、癌旁组织及正常肝脏组织中的表达情况。结果:CD90在肝癌组织、癌旁组织及正常肝脏组织中呈不同程度阳性表达(P0.05)。CD90在肝癌组织和癌旁组织中的表达显著高于正常肝脏组织,差异具有统计学意义(P0.05)。CD90在肝癌组织中的表达显著高于癌旁组织,差异具有统计学意义(P0.05)。CD90在HCC组织中的表达与肿瘤大小、肝内转移、TMN分期和病理分级有关(P0.05)。结论:CD90在肝癌组织中呈高表达,其表达水平与肝癌临床病理参数有关,可以作为HCC诊断、治疗及预后评估的参考指标。     

在大鼠肝癌发生过程中GABA-BR1的表达变化及意义

为探讨γ-氨基丁酸B型受体1(γ-aminobutyric acid type B1 receptor,GABA-BR1)与肝癌发生的关系,利用二乙基亚硝胺(DEN)制备诱发型大鼠肝癌模型,模拟人类肝癌发生发展过程,采用免疫组织化学技术对GABA-BR1和细胞周期素E(Cyclin E)蛋白在大鼠肝脏中的表达进行定性和定量分析.结果显示,在正常肝组织中有少量散在分布的GABA-BR1表达阳性的细胞;在变性或坏死灶周围GABA-BR1表达阳性的肝细胞较多;增生结节中部分肝细胞呈过表达;在肝癌细胞中广泛表达.Cyclin E与GABA-BR1阳性表达的细胞分布特点相似.实验结果提示,在肝癌发生发展过程GABA-BR1过表达,可能对肝细胞的异常增生或癌变过程起到抑制作用.     

大鼠诱发型肝癌发生发展过程中SonicHedgehog、Ptc和Gli1表达的改变

目的 观察大鼠诱发肝癌过程中Sonic Hedgehog（Shh）信号通路相关基因的表达变化,探讨其在肝癌发生发展过程中的作用.方法 雄性Wistar大鼠48只,随机分成4组,利用二乙基亚硝胺（DEN）制备诱发性大鼠肝癌模型,应用原位核酸杂交技术检测Shh、Ptc、Gli1 mRNA在对照组、模型组（6w）、模型组（14w）、模型组（22w）大鼠肝脏癌变过程中的表达变化.结果 在模型组（6w）大鼠肝脏的肝小叶周边可见嗜酸性、气球样变性等肝细胞损伤的表现,模型组（14w）大鼠肝脏中可见肝假小叶和非典型增生结节,模型组（22w）大鼠肝脏中可见到高分化的肝细胞癌结节.Shh、Ptc、Gli1 mRNA阳性表达细胞主要分布在大鼠肝脏中的肝细胞损伤区、增生结节、癌结节、小叶间胆管上皮和癌旁组织中,Shh、Ptc、Gli1 mRNA在模型组的大鼠肝组织中表达的平均光密度值均高于对照组.结论 Shh信号通路在诱癌过程中异常激活,可能促进肝损伤后的正常修复、异常增殖及肝细胞癌变过程.     

RNA干扰肝细胞肝癌中PECAM-1的表达对肿瘤细胞侵袭及增殖的影响

目的:探讨PECAM-1在肝细胞肝癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达及意义。方法:选择2013年5月-2015年6月在我院接受治疗的HCC患者100例,收集肝癌患者HCC组织及癌旁组织,另选取100例正常肝脏组织作为对照组。应用免疫组织化学法检测PECAM-1在肝癌组织、癌旁组织以及正常肝脏组织中的阳性表达。利用小分子干扰RNA技术(si RNA)构建低表达的PECAM-1,并转染至肝癌细胞中抑制PECAM-1的表达。应用Transwell小室法检测肝癌细胞的侵袭能力,CCK-8法检测肝癌细胞的增殖能力。结果:PECAM-1在肝癌组织、癌旁组织及正常肝脏组织中呈不同程度阳性表达(P0.05);PECAM-1在肝癌组织及癌旁组织中的表达显著高于正常肝脏组织,差异具有统计学意义(P0.05);PECAM-1在肝癌组织中的表达显著高于癌旁组织,差异具有统计学意义(P0.05);转染si RNA PECAM-1后,肝癌细胞中PECAM-1 m RNA的表达水平明显下降,PECAM-1蛋白表达也明显降低,差异具有统计学意义(P0.05);转染si RNA PECAM-1后,肝癌细胞侵袭及增殖能力明显降低,差异具有统计学意义(P0.001)。结论:PECAM-1在肝癌患者血清中高表达,PECAM-1 si RNA能够抑制肝癌细胞的侵袭及增殖能力,提示PECAM-1可作为预测肝癌发生及发展的临床指标。     

不同肝病变组织中CD34、CD31、Ki-67的表达及意义

目的比较正常肝组织、慢性肝炎、肝硬化、肝细胞肝癌组织及肝转移腺癌中CD34、CD31、Ki-67不同表达,寻找有助于鉴别不同性质病变的生物学标记物.方法正常肝及病变肝组织标本共104例;其中,正常肝组织10例;慢生C型肝炎组织73例;肝硬化组织7例;肝细胞肝癌7例;结肠癌肝转移5例;乳腺癌肝转移2例.73例慢性C型肝炎组织全部为肝穿活检标本,其余组织均为手术切除标本.所有病例标本分别行CD34、CD31、Ki-67免疫组织化学染色,半定量评分系统评价染色结果.统计学分析结果数据.结果在非肿瘤组织,抗CD34阳性染色主要存在于汇管区,亦可见于汇管区周围的肝实质内血窦.阳性染色内皮细胞呈点状、线状、半环状及环状,散在或簇状分布.肿瘤组织内抗CD34阳性染色特征与非肿瘤组织相似,阳性染色血管在肿瘤组织内散布分布.CD34指数在各病变组中的表达排列顺序依次为:肝细胞肝癌>乳腺癌肝转移>结肠癌肝转移>肝硬化>慢性C型肝炎>正常肝组织,从正常肝组织至慢性肝炎至肝细胞肝癌,CD34表达明显增强.组织中,抗CD31阳性染色分布、定位、形态特征与CD34相似.CD31在慢性肝炎、肝硬化、肝细胞肝癌、结肠癌肝转移及乳腺癌肝转移组织中阳性表达率分别为:6.8%(5/73)、100%(7/7)、100%(7/7)、100%(5/5)、100%(2/2);肝癌组织中CD31染色强度明显大于非癌组织中,组间比较具有显著差异(P<0.05).Ki-67阳性染色细胞呈棕黄色核着色,散在分布于肝实质内.阳性染色细胞无形态特殊性,亦无分布上的特殊性.Ki-67在各病变组间的阳性表达率分别为:64.4%(47/73)、28.6%(2/7)、100%(7/7)、100%(5/5)、100%(2/2),其中以在结肠癌肝转移组织中表达最明显;组间比较具有非常显著差异(P<0.05).在正常肝脏、慢性C型肝炎、肝硬化、肝细胞肝癌CD34、CD31、Ki-67三种生物学标记物在同一标本同时表达的阳性率分别为:0%(0/0)、4.1%(3/73)、28.6%(2/7)、100%(7/7),CD34、CD31、Ki-67其中任两种同时表达的阳性率分别为0%(0/10)、63.0%(46/73)、100%(7/7)、100%(7/7).结论 CD34是慢性肝病、肝癌临床病理评价的指标之一,CD34与CD31、Ki-67同时分析有助于建立可靠的诊断.     

壳聚糖酶的克隆表达与壳寡糖的制备分析

目的:克隆壳聚糖酶基因于大肠杆菌中实现高表达,制备壳寡糖。方法:以枯草芽孢杆菌总DNA为模板扩增壳聚糖酶基因(CSN),克隆至载体pET23a(+)上,转化菌株BL21(DE3)。重组子经0.5 mmol/L IPTG诱导后,SDS-PAGE和质谱检测与鉴定重组酶。酶纯化后水解壳聚糖,薄层色谱分析其水解产物。结果:质谱证明壳聚糖酶(31.5kDa)成功表达,表达量占菌体总蛋白的45%左右。纯化后重组酶浓度为900 mg/L,纯度95%、回收率85%,酶活力为10 000 U/mg。壳聚糖降解产物为壳二糖至壳四糖。结论:原核表达载体pET23a(+)-CSN构建正确,壳聚糖酶表达量与活性高,适用于水解壳聚糖制备壳寡糖。     

国内外蝗害治理技术现状与展望

本文首先概述了国内外蝗虫发生与为害的态势,总结了现阶段我国蝗虫发生与为害的主要特点:即农田飞蝗暴发频繁而且严重,草原土蝗的发生时常造成严重的经济损失,而且侵入城市干扰市民生活,我国与周边国家之间蝗虫过境迁移频繁,使用化学农药污染环境和农产品;分析了国内外蝗虫防治对策与技术的发展现状,重点介绍了应急防治和可持续治理对策、...     

Synthesis and turnover of cerebrosides and phosphatidylserine of myelin and microsomal fractions of adult and developing rat brain.

The synthesis and turnover of cerebrosides and phospholipids was followed in microsomal and myelin fractions of developing and adult rat brains after an intracerebral injection of [U-14C]serine. The kinetics of incorporation of radioactivity into microsomal and myelin cerebrosides indicate the possibility of a precursor-product relationship between cerebrosides of these membranes. The specific radioactivity of myelin cerebrosides was corrected for the deposition of newly formed cerebrosides in myelin. Multiphasic curves were obtained for the decline in specific radioactivity of myelin and microsomal cerebrosides, suggesting different cerebroside pools in these membranes. The half-life of the fast turning-over pool of cerebrosides of myelin was 7 and 22 days for the developing and adult rat brain respectively. The half-life of the slowly turning-over pool of myelin cerebrosides was about 145 days for both groups of animals. The half-life of the rapidly turning-over microsomal cerebrosides was calculated to be 20 and 40 h for the developing and adult animals respectively. The half-life of the intermediate and slowly turning-over microsomal cerebrosides was 11 and 60 days respectively, for both groups of animals. The amount of incorporation of radioactivity into microsomal cerebrosides from L-serine was greatly decreased in the adult animals, and greater amounts of the precursor were directed towards the synthesis of phosphatidylserine. In the developing animals, considerable amounts of cerebrosides were synthesized from L-serine, besides phosphatidylserine. The time-course of incorporation indicated that a precursor-product relationship exists between microsomal and myelin phosphatidylserine. The half-life of microsomal phosphatidylserine was calculated to be about 8 h for the fast turning-over pool in both groups of animals.     

Identification and composition of the tonsillar and anal enterococcal and streptococcal flora of dogs and cats

Enterococcus faecalis was the most frequently isolated enterococcal species from anal swabs and tonsils of dogs and cats, although in the anal samples from dogs Ent. hirae was found almost as often as Ent. faecalis. Most Ent.faecium strains from dog tonsils differed from those associated with humans and other animals in that they fermented sorbitol. Typical Ent. avium as well as atypical Ent. avium -like strains were seen in dogs, while the related species Ent. raffinosus was associated with cat tonsils. Enterococcus cecorum also occurred mainly in cats. Certain atypical strains, presumptively identified as Ent. cecorum , shared characteristics with Ent. columbae.
The most frequent streptococcal species in tonsils of cats and dogs were Streptococcus suis and Strep. canis. Streptococcus canis and Strep. bovis predominated in anal swabs. The canine Strep. suis differed from the common porcine strains in fermenting mannitol.
Forty-seven of the 288 isolates examined could not be identified or related to known species. The characteristics of two groups of these bacteria, provisionally called 'Ton 31 group' and 'O7 group' are described.     

Molecular characterisation of species and genotypes of Cryptosporidium and Giardia and assessment of zoonotic transmission

The molecular characterisation of species and genotypes of Cryptosporidium and Giardia is essential for accurately identifying organisms and assessing zoonotic transmission. Results of recent molecular epidemiological studies strongly suggest that zoonotic transmission plays an important role in cryptosporidiosis epidemiology. In such cases the most prevalent zoonotic species is Cryptosporidium parvum. Genotyping and subtyping data suggest that zoonotic transmission is not as prevalent in the epidemiology of giardiasis. Molecular characterisation of Cryptosporidium and Giardia is a relatively recent application that is evolving as new genes are found that increase the accuracy of identification while discovering a greater diversity of species and yet unnamed taxa within these two important genera. As molecular data accumulate, our understanding of the role of zoonotic transmission in epidemiology and clinical manifestations is becoming clearer.     

白术同源四倍体的诱导和鉴定及其与二倍体过氧化物酶的比较

以白术（Atractylodes macrooephala Koidz.）二倍体组培苗为材料,对其四倍体诱导方法进行研究,共获得45个白术同源四倍体株系,为优良株系的选育提供了材料。此外,还分析比较了其中8个白术四倍体株系与二倍体的过氧化物酶同工酶（POD）的酶谱差异,发现四倍体各株系过氧化物酶同工酶谱比二倍体的均多了Rf0.310的谱带,且总过氧化物酶比活力也发生了很大改变,对探讨白术四倍体优良株系的生理生化机理具有一定的参考价值。