免疫组织化学技术常见问题分析及对策

免疫组织化学染色是目前常规病理诊断及鉴别诊断的重要方法和手段,但在制作免疫组织化学切片中存在着影响结果的许多因素,本文较全面地阐述了影响制片质量的常见因素,并对出现的问题进行了分析和提出了切实可行的对策。     

乳腺癌的p53免疫组织化学和PCR-SSCP研究

为了明确p53突变与乳腺癌临床特征的关系,研究了50例浸润性乳腺导管癌中p53免疫组织化学检测与临床指标肿瘤大小、淋巴结转移情况及病人年龄的关系,并探讨p53免疫组织化学结果与PCR-SSCP检测结果的关系及意义.发现p53免疫组织化学检测阳性与肿瘤大小及淋巴结转移关系密切(P＜0.05);1例p53免疫组织化学检测阳性病例PCR-SSCP检测为杂合突变,1例p53免疫组织化学检测阴性病例为PCR-SSCP检测p53纯合缺失.我们的结果提示免疫组织化学检测阳性并不一定有p53突变,而阴性则可能有p53基因缺失,临床上结合两种检测可提供更准确的p53状况的参考资料.     

腹水离心石蜡切片联合免疫组化检测CA125、CK7、Ki67对卵巢癌的诊断价值

目的:探讨腹水离心石蜡切片及免疫组织化学在卵巢癌诊断中的价值.方法:对30例腹水标本离心收集细胞沉渣,经自动脱水机脱水后石蜡包埋,切片进行免疫组织化学检测CA125、CK7、Ki67表达.结果:腹水离心石蜡切片细胞形态清晰,着色鲜艳,免疫组织化学阳性定位准确.结论:腹水离心石蜡切片联合免疫组织化学检测CA125、CK7、Ki67对卵巢癌具有临床诊断价值.     

抗原修复技术在免疫组织化学中的作用

免疫组织化学是一门免疫学与病理形态学相结合的新兴学科 ,是现代生物医学的一项重要方法学 ,具有操作简单、敏感性高、特异性强等特点 ,已经广泛应用于临床病理及其相关学科的研究之中 [1,2 ] 。目前采用甲醛为常规标本固定剂 ,醛基与组织蛋白质中的氨基形成交联使抗原决定簇被遮蔽 ,从而影响免疫组织化学结果 ,而且这种作用随着固定时间增长而加重 [3 ]。抗原修复技术的出现 ,使得原来许多只能在冰冻切片作免疫组织化学得以在石蜡切片上实现 ,抗原修复技术在免疫组织化学中的作用愈加明显 ,并且对免疫组织化学方法的敏感性起着决定性作用[…     

脱钙对鼠颅骨标本中肥大细胞组织化学与免疫组织化学染色的影响

目的:探讨脱钙对鼠颅骨标本中肥大细胞组织化学与免疫组织化学染色影响.方法:用不同脱钙液处理小鼠颅骨标本,组织切片后进行苏木素一伊红染色、甲苯胺蓝染色、醛品红染色以及免疫组织化学染色.结果:经过不同脱钙液处理后的颅骨组织切片组织结构保存完好,肥大细胞的组织化学染色(甲苯胺蓝和醛品红染色),及肥大细胞中胰蛋白酶的免疫组织化学染色清晰.结论:不同脱钙液(8%盐酸脱钙液、EDTA脱钙液、混合酸脱钙液)处理不影响鼻腔粘膜中肥大细胞的组织化学和免疫组织化学染色.     

PTA1在大鼠淋巴器官中定位分布的免疫组织化学和原位杂交研究

采用免疫组织化学方法和地高辛－碱酸酶标记原位杂交组织化学方法观察PTA1在大鼠胸腺、脾脏和淋巴结等淋巴器官中的定位分布。首次证实PTA1和PTA1 mRNA散在分布于大鼠脾脏和胸腺中,但在淋巴结中未见分布。本研究结果为全面了解PTA1在体内的分布及功能提供重要的实验依据。     

网状纤维染色与免疫组织化学方法在显示肿瘤细胞及间质成分中的应用

免疫组织化学技术在判断肿瘤细胞来源、分类及鉴别诊断中应用十分广泛。网状纤维作为细胞外间质成分,存在于人体各组织器官中,通过网状纤维染色观察网状纤维在肿瘤组织中的形态变化是肿瘤鉴别诊断中又一重要参与依据。应用免疫组织化学方法和网状纤维染色,对一些不同类...     

三种自动免疫组化仪的染色结果比较分析

目的 探讨常用Leica、Roche和Dako等3种常用自动免疫组化仪在免疫组织化学染色过程中的优缺点.方法 选取中山大学第一附属医院病理科在2021年4月期间进行免疫组织化学染色病例,抽取常用25种抗体进行评分,相同抗体在3种不同自动免疫组化仪的同时行免疫组织化学染色,染色结果由病理医生和技术质控员一起评议.结果 相...     

树脂包埋半薄切片在视神经组织学和免疫组织化学研究中的应用

目的探讨半薄切片在视神经组织学和免疫组织化学研究中的应用,寻找一种视神经形态学研究和疾病诊断的有效方法。方法健康Sprague-Dawley大鼠视神经分别行树脂包埋制成半薄切片与石蜡包埋制成石蜡切片,分别采用HE、甲苯胺蓝染色及髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)免疫组织化学方法染色,光学显微镜下观察并比较半薄切片与石蜡切片染色结果的差异。结果石蜡切片HE和甲苯胺蓝染色均显示视神经髓鞘不着色,MBP免疫组织化学染色示MBP阳性着色较重,着色较紊乱,髓鞘着色不清晰。半薄切片HE及甲苯胺蓝染色均显示髓鞘呈环形,着色清晰,颜色对比鲜明;MBP免疫组化染色结果可见髓鞘呈环形,非特异性染色不明显,阳性对比显著,可清晰显示髓鞘结构。结论半薄切片在视神经组织学和免疫组织化学研究中优于石蜡切片,可用于视神经疾病的诊断和研究。     

p38 MAPK在小鼠睾丸不同发育阶段的表达和定位

为探讨丝裂原活化蛋白激酶p38 MAPK在小鼠睾丸不同发育阶段的表达,应用蛋白质免疫印迹杂交技术和免疫组织化学SABC法检测1至7周龄小鼠睾丸p38 MAPK的表达、定位及发育变化,并通过图像分析技术对免疫组织化学结果进行统计学分析。免疫印迹杂交发现,p38 MAPK在2～7周龄小鼠睾丸中均有表达。免疫组织化学结果显示,在2周龄小鼠睾丸曲细精管上皮中即可观察到p38 MAPK免疫阳性反应,免疫反应阳性细胞为精原细胞;3、4、5周龄小鼠睾丸仅有个别曲细精管上皮可见p38 MAPK免疫阳性反应;6、7周龄小鼠睾丸中p38 MAPK表达较丰富,免疫反应阳性细胞为精原细胞和初级精母细胞,免疫阳性反应物均主要位于细胞核内。在7周龄小鼠睾丸中还可见到部分间质细胞的细胞质亦呈p38 MAPK阳性。这些结果提示,p38 MAPK可能对生精细胞的增殖分化具有调控作用。     

微波技术在免疫组织化学中的应用

微波技术在免疫组织化学中的应用李科杨红胥维勇杨群（四川省人民医院病理科,成都６１００７２）免疫组织化学一般采用胰蛋白酶消化来恢复组织切片上被掩盖的抗原决定族。近年来,我们应用微波（ＭＷ）处理技术,使阳性结果清晰可辨,定位准确,获得了免疫组织化学显色较...     

朗格汉斯细胞肉瘤的临床病理学观察

目的探讨朗格汉斯细胞肉瘤(Langerhans cell sarcoma,LCS)的临床病理特征,提高对LCS的认识及病理诊断水平。方法报道两例LCS,结合患者临床资料、肿瘤大体及组织学特点、免疫组织化学标记结果及患者预后,并结合国内外相关文献进行分析。结果镜检,两例瘤细胞均呈弥漫排列,瘤细胞体积大,细胞核呈圆形或椭圆形,核沟易查见,可见核仁,异型明显,核分裂象多见。其中一例肿瘤间质内尚可见少量嗜酸性粒细胞浸润。免疫组织化学染色,两例CD1α、S-100蛋白、CD68均阳性、Ki-67增殖指数40%-50%。患者临床预后差。结论朗格罕斯细胞肉瘤是一种极为罕见的恶性肿瘤,组织病理学及免疫组织化学标记结果有助于该肿瘤的诊断及鉴别诊断。     

P2X3受体在感觉神经节的表达

用免疫组织化学与原位杂交研究P2X3受体在背根神经节,三叉神经节和结状神经节的分布。结果显示：1、原位杂交;在三种感觉神经节中,95%左右的神经节细胞为P2X3mRNA阳性,中、小型神经节细胞的杂交信号一般要比大型的神经节细胞强一些,2、免疫组织化学;免疫组织化学结果与原位杂交结果基本一致。此外,在各神经节内,均显示出许多P2X3免疫阳性神经纤维,在足掌表皮也显示许多P2X3免疫反应阳性纤维,结果提示：P2X3不仅参与机体的痛觉的形成,还可能参与其它感觉,如本体感觉等的形成。     

P2X_3受体在感觉神经节的表达

用免疫组织化学与原位杂交研究 P2 X3受体在背根神经节、三叉神经节和结状神经节的分布。结果显示 :1.原位杂交 :在三种感觉神经节中 ,95 %左右的神经节细胞为 P2 X3m RNA阳性 ,中、小型神经节细胞的杂交信号一般要比大型的神经节细胞强一些。 2 .免疫组织化学 :免疫组织化学结果与原位杂交结果基本一致。此外 ,在各神经节内 ,均显示出许多P2 X3免疫阳性神经纤维 ,在足掌表皮也显示许多 P2 X3免疫反应阳性纤维。结果提示 :P2 X3不仅参与机体的痛觉的形成 ,还可能参与其它感觉 ,如本体感觉等的形成     

MUC5AC在胃型宫颈腺癌组织中的表达及其临床病理特征

目的 分析胃型宫颈腺癌(gastric-type endocervical adenocarcinoma, GAS)组织病理形态学特点,检测MUC5AC在该癌组织中的表达,研究GAS免疫组织化学表型特点及相关特征,并结合AB-PAS特殊染色结果探究GAS潜在诊断方法。方法 回顾性分析2019年7月1日至2020年12月31日于武汉大学中南医院就诊的5例GAS患者的临床资料,总结其临床表现、病理特征、免疫表型及AB-PAS特殊染色特点。结果 免疫组织化学检测显示,5例GAS患者癌组织CK7、MUC6、CEA及MUC5AC阳性,p16、MUC2、CDX2、ER及PR阴性,Pax8表达不稳定,p53均为野生型表达,Ki-67多为阳性高表达。AB-PAS染色显示胞质均呈现红色。结论 与普通型宫颈腺癌相比,GAS具有易被误诊的良性组织形态。本研究发现免疫组织化学标志物MUC5AC的稳定阳性表达及AB-PAS染色后胞质呈红色可能是诊断该病的关键性特征。     

免疫胶体金法检测TGFβ2,bFGF在IgAN肾组织内位点

目的探讨TGFβ2和bFGF在IgAN肾组织内存在的位点.方法采用免疫组织化学,胶体金标记和免疫电镜技术,对28例IgAN肾活检组织进行了TGFβ2和bFGF检测.结果 TGFβ2和bFGF主要集中于肾小管上皮细胞的线粒体基质内,在其它部位有极少量的分布.结论免疫电镜技术和免疫组织化学技术联合应用,对抗原的精确定位具有重要的研究意义.TGFβ2和bFGF主要集中于肾小管上皮细胞的线粒体基质内的生物化学意义需要进一步研究.     

免疫胶体金法检测TGFl32，bFGF在IgAN肾组织内位点

目的 探讨TGFβ2和bFGF在IgAN肾组织内存在的位点。方法 采用免疫组织化学，胶体金标记和免疫电镜技术，对28例IgAN肾活检组织进行了TGFβ2和bFGF检测。结果 TGF岛和bFGF主要集中于肾小管上皮细胞的线粒体基质内，在其它部位有极少量的分布。结论 免疫电镜技术和免疫组织化学技术联合应用，对抗原的精确定位具有重要的研究意义。TGF协和bFGF主要集中于肾小管上皮细胞的线粒体基质内的生物化学意义需要进一步研究。     

肺小细胞癌细胞异质性电镜和免疫组织化学观察

采用电镜及免疫组织化学方法对３２例肺小细胞癌细胞异质性及组织学起源等问题进行了研究。结果提示：肺小细胞癌主要由神经内分泌分化型细胞组成,其中间杂少数鳞状细胞分化型,腺分化型及未分化型细胞,显示多向性分化和细胞异质性。未分化型细胞可能是起源细胞。免疫组织化学染色表明嗜铬蛋白Ａ具有较强特异性,为首选免疫标记,与神经特异性烯醇化酶、角蛋白、癌胚抗原联合使用,可提高诊断的准确性     

后肾腺瘤临床病理学特征观察

目的 探讨后肾腺瘤(metanephric adenoma,MA)的临床病理学、免疫组织化学和分子遗传学特征及预后.方法 2017年和2019年2例女性MA临床资料,通过HE及免疫组织化学染色进行形态学观察,运用ARMs-PCR法检测BRAF-V600E基因状态.结果 病例1肿瘤大小9.5cm,切面淡棕,实性,质中,部...     

HIV-1衣壳蛋白在转基因枸杞中表达的免疫组织化学定位

目的:研究转基因植物中重组蛋白的细胞定位,有助于进一步了解转基因枸杞中HIV-1衣壳(CA)蛋白融合蛋白的分泌表达途径。方法:利用含有MA4-CA融合基因的农杆菌转化枸杞,转化植株获得再生。采用免疫组织化学方法对转基因枸杞表达的CA融合蛋白进行初步定位。结果:免疫组织化学定位表明,在转基因枸杞愈伤组织中,HIV-1CA主要在细胞浆、细胞壁和细胞间隙中表达。结论:免疫组织化学结果初步证明了CA融合蛋白在转基因枸杞中的表达分布。