共查询到20条相似文献,搜索用时 15 毫秒
1.
大鼠肝细胞的分离技术 总被引:18,自引:1,他引:17
本文介绍一种采用含胶原酶的无钙、镁离子缓冲液系统灌注大鼠肝脏来分离大鼠肝细胞的方法,分离得到的肝细胞成活率达96%左右,且细胞产率较高。细胞在37℃恒温的waymouth溶液中、pH7.2—7.4、保持通气(95%O_2,5%CO_2),不断轻微搅拌的条件下,活力可维持8小时以上。 相似文献
2.
改进白蛋白工艺,加强产品稳定性及治疗对确保患者生命健康具有重要的意义,同时也节省企业资源,提高企业经济效益。目前国内血液制品发展面临较大的挑战,不仅受原材料血浆供应紧张的影响,同时缺乏自身产品多样性,因此对白蛋白分离及提纯工艺进行分析,提高人血白蛋白产品纯度,获得有效的血液制品是当前血液制品生产的重点及难点。本文将综述人血白蛋白分离及提纯的相关工艺要求,旨在为人血白蛋白的制备提供指导。 相似文献
3.
4.
5.
以往由于大鼠胰多肽(RPP)尚未分离提纯,没有纯RPP作为标准和标记物,因而无法建立RPP的放射免疫测定方法。因为没有RPP,人们不得不用牛PP代替RPP,而种属特异性的存在又使实验结果的分析复杂化。为了进一步探讨PP的生理功能,急需分离提纯RPP。RPP分离工作的困难在于缺少敏感的RPP测定方法,因而无法对分离过程进行监测。最近Taylor等制备出一种抗牛PPC-末端6肽的抗体,与RPP有较好的交叉反应,可用于对RPP进行放射免疫测定。作者便是以上述方法作为监测手段,应用凝胶过滤、离子交换层析及高压液相层析等技术,由大鼠胰腺成功 相似文献
6.
本文选择两种溶剂体系,用两次单向薄层层析,从小麦抗寒与不抗寒品系天然橡胶胶乳分离提纯出6种单半乳糖和双半乳糖双甘油酯。并比较了它们的疏水侧链的脂肪酸组成。小麦糖脂疏水侧链脂肪酸的不饱和指数远大于天然胶乳糖脂。抗寒品系胶乳糖脂疏水侧链脂肪酸不饱和指数大于不抗寒品系。双半乳糖双甘油酯疏水侧链脂肪酸不饱和指数均大于其单半乳糖糖脂。 相似文献
7.
用中性盐分离和提纯蛋白质 总被引:1,自引:0,他引:1
王世中 《生物化学与生物物理进展》1975,2(4):55-59
在毛主席革命路线的指引下,在批林批孔运动的推动下,全国各地正进一步广泛开展关于常见病、多发病(如气管炎、冠心病、肿瘤等)的研究。在研究这类疾病时,经常需要分离和提纯一些蛋白质(特别是免疫球蛋白)。国内有些实验室在分离和提纯蛋白质时,一般采用离子交换、凝胶过滤、亲合层析、区带电泳、超速离 相似文献
8.
简易胶原酶灌流法分离培养大鼠肝细胞 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:对传统的胶原酶灌流法加以改进,以节约分离肝细胞的实验时间和成本。方法:采用离体法,分3次从肝窦灌注含有肝素钠的D-Hanks液共150mL;用30mL终浓度为0.04%的胶原酶液(Ⅰ∶Ⅳ=1∶4)灌洗2min;去除表皮等结缔组织,过筛、离心洗涤即得肝细胞。结果:平均1g大鼠肝脏能获取7×106~8×106个肝细胞,细胞存活率为96.3%。结论:简易胶原酶灌流法的胶原酶用量是Seglen二步灌注法用量的1/16,是半原位的1/4;灌流时间约5min,是Seglen二步灌注法的1/4;半原位法也通常需要6~7min。此法具有装置简单、试剂消耗量小、操作方便快捷、实验成本低的特点,为需要周期性重复建立大鼠肝细胞模型的实验提供了一种简单快速的分离方法。 相似文献
9.
我们用双抗体免疫沉淀法,从牛垂体多聚核糖体中分离出牛生长激素特异多聚核糖体,由此多聚核糖体纯化的牛生长激素Poly(A)~+RNA,可以在麦胚体外翻译系统中和兔网织红细胞体外翻译系统中促进~(14)C-亮氨酸的参入。合成的含~(14)-亮氨酸的翻译产物中有91%可以被牛生长激素抗体沉淀。用SDS-11%PAGE对翻译产物进行鉴定表明,翻译产物在25KD处呈一条放射自显影带,与报导的牛生长激素前体分子量相吻合。 相似文献
10.
11.
12.
上海交通大学农学院生物技术研究所孙建和等 4人在实践和研究中发现鸡传染性法氏囊病病毒 (IB DV)不纯。它的基因组由含A、B两个节段的双链RNA组成 ,属于双RNA病毒科 ,研究发现病毒基因组被 1个 1.4 85× 10 - 2 0 g的蛋白环绕 ,它通过磷酸二酯键与基因片段的 5′端共价。此蛋白对病毒RNA分离有很大影响。鉴于此 ,研究者和作者们应用蛋白酶K消化法和Trizo1(异硫氰酸胍 酚 氯仿法 )处理从感染IBDV鸡法氏囊中分离出的IBDVdsRNA ,并比较了 2种纯化方法获得的dsRNA的质量和产量。同时 ,对所获得的dsRNA用ET PCR扩增IBDV基因… 相似文献
13.
IgGPH_7经木瓜蛋白酶消解产生Fab和Fc,在FPLC仪上,分别用MonoQ,Superose_(12),MonoS柱提纯Fab。提纯的Fab经还原和烷基化后,再用琥珀酸酐修饰,然后用Mono Q柱分离得到轻链和重链。最后通过SDS凝胶电泳和N端顺序测定,以鉴定它的纯度和轻、重链。 相似文献
14.
15.
16.
分离植物mRNA是植物分子生物学研究的重要手段之一。它直接关系到基因表达与调控的研究。还可以从mRNA获得互补DNA(cDNA),进而制备基因。真核生物的mRNA通常在其3-端含有poly(A)(多聚腺苷酸),可 相似文献
17.
白蛋白与甲胎蛋白基因是由同一祖先基因进化而来。在小鼠,它们是一前一后定位在同一条染色体DNA上。在个体发育和肝癌变过程中,这两基因的相互关系也呈现相反的表达水平。因此,研究甲胎蛋白基因表达的调控与白蛋白基因是不可分割的。本文简要报道我们克隆了大鼠白蛋白mRNA 3′端顺序,为研究白蛋白基因结构和表达提供了必要的探针。白蛋白mRNA是从Wistar大鼠肝脏用双抗体免疫沉淀法提取。分子克隆技术基本是按“分子克隆”实验手册进行。 相似文献
18.
由于全球面临的资源、能源、环境的压力甚至危机越来越大,利用可再生的生物质资源为原料经过物理、化学、生物及其集成方法加工化学品的研究和开发就显得越来越急迫,已经成为世界各国争相开展的重大课题①.化学品也包括生物能源,例如乙醇、甲烷等,可通过氧化反应提供大量的热能. 相似文献
19.
研究了植物凤凰木种子中的蛋白质成分,试图分离出新的核糖体失活蛋白凤凰木种子经磷酸盐缓冲液抽提,硫酸铵分级盐析,分子筛和阴离子交换剂等多次柱层析,分离出三种组分DrⅠ、DrⅡ和DrⅢ.SDS-PAGE和IEF实验表明这三种蛋白质均达到单一纯,而HPLC实验则表明它们的纯度不低于90%。它们的分子量据SDS-PAGE和HPLC实验分别约23500、26000、28500.IEF实验测得三者的等电点均为5.2左右。测定了组分DrⅠ的蛙卵泡裂解活性,其毒性约为天花粉蛋白的1/40.分析了它们的氨基酸组成。估算了三种蛋白质的二级结构含量,结果表明三者均富含β折叠结构。已有的实验事实表明这三种蛋白质的生化行为明显异于核糖体失活蛋白,因而很可能不属于这一蛋白质家族。 相似文献
20.
研究了植物凤凰木种子中的蛋白质成分,试图分离出新的核糖体失活蛋白,凤凰木种子经磷酸盐缓冲液抽提,硫酸铵分级盐析,分子筛和阴离子交换剂等多次柱层析,分离出三种组分DrI,DrⅡ和DrⅢ.SDS-PAGE和IEF实验表明这三种蛋白质均达到单一纯,而HPLC实验则表明它们的纯度不低于90%,它们的分子量据SDS-PAGE和HPLC实验分别约23500、26000、285蛋0.IEF实验测得三者的等电点均 相似文献