高表达钙调素NRK细胞模型的建立及其对细胞生长失调的影响

钙调素作为Ｃａ￣（２＋）信号的主要胞内受体,在细胞增殖调节中起着重要作用。实验中运用ＤＮＡ体外重组技术构建了高表达钙调素的真核载体,并将其转染到大鼠正常肾细胞（ＮＲＫ）中得到钙调素高表达的稳定细胞株。分析表明,高表达钙调素加速细胞生长,促进细胞从Ｇ＿１期向Ｓ期及Ｇ＿２期向Ｍ期的进程,并且使细胞血清依赖性降低,在单层培养中出现接触抑制丧失的岛状生长的现象。基因表达分析表明,原癌基因ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ随钙调素增高而表达加强,这可能是钙调素作用的分子机理之一。     

钙调素与细胞增殖的调控

CaM是Ca~(2+)的重要受体。大量事实表明,Ca~(2+)-CaM参与了细胞增殖的部分调控。其调控机理较复杂,主要通过以下3个环节实现:即促进G_1/S期过渡、G_2/M处期过渡和促进细胞进入有丝分裂后期。研究CaM对细胞增殖的调控具有重要的理论和实际意义。     

钙调素对DNA合成的影响

利用钙调素拮抗剂－－三氟拉嗪对Ｇｏ期小鼠Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２成纤维细胞进入Ｓ期和ＤＮＡ合成进行了研究,Ｇ０期细胞进入Ｓ期时,大量钙调进入细胞核,其水平为Ｇ０期的２倍。ＴＦＰ处理的细胞被阻抑在Ｇ１期,不仅使Ｓ期细胞群体下降,而且３Ｈ－ＴｄＲ掺入ＤＮＡ强度受到明显抑制,同时ＴＦＰ处理的细胞胞腺啶核苷激酶基因表达及ＴＫ活性亦明显下降,但不影响Ｓ期细胞核内的钙调素水平,结果表明钙调素功能之抑制不仅阻抑细胞从     

钙和钙调素对花粉萌发和花粉管生长的调控

本文简要综述了钙及钙调素对花粉萌发的启动效应和对花粉管生长的调节作用及Ｃａ＾２＋参与自交不亲和性调控的研究进展,并提出了相应的工作假说和进一步的研究方向。     

钙调素拮抗剂对大鼠早孕的影响

在大鼠孕７天子宫内一次注入钙调素拮抗剂－氯丙嗪观察其对大鼠妊娠的影响。结果表明：ＣＰＺ具有显著的抗生育作用,杭生育率为９８％。用药后卵巢及子宫组织内钙调素的含量及血清孕酮的水平明显降低。用用免疫组化研究卵巢内钙调素的定位分布,表明ＣＰＺ使巢内钙调素颗粒明显减少,黄体退化,胡钙调素染色粒减少尤为显著。由此推断,钙调素在大行娠过程中起着重要作用,且与性激素密切相关。     

钙调素对细胞周期的调节

ＲＣ３细胞是一种用真核表达载体Ｐ＾ｃａｍ转染ＮＩＨ３Ｔ３细胞建成的可调钙调素（Ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ,ＣａＭ）高表达细胞模型。通过分子杂交及蛋白免疫印迹方法证实在地塞米松（Ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｍｅ,ＤＸＭ）作用下,ＲＣ３细胞可高表达ＣａＭ．ＣａＭ拮抗剂三氟拉嗪（ｔｒｉｆｌｕｏｐｒａｚｉｎｅ,ＴＦＰ）则使Ｇ１期细胞增加,Ｓ期细胞减少。高表达ＣａＭ使细胞分裂指数提高,Ｇ２期细胞减少,有丝分裂前期细胞     

几种动物细胞内钙调素的免疫电镜定位

本实验利用钙调素特异性抗体,采用胶体金技术对这种蛋白分子在几种动物细胞内进行标记定位及电镜观察,为其细胞内分布规律提出了直观的超微形态依据。     

钙调素高表达对NRK细胞中DG-PKC和cAMP-PKA水平的影响

钙调素（ＣａＭ）作为Ｃａ２＋的主要受体,对细胞增殖起重要调节作用,而且在转化细胞中ＣａＭ的水平明显高于正常细胞．ｃＡＭＰ作为一种第二信使,起着将细胞外刺激信号转化为细胞内各种生理活动的媒介作用．蛋白激酶Ａ（ＰＫＡ）则是这种转化过程中的关键激酶．蛋白激...     

Zn^2＋对植物光系统Ⅱ的影响及与钙调素的关系

研究发现2.0mmol/L Zn~(2+)对白兰瓜幼苗离体叶绿体PS Ⅱ电子传递,如DCIP光还原和光合放氧及叶绿素a荧光有抑制作用,而这种抑制作用能分别被外加的Ca~(2+)(10mmol/L)和CaM(10μg/ml)所逆转。同时还发现CaM拮抗剂CPZ对叶绿素a荧光具有抑制作用,并且这种抑制能被外源CaM所逆转。通过PDE法证实了CaM在PS Ⅱ中的存在。因此,我们认为Za~(2+)对植物光合作用的影响与CaM有关,而且Zn~(2+)对PS Ⅱ电子传递的抑制很可能是通过CaM来实现的。     

钙和钙调素对玉米幼苗抗旱性的调控

用２０ｍｍｏｌ／ＬＣａＣｌ２浸种处理能显著提高玉米种子在干旱胁迫下的萌发率。改善玉米幼苗的生长状况,减轻胚根在干旱胁迫下的膜伤害,提高其活力和玉米幼苗在强干旱迫下的存活率。     

钙调素拮抗剂小柏胺衍生物对成纤维细胞增殖和功能的影响

为了研究钙调素拮抗剂EBB对成纤维细胞增殖和功能的影响,我们观察了经EBB作用后成纤维细胞的生长曲线、~3H-TdR掺入、钙调素水平的变化以及细胞增殖周期中DNA的改变和~3H-脯氨酸掺入。结果表明EBB直接抑制细胞增殖,使钙调素水平下降,DNA合成受阻,并使细胞停滞于生长周期中的G_0+G_1期。另外,胶原合成也受到阻抑。     

钙／钙调素依赖性蛋白激酶对17.7kD和6kD胰腺蛋白的磷酸化

本文报导了胰腺提取物中两种可被钙／钙调素依赖性蛋白激酶磷酸化的热稳定蛋白。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定其表观分子量分别为１７．７ｋＤ和６ｋＤ。经钙／钙调素依赖性蛋白激酶磷酸化后,其最大磷酸参入最为８．８μｍｏｌ／ｇ蛋白。同时磷酸化作用导致１７．７ｋＤ蛋白在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ中迁移率发生变化。本文还进一步分析了各种阳离子对磷酸化的影响,并对此两种蛋白可能的生理功能进行了初步探讨。     

大麦胚性细胞悬浮系的建立及其生长特性

由春大麦品种“如车”种胚诱导的松脆型胚性愈伤组织经2个月的悬浮培养,成功建立分散性好、生长速度快的胚性细胞悬浮系。该系细胞直径为1-3mm,由富含淀粉粒的胚性薄壁细胞构成。经不同浓度2,4-D实验,发现2mg/L最适合该细胞系的生长。文中对成功建立大麦胚性细胞悬浮系的关键问题进行了讨论。