地衣芽孢杆菌H—1的鉴定及其产木聚糖酶性质的研究

本实验室分离到一株木聚糖酶高产菌,经形态、生理以及生化鉴定,确认为地衣芽孢杆菌,定名为Ｈ－１。对Ｈ－１的胞外木聚糖酶进行初步的研究。从碳源利用方面,认为Ｈ－１的木聚糖酶为组成型合成。木聚糖和纤维二糖对它有诱导作用,而木糖和葡萄糖对酶的产生有阻抑作用。对酶解产物分析表明,有小分子糖产生、但并非都是单糖。Ｈ－１胞外木聚糖酶经６０％硫酸铵沉淀,过ＤＥＡＥ－５０柱,以及超过滤,得到了部分纯化酶。该酶作用的     

一株地衣芽孢杆菌产凝乳酶酶学性质研究

目的：对地衣芽孢杆菌所产凝乳酶的酶学特性进行研究。方法：在不同的温度、pH值、底物浓度、不同金属离子等条件下测定地衣芽孢杆菌产凝乳酶相对酶活力。结果：地衣芽孢杆菌所产凝乳酶最适凝乳温度为70℃;40℃以上热处理后凝乳活性有不同程度的损失,75℃热处理10min后凝乳酶活性丧失;pH值为5～8时凝乳活性随乳pH值的降低而增强,pH值为7时凝乳酶最稳定;Ca2+ 、Fe2+、Fe3+、Mn2+、Mg2+、Al3+对酶活性有一定的促进作用;Li2+、Na+、Cu2+、Zn2+对酶活性有抑制作用;底物浓度最适为250 g/L、Ca2+的最适浓度为0.014 g/L。     

芽孢杆菌木聚糖酶的发酵条件研究

本文研究了芽孢杆菌Ｌ２３产木聚糖酶的时间曲线,碳源种类和浓度,添加物,发酵起始ｐｈ以及接种量对产酶的影响。该菌经３７℃培养５０小时,酶活力为３０ＩＵ／ｍｌ,酶最适反应温度为５７℃,最适ｐＨ值为７．０。     

芽孢杆菌木聚糖酶测定条件研究

木聚糖是一种在植物体内大量存在的半纤维素,在植物中的含量仅次于纤维素,是地球上广泛存在的可再生资源之一。木聚糖酶（Xylanase,EC3．2．1．8）是一类重要的木糖苷键水解酶。木聚糖酶的水解产物可用于乙醇、丙酮、丁醇等重要化工产品的生产。在纸浆漂白工艺中,采用木聚糖酶对纸浆进行预漂白,可以降低纸浆的卡伯值,减少15％左右的有效氯用量,降低生产成本,减少二阳很类致癌物的排放,并能提高纸浆的质量。该酶还可以用于饲料工业,提高粗饲料的能量值及畜禽对其的利用率。木聚糖酶可由细菌（1,。）、霉菌（。,。）、放线菌（…     

地衣芽孢杆菌ws-6产纤维素酶条件优化

目的：通过优化该菌产酶条件,以期在饲料中的进一步应用建立基础。方法：纤维素酶活性用还原糖法测定,产酶条件采用单因素筛选与正交优化方法相结合。结果：培养基初始pH6.5、培养温度37℃、接种量2%2、50 mL三角瓶装液量30 mL、葡萄糖1.5%、羧甲基纤维素钠0.5%、酵母膏1.5%、KH2PO40.05%、NaCl 0.5%,培养48h后酶活性达到最高3.45U/mL;金属离子K＋、Mn2＋、Mg2＋、Zn2＋、Co2＋、Na＋对产酶有激活作用,Cu2＋则抑制酶活性。结论：酶活性比出发菌提高约1.4倍,对饲料制作中提高纤维降解具有一定的实用价值。     

地衣芽孢杆菌D-1产碱性蛋白酶培养条件的优化

为了对产碱性蛋白酶的地衣芽孢杆菌D-1的培养条件进行优化,利用10 L发酵罐,采用正交设计19(34)试验,对培养温度、pH值、搅拌转速、通气量4条件进行优化,得到地衣芽孢杆菌D-1发酵产碱性蛋白酶的最优培养条件为:培养温度37.0℃,pH值7.5,通气量4L/min,搅拌转速300r/min.利用最优条件组合进行验证...     

地衣芽孢杆菌20386株特性及其生态制剂的研究

作者在1986年从1例正常待产妇女的阴道中,分离出1株革兰氏阳性需氧地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)BL_(20386)株。该株体外试验(In Vitro Test)对金葡萄和白念珠菌具有明显的拮抗作用;体内试验(In vivo Test)表明具有调整肠道菌群和治疗作用。对BL_(20386)株的生物特性、生物毒性、生物拮抗、生物耗氧研究显示了安全、有效的指征,符合生态制剂生产用菌株。用该菌株制备的生态制剂—整肠生, 治疗婴幼儿感染性腹泻和非感染性腹泻治愈率分别为70％和85％;成年人细菌感染性腹泻3天治愈率为50％,5天为81％,7天为96.2％。整肠生具有治疗和预防肠道疾病的前景。     

枯草芽孢杆菌内切木聚糖酶的分离纯化与鉴定

目的：建立一种简便、快速的木聚糖酶分离和提取方法。方法：采用活性聚丙烯酰胺凝胶电泳和均质提取法相结合,分离纯化枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)固体培养基发酵产物中的木聚糖酶,进一步用薄层色谱和高压液相色谱对木聚糖酶进行鉴定。结果：采用活性聚丙烯酰胺凝胶电泳和均质提取法相结合,从枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)固体培养基发酵产物中分离得到了两种内切木聚糖酶,酶解桦木木聚糖的产要产物以木二糖和木三糖为主。结论：活性聚丙烯酰胺凝胶电泳和均质提取法相结合是一种新的分离纯化木聚糖酶的简便、有效方法。     

地衣芽孢杆菌普鲁兰酶编码基因的鉴定

对地衣芽孢杆菌基因组序列分析显示。其中标注为amyX的基因可能编码普鲁兰酶。以PCR方法,从地衣芽孢杆菌染色体DNA中扩增出amyX基因蛋白编码区,插入大肠杆菌表达载体pET28aT7启动予下游。含重组质粒的大肠杆菌BL21（DE3）在IPTG诱导下表达出有活性的普鲁兰酶。酶学性质初步分析表明,重组普鲁兰酶最适反应温度为40℃,最适pH值为6．0。     

溶剂稳定性蛋白酶产生菌Bacillus licheniformis YP1的发酵优化

溶剂稳定性蛋白酶产生菌Bacillus licheniformis YP1分离自油田土样。考察了碳源、氮源、金属离子等营养因素对YP1菌株发酵产溶剂稳定性蛋白酶的影响。YP1菌株发酵产胞外蛋白酶的最佳碳源为淀粉,果糖、甘露糖和乳糖显著抑制产酶;最佳氮源为酵母膏,干酪素、酵母粉和牛肉膏促进产酶,玉米浆和尿素显著抑制产酶。Mn^2＋可以显著促进酶活,Mg^2＋可以促进产酶,在初步优化的培养条件下,YP1菌株的胞外蛋白酶产量达980U。     

微生态系统中地衣芽孢杆菌消长的研究

采用不同接种培养方法,研究了地衣芽孢杆菌在微生态系统的消长状况．结果表明,在健康人体内该菌能迅速增殖,菌数为１．４９×１０８～１．８３×１０８个·ｇ－１,并能较长时间定植下来,３０ｄ后菌数为１．２７×１０７～１．５１×１０７个·ｇ－１．在病人体内增殖相对较慢些,菌数为１．４０×１０８～１．６７×１０８个·ｇ－１,３０ｄ后菌数为１．１５×１０７～１．３１×１０７个·ｇ－１．在人工模拟微生态系统中,当ｐＨ为５．０～９．０,营养物为食物匀浆培养基、牛肉膏蛋白胨培养基时,其菌数为３．０５×１０８、３．４２×１０８个·ｍｌ－１．     

强化底物利用酶系表达,提升地衣芽孢杆菌生产碱性蛋白酶性能

地衣芽孢杆菌2709由于易于培养、GRAS状态和完善的蛋白质分泌能力,是已经投入工业生产碱性蛋白酶的菌株.为改善该菌株的发酵生产性能,提高菌体对培养基成分的利用和碱性蛋白酶产量,对菌株的胞外分泌酶系进行完善.利用同源重组机制,在基因组复制起始位点附近引入了来源于短小芽孢杆菌的木聚糖酶基因xynA和在复制起始位点中心对称...     

中国新分离碱性耐热芽孢杆菌的木聚糖酶产酶特征

目的：检测由中国新分离碱性耐热芽孢杆菌[1]产生的粗木聚糖酶的酶活。方法：通过DNS法测定粗木聚糖酶的酶活。结果：实验表明,以橡树木聚糖为底物培养的新分离菌株在30-50℃处理2h酶活不丧失。其中,XJU-1菌株在60、70和80℃时粗酶酶活分别丧失是最初酶活的1.54%、19.09%和72.59%;而XJU-80的粗酶酶活分别是3.59%、26.43%和72.59%。两个菌株产生的粗木聚糖酶的最适pH是7.5-8.0。将该粗酶在pH 7.0-9.0（50℃）处理24h后,酶活几乎均降低最初酶活的18%。结论：由XJU-1和XJU-80产生的木聚糖酶是生化领域有用的嗜碱耐热酶。     

地衣芽胞杆菌活菌制剂的临床应用进展

整肠生是应用二十多年的地衣芽胞杆菌活菌制剂,已有大量的研究报道其临床有效性和安全性。地衣芽胞杆菌大量分泌种类丰富的消化酶,通过抑制肠道有害菌生长和促进有益菌增殖调节肠道菌群,并产生杆菌肽、地衣素和乙酸等生物活性物质发挥益生作用。本文总结了益生菌的益生特点,并重点分析了芽胞杆菌的益生特点,归纳了整肠生的作用机制与临床研究现状,揭示了其在肝脏疾病、溃疡性结肠炎、肠易激综合征、幽门螺旋杆菌感染以及病毒感染等疾病中的治疗作用,并对整肠生未来的临床应用方向进行了展望。     

Development of an asporogenic Bacillus licheniformis for the production of keratinase

AIMS: Bacillus licheniformis PWD-1 is a keratin-degrading, spore-forming bacterium isolated from a poultry waste digester. A sporulation-deficient mutant of B. licheniformis PWD-1, named B. licheniformis WBG, was developed and characterized. METHODS AND RESULTS: The mutation was generated using the splicing by overlap extension PCR method (Gene SOEing) to create 256 bp deletion in the spoIIAC gene, which encodes an essential sporulation-specific sigma factor. In vivo gene replacement was accomplished with the use of a temperature-sensitive plasmid that is able to integrate and excise the nucleotide fragment 256 bp from the B. licheniformis chromosome. PCR analysis and DNA sequencing confirmed the spoIIAC gene deletion. Heat-treatment assays and electron microscopy verified the absence of spores. CONCLUSIONS: This asporogenic strain is able to express normal levels of keratinase when compared with its wild-type host. SIGNIFICANCE AND IMPACT OF THE STUDY: In this study, a method of constructing a stable sporulation-defective strain was developed. It can be potentially useful as a tool to generate asporogenic strains of Bacillus that retain their industrial capabilities for production of exoproteases and other exozymes.     

Co-linear scaffold of the Bacillus licheniformis and Bacillus subtilis genomes and its use to compare their competence genes

We have established the co-linear regions of Bacillus licheniformis, an industrially important bacterium, and Bacillus subtilis, a model bacterium. In the co-linear regions, revealed by PCR, gene content and order are presumed to be conserved. These regions constitute approximately 60% of the compared chromosomes. Sequencing of the competence genes of B. licheniformis allowed us to validate the approach, and to demonstrate how it can be used for the comparative analysis of complex genetic systems. A new insertion sequence, designated IS3Bli1, was discovered in the competence region of the analyzed B. licheniformis strain.     

Detection and characterization of naturally occurring plasmids in Bacillus licheniformis

Twenty-two Bacillus licheniformis strains, freshly isolated from pasture-land, were studied for the presence of plasmid DNA. Among these strains, 14 were shown to harbor one or more plasmids of different size. Southern-hybridization experiments showed a high homology between all plasmids investigated and a 2.2-kb PvuII/HindIII fragment of pBL1, a B. licheniformis plasmid previously isolated. Three fragments of pBL1, including the 2.2-kb PvuII/HindIII region, were cloned into pJH101 vector. The resulting chimeras were able to transform Bacillus subtilis. The fragment with high homology probably contains the region with the replicative functions of plasmids from B. licheniformis species.