中国橡胶树疫霉种的研究*

疫病是我国植胶区的主要病害。近年来,作者从云南西双版纳和广东海南岛的橡胶树和胶园土共分离出57株疫霉菌种。通过分类研究,共鉴定出4个种:恶疫霉 Phytophthoracactorum(Leb.＆ Cohn)Schroeter,辣椒疫霉 P.capsici Leoman,柑桔褐腐疫霉 P.citrophthora(Sm.＆ Sm.)Leonian,和棕榈疫霉 P.palmivora(Butl.)Butler。其中辣椒疫霉是首次在橡胶树上发现。我国橡胶树疫霉的种群结构与东南亚和南亚的有所不同,除棕榈疫霉外,其余3种在东南亚和南亚均未发现。而东南亚常见种:簇囊疫霉(P.botryosa)、橡胶疫霉(P.heveae)和蜜色疫霉(P.meadii),在我国却迄今尚未发现或有待证实。以前报道分离自胶园土壤中的芋疫霉(P.colocasiae),可能系柑桔褐腐疫霉之误。绝大多数分离物经配对培养均可产生性器官:辣椒疫霉的A~1交配型和A~2交配型大致相等;柑桔褐腐疫霉和棕榈疫霉的A~2交配型则明显多于A~1交配型。     

辣椒疫霉致病毒素

辣椒疫霉在培养液中振荡培养时可分泌毒素,这种纱能经志辣椒叶片形成水渍状褐腐斑,类似病原菌侵染后形成的症状,Ｐｌｉｃｈ’ｓ和Ｖ８Ｃ２液适于Ｐ．ｃａｐｓｉｃｉ的生长和产毒;生长适宜温度和ＰＨ范围分别为２０－３０℃和ＰＨ６－７,在２５－３０℃、Ｐ５－８的条件下２滤液毒性最强;培养１５天产毒达到最高值,液先后经８５％硫酸铵沉淀,ＤＥ５２、Ｃ几ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５柱层将毒素纯化。经鉴定该纯毒素为３９．８     

核糖体基因ITS作为苎麻疫霉,恶疫霉分类辅助性状的研究

以２个雄器大多围生、少数侧生的苎麻疫霉菌株与１个雄器侧生、偶有围生的恶疫霉菌株为材料,采用真菌核糖体基因转录间隔区（ＩＴＳ）通用引物,ＰＣＲ扩增３个供试菌株核糖体基因的ＩＴＳ１和ＩＴＳ２,并对ＰＣＲ产物进行了克隆和序列分析。结果是苎麻疫霉的ＩＴＳ１和ＩＴＳ２分别由２０６和４５３个碱基组成,而恶疫霉则分别由２１８和４１５个碱基组成。２个供试苎麻疫霉菌株的ＩＴＳ１和ＩＴＳ２的碱基序列同源性均分别为１０     

辣椒疫霉致病毒素

辣椒疫霉(Phytophthora capsici Leonian)在培养液中振荡培养时可分泌毒素,这种毒素能引起辣椒叶片形成水渍状褐腐斑,类似病原菌侵染后形成的症状。Hich’s和V₈培养液适于P capsici的生长和产毒;生长适宜温度和pH范围分别为20～30℃与pH6～7,在25～30℃、pH5～8的条件下培养滤液毒性最强;培养15天产毒达到最高值。滤液先后经85％硫酸铵沉淀、DE52、CM32和SephadexG-75柱层析将毒索纯化。经鉴定该纯毒索为39．8kD酸性糖蛋白。并对80℃以上高温或蛋白酶敏感,而β-D-葡萄糖苷酶处理不影响其毒性,蛋白亚基为毒紊的活性中心。毒素处理寄主叶片引致病理性坏死,这一作用与辣椒品种抗病性有关。     

福建、浙江、江苏、上海疫霉种的研究

1985—1986年,从福建漳州,浙江杭州,上海,江苏南京,苏州,扬州,常州等地采集100多种植物进行分离,在雪松(Cedrus deodara),倒挂仙人鞭(Cereus flagelliformis),冬青卫茅(Euonymus japonieus),构树(Broussonetia papyrifera),蓖麻(Ricinus communis),柑桔(Citrus reticulata),带叶兜兰(Paphiopedilum hirsutissimum),芋(Colocasia esculenta),鳄梨(Persea americana),山茶(Camellia sp.),珊瑚樱(Solanum pseudo-capsicum),百合(Lilium brownii var.viridulum),蔓常春花(Vinca major),西瓜(Citrullus lanatus)等14种寄主植物上分离到51个疫霉菌株,鉴定为9个种:烟草疫霉(=寄生疫霉)Phytophthora nicotianae B.de Haan(=P.parasitica Dast.),掘氏疫霉P.drechsleri Tucker,樟疫霉 P.ciunamomi Rands,棕榈疫霉P.palmivora(Butl.)Butl.,柑桔褐腐疫霉P.citrophthora(R.et E.Smith) Leon.,苎麻疫霉P.bochmeriae Saw.,蜜色疫霉P.meadii McRae,簇囊疫霉P.botryosa Chee,隐地疫霉P.cryptogea Pethyb.et Laff.。其中,烟草疫霉,掘氏疫霉,樟疫霉出现频率较高,分布较广,初步认为是上述地区植物疫病的主要病原菌。簇囊疫霉、蜜色疫霉是国内新记录。     

荔枝霜疫霉的研究

对华南的荔枝霜疫霉(Peronophythora litchii Chen ex Ko et al)的形态和营养特性进行了研究,并和新模式种进行了比较。发现此菌孢囊梗的生长是一种有限-无限生长类型,或称之为多级有限生长。即孢囊梗上的小分枝大多数是有限生长的,在其顶端同时形成孢子囊。但有时在同一孢囊梗上有的小分枝会继续生长,形成二级、三级甚至四级孢囊梗。在营养要求上与疫霉无大差别,能在天然和合成培养基上旺盛生长,需要硫胺素,ca~(++)和有机二元酸,能利用NH_4~+ 或No_3~-为其氮源,并能利用淀粉为其碳源,菌体匀浆中测出淀粉酶活性。根据孢囊梗的独特生长方式,我们认为完全有理由承认这菌是一个新属,并可成为新科,霜疫霉科。本文中已将霜疫霉科作了修改描述。孢囊梗已被修改为:孢囊梗多级有限生长。无疑这菌是腐霉科和霜霉科的中间类型。在营养类型与有性器官上和疫霉相近,而其孢子囊的形成和霜霉相似。但其孢囊梗的多级有限生长方式则和这两科都不相同。     

恶疫霉有性杂交后代的竞争能力研究

5株杂交个体（携带对甲霜灵和地茂散的抗性标记）的游动孢子分别与其野生型亲本AP14和PK9（对甲霜灵和地茂散均敏感）按1：1、1：9和1：49比例混合涂布在10％V6培养基平板上或接种在苹果片上生长4－5d,并诱导产生孢子囊和释放游动孢子,经单孢分离建立单孢无性系,在含甲霜灵或地茂散的培养基上检测杂交个体的单孢后代所占的百分率。结果是,在V6培养基平板上混合生长的30个组合中,仅3个组合杂交个体的单孢后代在其单孢无性系群体中所占的比例显著低于野生型亲本,其余组合均符合其各自的期望值;在苹果片上混合接种的30个组合,杂交个体与野生型亲本的单孢后代所占比例均符合其各自的期望值。进一步测定2个杂交个体（APK－9和APK－24）分别与其野生型亲本以1：1的比例混合后在V6培养基平板上和苹果片上连续3个产孢循环过程中两者比例的变化,结果是,在杂交 个体与野生型亲本AP14的组合中,杂交个体的后代所占的百分率由第一个产孢循环的49．1％－54．2％至第三个产孢循环下降为1．8％－6．2％;而在与另一野生型亲本PK9的组合中,杂交个体的后代所占的百分率从第一个产孢循环的44．4％－54．2％至第3个产孢循环上升为72．1％－75．0％。上述结果表明恶疫霉有性杂交个体在离体和活体上均有较强的竞争能力,提示有性杂交对其生物多样性的产生可能具有重要作用。     

TAXONOMIC STUDIES ON PHYSARUM FROM CHINA I. THREE NEW SPECIES FROM NORTHEASTERN CHINA

在近年来对中国绒泡菌属粘菌的分类学研究中,观察到许多不寻常和有趣的标本,其中一些与目前已知的绒泡菌均不吻合,形态学研究表明它们是新种。本文报告了３个产自我国东北的绒泡菌属新种,它们是：产自吉林省的环柄绒泡菌Ｐｈｙｓａｒｕｍａｎｎｕｌｉｐｅｓ和青灰绒泡菌Ｐｈｙｓａｒｕｍｃａｅｓｉｕｍ及产自内蒙古自治区的木生绒泡菌Ｐｈｙｓａｒｕｍｘｙｌｏｐｈｉｌｕｍ。环柄绒泡菌的孢囊柄具有环带,较为特殊;青灰绒泡菌的囊被有一粉状物质层,但其中的钙含量远低于其它大多数绒泡菌;木生绒泡菌的球形白色的孢囊有柄、群生、直立,具纵皱的柄褐色而不透明,囊基盘状,石灰结较小、多角形或伸长,孢子匀生小疣但一侧色浅。文中对它们进行了形态学描述和讨论,并附有扫描电镜下的特征照片,模式标本保存在中国科学院微生物研究所真菌标本室（ＨＭＡＳ）。     

橡胶树花药和小孢子发生与发育过程的观察

应用石蜡切片法．观察橡胶树的实生树和RRIM600、GT-1品系的花药壁以及小孢子的发生和发育过程,得到如下结果：1．实生树的花药壁通常由四层细胞组成,发育形式为双子叶型。药室内壁细胞在发育后期进行径向条纹加厚．至花药开裂时仍保留着原生质体。中层由一层或不规则的两层细胞组成,在小孢子单核期消失。绒毡层细胞具单棱或双核,属分泌型,至花粉发育到三细胞时消失。小孢子母细胞减数分裂为同时型。成熟花粉粒具三十细胞。精细胞椭圆形,在光镜下不能区分出细胞质鞘和核仁。所观察的实生树雄花,多数发育正常,很少有空秕的花粉。2．RRIMB00品系的花药和小孢子发生与发育和实生树相似,但至后期只有少数花粉发育正常,多数成为大小不等的败育花粉;此外也有一些败育的雄花。3．GT-1的花药在小孢子母细胞减数分裂时,绒毡层细胞的体积开始异常增大并液泡化．小孢子在四分体内解体或分离后成为空秕花粉。     

橡胶树花药和小孢子发生与发育过程的观察

应用石蜡切片法,观察橡胶树的实生树和RRIM600、CT-1品系的花药壁以及小孢子的发生和发育过程,得到如下结果:1.实生树的花药壁通常由四层细胞组成,发育形式为双子叶型。药室内壁细胞在发育后期进行径向条纹加厚,至花药开裂时仍保留着原生质体。中层由一层或不规则的两层细胞组成,在小孢子单核期消失。绒毡层细胞具单核或双核,属分泌型,至花粉发育到三细胞时消失。小孢子母细胞减数分裂为同时型。成熟花粉粒具三个细胞。精细胞椭圆形,在光镜下不能区分出细胞质鞘和核仁。所观察的实生树雄花,多数发育正常,很少有空秕的花粉。2·RRIM600品系的花药和小孢子发生与发育和实生树相似,但至后期只有少数花粉发育正常,多数成为大小不等的败育花粉;此外也有一些败有的雄花。3.GT-1的花药在小孢子母细胞减数分裂时,绒毡层细胞的体积开始异常增大并液泡化,小孢子在四分体内解体或分离后成为空秕花粉。     

巴西橡胶树乳管分化的超微结构研究

用电子显微镜技术研究了巴西橡胶树(Hevea brasiliensis Mnll.Arg.)幼苗初生乳管分化的早期阶段,着重研究了乳管特有的结构成分的形成。最初可辨认的橡胶粒子出现在细胞质中,直径40—60nm,呈均匀的电子致密体;随着橡胶粒子的增大,粒子的中央区变为电子透明的,而周缘保持有电子致密物质,有时看到充满电子致密物的突起。观察到黄色体(本质为分散的溶酶体液泡)可由内质网膨大形成。在乳管发育过程中出现三种具有不同内含物的黄色体:最初的黄体含有染色很深的呈束状的微纤维,它们随后被含有浅色微纤维的黄色体所代替,成熟乳管的黄色体则含有杂乱的细纤维。在乳管分化初期,乳管细胞中不存在具有特殊结构的 F-w 复合体,只有许多与分生组织中的原质体相同的质体。观察到一些发育异常的乳管,它们似乎停留在发育的早期阶段,而不能继续发育成为典型的成熟乳管。     

树木发育阶段理论及其在橡胶树育种中的应用(综述)

近一个多世纪来,树木发育阶段理论的应用研究取得了令人瞩目的成就,在果树育种,造林,园艺等领域得到广泛应用并取得了巨大的经济效益,与此形成鲜明对比的是,树木发育阶段理论研究的核心内容如发育阶段转变的遗传基础,分子机制等方面的基础研究工作却进展缓慢,对各个阶段的发育特性和利用潜力认识不足,在一定程度上限制了该理论在生产实践中的应用和推广范围,本文就树木发育阶段理论的研究现状,存在问题及在橡胶树育种中的应用等进行了综述和探讨。     

中国西部柄锈菌新资料

本文报告了我国西部的四种柄锈菌。黑果茜草Rubia cordifolia var. pratensis上的西北柄锈菌Puccinia boreo-occidentalis被描述为新种。垂花报春Primula nutans上的北极柄锈菌P. arctica、车叶草Asperula aparine上的车叶草柄锈菌P. asperulae-aparines和黄水枝Tiarella polyphylla上的黄水枝生柄锈菌P. tiarellicola为中国新记录。根据我国的标本对每个种作了描述和讨论并附有孢子线条图。所有标本保藏在中国科学院菌物标本馆(HMAS)。     

中国唇形科植物柄锈菌属的种

本文报告了中国唇形科植物上的柄锈菌共9个种,其中新种2个,即灯笼草柄锈Puccinia clinopodii-polycephali和火把花柄锈P. colquhouniae;中国新纪录种1个,即香茶菜柄锈P.pletranthi。每个种都有描述并附有孢子图,对有些种作了简短讨论,对于过去的错误鉴定作了订正.有三种由于缺乏标本未能研究,仅列出文献、寄主及产地。已研究的种附有检索表。所有引证的标本均保藏在中国科学院微生物研究所真菌标本室。     

中国假尾孢属的研究II．

本文报道中国假尾孢属的24个种,其中有2个新种:杨桐假尾孢(Pseudocercospora adinandrae Guo&Liu),钟萼假尾孢(Pseudocercospora bretschneiderae Liu&Guo),10个新组合,1个新名称:木豆假尾孢(Pseudoeercospora cajani-flavi Guo&Liu)和11个中国新记录。文中对2个新种提供了拉丁文简介、描述及图。所研究的标本全部保存在中国科学院微生物研究所真菌标本室(HMAS)。