多重聚合酶链反应与荚膜肿胀试验对肺炎链球菌血清分型的比较研究

为评估多重聚合酶链反应（PCR ）对肺炎链球菌血清分型的可行性,分别采用多重PCR和荚膜肿胀试验对568株肺炎链球菌进行血清分型,并对分型结果进行比较分析。结果显示,568株肺炎链球菌中,213株通过荚膜肿胀试验分出16个血清群,主要有血清群19（23．1％,131／568）、6（5．3％,30／568）、23（1．6％,9／568）、14（1．4％,8／568）、9（1．1％,6／568）、15（1．1％,6／568）等,分型率为37．5％（213／568）;356株通过多重PCR分出21个血清群,主要有血清群19（27．8％,158／568）、23（8．5％,48／568）、6（7．4％,42／568）、14（4．4％,25／568）、3（4．2％,24／568）、15（3．5％,20／568）等,分型率为62．7％（356／568）。荚膜肿胀试验鉴定出血清群4和18,但多重PCR未能鉴定;多重PCR鉴定出血清群5、12、35、16、17和22,但荚膜肿胀试验未能鉴定。多重PCR与荚膜肿胀试验对19F、19A血清型的鉴定无显著差异。结果提示,这2种方法对肺炎链球菌血清分型结果有差别,多重PCR的分型率高于荚膜肿胀试验。对来源复杂的标本进行肺炎链球菌血清分型,2种方法可相互补充,以提高分型率。     

金黄色葡萄球菌抗体在诊断金黄色葡萄球菌L型败血症中的意义

目的：探讨测定金黄色葡萄球菌（简称金葡菌）抗体在金葡菌Ｌ型败血症中的意义。方法：金葡菌Ｌ型败血症的细菌诊断组３８例,临床诊断组４６例及对照组４１例的血清做试管定量凝集反应测定其效价。并以金葡菌细菌型和Ｌ型分别感染动物,停止感染两个月后测定抗体滴度。结果：以１：８０以上作为阳性,阳性率细菌诊断组９４７％、临床诊断组８６９％、而对照组仅１４６％。细菌诊断组及临床诊断组均明显高于对照组（Ｐ〈０００５）,而细菌诊断组与临床诊断组比较无显著差异（Ｐ〉００５）。结论：金葡菌抗体在金葡菌Ｌ型败血症中具有快速的病原学辅助诊断作用。     

类鼻疽菌血清分型

类鼻疽假单胞菌根据不耐热抗原的有无分为血清I型和II型。在没有标准血清情况下,用吸收试验,选出产不耐热抗原较好的菌株,用scphadex G—200纯化抗原制备I型血清,用该血清对我国分离的68株及引进6株菌以琼脂扩散法,进行血清学分型。结果表明：68株为血清I型,3株为血清II型菌,3株不稳定。上述结果与文献报道的一致。即血清I型菌多存在于亚洲,血清型与菌株来源(环境、动物)无关,但与地理分布有关。     

金黄色葡萄球菌的流行病学分型

金黄色葡萄球菌引起的医院获得性感染问题至今仍备受国内外有关部门重视。控制感染的一个重要策略就是弄清传染源及传播途径，中断菌株在敏感病人之间或无症状携带者与病人之间的传播，这样的流行病学研究依赖于有高鉴别力的分型系统来辨别菌株的相关性。本文就金葡菌传统的基于表型的噬菌体分型、血清学分型、耐药谱分型、凝固酶分型以及新兴的质粒分型、染色体ＤＮＡ脉冲电泳分型、核糖分型和全细胞蛋白图谱分型等分子生物学分型方法作一综述。     

金黄色葡萄球菌分子生物学分型方法进展

金黄色葡萄球菌的分子生物学分型方法和如质粒谱分析法，核糖体基因分型法，脉冲电泳分型法和随意引物ＰＣＲ法等正兴起，并有取代传统方法的趋势。本文对这些新分型法作了简要评述。     

金黄色葡萄球菌L型耐药现状分析

本文目的探讨金黄色葡萄球菌（金萄菌）Ｌ型耐药现状,达到合理应用抗菌药物。采用方法：对１９９２～１９９７年细菌室分离的金葡菌Ｌ型５３０株的耐药性前后３年进行对比。结果显示,苯唑西林、头孢哌酮、阿米卡星、利福平耐药率有显著差异（Ｐ＜００１）,金葡菌Ｌ型耐药性已发生变迁。治疗金葡菌Ｌ型菌感染,要选择敏感、窄谱、主要作用于细胞膜和影响细菌蛋白质合成的抗菌药物。为避免Ｌ型菌回复,必要时同时选用作用于细胞壁的抗生素,以达到彻底消灭病原菌。     

金黄色葡萄球菌D型肠毒素抗血清制备和在肠毒素免疫检测上的应用

参考Robbins等文章,制定了制备抗-SED血清的免疫方案,抗原用量6.9mg/兔,注射8针,免疫时间共14周。用免疫双向琼脂扩散方法测定,抗-SED血清效价可达1:128,所制抗-SED血清与高纯度(98%)及低纯度(60%)的SED只产生一条沉淀线,并且融合,与SEA、SEB、SEC_1、SEC_2均没有交叉反应。以抗-SED抗体IgG制备的诊断血球检出灵敏度较高,约1ng/ml。对6种罐头食品人工污染毒素的模拟实验结果,检出灵敏度为1.56ng/ml,略低于含纯SED标本,食物成份对反向血凝检出没     

深圳市金黄色葡萄球菌耐药性分析及分子分型

目的 了解深圳市金黄色葡萄球菌的耐药性特点及分子分型特征。方法 收集2012年来自深圳市7所医院的428株金黄色葡萄球菌,以琼脂稀释法测定其对12种抗菌药物的最低抑菌浓度（MIC）,采用聚合酶链式反应（PCR）检测杀白细胞毒素（PVL）,并对携带PVL基因的菌株进行多位点基因序列分型（MLST）。结果 428株金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）116株（26.2%）,甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）312株（73.8%）。12种抗菌药物中,该菌对青霉素和红霉素的耐药率最高,分别为88.8%和44.2%;未发现替考拉宁、利奈唑胺和万古霉素的耐药株。MRSA对青霉素和环丙沙星的耐药率显著高于MSSA。428株金黄色葡萄球菌中,60株（14.02%）携带PVL基因。MLST分型结果显示共有14种已知序列型和4种新的序列型,其中ST59和ST338最多,分别为16株和12株。结论 深圳地区金黄色葡萄球菌MRSA检出率以及对多种抗菌药物的耐药率均低于全国平均水平,PVL基因阳性率处于中等水平;存在多种ST分型,以ST59和ST338多见,具有遗传多样性和独特的遗传背景。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子分型研究进展

近年来,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌在全世界各地感染率和分离率不断提高,已成为目前院内感染的重要病原菌之一。运用有效、可靠、廉价的分子分型方法对分析耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的流行病学特征及来源,对制定控制院感及流行的措施非常重要的。本研究概述了各种分子分型方法的原理及比较,如SCCmec分型、脉冲场凝胶电泳分型、多位点序列分型、葡萄球菌A蛋白分型和毒力因子分型等。脉冲场凝胶电泳仍然是暴发流行中MRSA分子分型的金标准,而其他分型方法更适合用于检测菌株的变异和建立国际监测。     

金黄色葡萄球菌亚致死量的小鼠感染中L型致病性的实验研究

用亚致死量金黄色葡萄球菌静脉内注入感柒小鼠建立了动物模型,结果感染后1周内大部分(8/10)的小鼠肺脏中可分离出金葡菌 L 型;感染第2周时,肺中 L 型菌消失,肝、肾中出现 L型菌分别为5/10与8/10,在感染第4周金葡菌 L 型从肝脏中也消失,而在肾中从4周持续至12周仍有L 型菌(18/20),普通细菌型占2/10,说明 L 型菌在此处保存时间较长,在第12周时,L 型仍有15/20,从感染后4周时起至第12周组织学检查时,在4/5～1/2的肺、1/5～1/3的肝、3/4～5/5的肾脏器中表现有间质性炎症,提示金黄色葡萄球菌在机体内可转变为“L”型,并在肾内的高渗环境中长期存活,它能在小鼠中引起间质性炎症,这一病变,看来与无细胞壁的其它微生物(包括病毒、支原体等在内)具共同的致病特性有关。     

The capsular turnover product of Staphylococcus aureus strain Smith

Abstract The capsular polysaccharide released from the bacterial surface by cell wall turnover during growth exhibited less size heterogeneity and a higher average molecular mass than the polysaccharide extracted from the cell by treatment with lysostaphin or low pH. Treatment of turnover polysaccharide, radiolabelled by growth of the bacteria in the presence of N-acetyl-[³H]-glucosamine, with muramidase B from Chalaropsis released a low molecular weight product chromatographically identical to the peptidoglycan degradation products released from the peptidoglycan-teichoic acid complex by the same treatment. It is concluded that some or all of the capsular polysaccharide released into the culture fluid during growth is derived from peptidoglycan-linked capsular material, solubilised by cell wall turnover.     

Relationship between capsular types 5 and 8 and phage types in Staphylococcus aureus isolates from cow, goat and ewe milk

Abstract In order to check the relationship between capsular polysaccharide (CP) type 5 and 8 and certain phage patterns, previously described in human Staphylococcus aureus clinical isolates, we typed 100 CP types 5 and 8 S. aureus strains isolated from cow, goat and ewe milk, with the human set of phages. The proportion of typable strains was much less than that found with human strains. The association between CP types 5 and 8 and phage patterns reported for human isolates was only partially confirmed and an original correlation between susceptibility to group III phages and CP type 5 was found.     

金葡菌荚膜多糖血清型的研究进展

金葡菌是引起奶牛乳腺炎的一种主要的致病菌,致病性金葡菌多数含有荚膜成分,金葡菌荚膜多糖有11种血清型。从不同血清型荚膜多糖的结构,基因构成,抗吞噬作用,致病性等方面作了介绍,并简要介绍了金葡菌荚膜多糖血清型的国内外研究现状。     

Turnover of cell surface-bound capsular polysaccharide in Staphylococcus aureus

The capsular polysaccharide (CPS) of Staphylococcus aureus strain Smith was labelled by growth of bacteria in the presence of radioactive N-acetylglucosamine and was separated from labelled cell wall components by affinity chromatography on wheat germ agglutinin following dissolution of the cells by lysostaphin. The products were partially characterised chemically and immunochemically. Similar labelled components were found in the culture fluid during growth. In a pulse-chase experiment, cell-bound CPS was released continuously into the culture fluid at the same rate as cell wall turnover and there was no evidence of direct excretion of CPS.     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌及其肠毒素的检测和耐药性分析

目的评价乳胶结合试验检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)及其肠毒素(SE),并进行耐药性分析.方法收集130株金黄色葡萄球菌临床分离株,通过药敏试验将其分为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA),用反向间接血凝试验(RPHA)检测金黄色葡萄球菌肠毒素.结果67株MR-SA产肠毒素,19株MSSA产肠毒素,MRSA产肠毒素率为100%,MSSA产肠毒素率为30%.结论实验室应重视金黄色葡萄球菌肠毒素的检测.     

Spa typing of Staphylococcus aureus Isolated from Clinical Specimens from Outpatients in Iraq

Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) is notorious as a hospital superbug and a problematic pathogen among communities. The incidence of MRSA has substantially increased over time in Iraq. The aim of this study was to determine the prevalence and spa types of MRSA isolates from outpatients or patients upon admission into hospitals. Various biochemical tests identified S. aureus isolates, and then this identification was confirmed by PCR using species-specific 16S rRNA primer pairs. Antibiotic susceptibility was determined against methicillin, oxacillin, and vancomycin using the disk diffusion method. Vancomycin MIC was detected by VITEK 2 compact system. All the identified isolates were screened for the presence of mecA and lukS-PV-lukF-PV genes; 36 of them were subjected to spa typing-based PCR. Out of 290 clinical samples, 65 (22.4%) were S. aureus, of which 62 (95.4%) strains were resistant to oxacillin and methicillin. Except for two isolates, all MRSA isolates were mecA positive. One of the three MSSA isolates was mecA positive. Five strains were resistant to vancomycin. Fourteen (21.5%) isolates were positive for the presence of lukS-PV-lukF-PV genes. Spa typing of 36 S. aureus isolates revealed eleven different spa types, t304 (30.3%), t307 (19.4%), t346 (8.3%), t044 (8.3%), t15595 (8.3%), t386 (5.5%), t5475 (5.5%), t17928 (2.8%), t14870 (2.8%), t021 (2.8%), and t024 (2.8%). These findings could be useful for assessing the genetic relatedness of strains in the region for epidemiological and monitoring purposes, which would be essential to limiting the spread of MRSA.     

32株金黄色葡萄球菌分子分型及肠毒素分析

目的 对辽宁省内2016-2018年分离出的食源性金黄色葡萄球菌采用脉冲场电泳(PFGE)和肠毒素分型进行分析,为今后公共卫生等领域提供技术保障.方法 将32株金黄色葡萄球菌用限制性内切酶SmaI酶切以进行PFGE分析,并用BioNumerics(7.6版本)软件对分离株的指纹图谱进行聚类分析;用PCR方法对菌株进行肠...     

SCCmec遗传元件及其在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子分型中的应用

携带mec基因簇的葡萄球菌盒式染色体(Staphylococcal chromosome cassette mec, SCCmec)遗传元件的获得是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)耐药的主要原因。SCCmec由一个mec基因簇、一个染色体重组酶(ccr)基因簇及3个J区组成。mec基因簇含有mecA及其调控基因,mecA基因编码的耐药决定簇使MRSA对β-内酰胺类抗生素耐药;ccr基因簇编码的重组酶负责SCCmec元件的整合与切离;J区差异大,导致不同来源MRSA菌株携带SCCmec的大小不一,在组成上也具有多样性。这些特征为利用SCCmec元件进行MRSA分型创造了条件。文章介绍了SCCmec元件的结构和功能,综述了基于SCCmec的MRSA分型研究。