极谱氧传感仪快速测定超氧化物歧化酶的实验研究

超氧化物歧化酶（简称ＳＯＤ）是机体内超氧阴离子自由基（Ｏ２．＾－）的清除剂,广泛地生理界,其检测方法较多。为探索一种快速检测ＳＯＤ的新方法,我们自行设计、加工、组装成了极谱氧传感器ＳＯＤ检测仪,并建立了相应的检测方法。用该检测 测定ＳＯＤ,具有快速、简便、经济等优点。     

自动超氧化物歧化酶（SOD）活性分析仪的研制

根据极谱氧电极法测定ＳＯＤ活性理论,应用计算机技术,研制出自动ＳＯＤ活性分析仪器。该仪器采用灵敏的氧电极和放大电路,以单片计算机为核心组成,使ＳＯＤ活性测试更加快捷,微量和准确,并基本实现自动测试。     

小麦对赤霉病抗性不同品种的SOD活性

本研究对９个赤霉病抗性不同小麦品种采用赤霉病菌分生孢子悬浮液以单花针注法进行了田间和温室抗病性鉴定,测定了各品种的胚性愈伤组织和盛花期麦穗分别经赤霉病菌毒素和分生孢子接种前后ＳＯＤ活性的变化。结果表明,各品种ＳＯＤ活性与其对赤霉病抗性呈极显著的正相关,接种后寄主的ＳＯＤ活性均有提高,抗病品种比感病品咱提高幅度大且有新的同工酶带出现。抗病品种望水白比感病品种Ａｌｏｎｄｒａ＂Ｓ＂多出两条ＳＯＤ同工酶谱     

绞股蓝超氧物歧化酶及某些理化特性的研究

本文以示同类型绞股蓝植株超氧物歧化酶（ＳＯＤ）和某些理化特性进行了比较分析。结果表明,棚栽型与野生型绞股蓝ＳＯＤ同工酶谱均有１２条（含Ｃｕ,Ｚｎ－ＳｏＤ、Ｍｎ－ＳＯＤ）;ＳＯＤ活性、对热稳定性均为野生型优于棚栽型,理化特性和营养物质的差异程度与生璋水平息息相关。     

铜锌超氧物歧化酶对几种羟自由基产生系统的影响

应用脱氧核糖降解法研究了ＣｕＺｎ－ＳＯＤ对几种·ＯＨ产生系统的作用机理．结果证明：ＳＯＤ对Ｆｅ（３＋）·Ｏ·Ｈ２Ｏ２系统中·ＯＨ的产生有明显的抑制作用,而失活ＳＯＤ或ＢＳＡ对它的抑制作用不大;在Ｆｅ（２＋）·Ｈ２Ｏ２和ＣＵ（２＋）·Ｈ２Ｏ２系统中,ＳＯＤ、失活ＳＯＤ和ＢＡＳ均能抑制·ＯＨ的产生;在Ｆｅ（２＋）·Ｏ系统中,ＳＯＤ对·ＯＨ产生作用不大,而失活ＳＯＤ或ＢＳＡ对它有明显的抑制作用．由此推测ＳＯＤ对·ＯＨ形成可能有三方面的影响：１．对Ｏ的清除作用,阻断Ｈａｂｅｒ－Ｗｅｉｓｓ反应;２．对金属离子的络合作用,降低·ＯＨ的产额;３．促进Ｈ２Ｏ２的积累,加快Ｆｅｎｔｏｎ反应．     

高氧预适应对大鼠心肌缺血损伤时抗氧化酶的影响

抗氧化酶具有减轻心肌缺血再灌注损伤的作用,在抗氧化酶中,比较重要的是超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）,谷胱甘肽过氧化物酶（ＧｌｕｔａｔｈｉｏｎｅＰｅｒｏｘｉｄａｓｅ,ＧＳＨｐｘ）和过氧化氢酶（ＣＡＴ）。为了解高氧预适应（ＨｙｐｅｒｏｘｉｃＰｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ,ＨＯＰ）对大鼠心肌缺血损伤时抗氧化酶的影响,本实验将实验组大鼠放入高压氧舱内,每日吸８０－８５％氧气（１ａｔｍ,１５－２０％为氮气）６ｈ,连续７ｄ。利用Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆ装置做成心肌缺血再灌注模型。实验动物随机分为二个部分。第一部分可逆性心肌缺血（ＨＯＰＡ组与对照Ａ组）：缺血１０ｍｉｎ,再灌注６０ｍｉｎ。观察冠脉回流液中ＳＯＤ活力,检测心肌内抗氧化酶活力（ＳＯＤ,ＧＳＨｐｘ,ＣＡＴ）。第二部分不可逆性心肌缺血（ＨＯＰＢ组与对照Ｂ组）：缺血６０ｍｉｎ,再灌注６０ｍｉｎ。测定冠脉回流液中肌酸磷酸激酶（ＣＰＫ）含量,ＳＯＤ及心肌内抗氧化酶活力。结果表明：对于可逆性心肌缺血：ＳＯＤ,ＧＳＨｐｘ活力升高;对于不可逆性心肌缺血损伤：ＨＯＰ能减少ＣＰＫ释放,ＳＯＤ活力升高。     

氧传感器法测定红细胞SOD诊断Down综合症的研究

本文报道用氧传感器法测定了健康成人、正常新生儿、Ｄｏｗｎ氏综合症患者、胎儿红细胞的ＳＯＤ活性。Ｄｏｗｎ氏综合症患者的ＳＯＤ活性显著高于正常人。本研究可望为Ｄｏｗｎ氏综合症的快速产前诊断开辟新途径。     

槟榔植株超氧物歧化酶活性,酯酶同工酶的比较

本文对槟榔植株ＳＯＤ活性、酯酶同工酶进行了比较分析,测定结果明明：⑴ＳＯＤ活性表现为成熟果明显高于青果６３．５１％,青果明显高于幼果２１３．７６％,花粉＞雌花＞雄花＞花梗;⑵不同产地、不同器官的彘酶同工酶、酶含量、酶活性、泳动率（Ｒｆ）及酶带分布状况的变化与生境、部位不同相关密切。     

卟啉类光敏药物HPD活性组分DHE的光敏作用：Ⅱ.产生…

本文用ＥＳＲ方法研究了血卟啉衍生物（ＨＰＤ）和ＰｈｏｔｏｆｒｉｎⅡ的活性成分双卟啉醚酯混合物（ＤＨＥ）生成＾１Ｏ２的光敏作用。利用２,２,６,６－Ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌ－４－ｐｉｐｅｒｉｄｏｎｅ（Ｔｅｍｐｏｎｅ）对＾１Ｏ２的捕捉,测定所生成的氮氧自由基的ＥＳＲ信号,并经加ＮａＮ３和Ｄ２Ｏ的实验,证实了ＤＨＥ光敏反应有＾１Ｏ２的生成,并在实验的浓度范围内,随ＤＨＥ浓度增大,生成的＾１Ｏ２也增加。结合     

伤寒沙门氏菌SOD的提取及抗原性研究

经硫酸铵分级沉淀,ＤＥＡＥ纤维素柱层析提取了伤寒沙门氏菌ＳＯＤ。提取后酶的比活性为３２７０Ｕ／ｍｇ,经聚丙烯酰胺凝胶电泳,蛋白质染色及酶活性染色显示提取的ＳＯＤ达到了电泳纯。酶活性染色法和原子吸收分光光度法测定结果表明提取的ＳＯＤ为Ｆｅ－ＳＯＤ。双向琼脂扩散试验结果显示抗伤寒沙门氏菌Ｆｅ－ＳＯＤ血清与牛红细胞ＳＯＤ不形成沉淀线,提示伤寒沙门氏菌Ｆｅ－ＳＯＤ与牛红细胞ＳＯＤ无交叉反应,抗体对酶活性抑制试验结果显示抗Ｆｅ－ＳＯＤ血清可抑制伤寒沙门氏菌及鼠伤寒沙门氏菌的Ｆｅ－ＳＯＤ和Ｆｅ／Ｍｎ－ＳＯＤ活性,对Ｍｎ－ＳＯＤ活性无抑制作用,说明伤寒沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌的ＳＯＤ之间有共同抗原,也提示ＳＯＤ的辅基似乎决定了其抗原特异性。     

佛州侧耳子实体锰型SOD的纯化及性质研究

佛州侧耳子实体ＳＯＤ同工酶只有一条较宽的谱带,确认为Ｍｎ－ＳＯＤ,有其资源和学术研究上的意义。以简化的方法提纯其Ｍｎ－ＳＯＤ,活性回收率显著提高。该酶分子为二聚体。荧光光谱在３５５．１ｎｍ处有最大发射峰。     

肾髓质诱导型一氧化氮合酶在动脉血压调控中的作用

本文通过慢性血液动力学实验,观察了肾髓质局部输入诱导型一氧化酶（ｉＮＯＳ）抑制剂ＡＧ（ａｍｉｎｏｇｕａｎｉｄｉｎｅ）对Ｄａｈｌ盐敏感大鼠（ＤＳ）、Ｄａｈｌ盐抵抗大鼠（ＤＲ）及ＳＤ（Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙ）大鼠动脉血压的影响,并测定了一氧化氮（ＮＯ）代谢终产物ＮＯ２及ＮＯ３含量（ＵＮＯＸ）、ｉＮＯＳ活性、肾功能以及血浆肾素活性（ＰＲＡ）。结果表明：ＡＧ能明显放大高盐（８％）引起的ＤＳ及ＳＤ大鼠     

渗透促进剂对5－DSA标记裸鼠皮肤角质层影响的ESR研究

通过测定５－唑烷氮氧自由基硬脂酸（５－ＤＳＡ）标记裸鼠皮肤角质层的电子自旋共振（ＥＳＲ）谱,研究某些渗透促进剂如月桂酮（ＡＺ）、油酸（ＯＡ）、丙二醇（ＰＧ）、二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）等对裸鼠皮肤角质层的影响。促渗剂处理皮肤后,标记物序参数降低,各向同性超精细分裂偶合常数增大,前者表明保渗剂能够引起皮肤角质层细胞间脂质排列有序性降低,流动性增大;后者表明标记物周围脂质区域极性增大。     

渗透促进剂对5－DSA标记裸鼠皮肤角质层影响的ESR研究

通过测定５－恶唑烷氮氧自由基硬脂酸（５－ＤＳＡ）标记裸鼠皮肤角质层的电子自旋共振（ＥＳＲ）谱,研究某些渗透促进剂如ＡＺ、油酸（ＯＡ）、丙二醇（ＰＧ）、二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）等对裸鼠皮肤角质层的影响。促渗剂处理皮肤后,标记物序参数降低,各向同性超精细分裂偶合常数增大,前者表明促渗剂能够引起皮肤角质层细胞间脂质排列有序性降低,流动性增大;后者表明标记物周围脂质区域极性增大。     

修饰SOD及未修饰SOD的稳定性比较研究

测定了分子修饰ＳＯＤ的酶活力及其在不同温度下的稳定性,与未修饰的ＳＯＤ进行了比较,对在不同温度下测定的结果进行数据处理,经推算得出分子修饰ＳＯＤ在２５℃条件下,保存９５％的酶活力达３．５年,保存９０％的酶活力达７．２年,未修饰ＳＯＤ在２５℃条件下,保存９５％的酶活力为１０３ｄ,保存９０％的酶活力为２１３ｄ。     

酵母菌中SOD复合酶的初步研究

对不同酵母菌中ＳＯＤ等抗氧化酶的活性进行了初步的分析测定,筛选出了一株诸酶活性都较高的菌株（丹宝利面包活性干酵母）。研究了该酵母在不同培养时期ＳＯＤ等酶少力的变化情况,发现ＰＯＤ、ＣＡＴ等酶的活性水平ＳＯＤ活性的变化有密切的相关性。通过比较几种提取方法的效果,认为利用甲苯破壁法提取ＳＯＤ复合酶具有一定的可行性。     

化学修饰对反义寡核苷酸稳定性及抗流感病毒活性的影响

为了探讨 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ 化学修饰形式与 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ 稳定性,体外细胞毒性以及抗流感病毒活性之间的关系,合成了 ７ 种不同化学修饰形式的 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ：硫代 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ 及其 ３′端分别磷酸化和胆固醇修饰;３′与 ５′端硫代,中间为天然结构的混合骨架 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ;天然结构 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ 及其 ３′端分别磷酸化和胆固醇修饰等．测定了 ７ 种修饰体在小鼠血清, Ｍ Ｄ Ｃ Ｋ 细胞裂解液,含 ２％ 胎牛血清的 Ｄ Ｍ Ｅ Ｍ培养液以及水中的稳定性,体外细胞毒性和在细胞水平抗流感病毒活性．结果表明,混合骨架 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ,硫代 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ 及其 ３′端接磷酸和胆固醇的修饰形式在小鼠血清, Ｍ Ｄ Ｃ Ｋ 细胞裂解液与含２％ 胎牛血清的 Ｄ Ｍ Ｅ Ｍ 培养液中稳定性相对较高,作用 ２４～４８ ｈ 仅混合骨架 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ 与硫代 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ 发生部分降解;天然结构 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ 及其 ３′端接磷酸和胆固醇修饰体在 ２４ ｈ 内大部分降解．所有 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ 修饰体在水中具有很高稳定性,４８ ｈ 内未见降解作用．７ 种 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ 修饰形式在 Ｍ Ｄ Ｃ Ｋ 细胞中未表现明显的细胞毒性．硫代 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ 及其 ３′端接磷酸和胆     

N~+离子注入对不同辐射敏感性微生物超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活性的影响

以Ｅ．ｃｏｌｉ和耐辐射生球菌（Ｄｅｉｎｏｃｏｃｃｕｓｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ）为试材,研究了Ｎ＾＋离子注入对其ＳＯＤ,ＣＡＴ和ＰＯＤ活性的影响及共对自由基的清除,结果表明：Ｄ．ｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ经Ｎ＾＋离子注入后ＳＯＤ和ＣＡＴ酶活高于Ｅ．ｃｏｌｉ的,而ＰＯＤ酶活不仅很低于Ｅ．ｃｏｌｉ的;随剂量的增大,两者ＳＯＤ和ＣＡＴ酶活均为增后减,只是其ＳＯＤ酶活的变化峰值对应剂量分别为６×１０＾１５Ｎ＾＋／     

枸杞果实铁型超氧物歧化酶的纯化及性质

枸杞果实Ｆｅ－ＳＯＤ粗提液经硫酶铵盐析、离子交换柱层析及凝胶过滤,纯化到电泳单班点均一程度。纯化的Ｆｅ－ＳＯＤ分子量为４４．６ｋＤ,亚基分子量为２２．０ｋＤ。金属元素分析表明,每分子酶含１个Ｆｅ原子。该酶在紫外区最大吸收值为２７８ｎｍ。Ｈ２Ｏ２明显抑制该酶活性,ＫＣＮ对酶活性无影响。该酶氨基酸组成与高等植物和蓝绿藻的Ｆｅ－ＳＯＤ相似,但它具有较高甘氨酸,酸性氨基酸与碱性氨基酸比值高于等植物而与低等     

酵母SOD高产工程菌培养优化条件研究

研究了酵母ＳＯＤ高产工程菌培养条件,培养基组分、糖浓度、ｐＨ、通气量、培养时间、微量元素等对该菌的生物量和ＳＯＤ含量均有影响。其中通气量和微量元素的影响最显著。在优化条件下,细胞生物量为５．１５ｇ／１００ｍｌ培养基;ＳＯＤ产量为２０７０Ｕ／ｇ菌体。