砂土法、矿油封藏法保存链霉菌17年效果的评定

本文总结了用砂土法保存130个种、14个变种、409株链霉菌以及矿油封藏法保存其中103个种、11个变种、307株菌17年的效果;其中部分菌株的抗菌素产生能力和蛋白酶活力的测定结果;经矿油封藏后,死亡菌株的矿油层,用红外光谱法检查的结果。用砂土法保存的409株菌,17年后存活384株,存活率为93.9%;在144种（包括变种）中,有101种（70%）保持着原来的形态特征。用矿油封藏法保存的307株菌,17年后存活256株,存活率为83.4%;其中169株（66%）保持着原来的形态特征。产生链霉素的灰色链霉菌（Streptomyces griscus）As 4.181、比基尼链霉菌（S.bikiniensis）AS 4.569,产氯霉素的委内瑞拉链霉菌（S.venezu（?）la（?））AS 4.223等菌株,用矿油封藏法比砂土法保存得到较好的效果。产生新霉素的弗氏链霉菌（S.fradiae）AS 4.576,用砂土法保存效果较好。矿油封藏法保存链霉菌对保持蛋白酶活力,有着良好的效果。经红外光谱法检查19株失活的菌株的矿油层,其中17个样品于1710厘米-1或1600厘米-1处有吸收带。根据红外光谱,此吸收带属于脂肪族或芳香族中（?）c=c（?）基的伸展振动,与 Arai 用此法保存诺卡氏菌,分枝杆菌测出的结果近似。故推测链霉菌经此法保存后,菌株死亡的原因是由于浸出了细胞中类脂所致。砂土法和矿油封藏法对于长期大量保存链霉菌,是两种简便而且可取的方法。     

抗肿瘤抗菌素阿克拉辛霉素的研究I．加利利链霉菌思文变种的鉴定

从我国四川省的土壤中分离到一株产生蘸环类抗肿瘤抗菌素的链霉菌77—3082。经形态、培养特征和生理生化等方面的研究表明,该菌株与加利利链霉菌(Streptomyces galilaeus)相似,但也有些显著差异,故定名为加利利链霉菌思文变种(Streptomyces galilaeus var. siwenensis),它产生的抗菌素主要组分为阿克拉辛霉素A。     

链霉菌科分类的研究II．钦氏菌属的一个新种及其菌核的形成

从甘肃省西峰镇的土壤中分离到的AS 4．385菌株,以前报道为褐色李黑链霉菌(Stre-ptomyees pruniniger var. fuscus Yah ＆ Zhang,1965)。经研究发现,该菌株形成菌核,对其菌核形成过程进行了初步研究,同时把这株菌重新定名为李黑褐色钦氏菌(Chaiuia prunigrofusea n．Sp．Yan ＆ Zhang)。     

抗菌素3719的发酵条件研究

经鉴定,供试菌株的生物学特征与1970年日本发现的核糖苷链霉菌(Streptomyces ribosidificus strain SF-733)近似。而其代谢产物抗菌素3719经鉴定与核糖霉素(Ribostamycin)相同。它是具有一般氨基糖苷类抗菌素特征的广谱抗菌素,具有临床价值。由于它对耳及肾脏     

农用抗菌素1222的研究

农用抗菌素1222是从我国土壤中分离得到一株链霉菌NO.1222所产生的抗菌素,对多种植物病原真菌、酵母及真菌有抑制作用,但对细菌无作用。链霉菌NO.1222经分类鉴定证明为烬灰链霉菌类群。农抗1222经理化性质的研究表明是属于四烯类抗菌素。我们把它用于浸种试验,表明对棉花枯萎病菌的灭菌有较好的效果。本文报告链霉菌NO.1222的菌种鉴定,抗菌素的理化性质及防治病害的研究结果。     

金霉素链霉菌无活性菌株回复突变的研究

近年来,在有关抗菌素合成途径的研究中,报道了由于产生遗传性障碍而不能合成抗菌素,亦即产生了“零”突变菌株。又在次级代谢途径障碍性菌株的回复突变研究中,报道了能使抗菌素产量大幅度提高的回复突变型菌株。我们在对产金霉素链霉菌(Streptomyces aureofaciens)菌株进行诱变试验中,筛选到一些     

二株产生麦迪霉素的链霉菌

从四川和广东的土壤中分离到两株产生麦迪霉素的链霉菌：74—10204和1748。经形态、培养特征和生理特性的研究表明,前一株菌与生米卡链霉菌(Streptomyces mycarofaciens)近似,但形态与培养特征有某些不同,并能利用甘露醇,故定名为生米卡链霉菌四川变种(Streptomyces mycarofaciena var．Sichuanensis Yan);后一菌株鉴定为生米卡链霉菌1748(S. mycarofacins 1748)。这两株菌所产生的抗菌素,经不同溶剂中的溶解度、熔点、比旋光度、分子量和化学反应性质的测定,红外和紫外吸收光谱、核磁共振波谱及质谱分析,确定为麦迪霉素。     

高温链霉菌24＃的初步研究

从土壤中筛选得到一株产广谱、高活性抗真菌物质的链霉菌 2 4 # ,经测定对 2 5种植物病原真菌有显著拮抗作用 ,其次生代谢产物对病菌菌丝有断裂、扭曲、缢缩等致畸效应。 16SrDNA序列分析显示本菌株与模式菌株链霉菌DSM4 4 2 93T的 16SrDNA同源性为 98 93% ,但菌株形态特征、培养特征、细胞壁化学组分、生理生化特性等均不同于模式菌株 ,且DNA杂交率只有 2 2 5 4 % ,建议为链霉菌属的一个新种 ,命名为山东链霉菌 (Streptomycesshandon gensissp .nov .)。     

链霉素产生菌——灰色链霉菌质粒的分离和电镜观察

本工作首次从具有临床应用价值的抗菌素产生菌——灰色链霉菌中分离得到质粒DNA(SGP1),并经电镜观察证实。用琼脂糖凝胶电泳分析,初步证明灰色链霉菌和天蓝色链霉菌质粒DNA分子大小相似,限制性内切酶Eco R1对灰色链霉菌质粒DNA可能只有一个切口。电镜观察表明灰色链霉菌质粒DNA具有共价闭合超盘旋环状和开放形环状两种构型,根据经验公式计算,灰色链霉菌质粒DNA分子量为1．9x107道尔顿左右。经紫外分光光度计测定灰色链霉菌质粒DNA解链温度(Tm值)为80．8u℃ G—C克分子百分数为76．8％。我们所获得的灰色链霉菌质粒DNA(SGP1)是否即是前文报道的[10]经高温消除,并与链霉素生物合成有关的质粒,则尚待进一步证实。     

复合诱变和抗性筛选利迪链菌素高产菌株

为解决利迪链霉菌生产能力低的问题,以Streptomyces lydicus AS4.2501-P28为出发菌株,应用紫外和吖啶橙诱变,结合抗生素的抗性筛选,得到稳定高产的S.lydicus AS4.2501-L8,发酵水平达到177.0μg/mL,较出发菌株提高了96.2%。     

链霉菌原生质体种间融合重组的研究 I．庆丰链霉菌和吸水链霉菌井冈变种的种间融合

本文报道庆丰链霉菌AS20l[11v]、MS30[Pr0一Ade—sm r］菌株和吸水链霉菌井冈变种VA4[His-]菌株原生质体的种间融合重组。AS201×vA4融合产生由二亲株营养标记互辅的稳定的原养型重组子,频率为1．09×10^-5．98×10^-6MS30 xvA4融台产物除原养型重组子,重组频率为5．7×10^-5外,还出现异核体及异质无性系(频率为2．8×10^-4一2．14×10^-5)。得到的原养型重组子,在孢子颜色、抗药性状、产物性质等方面显现广泛多样的变异。从中得到一个原养型重组菌株RvAl8,它所产生的抗菌物质,理化和生物性质与亲株产生的庆丰霉素和井冈霉素明显不同。     

一种新的抗真菌抗菌素——金褐霉素

金褐霉素是从我国土壤中分离得到的链霉菌R-22所产生的一种抗真菌物质,对多种酵母型及菌丝型真菌有作用,但对细菌无作用。链霉菌R一22经分类鉴定证明为一株新的链霉菌,命名为金褐链霉菌(Streptomyces aureofuscui n. sp.)。金褐霉素经理化性质的研究证明是一个新的四烯类抗菌素。它的急性毒性：对小白鼠LD,。腹腔注射为2{．68土2．36毫克／公斤,静脉注射为28．27±2．49毫克／公斤。金褐霉素目前在临床上用于冶疗真菌性角膜溃疡,有明显的疗效,     

Genome shuffling筛选ε-聚赖氨酸高产菌及其对代谢流量分配的影响

【目的】从代谢流量分配的角度,探讨Genome shuffling导致链霉菌ε-聚赖氨酸合成量提升的原因。【方法】从葡萄糖耐受型的亲本菌株Streptomyces sp.AS32和ε-聚赖氨酸耐受型的亲本菌株Streptomyces albulus F15出发,进行三轮Genome shuffling,筛选得到ε-聚赖氨酸产量提高的链霉菌株Streptomyces sp.AF3-44,采用通量分析方法构建链霉菌ε-聚赖氨酸合成代谢网络,并对上述3株菌的代谢通量进行比较。【结果】AF3-44的ε-聚赖氨酸摇瓶产量为3.1 g/L,较AS32和F15分别提高了34%和29%。3株菌株中AS32三羧酸循环(TCA)的代谢通量最高;F15磷酸戊糖途径(PPP)代谢通量最高;AF3-44流向赖氨酸合成前体天冬氨酸以及ε-聚赖氨酸的通量最高,TCA和PPP通量位于两亲本菌株的中间水平,其中TCA中流向异柠檬酸的通量分别为AS32和F15的77%和116%,PPP中流向5-磷酸核酮糖的通量分别为AS32和F15的149%和92%。【结论】Genome shuffling导致了代谢流的重新分布,流向前体赖氨酸和ε-聚赖氨酸通量的增加,以及PPP和TCA通量配比的改变是链霉菌ε-聚赖氨酸合成量增加的重要因素。     

南昌链霉菌的微波诱变

以微波对南昌链霉菌进行了微波育种,获得梅岭霉素杀虫剂生产能力高于出发菌株73％的W4-311。该菌株经多次传代,遗传性状保持稳定。     

链霉菌科分类的研究III．链霉菌科中的一个新属

从我国云南省西双版纳热带植物研究所的土壤中分离到二株菌,编号80—56、80 57。该菌株气丝形成非轮生的孢子链,基内菌丝体不断裂,形态与培养特征与链霉菌属基本相似。但由于细胞壁水解物中含有…o一二氨基庚二酸、甘氨酸。全细胞水解物中含有半乳糖,与链霉菌属胞壁组分含LL二氨基庚二酸、甘氨酸,不含特征性糖有明显区别。故菌株80—56、80一57不能归人到过去任何一个放线菌属中,因此建立新属——类链霉菌属(Streptomycoides n.gen．),此二菌株为该新属的代表种,定名为青黄类链霉菌(Streptomycoides glaucoflavus n.sp．),典型菌株80—56。     

重离子辐照诱变阿佛曼链霉菌的实验观察

目的：对阿佛曼链霉菌采用新的诱变手段,以获得稳定高产的优良菌株。方法：采用重离子束辐照阿佛曼链霉菌,研究了0.25Gy、0.5Gy、3Gy、5Gy、10Gy和15Gy剂量的12C＋粒子束辐照阿佛曼链霉菌菌株后,菌落特性的变化及对菌株产素能力的影响。结果：重离子辐照阿佛曼链霉菌后,在其各个辐照剂量区都存在变异菌株,诱变后阿佛曼链霉菌的菌落形态多样,小山状,火山口状、彗星尾状、车轮状、边缘放射状等;菌落大小不一,有的直径达4～5mm,有的小如针尖状。效价提高到7298μg/mL,获得了高产菌株。结论：重离子束辐照阿佛曼链霉菌菌株后,阿佛曼链霉菌的产素能力显著提高,可得到高产的菌株。     

大观霉素产生菌1043菌株的分类鉴定

在筛选新抗菌素的过程中,从我国杭州土壤中分离到一株链霉菌,编号1043.它可产生两种抗菌素.一种是碱性水溶性抗菌素——大观霉素(曾译为壮观霉素)actinospectacin.另一种是酸性酯溶性抗菌素,与曲张霉素streptovaricin相似.有关该菌株及其产生的抗菌素已作过简要报道.大观霉霉,是一广谱抗菌素,可用于治疗淋球菌.现正在进行试制研究,即将投入生产应用于临床.为此,对1043菌株的分类鉴定进行补充,现将其结果报告如下.     

麦迪霉素产生菌酮基还原酶基因的研究

将麦迪霉素产生菌基因文库中与放线紫红索酮基还原酶基因actⅢ有同源性的4·0kb DNA片段克隆到质粒载体pWHM3中,构成重组质粒pCB4。将质粒pCB4转入酮基还原酶基因缺陷菌株——加利利链霉菌ATCC3167l中,得到转化子。转化子发酵产物经TLC和HPLC分析证明是阿克拉菌酮,与加利利链霉菌原株ATCC31133的产物相同,说明麦迪霉素产生菌酮基还原酶基因互补了加利利链霉菌ATCC31671中缺陷的酮基还原酶基因,使其恢复了产生阿克拉菌酮的能力。4．Okb DNA片段插入方向相反的重组质粒pCBR4在加利利链霉菌ATCC31671中发酵产物经TLC分析证明也是阿克拉菌酮,这说明4．0kbDNA片段中麦迪霉素产生菌酮基还原酶基因具有自身的启动子。对4．0kb DNA片段进行了限制酶酶切分析,建立了其酶切图谱。以actⅢ基因为探针,经分子杂交以及亚克隆和DNA转化实验,将麦迪霉索产生菌酮基还原酶基因定位于BssH Ⅱ—BamH Ⅰ 1．3kb DNA片段上。对1．3kb DNA片段核苷酸序列分析结果表明：此1．3kbDNA片段中含有一个独立的ORF,起始密码ATG,终止密码TAG,含783bp;在起始密码上游有GGAGG5个核苷酸SD序列;此ORF编码260个氨基酸,与actⅢ基因编码的261个氨基酸相似性为77．4%,相同性为66．7％,对麦迪霉素产生苗酮基还原酶基因的可能作用进行了讨论。     

卡那霉素链霉菌噬菌体SKJ1—温和性噬菌体

从土壤中分离出一株卡那霉素链霉菌噬菌体ＳＫＪ１,该噬菌体在卡那霉素链霉菌及林肯链霉菌菌苔上产生混浊的噬菌斑。从噬斑中长出的菌落后代对ＳＫＪ１噬菌体的感染产生了抗性。单株传代未风自发释放游离噬菌体。紫外线照射亦未发现诱导现象。抗性菌株经１０μｇ／ｍｌ丝裂霉素Ｃ处理后,其中一株能释放出约５．９×１０＾３ｐｆｕ／ｍｌ游离噬菌体颗粒,推测这些抗性菌株可能是溶源性菌株。菌落原位杂交实验证实抗性菌株的ＤＮＡ与     

三个链霉菌类群孢子表面结构的研究

1. 对三个链霉菌类群中11个新种,4个新变种的孢子形状和表面结构进行了观祭研究。 2．链霉菌的分类,根据以形态培养特征为主,生理生化和生态特征为副的原则,在我们研究的三个类群的菌株中,孢子表面结构比较稳定,同种内不同菌株孢子表面形态基本相同。 3．链霉菌孢子表面装饰物是由鞘上长出,即在孢于丝未生成孢子之前就开始出现装饰物。