对血平皿及双相培养基两种培养方法的评价

目的:通过实践了解血平皿及双相培养基两种培养方法的差异性,提高阳性率.方法:将体液标本同时接种血平皿及双相培养基,按<全国临床检验操作规程>,根据分离菌株形态、氧化酶、触酶,选择相应的生化/药敏鉴定板,用美国DADE Behring公司生产的MicroScan AS-4微生物分析仪进行菌种鉴定及药敏试验.结果:364例标本血平皿131例为阳性,阳性率为36.0%(131/364),双相培养基164例为阳性,阳性率为45.1%(164/364).两种培养方法经统计学处理χ2=6.26,P<0.05.两种培养方法总阳性率为53.3%(194/364).如将标本仅接种血平皿,漏检率达17.3%(63/364),标本只接种双相培养基,漏检率达8.2%(30/364).结论:将体液标本同时接种上述两种培养基进行培养,可使阳性率有较大的提高.     

不同方法检测淋巴瘤病理标本EB病毒的比较

目的 :探讨用不同方法检测淋巴瘤标本中EB病毒LMP 1的表达率以选择一种敏感、可靠的检测手段。方法 :运用SP法、CSA法检测EB病毒LMP 1在Raji细胞株细胞学涂片、12 3例淋巴瘤 (其中 10 4例NHL ,19例HL)切片中的表达 ,部分病例结合PCR加以验证。结果 :(1)细胞学涂片SP阳性细胞率为 70±10 % ,CSA法 10 0 %阳性。 (2 )HL中 ,SP法检测LMP 1阳性率为 6 / 19(32 % ) ,CSA法阳性率 8/ 19(4 2 % ) ,PCR阳性率为 11/ 19(5 8% )。 (3)非霍奇金淋巴瘤 (NHL)中SP法阳性率为 3/ 10 4 (其中B NHL 1/ 79,1 2 6 % ,T NHL2 / 2 5 ,8% )。CSA法阳性率为 9/ 10 4 ,其中B NHL4 / 79(5 % ) ,T NHL 5 / 2 5 (2 0 % ) ,ITCL达 2 / 10 (2 0 % )。结论 :SP法在检测低丰度抗原时漏检率较高 ,CSA法为一种较敏感、可靠的检测手段 ,结合PCR方法可有效检测低丰度抗原。     

三种方法检测淋球菌的结果分析

用革兰染色、淋球菌培养、PCR检测三种方法同时对135例泌尿生殖道患者进行淋球菌检测.革兰染色阳性53例,检出率39.26%,淋球菌培养68例,检出率50.37%,PCR阳性78例,检出率57.78%.上述结果经统计学处理x2=9.39,P＜0.05.革兰染色与淋球菌培养和PCR检测有差异,淋球菌培养与PCR检测P＞0.05,二种方法差异无显著性,其中,用PCR法测淋球菌敏感、特异、快速.提示临床上在革兰染色、淋球菌培养均阴性而症状又符合淋球菌感染者考虑可用PCR方法检测.这对淋病患者进行准确地早期发现,早期诊断和防治及因淋球菌漏检而引起的淋病传播起到重要作用.     

影响细菌自动培养阳性检出率的若干因素探讨

目的:探讨影响血(体)液细菌自动培养阳性检出率的若干因素,提高培养阳性率.方法:对使用Mini VITAL全自动荧光血培养仪三年多来检验6 223例的结果作回顾性分析.结果:本组阳性检出率28.19%,培养阳性率可因标本种类不同而异;在需氧和厌氧配对培养阳性的1 681例中,有9.88%的病例厌氧培养和12.67%的病例需氧培养未检出感染菌;5天收瓶时限的漏检率为0.29%;培养阳性者的年龄分布有随年龄增大而阳性率升高的趋势(χ2=530.79,P＜0.01).结论:同时做需氧和厌氧培养,阴性收瓶时限不少于5天,适当增加儿童病例血培养采血数量,可进一步提高细菌自动培养阳性率.     

3种检测分枝杆菌方法的比较及应用价值分析

目的:比较并评价涂片抗酸染色法(涂片法)、L-J培养法和基因芯片法在分枝杆菌检测中的应用价值。方法:对241例需查抗酸杆菌的临床标本,采用涂片法、L-J培养法和基因芯片法检测分枝杆菌,3种方法检测结果存在分歧的标本再进行DNA测序,以培养鉴定结果阳性或DNA测序得到分枝杆菌序列为确诊标准。结果:241例标本,涂片法、L-J培养法和基因芯片法的检测阳性率依次为18.7%、12.0%、15.8%,经卡方检验三者阳性率的差异没有统计学意义(P0.05);检测灵敏度依次为85.4%、70.7%、93.0%,经卡方检验三种方法的灵敏度总体来说有差别(χ2=7.24,P0.05),涂片法与L-J培养法以及涂片法与基因芯片法的灵敏度差异没有统计学差异,基因芯片法的灵敏度高于涂片法(χ2=6.61,P0.05);检测特异性依次为95.6%、100.0%、100.0%。38例基因芯片检测阳性患者中有28例为结核分枝杆菌,10例为非结核分枝杆菌。结论:与涂片法及培养法相比较,基因芯片法能够鉴别分枝杆菌菌种,同时具有快速、可靠、准确度高的特点,在分枝杆菌感染的早期诊断和抗菌治疗上具有重要的临床价值。     

危重患者感染病原菌的分布及血清降钙素原水平的研究

目的探讨危重患者感染病原菌的分布及血清降钙素原(PCT)的水平,为临床诊断与治疗提供依据。方法对167例ICU危重感染患者同时送检的微生物培养和PCT检测的结果进行分析,比较两者间的关系。将微生物培养结果分为阴性组、单一标本阳性组、两种标本阳性组和三种及以上标本阳性组,进一步比较四组间PCT检测结果的差异并分析革兰阴性菌、革兰阳性菌和真菌感染后患者体内PCT的水平。结果 167例危重感染患者微生物培养阳性102例,阳性率为61.1%。PCT检测阳性103例,阳性率为61.7%。两者间无统计学差异(χ~2=0.01,P0.05)。两者联合检测的总阳性率为79.6%。102例微生物培养阳性患者中,PCT为0.57(0.10~131.50)μg/L,高于培养阴性患者[PCT为0.33(0.10~21.85)μg/L,U=8.52,P0.05]。培养阳性患者中,单一标本阳性的PCT水平相对较低,两种及以上标本阳性的PCT水平相对较高。革兰阴性菌、革兰阳性菌和真菌感染组PCT阳性率分别为70.0%、64.7%和66.7%,混合感染组最高,为87.5%。结论 PCT可用于危重患者感染性疾病的早期预测。加强微生物培养和PCT的联合检测,可促进危重患者感染后的精准诊治。     

需氧厌氧培养方式对甲型副伤寒沙门菌检出率的影响

目的探讨需氧和厌氧血培养方式的选择对甲型副伤寒沙门菌检出率的影响。方法使用mini VI-TAL自动荧光血培养仪或BacT/Alert 3D培养仪对18684例疑似血流感染患者血液(含骨髓)标本进行需氧和(或)厌氧培养(其中仅做需氧培养935例,仅做厌氧培养16例,需氧和厌氧配对培养17733例,每瓶注入约5 ml血液)。结果18684例血液标本,共分离到甲型副伤寒沙门菌3888例(20.81%)。在17733例需氧和厌氧配对培养中检出3613例,其中仅需氧阳性406例占11.24%(406/3613),仅厌氧阳性405例占11.21%(405/3613),需氧和厌氧培养均阳性者2802例占77.55%(2802/3613),需氧和厌氧均生长的阳性报警时间分别为(22.56±13.22)h和(26.69±15.80)h,仅需氧阳性的报警时间为(32.85±23.33)h,仅厌氧阳性的报警时间为(34.46±18.44)h。结论需氧和厌氧血培养方式获得甲型副伤寒沙门菌的阳性率相同,采用需氧和厌氧瓶配对培养可提高阳性检出率,只做厌氧或需氧培养将有11.24%或11.21%阳性病例被漏检。     

重症监护病房肺部感染病原菌的鉴定及耐药性分析

目的对2005年1月至2009年8月期间在我院ICU及神经外科ICU住院420例确诊为肺部感染者由人工吸取痰液进行培养鉴定并做耐药性分析,为临床诊断和治疗提供指导。方法用常规方法将临床送检的标本进行分离培养,采用K-B法进行体外药敏试验。结果在送检的420例标本中,共分离出380株病原菌,阳性率为90%,其中革兰阴性杆菌290株,阳性率为76.3%;革兰阳性球菌80株,阳性率为21%;真菌10株。药敏结果显示:革兰阴性杆菌对头孢唑啉、头孢塞肟、头孢曲松和头孢呋辛耐药率较高,对哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、美洛培能和亚胺培南敏感性较好。革兰阳性球菌首选万古霉素和替考拉宁。结论临床分离到的病原菌对常用药物有不同程度耐药,临床医师应根据药敏试验结果合理使用抗生素。     

肺炎支原体液体培养法检测的实验评价

目的比较液体培养法和固体培养法平行检测肺炎支原体结果的一致性;评价液体培养法检测肺炎支原体的可靠性。方法采用液体培养基和固体琼脂培养基平行检测1 648份临床标本的肺炎支原体,比较同一份标本在2种培养基上的检测结果。结果液体培养法阳性296例,阳性率为18%;固体培养法阳性244例,阳性率为14.8%;液体培养法阳性而固体培养法阴性57例;固体培养阳性而液体培养法为阴性5例。2种方法的阳性检出率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论肺炎支原体快速液体培养法与固体培养有较好的一致性,具有方便、简单、准确且可以用于早期检测等优点,适合临床大批量标本筛查。需结合患者临床症状等排除真菌和耐药菌造成的假阳性。     

恒温扩增芯片法在重症监护病房肺部感染患者诊断中的应用

目的评价恒温扩增芯片法在重症监护病房肺部感染患者下呼吸道感染病原体检测中的效果。方法收集合格痰标本146例,通过恒温扩增芯片法和细菌培养法检测病原体,对两种方法检测结果进行分析。结果 146例痰液标本中,恒温扩增芯片法检出阳性标本114例(阳性率为78.1%),其中单一致病菌感染42例,2种及以上致病菌混合感染72例。45例标本检测到mecA基因,其中13例为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。146例痰标本中,有109例痰标本同时进行了痰培养检测,痰培养阳性率为67.9%(74/109),相应的恒温扩增芯片法检测阳性率为82.6%(90/109);痰培养结果阴性共计35例,与之相符合的恒温扩增芯片法检测阴性共计16例(阴性符合率45.7%)。恒温扩增芯片法对肺炎链球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌、流感嗜血杆菌的阳性检出率明显高于痰培养,差异具有统计学意义。恒温扩增芯片法检测到2例结核分枝杆菌复合群、1例军团菌、1例肺炎支原体,痰培养检测到3例奇异变形杆菌。结论本实验室所开展的恒温扩增芯片法在重症监护病房肺部感染者下呼吸道病原体检测方面的优势体现在阳性率高、检测时间短,可为临床肺部感染诊断提供及时准确的参考依据。     

3种方法检测艾滋病患者血和脑脊液中隐球菌的结果分析

目的比较真菌培养、墨汁染色、侧向免疫层析法(LFA)检测艾滋病患者脑脊液和血标本中隐球菌的阳性率差异,以期为临床医生提供隐球菌感染理想的检测方法。方法采用回顾性分析,收集2017年本院就诊的1 049例AIDS患者的血液和脑脊液标本,进行真菌培养、侧向免疫层析法和脑脊液墨汁染色。数据分析应用SPSS 14.0软件。结果 1 049例AIDS患者,其血培养、隐球菌抗原检测、脑脊液培养和墨汁染色阳性率分别为2.8%(19/688)、10.96%(115/1 049)、9.18%(29/316)、17.99%(59/328),其中201例患者同时做了脑脊液和血标本的隐球菌抗原检测,阳性率分别为27.86%和37.31%,差异有统计学意义(P0.05)。292例AIDS患者同时做了脑脊液的墨汁染色和隐球菌抗原检测,阳性率分别为19.52%和23.97%,隐球菌抗原检测的阳性率大于墨汁染色法,差异无统计学意义(P0.05)。结论 3种方法检测结果显示侧向免疫层析法阳性率最高,比较脑脊液和血标本侧向免疫层析法阳性率,血标本阳性率较高,所以血标本侧向免疫层析法检测是诊断AIDS是否合并隐球菌感染的理想方法之一。     

应用树状DNA杂交(DDH)对生殖道尖锐湿疣中HPV DNA的分型检测

从手术切除的50例生殖道尖锐湿疣新鲜标本中,以及15例正常人血清中,提取基因组DNA,同时用树状DNA杂交(dendrimer DNA hybridizalion,DDH)技术和PCR进行HPV DNA的分型检测.结果50例尖锐湿疣中,以DDH方法检测,感染HPV6型者20例,感染11型者24例,6/11型混合感染者3例,阴性3例,总检测率达94%;以PCR方法检测,HPV6型感染者21例,11型感染者24例,6/11型混合感染者3例,阴性2例,总检测率为96%.15例正常人血清中,以DDH方法检测,HPV感染的假阳性率为0%;以PCR检测,假阳性率为6.67%.还以HPV阳性标本对DDH方法做了敏感度的测定,结果阳性病例DNA检测最低浓度为97.28pg/ml.研究表明,DDH技术具有较高敏感性和高特异性,且成本较低,操作安全简便,可适用于基层中小医院较大样本量筛查.     

应用GeneXpert MTB/RIF对肺外结核的快速检测及评估

目的评估GeneXpert MTB/RIF检测肺外结核分枝杆菌的准确性,并与传统方法进行比较。方法选取2016年6月至2017年6月在本院就诊的144例疑似肺外结核病患者,对所有标本分别进行金胺“O”荧光染色镜检、液体培养及药敏试验、固体培养及比例法体外药敏试验和Xpert法检测。结果收集的144例疑似肺外结核标本中,确诊108例,以胸水、淋巴结活检和脓液感染较多,另36例阴性患者中,10例为非结核分枝杆菌感染。Xpert试验的敏感性为28.73%,特异性为96.00%,其阳性预测值和阴性预测值均高于其他3种检测方法。在阳性检出率方面,Xpert试验高于涂片镜检(χ~2=17.39,P0.05)、低于液体培养(χ~2=8.64,P0.05),而与固体培养之间差异无统计学意义(χ~2=2.56,P0.05)。固体培养、液体培养和Xpert试验3种方法对结核分枝杆菌利福平耐药率检测差异无统计学意义(P0.05),耐药率分别为8.33%、9.68%和11.11%,且Xpert试验方法检测出2株耐多药结核分枝杆菌,平均耗时2.5 h。结论 GeneXpert MTB/RIF可以作为一种筛选及快速检测工具应用于肺外结核的诊断,同时可作为检测MDR-TB的一种指标。     

压电体声波阻抗生物传感器技术在血培养中的应用评价

评价全自动压电体声波阻抗生物传感器血液培养系统的应用价值,并与Bactec9120血培养系统相比较。将2005年7~12月临床标本407例分别同时接种于2种不同的血培养系统中进行培养,对其阳性检出率、阳性检出时间、假阳性率及相关因素进行综合性评估。407份标本全自动压电体声波阻抗生物传感器血液培养系统检测出阳性标本58株,阳性率为14.3%,平均检出时间为(11.58±7.62)h;Bactec9120血培养系统培养阳性菌株61株,阳性率为15.0%,平均检出时间为(18.71±12.89)h。经统计学处理,两种检测方法阳性率无显著性差异(χ2=0.089,P>0.5),但检出时间有显著性差异(t=3.64,P<0.001)。全自动压电体声波阻抗生物传感器血液培养系统快速、简单、准确、便宜,可在各医院推广使用。     

三种结核分枝杆菌检测方法的比较

目的:比较三种结核分枝杆菌检测方法的阳性检出率,并且评价其检测成本等因素,为基层医院快速、准确诊断结核病提供科学依据。方法:对学院附属医院2010---2012年确诊为肺结核病的98例患者标本用抗酸染色涂片法、血清学胶体金法以及聚合酶联链式反应(PCR)分别进行检测。结果:三种检测方法的阳性率分别为:17.3%,76.5%和79.5%。结论:综合三种方法的优缺点,建议基层医院联合使用抗酸涂片染色法和血清学胶体金法进行结核分枝杆菌的检测。     

95例肺炎支原体快速液体培养阳性标本分析

目的:采用巢式PCR法(nPCR)及全自动微生物鉴定仪对肺炎支原体(MP)快速液体培养阳性标本进行分析,探讨MP快速培养假阳性情况及原因.方法:收集95例MP快速液体培养阳性标本,巢式PCR检测MP核酸,用全自动微生物鉴定仪检测导致培养假阳性的微生物.结果:95例MP快速液体培养阳性标本中,90例巢式PCR结果阴性,假阳性率94.7%;经全自动细菌鉴定仪鉴定,97.8%为真菌所致.结论:普通的敏感细菌在MP快速液体鉴定培养基中可以被有效抑制;真菌是引起的快速培养假阳性的主要原因.     

儿童感染性眼病的病原菌分布特征及耐药性分析

目的探讨儿童感染性眼病的感染病原菌菌群分布及药敏分析。方法回顾性分析2010年12月至2014年2月我院眼科门诊及住院部的526例感染性眼病的患儿的临床资料。结果送检病原体标本的培养阳性数共为157例,培养阳性率为29.8%。其中细菌标本134例(占85.3%),真菌标本21例(占13.4%),阿米巴2例(占1.3%)。阳性标本的年龄分布≤l岁的标本数最多且全部为细菌感染;共培养鉴定出细菌206株,其中革兰阳性球菌占45.6%,革兰阴性杆菌占15.5%。培养的细菌中,淋球菌比例最高,占18.4%,且均来自1岁以下幼儿。1岁以上幼儿最常见为表皮葡萄球菌(17.9%)。培养阳性细菌中,左氧氟沙星及利福平的药物敏感性显著高于其他药物;培养阳性的真菌中,对那他霉素敏感性最高。结论儿童感染性眼病致病因素和病原菌的分布与成人相比,均有所不同,所以眼科医师要更深入全面了解其病原菌的分布和敏感性药物的特点。     

乙型肝炎病毒前S1抗原与HBV血清标志物同时检测及临床意义

目的 :了解前S1抗原与HBV血清标志物的关系。方法 :采用ELSIA方法同时检测 2 1 0 1例乙型肝炎病毒感染者的前S1抗原和HBV血清标志物。结果 :2 9例HBsAg( )、HBeAg( )标本中 ,有 2 8例前S1抗原阳性 ,阳性率 96.5 5 % ;784例HBsAg( )、HBeAg( )、抗HBc( )标本中 ,有 679例前S1抗原阳性 ,阳性率 86.61 % ;2 76例HBsAg( )、抗HBc( )标本中 ,有 1 97例前S1抗原阳性 ,阳性率 71 .38% ;1 0 1 2例HBsAg( )、抗Hbe( )、抗HBc( )标本中 ,有 468例前S1抗原阳性 ,阳性率 46.2 5 %。结论 :前S1抗原作为病毒复制的指标与HBeAg具有很好的一致性 ,又具有其独立的检测价值 ,可弥补HBV血清标志物检测的不足。     

血源肝炎病毒筛查试验结果的分析

目的 探讨血筛酶免疫试剂的质量以及2次化验试剂的合理搭配,最大限度地避免漏检和减少假阳性。方法 对随机抽取的73份HBsAg和99份抗-HCV检测不合格的献血标本分别采用与常规筛查相同的2种进口试剂和另1种国产酶免试剂进行复检,并对复检中至少1种试剂为反应性的标本进行HBsAg中和试验或抗-HCV重组免疫印迹试验确证。结果 73份HBsAg不合格标本中,20份确证阳性,11份可疑,42份阴性;99份抗-HCV不合格标本中,29份确证阳性,70份阴性。针对研究范围内特定的标本,进口试剂的漏检率可达13.79%～27.59%,且也存在不同程度的假阳性。2种进口试剂间检测结果互补,而国产试剂无法查出进口试剂的漏检。结论 无论是进口还是国产血筛酶免试剂,都存在不同程度的漏检和假阳性情况,应选择2种检测结果互补的试剂对血液进行筛查,以保障血液安全。     

腹泻患者艰难梭菌及其毒素A/B检出率分析

目的了解住院腹泻患者艰难梭菌及其毒素A/B的检出情况,为临床诊断抗生素相关性腹泻提供参考依据。方法收集2015年9月至2016年8月崇州市人民医院疑似抗生素相关性腹泻住院患者的粪便标本163份,用艰难梭菌快速检测试剂盒检测艰难梭菌特异性抗原谷氨酸脱氢酶(GDH);用酶联免疫荧光法检测GDH阳性标本中艰难梭菌毒素A/B的产生情况。结果 163份粪便标本中GDH阳性为34份,阳性率为20.86%。34份GDH阳性标本中艰难梭菌毒素A/B阳性率为41.18%(14/34),可疑阳性率为17.65%(6/34),阴性率为41.18%(14/34)。结论疑似抗生素相关性腹泻住院患者艰难梭菌GDH检出率较高,毒素A/B阳性率也比较高,提示临床应重视抗生素相关性腹泻患者艰难梭菌感染的诊断。