甘蔗幼叶脱分化及愈伤组织形成过程中内源细胞分裂素和ABA的变化

甘蔗幼叶片,叶鞘和幼茎在含有2.4-D的培养条件下脱分化的情况有明显差异。它们除了在形态学上有区别外,这三种材料原有的细胞分裂素和ABA的水平明显不同。在幼叶片脱分化及愈伤组织形成过程中,内源细胞分裂素和ABA的水平也发生了明显变化。据此我们认为在甘蔗组织培养中2.4-D可能通过调节内源激素的水平及其相互作用,引起培养物中某些生理生化过程发生改变,从而进行脱分化和愈伤组织形成。     

甘蔗幼叶脱分化及愈伤组织形成过程中内源细胞分裂素和ABA的变化

甘蔗幼叶片,叶鞘和幼茎在含有2.4-D的培养条件下脱分化的情况有明显差异。它们除了在形态学上有区别外,这三种材料原有的细胞分裂素和ABA的水平明显不同。在幼叶片脱分化及愈伤组织形成过程中,内源细胞分裂素和ABA的水平也发生了明显变化。据此我们认为在甘蔗组织培养中2.4-D可能通过调节内源激素的水平及其相互作用,引起培养物中某些生理生化过程发生改变,从而进行脱分化和愈伤组织形成。     

萝卜花药愈伤组织诱导与分化影响因素的研究

以5个萝卜品系为材料探讨了不同培养方式、激素与基因型对花药愈伤组织诱导的影响．结果表明固液双层培养较固体与液体培养效果好,0．2mg／L 2,4-D与4．0mg／LKT＋0．2mg／LNAA对花药愈伤诱导率较高,4．0mg／L KT＋0．2mg／L NAA的激素组合愈伤组织生长快,NAA为2．0mg／L时根分化明显,各种激素处理均未见芽的分化．5个品系中NAU,Yb．03与NAU—Dy-13,03对激素反应较为敏感;NAU,Dq-03在所有的处理中均未见愈伤组织的形成．     

苎麻(Boehmeria nivea(L.)Gaud)下胚轴组织培养的器官形成

苎麻是我国重要经济作物,自古以来的繁殖方法主要是用分蔸等繁殖法,其繁殖系数低、速度慢,不能满足生产上的需要。近年来国内开始了苎麻组织培养的试验,从苎麻茎,叶切段诱导出愈伤组织,但未能分化出再生植株。我们以苎麻子叶及下胚轴为材料,诱导出愈伤组织并分化出芽获得再生植株,发现苎麻下胚轴有较强的再分化能力,是研究器官形成较好的材料。本工作进行了不同培养基配方、不同激素及不同浓度、不同激素组合以及一些天然复合物对苎麻下胚轴组织培养中器官形成的影响的初步结果。     

培养矮牵牛叶肉原生质体的几种较好的培养基

本文对培养在8种不同培养基上的矮牵牛(Petunia hybrida)叶肉原生质体的生长情况进行了比较。在所用的培养基上,原生质体都再生了细胞壁、产生了持续的细胞分裂并发育成小细胞团。在其中6种培养基上得到了愈伤组织。最好的两种培养基是我们组合的G培养基及修改的K培养基,它们的植板效率分别达到56％及70％。 还进行了一些激素组合对愈伤组织生长和分化影响的试验,某些激素组合对愈伤组织的生长有较大的影响,在某些激素组合的培养基上愈伤组织已分化出根。     

烟草原生质体再生的愈伤组织与冠瘿组织分化的比较

普通烟草(Nicotiana tabacum L.)原生质体培养成植株的研究国内外已有不少报道。我们研究了红花大金元品种的烟草叶肉原生质体培养成植株的条件,并考虑到由根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)诱导的烟草冠瘿及其畸胎瘤与正常细胞有显著差别,它们在不加任何激素的培养基上细胞能继续分裂,增殖。如果冠瘿及畸胎瘤组织与原生质体再生的愈伤组织在分化芽和根方面也有差别,那末,利用它与正常细胞融合后,有可能提供更多的筛选杂种的条件,我们对这两种细胞在同样条件下分化芽和根的情况作了比较研究。     

不同培养基对水稻胚性愈伤组织诱导及分化的影响

以水稻成熟胚为材料诱导愈伤组织,统计在不同基本培养基上的愈伤诱导率以及绿苗分化率,分析不同基本培养基及外源激素的含量和比例对愈伤组织生长及分化的影响。结果表明,试验材料对基本培养基具有选择性,MS培养基对籼稻种胚愈伤的诱导培养效果较好,NB培养基则更适合粳稻种胚愈伤的诱导培养;诱导继代培养基中加入多种氨基酸组合可有效提高出愈率和分化率,特别是粳稻的愈伤组织的诱导和分化需要多种氨基酸的共同作用;不同基因型水稻材料对激素和氨基酸组合的需求不同。     

烟草根培养的植株再生

菸草是通过组织培养研究形态发生极为良好的试验材料,以往利用烟草的叶片和茎段等培养曾作过不少工作。但利用烟草根段进行培养则未见报道。为了进一步扩大烟草材料的试验范围及探讨烟草根的脱分化能力、要求的条件及植株再生的规律,本试验用烟草根段进行了培养并经愈伤组织或直接分化出芽两种形式获得植株。     

植物激素对驳骨丹茎愈伤组织生长和器官再生的作用

在驳骨丹离体茎切段培养中,用MS基本培养基,分别附加2毫克/升BA和0.2毫克/升NAA诱导愈伤组织,附加1毫克/升BA诱导芽分化;以2/1MS基本培养基分别附加0.5毫克/升NAA、IBA、IAA和2,4-D进行诱导发根试验,除2,4-D无效外,均能生根形成再生植株。根据上述试验结果,设计不同浓度的BA和NAA组合,进行愈伤组织继代培养,讨论这两种激素对愈伤组织生长和器官再生的调节作用。主要结果为:1.低浓度的BA和NAA组合比较有利促进愈伤组织的生长,且以中等浓度的BA和低浓度NAA的效果最佳;2.单独附加BA,其浓度在0.25—4.0毫克/升范围内,都能促进芽分化,而完全抑制了根的发生。当单加NAA,在0.5—6.0毫克/升的浓度范围内,能促进根的形成,而随其浓度的升高抑制芽的分化;3.细胞分裂素与生长素的比值>0.5时,有利芽分化而抑制根的发生,当比值<0.6时,有利根形成而抑制或减弱细胞分裂素促进芽分化的作用。在这里讨论了生长素和细胞分裂素之间对报、芽形成的拮抗作用。     

紫云英叶片及叶肉原生质体的培养

本工作研究了豆科植物紫云英的叶片及叶肉原生质体的培养。叶片培养实验表明,诱导愈伤组织的最适培养基为MS加1.0-2.0毫克/升2,4-D和0.25毫克/升KT;诱导根分化需加1.0—5.0毫克/升NAA和0.5毫克/升BA;而苗分化则以0—0.5毫克/升IAA和0.5毫克/升BA为好。高浓度的NAA有利于根分化而抑制茎芽形成;高浓度的IAA对根和芽分化都有抑制作用。叶肉原生质体分离和培养试验表明,紫云英叶肉原生质体的释放及其培养活力受叶龄、植株生理状态和酶浓度的影响。叶肉原生质体在改良的KM8P培养基中能分裂。用改良KM8细胞培养基定期稀释,可使分裂持续进行而得到细胞团。BA和2,4-D为诱导紫云英叶肉原生质体分裂所必需。其最佳组合激素为BA 0.21毫克/升和2,4-D 1.13毫克/升。葡萄糖作为渗透压稳定剂时,其浓度明显影响原生质体的存活率。弱光条件下培养比黑暗培养有利于叶肉原生质体分裂。由叶肉原生质体形成的愈伤组织能形成瘤状结构和根。     

植物离体培养中器官发生调控机制的研究进展

本文就离体培养的植物组织对生长调节物质的吸收和代谢,外源生长调节物质对内源激素水平的影响,内源激素对细胞脱分化和再分化的调控,生长素和细胞分裂素基因与器官发生的关系,与器官发生有关的基因和特异蛋白等问题的研究进展进行了评述,并对下一步研究提出了自己的看法。     

光棘豆悬浮细胞原生质体培养影响因素的研究

采用光棘豆无菌苗胚轴诱导的分化能力强的愈伤组织建立的胚必细胞悬浮系材料,对悬浮细胞原生质体解离所需酶液,原生质体培养所需要的渗透压和激素组合进行了研究。发现较低的培养基渗透压（〈０．３５ｍｏｌ／Ｌ葡萄糖）和较高浓度的２,４－Ｄ（〉１ｍｇ／Ｌ）易于诱导细胞出芽分裂,导致细胞破碎和死亡,并引起培养细胞褐化,找出适合光棘悬浮细胞原生质培养基渗透压和激素组合。     

甘蔗原生质体的体细胞胚胎发生

用甘蔗(台糖134)花粉植株叶外植体产生的愈伤组织,作为分离原生质体的材料。原生质体以液体浅层培养的方式培养在修改的 MS 培养基上,经培养后一周内,观察到第一次细胞分裂,约5—6周后,形成了愈伤组织。将胚性细胞团组成的愈伤组织转移到除去或降低2,4-D浓度,但含有 BA 的分化培养基上,约2—3周后,有的愈伤组织发育了胚芽鞘,另一些愈伤组织分化出胚根或根。系统观察了这些原生质体在分裂和愈伤组织形成过程中的体细胞胚胎发生。     

植物离体培养中器官发生调控机制的研究进展

本文就离体培养的植物组织对生长调节物质的吸收和代谢，外源生长调节物质对内源激素水平的影响，内源激素对细胞脱分化和再分化的调控，生长素和细胞分裂素基因与器官发生的关系，与器官发生有关的基因和特异蛋白等问题的研究进展进行了评述，并对下一步研究提出了自己的看法。     

702烟草冠瘿系的单细胞克隆及其植株再生

用酶分离了根癌土壤杆菌702菌株诱发的烟草冠瘿及其畸胎瘤细胞系的原生质体被培养在修改的K及NT培养液中。当它们长成小细胞团时,转移到不加激素的NT培养基上筛选出T-DNA转化了的细胞形成的细胞团。这样,建立了单细胞克隆的702C烟草冠瘿系及其702TC畸胎瘤系。经过15代继代培养,他们全部保持了他们原有的特征并且都含有nopaline。用这种畸胎瘤的芽进行了分化根的试验,有少数芽长了根得到完整的植株。分别测试了植株的各部分,植株的叶及其冠瘿都含有nopaline,而根中未测出nopaline。可能根是由丢失了T-DNA的正常细胞长成的。也可能是它的基因未表达。     

植物生长调节剂对白头翁叶片培养的影响

以白头翁试管苗叶片为外植体,以MS为基础培养基,探讨不同细胞分裂素和生长素对叶片不定芽诱导、愈伤组织的诱导、增殖、再分化的影响。实验结果表明：细胞分裂素TDZ适合于白头翁叶片培养,与生长素搭配使用使叶片发生分化;2,4-D对愈伤组织的诱导能力相对较强。叶片直接诱导不定芽的激素组合为TDZ0．3mg／L＋NAA0．1mg／L;愈伤组织增殖的激素组合为TDZ0．2mg／L＋2,4-D0．2mg／L,将愈伤组织转接到TDZ和NAA组合的培养基上时会再分化。     

生长激素对油菜苔段分化成苗的影响

在B_5培养基上,研究了不同激素、不同激素浓度和比例,以及不同生长素对油菜(Brassica napus L.刁叶青品种)苔段分化成苗的影响。结果表明:①5～10毫克/升的BA,ZT和KT均可使苔段分化成苗,但BA和ZT效果好,KT效果差。②激素配合使用,有利于苗的分化,其中以BA2毫克/升 ZTl毫克/升效果最好,分化频率高,苗数多,生长正常。③激素和生长素配合使用,对苗的分化也有明显影响。在BA2毫克/升 KT1毫克/升的基础上,附加0.5毫克/升的2,4-D、NAA,或IAA均抑制苗的分化。若同时追加0.5毫克/升的NAA IAA,NAA GA_3,仅分化出大量的根,而未分化成苗。④激素和GA_3配合使用,明显促进苗的分化和生长。⑤在B_5 3％蔗糖的培养条件下,能成功地诱导根的生长。由于从苔段能分化出大量的苗和诱导生根,并形成完整的植株,这对油菜的育种和繁殖均有利用价值。     

原代猪前体脂肪细胞培养方法的优化

以胎猪皮下脂肪组织为材料,比较不同培养方法、消化酶、筛网孔径和离心力对培养猪前体脂肪细胞的影响。结果表明,组织块法与消化法均可培养出猪前体脂肪细胞,但组织块法培养的原代细胞中分化为成熟的细胞较少,消化法获得的细胞均匀一致,形态学染色鉴定大部分均可分化为脂肪细胞;在用消化法培养的过程中,采用Ⅳ型胶原酶消化脂肪组织,200目筛网孔径、800g离心力离心5min可获得大量的、纯度均一的细胞。可以认为,实验成功建立了猪前体脂肪细胞培养的优化体系,在体外重现了猪前体脂肪细胞增殖肥大的全过程。     

麦冬的组织培养

植物名称:麦冬(Ophiopogon japonicus)。材料类别:成熟的浆果。培养条件:将成熟的浆果置无激素的MSo培养基上,萌发成带根的正常植株。将单个的无根试管苗移转至以下二组培养基上观察其器官分化(1),MS BA1.0mg/L(单位下同) NAA0.5;(2),MS KT1.0 NAA0.5,在此基础上进一步试验BA与不同浓度的NAA组合对器官分化的影响。蔗糖均为2％,琼脂浓度为0.7％,pH为5.8～6。培养温度为25±1℃,白天用日光灯照光10～11小时。生长和分化情况:不同植物激素组合对器官分化和苗生长试验表明,BA1.0 NAA0.5组合,每瓶有7株苗,苗壮、叶宽,同时基部还不断产生不定     

爪哇三七组织培养植株再生

本文报道了爪哇三七通过组织培养再生植株的方法。爪哇三七的叶片,叶柄或茎段外植体分别接种于6种分化培养基上,均难以直接分化。在附加1mgL~(12),4-D和0.1mgL~(-1)KT的B_5培养基上的叶片形成无色疏松的愈伤组织转接于MS附加1mgL~(-1)BAP和0.1mg L~(-1)NAA培养基上,5天后开始形成绿色球胚状结构,继而形成不定芽或丛生芽。这些不定芽或丛生芽在锈根培养基中迅速长成根系发达的完整植株。此外,本试验比较了不同浓度及不同组合的激素对爪哇三七外植体的脱分化、再分化的影响。并讨论了此项工作对柑桔裂皮病类病毒(简称CEV)的复制及致病机理研究的意义。