白纹伊蚊和埃及伊蚊经卵传递登革病毒的研究

白纹伊蚊和埃及伊蚊通过吸食病毒液或叮吸有病毒血症的小鸡血后,能感染登革１－４型病毒,并能在蚊体内增殖,对感染雌蚊了１和子２代幼虫,雌性或雄性成虫４５５９只,分１０１批进行了病毒检测,白纹伊蚊子１代的批阳性率;登革１型为１０％（１／１０）２型为２２．２２％（２／９）３型为３３．３３％（４／１２）,４型为２８．９５％（１１／３８）登革１～４型的最低子代感染率依次主国０．２０％,０．７１％,０．７０％和     

白纹伊蚊垂直传播乙型脑炎病毒的研究

用５株乙型脑炎病毒（ＪＥｖｉｒｕｓ）经口感染白纹伊蚊,证明该蚊能感染和传播乙型脑炎病毒,对感染雌蚊的１和子２代卵３４４３粒,幼虫７０２１只和成虫４８５３只,分１７１批检查乙型脑炎病毒,子１代的批阳性率,卵为４６．６７％（１４／３０）,幼虫为２１．２１％（７／３３）。雌性成虫为２３．７８％（９／３８）,雄性成虫为１５．００％（３／２０）;子２代幼虫,雌性和雄性成虫和批阳性率依次为２３．５３％（４／１     

白纹伊蚊卵滞育的实验观察

对两个地理品系的白纹伊蚊卵期滞育的实验观察表明:白纹伊蚊宜兴品系(约北纬31°N)不仅亲代受短光照作用后可诱导卵期发生滞育,而且卵期仍具有光照敏感性;海南岛品系(约北纬18°N)中,光期变化不能诱导卵期滞育.宜兴品系卵滞育率随亲代光期缩短而增高的现象只发生在一定范围内(约L:D=9:15到L:D=15:9).卵滞育还受卵期低温、干燥以及孵化时水中溶解氧的影响.卵进入深度滞育是多种环境因素作用的结果.     

白纹伊蚊和埃及伊蚊对基孔肯雅病毒的易感性和传播性的研究

用４株基孔肯雅病毒经口感染白纹伊蚊和埃及伊蚊,进行了易感性和传播性的研究。结果表明,这两种蚊虫对基孔肯雅病毒易感。无论白纹伊蚊或埃及伊蚊,感染后第５－６天即可通过吸血将病毒传播给乳鼠,至第８－１３天,传播率可高达５５．５５％－１００％。感染蚊亦可经叮咬将病毒传播给小鸡。埃及伊蚊的易感性和传播率高于白纹伊蚊。实验还发现,不同来源毒株之间存在一定差异,如分离自云南白纹伊蚊的Ｍ８１株的感染率和传播率均高于其它毒株。这些结果表明,白纹伊蚊和埃及伊蚊在基孔肯雅病毒的保存和传播中起重要作用。     

登革Ⅱ型病毒经白纹伊蚊滞育卵的传递

采用C6/36细胞培养分离病毒的方法检测感染登革Ⅱ型病毒的白纹伊蚊Aedes albopictus滞育卵孵化的F₁代蚊虫感染率,从第一个生殖营养周期子代蚊虫中未分离到病毒,第二与第三生殖营养周期子代蚊虫最低感染率没有显著性差异（χ²=0.01,P＞0.0 5）,感染子代的批阳性率为9.1%,最低感染率为1∶330;间接免疫荧光检测结果表明感染登革Ⅱ型病毒的白纹伊蚊滞育卵孵化的子代成蚊能通过叮咬将登革病毒传播给敏感乳鼠。这些研究结果表明登革病毒能在媒介滞育卵内存活并传至子代,子代蚊虫能通过叮咬敏感宿主水平传播病毒。     

白纹伊蚊感染登革Ⅱ型病毒后的屏障

以高、低两种浓度病毒液分别经胸接种和经口感染海南株白纹伊蚊Aedes albopictus后,经不同时间内对蚊虫中肠、脑、神经节和涎腺进行IFA染色检查.比较各器官感染率后可知该蚊存在中肠感染屏障(mesenteronal infection barrier MIB)、中肠释放屏障(mesenteronal escape barrier,MEB)和涎腺感染屏障(salivary gland infection barrier,SGIB)并且各屏障率分别与时间及剂量呈负相关.     

登革Ⅱ型病毒在白纹伊蚊体内分布的研究

利用蚊虫连续石蜡切片免疫组织化学技术,对登革Ⅱ型病毒(DEN-2)感染白纹伊蚊Aedes albopictus后的散播时间、程度及组织器官的感染顺序进行监测,以了解DEN-2在媒介白纹伊蚊体内的分布规律。结果表明：大剂量感染登革Ⅱ型病毒后,在蚊虫消化道的主要部位以及大多数组织器官包括神经及内分泌系统在内,如涎腺、脑、神经节等亦检测到病毒抗原。登革Ⅱ型病毒一旦感染并逸出中肠会迅速侵染其它组织。从各组织感染率的高低推断,病毒逸出中肠后通过血淋巴传播到其它组织的顺序通常为：前肠、涎腺、咽部神经节、脑及食管下神经节、后肠及复眼的小眼等。     

从贵州白纹伊蚊体内分离到一株2型登革病毒

从贵州省独山县麻尾镇白纹伊蚊标本中分离到一株病毒,用抗DEN 14型单克隆抗体经间接免疫荧光法和RTPCR产物酶切分型鉴定为DEN2,并对其 NS1和E基因RTPCR产物进行部分基因序列测定,与DEN2 NGC株比较,麻尾株的NS1基因区有7个碱基发生点突变,E基因区有1个碱基的插入,两个序列被GenBank收录,编号分别为AY277402、AY278226;麻尾分离株与其他9株DEN2型病毒进行系统发育关系的分析,结果显示与D243株系统进化关系最近;证明贵州省存在DEN感染的自然循环。     

以壳聚糖为载体束缚脂肪酸吸附CO2在诱捕白纹伊蚊中的应用研究

为了从壳聚糖+脂肪酸离子液体吸附CO2化合物中筛选出对白纹伊蚊Aedes albopictus具有良好引诱效果的化合物,采用陷阱诱捕法分别测定了壳聚糖+丙酮酸、壳聚糖+乙酸、壳聚糖+丙酸 3种脂肪酸离子液体化合物及其吸收CO2对白纹伊蚊成虫的诱捕效果。结果表明,在供试的3种脂肪酸离子液体中,等物质的量吸收CO2的性能依次是丙酮酸>乙酸=丙酸,对白纹伊蚊的诱蚊效果依次是丙酮酸>乙酸=丙酸。其中最优配方比是壳聚糖∶丙酮酸∶CO2=1∶25∶0.3621,平均累计诱蚊量比单组分丙酮酸增加31.37%,比单组分CO2增加30.73%,比对照纯水增加59.52%（P<0.05）。相同质量的3种脂肪酸吸附CO2,具有协同增效作用,平均累计诱蚊量均显著优于单组分脂肪酸（P<0.05）。现场诱蚊试验结果表明,壳聚糖对3种脂肪酸均有缓释作用,其诱蚊持效期延长1.71~3.00倍。根据离子液体原理以壳聚糖为载体束缚脂肪酸吸附CO2并结合陷阱诱捕器,能够显著提高对白纹伊蚊的诱捕数量（混合物60 d的累计诱蚊总数量是单组分的1.62~1.78倍）。研究结果为进一步开发可适用于家居办公环境中使用的诱蚊剂提供了研究基础。     

胡椒碱对白纹伊蚊C6/36细胞株的毒性作用

采用MTT检测法、Annexin-V/PI双染流式细胞仪检测法及细胞形态学观察法,研究了植物型杀虫剂胡椒碱对白纹伊蚊Aedes albopictus C6/36细胞株的细胞毒性、诱导细胞凋亡与坏死的关系、Fas蛋白的表达、细胞生长状态改变及受损细胞的恢复。结果表明：胡椒碱浓度在0.035 mmol/L以上时可以诱发C6/36细胞形态学改变,在倒置显微镜下表现为细胞呈多形性,细胞胀大或皱缩,细胞间隙增宽,大片细胞聚集成团,脱落、崩解、死亡。用胡椒碱处理24 h后,对C6/36细胞的半数毒性浓度（IC₅₀）为 0.32 mmol/L,且毒性作用强度随着药物浓度增加而增强。Annexin-V/PI双染法检测结果显示药物浓度在0.28 mmol/L 以上诱导的细胞凋亡明显,药物浓度为0.56 mmol/L 时细胞凋亡率达19.4%,而药物引起的细胞总死亡率为72.7%;Fas蛋白表达在药物浓度0.28 mmol/L 以上时有所上调,但不明显。高浓度胡椒碱（0.56 mmol/L）分别作用于C6/36细胞24和48 h,在经历一段生长停滞后,24 h组受损细胞均可缓慢恢复,而48 h组细胞则出现不可逆性的损伤。由此认为：胡椒碱对C6/36细胞株有毒性作用,但药物诱导的细胞凋亡在细胞毒性作用机制中不占主导地位;胡椒碱对C6/36细胞的作用有时间依赖性,延长作用时间,药物对细胞的毒性作用增强。     

白纹伊蚊幼虫龄期的发育历期

在实验室内20±1℃, 23±1℃, 25±1℃, 28±1℃和30±1℃恒温条件下, 观察了白纹伊蚊(Aedes albopictus)幼虫(广州株)的发育历期.幼虫的总发育历期和各龄幼虫的发育历期随温度的上升而缩短, 各龄幼虫历期在总发育历期中占有恒定的百分比, 据此计算出其捕获机率.各龄幼虫的发育历期与温度呈直线回归关系.通过积温公式, 求出各龄幼虫的积温常数.此外还探索了营养对幼虫发育历期的影响, 从而影响各龄幼虫捕获机率的计算.     

白纹伊蚊溴氰菊酯抗性和敏感品系羧酸酯酶性质比较

本文对白纹伊蚊Aedes albopictus溴氰菊酯抗性品系和敏感品系羧酸酯酶的生物化学性质进行了比较。白纹伊蚊抗性品系和敏感品系羧酸酯酶随底物浓度(α-乙酸萘酯或β-乙酸萘酯)的变化比活力变化趋势一致,但抗性品系对这2种底物的比活力均高于敏感品系,抗性品系羧酸酯酶的米氏常数和最大反应速度与敏感品系有显著差异。胆碱酯酶抑制剂测定结果表明,抗性品系羧酸酯酶对敌敌畏和磷酸三苯酯的敏感性高于敏感品系,对残杀威的敏感性低于敏感品系。2个品系羧酸酯酶对脱叶磷的敏感性差异不大。说明羧酸酯酶可能与白纹伊蚊对溴氰菊酯抗性有关。     

白纹伊蚊卵黄发生的观察

以白纹伊蚊Aedes albopictus为材料,对其卵子发生的卵黄物质形成过程进行了显微观察.结果显示,卵子和卵母细胞的长度变化显著,呈现先平稳后快速增长直至稳定的发育特点;在吸血后31 h内,卵黄物质快速、急剧地在卵母细胞中沉积,至吸血51 h,卵黄物质在卵母细胞中的比例达到峰值(100%).根据卵子中卵母细胞、滋...     

白纹伊蚊实验种群动态的研究

在实验室条件下观察白纹伊蚊种群发育、存活和繁殖的动态,得出年龄特征存活率、繁殖率等数据,编制成生命表,计算出有关种群各项参数,包括内禀增长能力(r_m=0.1333),净增殖率(R₀=45.3017),增殖有限速率(λ=1.1426),平均世代周期长(T=33.3299天),瞬时出生率和死亡率(b=0.5562,d=0.4229),稳定年龄组配,成虫前期占90.66%,成虫期占9.34%。该蚊种群大约每隔5.2天增加一倍。根据结果对该蚊种群传播登革热的关系和防制加以讨论。     

白纹伊蚊寿命的研究:实验室内雌蚊的存活

在实验室条件下观察白纹伊蚊雌蚊的存活情况,取得如下结果: (一)测定不同温湿度组合条件下白纹伊蚊的半数致死期(LT₅₀),证明此蚊的致死高温为40℃(LT₅₀=0.90小时,致死低温为-5℃,LT₅₀=0.85小时)。在30℃和35℃温度中,存活期直接受相对湿度的影响,湿度愈大则存活期愈长。 (二)恒温室(25±1℃;80±5%RH)内连续8年观察笼内雌蚊的平均寿命约为30—40天。雌蚊寿命可因饲养条件不同而呈现一定范围的变动。 (三)根据实验室和野外7种不同条件下的寿命数据绘制存活曲线,均呈“中间型”说明同一种群内个体的死亡速率,在早期增加缓慢,接近中期发展迅速,至晚期又迁延持久。最长寿个体的寿命约为平均寿命的2倍或2倍以上。种群的死亡过程可因环境条件恶化而加速,但这一过程无论快慢,多数个体仍表现出相对集中的寿命范围。 (四)结合文献资料进行分析讨论后,认为白纹伊蚊在中温、高湿和食物充足的条件下具有较长的寿命期,能耐受较高的饲养密度,但抗寒力较差,与埃及伊蚊的高温和低温致死点十分相近,同具暖区蚊种的特点。     

白纹伊蚊β-actin基因实时荧光定量RT-PCR方法的建立

目的建立白纹伊蚊β-actin基因实时荧光定量RT-PCR法.方法 根据GenBank上白纹伊蚊β-actin基因的序列(GenBank accession number: DQ657949),利用Primer Express 3.0软件设计并合成一对引物,采用SYBR Green I作为染料建立实时荧光定量RT-PCR 法.以Ct值为纵坐标,以稀释倍数的对数为横坐标,建立标准曲线,并进行溶解曲线分析.结果标准曲线Ct 值检测范围为15～30,扩增效率为97.9%,相关系数为0.996,溶解曲线分析结果显示产物为特异的单峰,其Tm 值为86.4℃.结论 成功建立白纹伊蚊β-actin 基因实时荧光定量RT-PCR 法,为β-actin 基因作为内参基因进行白纹伊蚊功能基因表达差异研究奠定基础.     

河南伊蚊一新种记述（双翅目：蚊科）

报道伊蚊属覆蚊亚属Ｓｔｅｇｏｍｙｉａ一新种,即新缘纹伊蚊Ａｅｄｅｓ（Ｓｔｅｇｏｍｙｉａ）ｎｅｏｇａｌｌｏｉｓｉ Ｃｈｅｎ ｅｔ Ｃｈｅｎ,ｓｐ．ｎｏｖ．。模式标本采自河南省太行山一树洞,存放于贵阳医学院和新乡市卫生防疫站。     

AalDV-3介导的miRNA海绵载体构建及其在埃及伊蚊体内外的抑制效果测试

miRNA不仅广泛参与了蚊生长、发育的调控,还参与了媒介与病原体的相互作用,因此miRNAs可能作为蚊虫防制与蚊媒病原体控制的靶点,但目前尚无有效的转导系统。为研究白纹伊蚊浓核病毒-3(AalDV-3)是否可以作为有效的载体,我们利用内含子内表达miRNA海绵的策略,以埃及伊蚊内源性miR-210为靶基因,构建了重组病毒AalDV-anti-210。使用跨内含子引物通过RT-PCR验证了内含子可在蚊体内外的剪接效果,通过qPCR方法对埃及伊蚊Aag2细胞与埃及伊蚊幼虫的感染后的miR-210的表达水平进行检测。结果证实,含有miRNA海绵的内含子可以有效的蚊体内外剪接,重组病毒可以在蚊体内外高效的抑制靶miR-210的表达水平。该结果为探索AalDV-3在蚊虫基因功能研究及生物杀虫剂方面的潜在价值提供了理论依据。     

三色迷彩油添加避蚊胺对白纹伊蚊驱避效果的实验室评价

参照中华人民共和国国家标准GB/T 17322.10-1998和《军队特需药品研发勤务技术指导原则(试行)》规定的测试方法,测试了避蚊胺和水溶性二氧化钛处理迷彩油(CFP)对白纹伊蚊Aedes albopictus的驱避效果,为研发我军专用的防蚊虫迷彩油提供依据。结果表明:在3种颜色迷彩油中加入DEET后,不影响DEET的驱蚊效果;添加不同浓度DEET对蚊虫的驱避效果差异显著,20%DEET和25%DEET+迷彩油对白纹伊蚊的平均防护时间均达到或超过10 h,达到《军队特需药品研发勤务技术指导原则(试行)》规定的标准,15%DEET+迷彩油平均防护时间不足10 h,未达《军队特需药品研发勤务技术指导原则(试行)》规定的标准。研究表明:将适量DEET与迷彩油混合涂抹于皮肤可能作为演习或战时的伪装和防蚊的一种有效的综合保护措施。