基因转移研究进展

基因治疗已经广泛应用于遗传病,肿瘤等疾病治疗临床试验,基因转移方法是基因治疗研究的基础和关键,脂质体介导的基因转移是物理化学方法中的最佳选择;反转录病毒介导的基因转移系统较为成熟,临床运用最广泛;腺病毒、腺病毒相关病毒基因转移系统也已进入临床试验,单纯疱疹病毒,痘苗病毒,细小病毒以及哺乳动物细胞人工染色体的基因转移系统也在研究之中。     

骨骼肌基因靶向转移研究进展

近年来,骨骼肌靶向基因转移主要有两条途径;一是间接体外基因修饰成肌细胞后将植入骨骼肌组织;二是直接体内骨骼肌内注射,原位转染成熟的非分裂肌细胞。间接体外实验周期长,临床适用性较差,但易获得较高水平和较长期的外源性基因的体内表达;直接体内法直接简便,接近临床应用的实际情况,本文对两条途径进行的基因免疫,基因治疗及外源性基因在骨骼肌中表达的调控有关进展进行了一综述。     

受体介导基因转移的策略研究与进展

基因转移是基因治疗中一个关键的环节,受体介导的基因转移具有靶向,有效和安全,无毒的特点,且操作简便,因此有望成为一种理想的体内基因转移应用基因治疗。     

基因转移的DNA病毒方法

在基因治疗中,作为基因转移的载体,迄今几乎都用逆转录病毒,但是在某些情况下,ＤＮＡ病毒作为载体具有明显的优越性,本对腺相关病毒、腺病毒和疱疹病毒作为外源基因载体进行了简要的讨论。     

基因治疗载体及其基因转移技术的关键问题与研究现状

目前使用的基因治疗载体及其基因转移技术中还没有一种能用于临床并永久有效的基因转移技术 .该文分析了直接体内转移、间接体内转移及其非载体法、病毒载体法、非病毒性生物载体法等基因治疗转移技术存在的一些关键问题 ,并探讨了各问题的解决办法或研究策略以及基因治疗载体研究的发展方向     

前列腺癌转移相关基因

前列腺癌的生物学特性具有多样性,其侵袭转移是导致病人死亡的主要原因。如何准确判断哪些肿瘤将发生转移是研究的重要课题,目前仍缺乏特异性的标记物来协助判断。近年,随着研究的深入,不断发现一些新基因与前列腺癌转移有明显的相关性。有证据表明前列腺癌由非转移表型向转移表型演进过程中,一些转移促进基因参与了此过程,同时转移抑制基因功能的丢失是另一个重要的方面。     

基因治疗研究中脂质体介导的基因转移技术

对于脂质体的深入研究特别是阳离子脂质体的研制使其逐步成为重要的基因转移载体之一,并且初步应用于基因治疗研究,同时多种靶向脂质体的研制也为体内靶向基因转移和表达奠定了基础。本文就脂质体的结构、功能、在基因治疗研究中的应用以及各种靶向脂质体的研制进行了介绍。     

基因兴奋剂

人类基因组计划的完成为基因治疗提供了依据,同时也给基因兴奋剂的产生创造了条件。本文通过综述基因兴奋剂的概念、产生的分子机制,讨论了可能被用作基因兴奋剂的基因,并从基因、转录和蛋白质三个水平探讨了基因兴奋剂的检测策略。     

酒精依赖相关基因的遗传多态性

酒精依赖综合征受到复杂的生理、心理、个体遗传及环境等诸多因素的影响。有关研究已经证实了某些候选基因和酒精依赖密切相关。文章主要对与酒精依赖相关的酒精代谢关键酶(乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶以及细胞色素P450 2E1)基因以及调节神经递质作用的酶和受体(儿茶酚氧位甲基转移酶, 多巴胺受体D2、D4, μ阿片受体)基因遗传多态性研究作一综述。     

THE ASSOCIATION OF GENE POLYMORPHISMS WITH ATHLETE STATUS IN UKRAINIANS

Athletic performance is a polygenic trait influenced by both environmental and genetic factors.

Objective

To investigate individually and in combination the association of common gene polymorphisms with athlete status in Ukrainians.

Methods

A total of 210 elite Ukrainian athletes (100 endurance-oriented and 110 power-orientated athletes) and 326 controls were genotyped for ACE I/D, HIF1A Pro582Ser, NOS3 –786 T/C, PPARA intron 7 G/C, PPARG Pro12Ala and PPARGC1B Ala203Pro gene polymorphisms, most of which were previously reported to be associated with athlete status or related intermediate phenotypes in different populations.

Results

Power-oriented athletes exhibited an increased frequency of the HIF1A Ser (16.1 vs. 9.4%, P = 0.034) and NOS3 T alleles (78.3 vs. 66.2%, P = 0.0019) in comparison with controls. Additionally, we found that the frequency of the PPARG Ala allele was significantly higher in power-oriented athletes compared with the endurance-oriented athletes (24.7 vs. 13.5%; P = 0.0076). Next, we determined the total genotype score (TGS, from the accumulated combination of the three polymorphisms, with a maximum value of 100 for the theoretically optimal polygenic score) in athletes and controls. The mean TGS was significantly higher in power-oriented athletes (39.1 ± 2.3 vs. 32.6 ± 1.5; P = 0.0142) than in controls.

Conclusions

We found that the HIF1A Ser, NOS3 T and PPARG Ala alleles were associated with power athlete status in Ukrainians.     

当前肿瘤基因治疗中存在的主要问题及其解决途径

本文概述了当前肿瘤基因治疗研究中存在的一些主要问题,如绝大多数治疗方案中目的基因只有一个,肿瘤基因治疗缺乏靶向性,基因转移载体的效率、安全性及容量等问题。讨论了解决这些问题的主要途径,即肿瘤多基因联合治疗、直接体内途径基因治疗与靶向基因治疗、基因转移载体的改造。     

猪GH基因部分突变位点对生产性能的影响

本试验利用PCR－RFLPs技术,用MspⅠ,ApaⅠ两种限制酶,检测了猪生长激素基因＋206－＋711位共506bp片段中[ 295- 300, 563- 566]2处突变位点,分析各多态位点在姜曲海猪中的分布及其与生产性能的关系。发现：姜曲海猪中,MspⅠ酶切突变位点中的G1G2基因型和G2G2基因基因型个体的生产性能没有差异,不同日龄体重在两组间变化没有规律。ApaⅠ酶切突变位点G4G4基因型个体的20个日龄体重、45日龄体重高于G3G3／G3G4基因型个体,但差异不显。G4G4基因型个体的70日龄体重极显高于G3G3／G3G4基因型个体（P＜0．01）。G4G4基因型个体的0－70日龄日增重也极显高于G3G3／G3G4基因型个体（P＜0．01）。这些结果显示GH基因有可能作为数量性状基因座的侯选基因。     

小麦雄性不育遗传及基因定位研究进展

雄性不育的研究对于杂种优势的利用具有重要意义。本文综述了小麦雄性不育遗传及基因定位研究进展,介绍了小麦雄性不育的基因工程,对小麦雄性不育的应用进行了讨论。 Abstract:The study of plant male sterility plays an important role on utilization of heterosis.This paper reviews the current status of the studies of the heredity and mapping of the male sterile genes in wheat and the gene engineering of wheat male sterility.The application of male sterility in wheat breeding is discussed.     

Molecular Determinants of Vectofusin-1 and Its Derivatives for the Enhancement of Lentivirally Mediated Gene Transfer into Hematopoietic Stem/Progenitor Cells

Gene delivery into hCD34+ hematopoietic stem/progenitor cells (HSPCs) using human immunodeficiency virus, type 1-derived lentiviral vectors (LVs) has several promising therapeutic applications. Numerous clinical trials are currently underway. However, the efficiency, safety, and cost of LV gene therapy could be ameliorated by enhancing target cell transduction levels and reducing the amount of LV used on the cells. Several transduction enhancers already exist, such as fibronectin fragments or cationic compounds. Recently, we discovered Vectofusin-1, a new transduction enhancer, also called LAH4-A4, a short histidine-rich amphipathic peptide derived from the LAH4 family of DNA transfection agents. Vectofusin-1 enhances the infectivity of lentiviral and γ-retroviral vectors pseudotyped with various envelope glycoproteins. In this study, we compared a family of Vectofusin-1 isomers and showed that Vectofusin-1 remains the lead peptide for HSPC transduction enhancement with LVs pseudotyped with vesicular stomatitis virus glycoproteins and also with modified gibbon ape leukemia virus glycoproteins. By comparing the capacity of numerous Vectofusin-1 variants to promote the modified gibbon ape leukemia virus glycoprotein-pseudotyped lentiviral vector infectivity of HSPCs, the lysine residues on the N-terminal extremity of Vectofusin-1, a hydrophilic angle of 140° formed by the histidine residues in the Schiffer-Edmundson helical wheel representation, hydrophobic residues consisting of leucine were all found to be essential and helped to define a minimal active sequence. The data also show that the critical determinants necessary for lentiviral transduction enhancement are partially different from those necessary for efficient antibiotic or DNA transfection activity of LAH4 derivatives. In conclusion, these results help to decipher the action mechanism of Vectofusin-1 in the context of hCD34+ cell-based gene therapy.     

四氧嘧啶诱导糖尿病小鼠的胰岛素原基因治疗

为了解决基因治疗中的安全性问题 ,和寻求一种简便而又经济的糖尿病基因治疗模式 ,采用腹腔注射四氧嘧啶的方法 ,以昆明小鼠为实验对象 ,成功地建立了糖尿病小鼠模型 .通过电穿孔的基因转移 ,将含有胰岛素原cDNA的质粒pCMV IN转移到这些小鼠的股四头肌 .反转录PCR的结果表明 ,转基因在转染部位有转录活性 ,而放射免疫分析结果却表明转基因的表达产物分泌进了小鼠的血循环系统之中 .血糖浓度的变化说明 ,这些产物具有明显的降血糖效果 .在电基因转移前对转移部位用透明质酸酶处理 ,使电激时的使用电压降低 ,增加了转移效果 ,也更加安全 .     

携带IL-2/NK4双基因减毒沙门氏菌TPIN的遗传稳定性研究

对携带IL-2/NK4双基因减毒沙门氏菌TPIN的遗传稳定性进行研究。将TPIN连续传40代,取10代、20代、30代、40代菌落进行鉴定,包括菌落和菌体的形态、质粒的纯度和浓度、目的基因片段、双酶切结果及转染人肝癌细胞(HepG2)后目的基因体外表达活性。结果表明,每10代的菌落和菌体形态一致,其所含质粒的纯度和浓度在传代过程中无明显变化,PCR扩增的目的基因条带大小一致,双酶切鉴定结果正确,转染HepG2细胞后,每代间所表达目的蛋白浓度无明显差异。TPIN作为消化道肿瘤的生物治疗药物,在遗传方面有较好的稳定性,可进一步进行大量生产。