肝硬化患者肝脏表皮生长因子受体的表达及其意义

作者采用免疫组织化学方法研究８例肝硬化患者及６例非肝病患者肝脏表皮生长因子（ＥＧＦ）受体的表达及意义。结果显示肝硬化患者肝细胞核出现ＥＧＦ受体阳性反应;增生的小胆管上皮细胞呈ＥＧＦ受体强阳性反应并出现细胞核ＥＧＦ受体。提示肝硬化患者肝脏ＥＧＦ受体分布与对照组肝脏明显不同。肝硬化患者肝细胞核内ＥＧＦ受体可能与维持肝实质细胞数量有关;ＥＧＦ与胆管上皮细胞增生有关     

不同肝脏损伤模型下新生肝细胞来源研究进展

肝脏是执行很多重要生理功能的器官,它具有强大的再生能力,在损伤后可以迅速恢复到原本的体积。它的再生特性得益于肝细胞和胆管上皮细胞在损伤后的快速增殖;然而,在极端急性损伤或长期慢性损伤的情况下,肝脏可能无法再生或再生不佳。有众多研究表明,不同的肝损伤模型会动员不同的细胞亚群促进肝再生。该文主要介绍了五种不同的肝脏损伤模型,并对在不同损伤情况下新生肝细胞的来源、胆管上皮细胞与肝细胞的互相转换等方面进行了总结,为肝脏后续相关研究和疾病治疗提供了借鉴。     

肾综合征出血热（HFRS）患者尸检肝组织中的病毒抗原－免疫组织化学研究

应用敏感的免疫组织化学多重ＰＡＰ法,观察了ＨＦＲＳ（肾综合征出血热）病毒抗原在ＨＦＲＳ患者尸检肝组织的定位,结果发现１８例尸检肝组织中．１５例肝细胞病毒抗原阳性,２例肝组织血管中白细胞也存在病毒抗原、４例肝内胆管为ＨＦＲＳ病毒抗原阳性,主要分布于肝内大胆管,小叶间胆管和小胆管的上皮细胞中,ＨＦＲＳ病毒抗原阳性物质呈地颗粒状,定位于胆管上皮细胞核上区的胞质中。     

熊去氧胆酸改善胆汁淤积症幼鼠肝功能和抗肝纤维化的作用

本研究试图通过制造幼鼠胆汁淤积症模型进而探讨熊去氧胆酸(ursodeoxycholic acid,UDCA)对胆汁淤积症幼鼠肝功能及肝纤维化指标的作用及影响。我们采用α-萘异硫氰酸酯(α-naphthyl isothiocyanate,ANIT)灌胃诱发幼鼠胆汁淤积症模型,检测经UDCA治疗后对大鼠肝功能各项生化指标、血清肝纤四项、肝组织免疫组化影响。结果提示造模组(ANIT Model)除胆碱酯酶(cholinesterase,CHE)外,肝功能各项指标均明显高于空白对照组(blank control)(p0.01),表明造模成功;试验显示:γ-谷酰转肽酶(γ-glutamyl transpep tidase,γ-GT)、胆汁酸(total bile acids,TBA)在熊去氧胆酸治疗组(UDCA Treatment)中数值,明显较ANIT Model组降低,有统计学差异(p0.05),而丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、总胆红素(total bilirubin,TBIL)、直接胆红素(direct bilirubin,DBIL)、间接胆红素(indirect bilirubin,IBIL)数值,相比ANIT Model组,无统计学差异;UDCA Treatment组血清层粘连蛋白(laminin,LN)、Ⅳ型胶原(collagenⅣ,cⅣ)明显低于ANIT Model组(p0.01),而透明质酸(hyaluronic acid,HA)、Ⅲ型前胶原(procollagenⅢ,PCⅢ)与ANIT Model组相比均无统计学差异;UDCA Treatment组肝组织LN、cⅣ均明显低于ANIT Model组(p0.01),有统计学意义。因此,通过本研究证明了UDCA有可能通过降低血清γ-GT、TBA改善肝功能,通过降低血清及肝组织中LN、cⅣ而起到抗肝纤维化作用。     

束缚浸水应激对大鼠肝胆汁分泌的影响及其作用机制的研究

目的：通过研究束缚浸水应激对大鼠肝胆汁分泌的影响,探讨其作用机制。方法：实验分6组（n=8）：A组：室温下单纯束缚＋生理盐水;B组：束缚浸水应激＋生理盐水;C组：室温下单纯束缚＋阿托品;D组：束缚浸水应激＋阿托品;E组：室温下单纯束缚＋酚妥拉明;F组：束缚浸水应激＋酚妥拉明。结果：与A组比较,B组肝胆汁分泌量显著减少（P〈0．05）,pH值显著升高（P〈0．01）;与A组比较,C组肝胆汁分泌量变化不明显,只有微量减少：E组与A组相对照肝胆汁分泌量无明显变化,但也有微量减少。与B组比较,D组肝胆汁分泌量有明显变化（P〈0．05）,肝胆汁pH无明显变化;F组与B组对照其肝胆汁分泌量有明显变化（P〈0．05）,肝胆汁pH无明显变化;D组与F组对照肝胆汁分泌量无明显变化,肝胆汁pH无明显变化。结论：束缚浸水应激对大鼠肝胆汁分泌有明显地抑制作用。浸水应激组肝胆汁的分泌量明显减少,肝胆汁的pH明显升高;迷走神经、交感神经在室温单纯束缚的情况下对肝胆汁的分泌影响较小,而在束缚浸水的情况下迷走神经、交感神经对肝胆汁的分泌有较显著的影响（P〈0．05）。     

经皮肝穿刺胆道引流术与逆行胰腺胆管造影术对结石性梗阻性黄疸患者的疗效比较研究

目的:比较经皮肝穿刺胆道引流术(PTCD)与逆行胰腺胆管造影术(ERCP)对结石性梗阻性黄疸患者的治疗效果。方法:选取海军军医大学第三附属医院东方肝胆外科医院于2016年3月～2018年4月间收治的结石性梗阻性黄疸患者80例。按照介入治疗术式的异同将患者分为ERCP组(n=40,给予ERCP治疗)和PTCD组(n=40,给予PTCD治疗),记录两组手术时间、术中出血量、住院费用、住院时间、治疗成功率、黄疸缓解率、并发症发生情况,比较两组术前、术后1 d、术后7 d肝功能指标情况。结果:两组患者手术时间、术中出血量、治疗成功率、黄疸缓解率比较差异无统计学意义(P0.05),ERCP患者住院费用少于PTCD组患者,住院时间亦短于PTCD组患者(P0.05)。两组患者术后1 d、术后7 d丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)水平均较术前降低,且两组患者术后7 d上述指标水平低于术后1 d(P0.05),ERCP组术后1 d、术后7 d ALT、TBIL、DBIL水平与PTCD组比较差异无统计学意义(P0.05)。两组患者术后并发症总发生率比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:PTCD、ERCP治疗结石性梗阻性黄疸,均能有效改善患者临床症状和肝功能,且手术安全性相当,但ERCP可明显减少住院时间和住院费用。     

过量大黄对小鼠肝脏细胞的毒性作用

目的探讨不同剂量的大黄对小鼠肝脏细胞的损伤及其机理,为大黄的安全用药提供理论依据。方法采用大、中、小、最小剂量的大黄灌胃昆明小鼠,观察一般状态,进行肝脏组织切片HE染色、酶指标生化检测及TNFαmRNA半定量检测。结果①小鼠一般状况随大黄剂量的增加而恶化。②小鼠ALT及γ-GT随大黄剂量增加而增高,除正常对照组和最小剂量组外,其余各组之间差异均达显著水平。③从小剂量组开始,小鼠肝脏出现脂肪变性,且随大黄剂量增加而加重。④从小剂量组开始,TNFα表达明显升高,且随大黄剂量增加而增高。结论8g/Kg/d剂量大黄对肝脏具有毒害作用,毒害作用随大黄剂量增加而加剧,过量大黄对肝脏的毒害作用主要表现为肝细胞脂肪变性。TNFα参与了过量大黄对肝脏的毒害过程,是造成肝细胞脂肪变性的损伤因子之一。     

肝细胞极性与膜蛋白分选的分子机制

肝细胞是高度特化的极性上皮细胞,细胞质膜蛋白的分选和极性转运对于肝细胞极性的建立与维持至关重要.首先,膜蛋白在内质网中合成,随后经高尔基体加工修饰,再由反面高尔基体进一步分选,最后通过膜泡运输等不同的机制分别转运到胆汁腔面或窦状隙面,行使其特殊的功能.近些年来,细胞内负责转运的细胞器和主要的分选信号已逐步被揭示.特别是循环内体也被证明参与了胆汁腔面和窦状隙面膜蛋白的极性分选和转运.肝细胞的极性一旦遭到破坏,将会引起胆汁分泌障碍以及其他肝脏功能的损伤,从而可能导致肝脏糖脂代谢紊乱,甚至丧失正常的生理功能.因此,深入研究肝脏细胞极性的形成与维持机制,将为多种肝脏疾病的预防和治疗寻找到新的方向和靶点,具有重要的理论和临床实践意义.     

TURP联合经尿道膀胱颈切开术治疗小体积前列腺增生所致膀胱出口梗阻的疗效分析

目的:探讨经尿道前列腺电切术(TURP)联合经尿道膀胱颈切开术(TUIBN)治疗小体积前列腺增生(BPH)所致膀胱出口梗阻的疗效。方法:选择2009年1月~2013年12月我院收治的小体积BPH患者,其中单纯经尿道前列腺电切术(TURP组)48例,经尿道前列腺电切术联合经尿道膀胱颈切开术(TURP+TUIBN组)48例。比较两组的术前、术后国际前列腺症状评分(IPSS)、残余尿量(PVR)、最大尿流率(Qmax)等,以及术后并发症的发生情况。结果:TURP+TUIBN组术中出血量较TURP组明显增多(P0.05),两组手术时间、组织切除质量比较,差异均无统计学意义(P0.05);与TURP组比较,TURP+TUIBN组术后6个月IPSS评分、PVR明显下降,Qmax、膀胱压力明显上升(P0.05);TURP+TUIBN组并发症发生率为4.2%,显著低于TURP组16.7%(P0.05)。结论:TURP+TUIBN治疗小体积前BPH所致膀胱出口梗阻,可彻底切除增生腺体,消除小体积BPH的各种梗阻因素,减少术后膀胱颈挛缩的发生。     

通过酒精饲养小鼠建立小鼠酒精模型

研究通过酒精饲养小鼠建立小鼠酒精成瘾模型的方法。使用6周龄SPF级Balb/c雄性小鼠15只,随机分为3组(n=5),即灌胃和酒水喂养组(A)、灌胃组和水喂养组(B)、对照组(C)。3组固体饲料正常给予,A、B两组每日灌胃11%酒水200μL,A组酒水溶液自由摄取并作为唯一饮水来源,B组水自由摄取,C组不做处理。饲养8周后进行24 h酒精戒断,并进行矿场实验,强迫游泳实验。处死小鼠取肝脏、肾脏和结肠制作石蜡切片并观察。造模过程中3组小鼠进食、饮水、体重、内脏重量出现了不同程度的变化。行为学结果显示,矿场实验中A、B两组小鼠戒断酒精后相对对照组小鼠焦虑水平明显升高;强迫游泳实验中,A、B两组相对C组绝对不动时间显著加长,表现出精神抑郁。显微镜观察小鼠内脏石蜡切片,A组小鼠肝脏切片明显出现肝细胞排列紊乱,肾脏中肾小球上皮细胞轻度萎缩,空泡变性,肾小管无明显病变,结肠石蜡切片肠绒毛出现破损,肠绒毛顶端完整性降低。B组肝、肾、结肠石蜡切片与对照组相比无明显变化。     

益生菌对急性肝内胆汁淤积大鼠肝组织NF-κB和MCP-1的影响

目的通过研究益生菌制剂对异硫氰酸萘酯（ANIT））所致的急性肝内胆汁淤积大鼠肝组织NF-κB和MCP-1表达的影响,进一步探讨益生菌防治急性肝内胆汁淤积肝损伤的作用机制。方法72只幼年雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠分为正常对照组（8只）、中毒组（32只）和干预组（32只）。中毒组及干预组幼鼠,按100mg／kg一次性灌服ANIT诱导急性肝内胆汁淤积病变,干预组于ANIT灌胃前3d开始灌服培菲康[4．2×10^8个活菌／（kg·d）]。观察各组在灌服ANIT后24h、48h、72h和96h血浆总胆红素（TB）、丙氨酸转氨酶（ALT）的浓度,同时用RT-PCR测定肝组织中MCP-1mRNA的表达,用免疫组化方法测定肝组织中NF-κB、MCP-1蛋白的表达,并在光学显微镜下观察肝脏的形态学改变。结果干预组大鼠血清ALT、TB在灌服ANIT后24h、48h、72h和96h各时间点升高的峰值较中毒组明显减低,且其肝组织MCP-1mRNA和蛋白表达水平以及NF-κB蛋白表达水平较中毒组低。结论益生菌能够改善急性肝内胆汁淤积肝脏功能,降低NF-κB、MCP-1的基因表达,对急性肝内胆汁淤积性肝损伤起到一定的防治作用。     

内镜下鼻胆管引流术与经皮肝穿刺胆道引流治疗急性梗阻性化脓性胆管炎疗效

目的:探讨内镜下鼻胆管引流术与经皮肝穿刺胆道引流治疗急性梗阻性化脓性胆管炎的疗效。方法:选择我院335例急性梗阻性化脓性胆管炎患者,按不同治疗方法分为A、B、C三组,A组125例患者使用传统胆管切开并T管引流术,B组100例患者使用内镜下鼻胆管引流术治疗,C组110例患者使用经皮肝穿刺胆道引流治疗。比较三组患者治疗有效率、脓性胆汁引流量、术后1周血清胆红素水平、住院时间及并发症发生率。结果:B、C组患者治疗有效率分别为91.0%(91/100)及90.9%(100/110),明显高于A组71.2%(89/125),B组与C组治疗有效率比较差异无统计学意义(P0.05);B、C组脓性胆汁引流量、术后1周血清胆红素水平及住院时间均优于A组,比较差异具有统计学意义(P0.05),B组与C组以上指标比较差异无统计学意义(P0.05);B、C组并发症发生率分别为11.0%(11/100)和8.2%(9/110),均明显低于A组的28.0%(35/125),比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论:内镜下鼻胆管引流术与经皮肝穿刺胆道引流治疗急性梗阻性化脓性胆管炎疗效均明显优于传统开放手术,且术后并发症少,值得推广应用。     

高浓度葡萄糖诱导人晶状体上皮细胞发生EMT

目的:观察高浓度葡萄糖诱导人晶状体上皮细胞发生上皮-间质转分化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)。方法:将人晶状体上皮细胞HLE-B3系分别培养在正常葡萄糖浓度(5.5 mmol/L)DMEM培养基和高浓度葡萄糖(35.5 mmol/L)的DMEM培养基中24小时,于培养的0 h、3 h、6 h、12 h、24 h在倒置显微镜下观察细胞形态学变化,采用免疫荧光染色检测晶状体上皮细胞中EMT相关蛋白E-cadherin及α-SMA的表达变化。结果:与正常糖浓度组相比,随着时间的延长高糖组细胞逐渐丢失上皮细胞形态,细胞变细、变长,向纤维细胞的形态转变;同时随着时间的延长,高糖组晶状体上皮细胞中E-cadherin染色的荧光强度在各时间点均低于正常糖浓度组,而α-SMA的荧光强度却明显高于正常糖浓度组,在6 h和12 h时差异显著,有统计学意义(P0.01)。结论:高浓度葡萄糖诱导人晶状体上皮细胞发生上皮-间质转分化。     

茵栀黄口服液联合布拉酵母 对新生儿黄疸的治疗

目的探讨茵栀黄口服液联合布拉酵母治疗新生儿黄疸的效果。方法回顾性分析2012年5月至2016年2月我院收治的108例新生儿黄疸患儿的临床资料,根据治疗方法的不同将患儿分为对照组(50例)和观察组(58例)。两组患儿均给予蓝光处理,对照组同时给予布拉酵母治疗,观察组在对照组的基础上联用茵栀黄口服液进行治疗。比较两组患儿凝血指数、血气指标、生化指标及治疗效果。结果观察组患儿治疗后有效率高于对照组(98.28%vs 90.00%,χ~2=24.92,P0.05)。观察组患儿治疗后PaCO_2、pH、BE及Ca~(2+)和Mg~(2+)水平均低于对照组,差异有统计学意义(均P0.05)。观察组患儿治疗后PT、APTT、FIB、TT异常发生率与对照组比较差异无统计学意义(均P0.05)。观察组患儿治疗后血清总胆红素水平低于对照组,住院时间及黄疸消退时间均短于对照组,差异有统计学意义(均P0.05)。结论茵栀黄口服液联合布拉酵母治疗新生儿黄疸效果显著,能够明显缩短黄疸消退时间,改善血气分析指标及生化指标水平,安全有效。     

吸入一氧化碳防治肢体缺血／再灌注所致肝脏损伤的实验研究

目的：观察吸入外源性一氧化碳（CO）对肢体缺血／再灌注（I／R）所致肝脏损伤的防治作用。方法：健康SD大鼠100只,随机分为假手术（S）、假手术吸入CO（SC）、I／R、I／R吸入CO（RC）组。通过夹闭股动脉4h、再开放6—72h、10d复制肢体L／R致肝脏损伤模型。S、I／R组吸入普通医用空气,SC、RC组吸入含CO（体积分数为0．05％）的医用空气。光镜观察肝组织病理学变化,全自动生化分析仪检测血谷丙转氨酶（GPT）,流式细胞仪检测肝细胞凋亡百分比及bax、bcl-2的表达水平。结果：S组与SC组比较,各项观察指标无显著差别;与SC组比较,I/R及RC组肝组织呈病理改变,血清GPT及肝细胞凋亡百分比明显升高;I／R组肝细胞bax蛋白的表达水平明显升高。和L／R组相比。RC组肝组织损伤程度减轻,血清GPT、肝细胞凋亡百分比及bax蛋白的表达水平明显降低,而肝细胞bcl-2蛋白的表达水平显著升高。结论：吸入适量外源性CO对肢体I／R所致肝脏损伤有防治效应。     

胆管上皮细胞TLR3内源性活化在原发性胆汁性肝硬化中的作用

目的:探讨胆管上皮细胞中Toll样受体3(TLR3)内源性活化对原发性胆汁性肝硬化损伤的影响。方法:体外培养人肝内胆管上皮细胞(HiBEC),并通过冻融处理制备坏死HiBEC样本。将死亡样本与活样本混合培养6h,以制备TLR3内源性活化样本,将其标记为观察组;以核酸酶处理坏死细胞及活细胞,并混合培养6h,以制备对照样本,将其标记为对照组。检测2组细胞凋亡率、TLR3及β干扰素Toll样受体结构域衔接蛋白(TRIF)表达水平、Caspase-3活性。结果:观察组凋亡率明显高于对照组,TLR3及TRIF相对表达量明显高于对照组,细胞Caspase-3平均表达量明显高于对照组,上述差异均有统计学意义(P0.05)。结论:TLR3的内源性活化可导致HiBEC凋亡,在原发性胆汁性肝硬化的发生及发展中可能有一定促进作用。     

两种不同手术方式治疗恶性梗阻性黄疸患者的临床疗效比较研究

目的:探讨经皮肝穿刺胆管引流术(PTCD)与经内镜逆行胰胆管造影术(ERCP)治疗恶性梗阻性黄疸的治疗效果,并进行比较分析。方法:选取2016年1月~2018年5月期间我院收治的127例恶性梗阻性黄疸患者。根据治疗术式的不同将患者分为ERCP组(n=63,采用ERCP联合金属支架置入术进行治疗)和PTCD组(n=64,采用PTCD进行治疗),比较两组患者术后5d黄疸缓解率,比较两组患者术前、术后2周肝功能指标[血清总胆红素(TBIL)、丙氨酸转氨酶(ALT)、直接胆红素(DBIL)],比较两组患者术后舒适度量表评分情况及并发症发生情况。结果:两组患者术后黄疸总缓解率比较差异无统计学意义(P0.05);PTCD组低位梗阻患者黄疸缓解率低于ERCP组,而高位梗阻患者黄疸缓解率高于ERCP组(P0.05)。两组患者术前、术后2周TBIL、ALT、DBIL比较差异无统计学意义(P0.05);两组患者术后2周TBIL、ALT、DBIL水平较术前比较均下降(P0.05)。ERCP组患者术后舒适度量表评分总分低于PTCD组,差异有统计学意义(P0.05)。PTCD组术后并发症总发生率14.06%(9/64),低于ERCP组的41.27%(26/63)(P0.05)。结论:ERCP与PTCD治疗恶性梗阻性黄疸均可改善患者肝脏功能、疗效满意,但ERCP对低位梗阻患者治疗效果优于PTCD,且术后舒适度优于PTCD,但术后并发症较多,临床应根据患者情况选择具体术式。     

地衣芽孢杆菌治疗新生儿母乳性黄疸的疗效观察

目的了解地衣芽孢杆菌活菌胶囊(整肠生)治疗母乳性黄疸的疗效。方法选取2012年1月至2015年4月我院门诊治疗的新生儿母乳性黄疸69例,随机分为两组,对照组给予口服茵栀黄颗粒,观察组给予茵栀黄颗粒及整肠生治疗,观察治疗效果及两组血清胆红素值及黄疸消退时间、大便次数。结果 (1)治疗后观察组总有效率97.14%,对照组治疗总有效率82.35%,差异具有统计学意义(P0.05)。(2)治疗第5天观察组血清总胆红素值明显低于对照组,黄疸消退时间短于对照组,平均大便次数多于对照组,差异具有统计学意义(P0.01)。(3)两组患儿均无过敏及脱水等不良反应。结论整肠生治疗母乳性黄疸可缩短黄疸持续时间,显著降低血清总胆红素水平,提高治疗有效率。     

微生态制剂对肝内胆汁淤积性肝损伤兔模型胆汁和血清TNF-a、IL-6的影响

目的:通过研究异硫氰酸萘酯(ANIT))所致的急性肝内胆汁淤积性肝损伤兔模型血清和胆汁中TNF-a、IL-6的代谢变化,来进一步探讨微生态制剂-乐托尔对该模型的作用机制.方法:按200 mg/kg一次性灌服ANIT来诱发新生白兔急性肝内胆汁淤积性肝损伤病变,分别检测中毒后24、48 h及用乐托尔散剂治疗后血清和胆汁中总胆红素(TB)、丙氨酸转氨酶(ALT)、肿瘤坏死因子-a(TNF-a)、白细胞介素-6(IL-6)的值.结果:在乐托尔组中发现,灌服ANIT 48 h后血清和胆汁中的TNF-a、IL-6、ALT、TB值均较中毒48 h组明显降低(P值均小于0.05);各组胆汁中TNF-a、IL-6的浓度均明显高于血清中浓度.结论:微生态制剂能够改善肝功能,增加胆汁的排泄量,使炎性细胞因子的产生量显著减少.     

不同月龄虹鳟肝显微及超微结构特征

应用多种组织化学方法和透射电镜技术,对同一生长条件下8月龄、20月龄及30月龄虹鳟（Oncorhynchus mykiss）肝显微结构和超微结构特征进行研究。结果表明：不同月龄虹鳟肝被膜均为单层扁平上皮,厚度变化明显;肝细胞为单核,8月龄细胞排列不明显,20月龄及30月龄形成完整双层管式排列,胆管及其周围结缔组织随月龄发育尤为明显,血窦分支吻合成网状,窦壁内皮细胞扁平,胞质孔较多,窦腔内巨噬细胞具有典型胞质突,但并没有观察到Kupffer细胞;各月龄组肝星状细胞发育完善,胞突彼此相连;汇管区分为胆管孤管型、胆管动脉型、胆管静脉型、胆管动静脉型4种,8月龄以胆管孤管型为主,20月龄以胆管动脉型为主,30月龄以胆管动脉型、胆管动脉静脉型为主。因此,性成熟前虹鳟肝组织结构与其生理发育密切相关,胆管系统结构形式随月龄变化明显,肝细胞排列逐渐完善,Disse间隙胶原纤维及网状纤维含量逐渐增加,与被膜、中央静脉及汇管区结缔组织互相延伸,构成肝完整骨架,有利于调节肝细胞正常生理功能。