马尾松成熟合子胚的体细胞胚胎发生和植株再生

采用马尾松（Ｐｉｎｕｓｍ ａｓｓｏｎｉａｎａ Ｌａｍ ｂ．）成熟合子胚为起始外植体,在含２,４－Ｄ １０ ｍ ｇ／Ｌ,ＫＴ和ＢＡ 各４ ｍ ｇ／Ｌ的ＤＣＲ培养基上得到胚发生培养物。将白色半透明的愈伤组织（含早期原胚）在含２,４－Ｄ１．０ ｍ ｇ／Ｌ,ＫＴ和ＢＡ 各０．４ ｍ ｇ／Ｌ的ＤＣＲ培养基上保持并增殖。在附加９０００ ｍ ｇ／Ｌ肌醇的ＤＣＲ高渗培养基上得到粗壮的后期原胚。ＡＢＡ 和活性炭同时使用能促进子叶胚的形成,最高频率为３５．１％ 。在无激素培养基上,成熟体细胞胚萌发并进一步形成完整小植株     

油松体细胞无性系的建立

以油松（Ｐｉｎｕｓｔａｂｕｌａｅｆｏｒｍｉｓ）种胚为外植体,通过器官发生途径建立体细胞无性系。以ＭＳ为基本培养基,在芽的诱导和增殖培养基中,附加植物激素,以６ＢＡ＋ＫＴ和ＮＡＡ效果最好,两者的配比为５－１０：１,６ＢＡ和ＫＴ的浓度分别均不超过１ｍｇ／Ｌ。同时根据培养物的发育状态交替使用活性炭,则对芽的增殖有明显的促进作用。选择发育状态较幼嫩的刚抽茎的外植体,诱导生根,在１／２ＭＳ＋ＫＴ０．１＋ＩＢＡ０．１＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ的培养基中,生根率达３２．％。体细胞胚胎发生途径建立细胞无性系也已取得成功,筛选出可继代培养的胚性胚柄团无性系,在胚轴和子叶上诱导出成熟的体细胞胚并获得完整小植株。     

蛇床幼茎离体培养中体细胞胚胎形成的观察

蛇床幼茎外植体经诱导产生了愈伤组织。在ＭＳ＋２,４－Ｄ,０．２ｍｇ／Ｌ＋ＺＴ０．４ｍｇ／Ｌ培养基中,愈伤组织转变成胚性愈伤组织。转入ＭＳ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ＋ＺＴ０．８ｍｇ／Ｌ培养基以后,胚性愈伤组织分化出体细胞胚胎。体细胞胚胎在ＭＳ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ培养基中可直接发育成为完整植析。显微观察表明,体细胞胚胎产生于愈伤组织的表层细胞或内部细胞。在鱼雷胚期已有螺纹导管的分化。子叶期的维管组织从两     

海边香豌豆胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚发生

将生长１４ｄ的海边香豌豆（Ｌａｔｈｙｒｕｓ ｍａｒｉｔｉｍｕｓ（Ｌ．）Ｂｉｇｅｌ）无菌苗下胚轴切成０．５ｃｍ左右的片段,置于含有１ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ,０．５ｍｇ／Ｌ ＢＡ和０．５％ＮａＣｌ的ＭＳ培养基中,２８ｄ后诱导出胚性愈伤组织。将其转入含有适当浓度２,４－Ｄ的ＭＳ培养基上,又２８ｄ后可得到大量球形胚和心形胚以及极少量鱼雷胚和子叶胚。诱导体细胞胚适合的２,４－Ｄ浓度为０．５ｍｇ／Ｌ。较高浓度的２     

麻体细胞胚胎发生研究初报

将苎麻“浏阳大叶绿”的子叶培养在附加０．５ｍｇ／ＬＣＰＡ、０．０５ｍｇ／ＬＢＲ的ＣＸＷ培养基上,可获得淡黄色或浅灰绿色的颗粒状愈伤组织。将愈伤组织转移至附加０．１ｍｇ／ＬＣＰＡ、０．０５ｍｇ／ＬＮＡＡ、１．５ｍｇ／ＬＺＴ的ＣＸＷ培养基上继代,颗粒状结构非常明显。继续培养在添加２ｍｇ／ＬＭｅｔ,３ｇ／ＬＹＥ的上述继代培养基上,可分化出一些相互独立的胚状体,继而发育成为胚状体幼苗。     

南苜蓿组织和原生质体培养及转化试验

主要探讨南苜宿子叶和下胚轴外植体,子叶原生岳体培养中的器官发生及遗传转化。南苜蓿子叶和下胚细外植体培养在附加１ＡＡ０．５－１ｍｇ／Ｌ和细胞分裂素（ＢＡ或ＺＴ）０．５－２ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上,在有当照的条件下诱导形成不定芽,进而再生成完整植株。子叶原生质体培养在附加２,４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ和ＫＴ０．２ｍｇ／Ｌ的Ｂ５液体培养基中,细胞分裂频率可达３０－４１％,原生质全来源的愈伤组织在ＭＳＢ培养基（Ｍ     

扁蓿豆体细胞胚的诱导和植株再生

扁蓿豆实生苗的根、下胚轴、子叶、叶片和叶柄外植体,在含２,４—Ｄ２—０．２５ｍｇＬ－１与ＫＴ０．２５－２ｍｇＬ－１及２,４—Ｄ０．５ｍｇＬ－１与ＺＴ０．５ｍｇＬ－１或ＢＡＰ０．５ｍｇＬ－１与ＮＡＡ０．０５ｍｇＬ－１的ＭＳ琼脂培养基上均可产生愈伤组织．愈伤组织在含２,４—Ｄ０．５—０．１ｍｇＬ－１与ＫＴ０．５—０．１ｍｇＬ－１或ＢＡＰ０．２５＋ＮＡＡ０．０５ｍｇＬ－１的ＭＳ培养基上可诱导分化出体细胞胚．体细胞胚在无激素的培养基上发育成完整植株．用海藻酸钠包襄体细胞胚制成人工种子,其发芽率和植株转换率分别为９５％和５３％．     

火炬松成熟合子胚培养直接器官发生和植株再生

基因型Ｈｂ,Ｍａ和Ｍｃ的火炬松成熟合子胚在附加１．０ｍｇ／ＬＮＡＡ,４．０ｍｇ／ＬＢＡ,５００ｍｇ／ＬＬＨ和５００ｍｇ／Ｌ谷氨酰胺的ＴＥ培养基上培养１２周后,在子叶和胚轴部位形成不定芽原基。然后将合子胚转移到附加０．５ｍｇ／／ＬＮＡＡ,０．０５ｍｇ／ＬＩＢＡ,２ｍｇ／ＬＢＡ,５００ｍｇ／ＬＬＨ和５００ｍｇ／Ｌ谷氨酰胺的ＴＥ不定芽分化培养基上,６周后分化产生大量不定芽,３种基因型中,Ｈｂ的直接不定芽     

黄花蒿培养细胞中青蒿素合成代谢的体外调节

黄花蒿培养细胞通过两步培养积累青蒿素．第１步在含有０．２～０．４ｍｇ／Ｌ６－苄基氨基嘌呤（６－ＢＡ）和３～４ｍｇ／Ｌ吲哚乙酸（ＩＡＡ）的Ｎ６培养基中进行细胞的增殖培养,第２步将培养好的细胞转入含０．２～０．４ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ和０．２～０．４ｍｇ／ＬＩＡＡ的改良Ｎ６培养基中进行青蒿素的合成．青蒿素的合成量为１９０μｇ／ｇ干细胞左右．当在第２步培养中加入青蒿素合成前体青蒿酸,青蒿素合成量比仅靠激素诱导提高了３倍多．青蒿素的合成途径是植物固醇合成途径的分支途径,当在青蒿素合成过程即第２步培养中加入固醇生物合成抑制剂双氯苯咪唑和氯化氯胆碱处理,可使代谢向合成青蒿素的方向移动,青蒿素合成量明显提高．经２００ｍｇ／Ｌ氯化氯胆碱处理２ｄ,黄花蒿细胞合成青蒿素量为３７２μｇ／ｇ干细胞;经２０ｍｇ／Ｌ双氯苯咪唑处理４ｄ,黄花蒿细胞合成青蒿素量为１５４０μｇ／ｇ干细胞,比靠激素诱导提高了８倍多,与诱导脱分化细胞的黄花蒿叶中所含的青蒿素（３０００μｇ／ｇ干细胞）处于同一个数量级．以上结果表明：在通过植物激素调节可以合成青蒿素的黄花蒿培养细胞中,缺乏青蒿素合成前体是青蒿素合成量低的重要原因．因此,在青蒿素合成的过程中通过体外调节,     

大叶紫花苜蓿愈伤组织原生质体再生植株

大叶紫花苜蓿下胚轴诱导的愈伤组织在继代培养基上生长快速,易于分散。继代第１２ｄ的愈伤组织原生质体的得率为６．５×１０７／ｇ鲜重。原生质体培养基为ＳＨ基本培养基,含有１．０ｍｇ／Ｌ２,４－０、０．５ｍｇ／ＬＢＡ、２．０ｇ／ＬＣＨ、２％蔗糖、６％葡萄糖、５ｍｍｏｌ／ＬＭＥＳ,培养密度为１．０×１０５／ｍＬ。培养至第１２ｄ时的原生质体再生细胞植板率为３．７％。由原生质体形成的小愈伤组织在含２．０ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ的ＭＳ固体培养基上大量增殖。增殖的愈伤组织转移至２．０ｍｇ／Ｌ２－ｉｐ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ的Ｂ５培养基上,形成体细胞胚并发育成完整植株。     

红花细胞培养条件的优化及其胞内产物生育酚的

红花（Ｃａｒｔｈａｍｕｓ ｔｉｎｃｔｏｒｉｏｕｓ）的子叶能诱志出愈伤组织,并且该愈伤组织能合成生育酚。正相高效液相色谱测定的结果表明,其主要成分是α－生育酚。在ＭＳ培养基基础上添加０．１％酪蛋白,并将生长调节剂浓度调整为２,４－Ｄ０．３０ｍｇ／Ｌ,６－ＢＡ １．８０ｍｇ／Ｌ,槿使α,β－γ生育酚含量分别达４．１７０６,０．３１２０,０．１６５０μｇ／ｇ鲜重。     

应用３１１—Ａ最优回归设计研究ＡＢＡ、ＰＥＧ４０００及AgNO3对落叶松体

采用三因素多项式回归３１１－Ａ最优设计方法对影响落叶松体细胞发生数量的ＡＢＡ、ＰＥＧ４０００和ＡgNO3的用量进行了研究,建立了华北落叶松正常体细胞胚发生数量与ＡＢＡ、ＰＥＧ４０００和ＡgNO3的数学模型,分析了落叶松体细胞 生数量试验因子的主效应和互作效应,优选了落叶松体细胞胚发生数量最佳结果的最佳技术组合方案为ＡＢＡ１８．９１３８mg/L,PEG400088.8007g/L与ＡgNO310.7513mg/L时,最佳体细胞胚数量应为１０７．５２７８个子叶胚／g.callus。实验结果表明,该方法是针对叶树体细胞胚胎发生过程中,主要激素种类与浓度配比,处理组合,科学、合理的培养基优化途径。     

石斛离体培养中ABA对诱导花芽形成的影响

由兰科植物铁皮石斛（Ｄｅｎｄｒｏｂｉｕｍ ｃａｎｄｉｄｕｍ Ｗａｌｌ．ｅｘ Ｌｉｎｄｌ．）种子诱导形成的愈伤组织,在光照下置于ＭＳ附加０．３ ｍ ｇ／ＬＮＡＡ 的培养基上繁殖,可以形成原球茎。将原球茎转入ＭＳ含２ ｍ ｇ／Ｌ ６－ＢＡ 和０．５ ｍ ｇ／ＬＮＡＡ 的培养基上,花芽形成频率为２７．０％ 。原球茎先在０．５ ｍ ｇ／ＬＡＢＡ的培养基上预培养１５ ｄ,再转入含２ ｍ ｇ／Ｌ６－ＢＡ 的ＭＳ培养基上培养,花芽形成频率明显提高,可达８４．４％ ,而且每株植株花的数目增加;但是在仅有ＡＢＡ 的ＭＳ培养基上培养的原球茎再生的植株未见花芽形成     

芹菜体细胞胚胎发生及干化体细胞胚的研究

以芹菜无菌苗为材料,在ＭＳ附加ＫＴ ０．５ｍｇ／Ｌ,ＡＢＡ０．２５ｍｇ／Ｌ,脯氨酸５００ｍｇ／Ｌ,ＣＨ５００ｍｇ／Ｌ的培养基上,采用静止与震荡交替进行的培养方式,可获得大量健壮的子叶期胚状体（体胚）。干燥可以提高贮茂后体胚的转换率,特别是在低温,高湿中缓慢干燥,并在干燥前用ＡＢＡ预处理效果更好。通过干燥和不干燥体胚扫描电镜观察和电导值及脱氢酶的比较,发现干燥体胚有助于贮藏期间细胞结构及膜系统的保持     

平贝母体细胞胚胎发生中的核酸与蛋白质合成研究

在获得比较理想的平贝母体细胞胚胎发生体系的基础上,我们应用放射性同位素液体闪烁计数技术测定了平贝母体细胞胚胎发生过程中球形胚、心形胚、鱼雷胚、子叶胚和成熟胚等时期的DNA、RNA和蛋白质合成动态,实验表明,从球形胚到子叶胚,核酸与蛋白质的合成速度递增。在子叶胚前期RNA合成达到高峰,在子叶胚期蛋白质合成达到高峰,在子叶胚后期DNA合成达到高峰,核酸与蛋白质合成速度的变化与胚体细胞增殖及器官分化相关联。     

一品红离体培养诱导体细胞胚的研究（简报）

一品红的嫩茎离体培养在附加不同浓度的２,４－Ｄ和６－ＢＡ的ＭＳ培养基上,２．４Ｄ浓度为１．０～２．０ ｍｇ· Ｌ~（－１）的愈伤组织生长量最大。这些愈伤组织转移到ＭＳ＋６－ＢＡ１．０ ｍｇ·Ｌ~（－１）＋ＮＡＡ０．１ ｍｇ·Ｌ~（－１）的分化培养基上后,产生了胚性愈伤组织,观察到大量不同时期体细胞胚。带有体细胞胚的愈伤组织进一步转移到无激素 ＭＳ培养基上,便发育成小植株。     

拟南芥菜离体培养中愈伤组织的诱导和植株再生的初步研究

以ＧＡＭＢＯＲＧ＇ＳＢ５为基础,附加激素２,４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ,ＫＴ０．０５ｍｇ／Ｌ,分别以拟南芥菜的胚、根、子叶、下胚轴、营养期和开花期莲座叶为外植体进行培养,有愈伤组织形成;胚外植体先萌发出子叶和根,接着在延伸的下胚轴上长出愈伤组织。若将上述培养基碳源 由蔗糖改为葡萄糖,整个胚外植体都可形成愈伤组织。对莲座叶的培养发现,即使改变２,４－Ｄ深度为２．０ｍｇ／Ｌ,其它成分上进行植株再生的诱导,结     

苹果原生质体培养及植株再生

用苹果（Ｍａｌｕｓ ｐｕｍ ｉｌａ Ｍｉｌｌ）胚珠诱导愈伤组织并建立悬浮细胞系。用２％ 纤维素酶、０．５％ 果胶酶的混合酶液分离悬浮培养物,可得到５．４×１０６ 个／ｇ ｆｒ． ｗ ｔ有活性的原生质体。这些原生质体在改良的ＭＳ、Ｋ８ｐ、Ｄ２ 培养基中均可发育成细胞团,在含２．０ ｍ ｇ／ＬＩＡＡ、２．０ｍ ｇ／ＬＮＡＡ、０．１ ｍ ｇ／ＬＢＡ 的ＭＳ固体培养基上形成愈伤组织,更换几次不同的培养基后,在分化培养基上分化出不定芽,在生根培养基上生根形成完整植株。     

外源激素对金钱松胚外植体愈伤组织的诱导及其器官发生的调节作用

金钱松胚外植体在培养过程中由于外源激素的种类和配比的不同而存在着几种发育途径：直接从胚外植体表面分化不定芽;先诱导愈伤组织,再从愈伤组织分化不定芽;还可由愈伤组织分化出胚状体。激素ＢＡ对外植体不定芽的诱导起着关键作用。激素２,４－Ｄ则诱导愈伤组织,ＢＡ与２,４－Ｄ配比恰当诱导的愈伤组织分化出体细胞胚状体。　ＬＰ’附加低浓度的ＢＡ或ＫＴ（＜０．５ｍｇ／Ｌ）促进不定芽茎的伸长;　ＬＰ’附加浓度的ＩＢＡ（＜０．５ｍｇ／Ｌ）诱导不定根的发生。愈伤组织在基本培养基浓度为　×ＬＰ’或１×ＬＰ’的分化培养基上不定芽诱导率相似。     

脱落酸和抑制剂对萌发花生子叶肽链内切酶和花生球蛋白降解的影响

脱落酸（Ａｂｓｃｉｓｉｃａｃｉｄ,ＡＢＡ）抑制花生种子萌发的作用与核酸和蛋白质合成抑制剂的作用不同．ＡＢＡ（１００μｍｏｌ／Ｌ）在萌发零时施用,明显抑制肽链内切酶活性和同工酶表现以及花生球蛋白降解,萌发４８ｈ施用ＡＢＡ（１００μｍｏｌ／Ｌ）只降低肽链内切酶活性．ＡＢＡ的抑制作用不依赖于核酸和蛋白质合成．核酸合成抑制剂（３＇－脱氧腺苷,放线菌素Ｄ,５－氟尿嘧啶）和蛋白质合成抑制剂（亚胺环己酮）只能部分降低肽链内切酶活性,对肽链内切酶同工酶表现和花生球蛋白降解无明显影响．实验结果表明花生子叶肽链内酶不是在种子萌发过程中重新（ｄｅｎｏｖｏ）合成,文中讨论了肽链内切酶活性调节和花生贮藏蛋白降解的起始模式．