烟草爱精后胚囊和合子的分离及合子的离体分裂

以酶解－振荡,酶解－解剖及酶解－研磨３种方法分离出烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍ）受精后生活胚囊,其中以第三种方法效果最好,将分离在胚囊经再次酶解并结合显微解剖,进一步分离出合子,胚乳细胞及其原生质体。以微室饲养法培养离体合子,启动了第一次分裂。     

激光诱导泥鳅卵细胞融合——一种新的细胞融合方法

本文提出了一种新的细胞融合方法——激光诱导细胞融合,并以泥鳅受精卵为材料进行了细胞融合实验,获得成功。激光融合的突出优点是无毒,无损伤,融合后成活率高。实验中融合的泥鳅卵大都能继续卵裂发育,有的经卵裂、囊胚、原肠到器官形成．直至幼体。     

烟草受精后胚囊和合子的分离及合子的离体分裂

以酶解－振荡、酶解－解剖及酶解－研磨３ 种方法分离出烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ ）受精后生活胚囊。其中以第三种方法效果最好。将分离的胚囊经再次酶解并结合显微解剖，进一步分离出合子、胚乳细胞及其原生质体。以微室饲养法培养离体合子，启动了第一次分裂。     

几种植物生活胚囊的分离与鉴定

向日葵、金鱼草和烟草的成熟胚囊以及前两种植物受精后具原胚和胚乳的胚囊均已从新鲜胚珠中分离出来。干涉差显微观察与 H33258荧光显微技术表明它们确系保持了细胞结构和含有丰富内含物的完整胚囊。荧光素二醋酸酯的显微鉴定进一步证明它们是有生活力的。     

葱卵细胞的分离

将大葱(Allium fistulosum)胚珠置于酶液中30分钟可将其外珠被去掉。可清楚地看到由内珠被包裹的胚珠中胚囊的轮廓。将胚珠转移至不含酶的相同溶液中, 用解剖针从胚珠中部切割, 然后挤压胚珠的珠孔部位, 卵器细胞从胚珠的切口处逸出。再用显微操作仪将卵细胞和2个助细胞分开, 达到葱卵细胞分离的目的。酶对分离卵细胞具有重要的作用, 经0.2%果胶酶Y23、0.8%果胶酶、0.8%纤维素酶和0.5%半纤维素酶的处理, 可在2小时内从30 个胚珠中分离出18个卵细胞。随着胚囊的发育, 2个助细胞的体积出现明显差异。生活的葱卵细胞的成功分离, 为建立葱离体受精体系创造了条件。     

葱卵细胞的分离

将大葱（Allium fistulosum）胚珠置于酶液中30分钟可将其外珠被去掉。可清楚地看到由内珠被包裹的胚珠中胚囊的轮廓。将胚珠转移至不含酶的相同溶液中,用解剖针从胚珠中部切割,然后挤压胚珠的珠孔部位,卵器细胞从胚珠的切口处逸出。再用显微操作仪将卵细胞和2个助细胞分开,达到葱卵细胞分离的目的。酶对分离卵细胞具有重要的作用,经0．2％果胶酶Y23、0．8％果胶酶、0．8％纤维素酶和0．5％半纤维素酶的处理,可在2小时内从30个胚珠中分离出18个卵细胞。随着胚囊的发育,2个助细胞的体积出现明显差异。生活的葱卵细胞的成功分离,为建立葱离体受精体系创造了条件。     

洋葱卵细胞的分离

将洋葱的胚珠置于酶液中酶解50-110 min后剥去其珠被,可清楚地看到珠心中的胚囊轮廓。用解剖针将珠心从中部横切,然后挤压其珠孔部位,卵器细胞从胚珠的切口处逸出。再用显微操作仪的玻璃针将卵细胞和两个助细胞分开,达到分离洋葱卵细胞的目的。酶对分离卵细胞具有重要作用,在最佳的酶液浓度[0.02%果胶酶Y23、0.08%果胶酶（Serva）、0.05%纤维素酶和0.05%半纤维素酶]下酶解胚珠110 min后,解剖1 h可从24个胚珠中分离出10个卵细胞（41.67%）。随着胚囊的发育,两个助细胞的体积出现明显的二形性。洋葱生活卵细胞的分离为开展洋葱离体受精建立了基础,也为研究洋葱卵器细胞的发育创造了条件。     

洋葱卵细胞的分离

将洋葱的胚珠置于酶液中酶解50~110 min后剥去其珠被,可清楚地看到珠心中的胚囊轮廓。用解剖针将珠心从中部横切,然后挤压其珠孔部位,卵器细胞从胚珠的切口处逸出。再用显微操作仪的玻璃针将卵细胞和两个助细胞分开,达到分离洋葱卵细胞的目的。酶对分离卵细胞具有重要作用,在最佳的酶液浓度[0.02%果胶酶Y23、0.08%果胶酶(Serva)、0.05%纤维素酶和0.05%半纤维素酶]下酶解胚珠110 min后,解剖1 h可从24个胚珠中分离出10个卵细胞(41.67%)。随着胚囊的发育,两个助细胞的体积出现明显的二形性。洋葱生活卵细胞的分离为开展洋葱离体受精建立了基础,也为研究洋葱卵器细胞的发育创造了条件。     

烟草雌性细胞原生质体的融合实验

将聚乙二醇诱导的单对原生质体融合技术应用于烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ ）雌性细胞体外融合,成功地进行了雌性细胞间,雌、雄性细胞间,雌性细胞与体细胞间各种组合的融合实验。此外,应用微滴培养与微室饲养培养两种方法诱导了体细胞原生质体分裂并形成细胞团,为数目有限的性细胞融合体的培养奠定了技术基础     

水稻卵细胞与合子的分离

水稻卵细胞与合子的分离韩红梅赵洁施华中杨弘远周嫦（武汉大学生命科学学院植物生殖生物学研究室武汉４３００７２）关键词水稻,卵细胞,合子,分离ＩＳＯＬＡＴＩＯＮＯＦＥＧＧＣＥＬＬＳＡＮＤＺＹＧＯＴＥＳＩＮＯＲＹＺＡＳＡＴＩＶＡＨＡＮＨｏｎｇＭｅｉＺ...     

胡萝卜精、卵细胞、助细胞和中央细胞的分离

用两个解剖针挤压胡萝卜花粉使其破裂释放出精细胞。用酶解-解剖方法分离胡萝卜胚囊中的卵细胞、助细胞和中央细胞。胡萝卜胚珠先在酶液中酶解40~50min,然后将其转移到不含酶的分离液中用解剖针解剖胚珠。将胚珠的合点端切破,轻轻挤压胚珠的珠孔,卵细胞、助细胞和中央细胞即可逸出。在最佳条件下,20min可从20个胚珠中分离出5个卵细胞。对分离胚囊细胞的渗透压和酶液成分进行了筛选。分离出的卵细胞用显微操作仪收集。胡萝卜精、卵细胞的成功分离为在双子叶植物中进行离体受精探索创造了条件。     

烟草幼嫩花粉原生质体分离与早期离体发育

建立了两种分离烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ ）幼嫩花粉原生质体的方法：一为通过花药漂浮培养释放出外壁裂开的花粉,后者转入酶液彻底脱去外壁,内壁降解而分离出原生质体（简称“花药预培养法”）;二为花粉经饥饿处理后,转入酶液释放原生质体（简称“花粉饥饿预处理法”）。对影响分离效果的主要因素作了研究。用花药预培养法分离的幼嫩花粉原生质体,在Ｋ３ 培养基中可再生细胞壁,启动１ 次细胞分裂,或萌发花粉管。表明具有孢子体发育与配子体发育的潜能。观察到花粉原生质体分裂成二细胞后,其中１ 个子细胞又长出花粉管的稀有现象,暗示其开始启动孢子体发育后又重新恢复配子体发育途径     

杏叶沙参胚囊的酶法分离：受精、合子生长与胚乳发育

胚囊酶法分离作为植物胚胎学中的一项观察技术已为不少作者所采用。本实验室用此技术观察了多种植物的成熟胚囊,泡相与芝麻的大孢子发生和雌配子体发育过程,以及金鱼草与向日葵受精后的若干变化。本文以杏叶沙参为材料,进一步探索其在观察受精、胚和胚乳发生过程中的应用前景。材料和方法实验材料为杏叶沙参(Adenophora axilliflora)。自然传粉后定期取样固定胚珠。固     

烟草花粉原生质体与叶肉原生质体的融合及培养早期变化

用ＰＥＧ—高Ｃａ高ＰＨ法诱导抗卡那霉素的烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍ）品系Ｎ３６４＋Ｋｍ＋花粉原生质体和黄花烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｒｕｓｔｉｃａ）叶肉原生质体融合。幼嫩花粉原生质体和叶肉原生质体之间的融合体培养启动胚胎发生分裂,经卡那霉素筛选后,少数多细胞团存活并形成小愈伤组织。成熟花粉原生质体与叶肉原生质体之间的融合体则仅产生管状结构。这一结果表明,作为融合一方的花粉原生质体的发育时期对融合产物的发育途径有重要影响。     

受精前后烟草卵细胞内玉米素和三类酸性植物激素分布的免疫金电？…

用胶体免疫金电镜技术观察了受精前后烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ ｖｅｒ．ｍａｒｏｐｈｙｌｌａ）卵细胞内玉米素（ｔ－Ｚ）、ＧＡ７与ＧＡ４、（＋）ＡＢＡ与ＩＡＡ分布的变化。受精前卵细胞内有大量ｔ－Ｚ,主要位于细胞核、内质网与线粒体上;与卵细胞相邻的助细胞合点端及中央细胞珠孔端亦有较多ｔ－Ｚ。受精后,例子与宿存助细胞ｔ－Ｚ显著减少,正加厚的合子细胞壁中ｔ－Ｚ分布。未受精卵细胞内ＧＡ７与ＧＡ４     

成熟胚囊的结构与功能是什么？

答：大多数被子植物的成熟胚囊由7个细胞8个核构成,包括珠孔端的1个卵细胞、2个助细胞、合点端的3个反足细胞和1个中央细胞,其中中央细胞具有2个核。这些细胞的结构和功能如下：