鸡胚尿囊膜（HET-CAM）眼刺激替代试验对产品及原料评价的比较

目的比较鸡胚尿囊膜试验（HET-CAM）作为一种眼刺激替代方法对产品或原料的评价。方法采用HET-CAM和兔眼Draize试验方法,对19种原料和23种化妆品及家用洗涤产品眼刺激性进行检测,对体内体外试验的结果进行统计比较。结果比较体内体外试验,原料和产品的kappa系数分别为0.826,0.531;灵敏度分别为100%,81.8%;特异度分别为85.7%,77.8%。结论 HET-CAM可作为Draize试验的替代试验,HET-CAM系统更适合对单纯化学品原料进行眼刺激试验。     

GLP原则在体外毒理学评价实验室的应用

在动物福利运动的推动下,以减少、优化和替代动物试验为核心内容的体外试验系统已成为安全评价不可或缺的组成部分,在药品、化学品、化妆品毒理学评价中起到重要作用。体外试验系统不同于体内动物实验,体外毒理学实验室GLP原则的建立和运行应充分考虑体外试验系统的特殊性。目前我国专业的体外安全评价实验室的建设刚刚起步,还没有可供借鉴的成熟经验。本文从实验室组织、试验系统维护、人员职责、质量管理和运行几个方面,介绍了GLP原则在化妆品体外毒理学检验和评价实验室的应用。     

基于4-1BBL和CD3双信号的融合蛋白协同抗肿瘤作用研究

旨在研究4-1BBL/CD20融合蛋白增强抗CD3/抗CD20 diabody介导的特异性靶向杀伤活性。采用亲和层析法纯化本室构建的抗-CD3/抗-CD20 diabody和4-1BBL/CD20融合蛋白可溶性表达产物;采用calcein释放试验测定其介导的体外靶向杀伤活性;采用人B淋巴瘤细胞系Raji裸鼠移植瘤模型测定其介导的体内靶向杀伤活性。纯化4-1BBL/CD20融合蛋白在体外能增强抗-CD3/抗-CD20 diabody介导激活的T细胞杀伤Raji细胞;在人B淋巴瘤细胞系Raji裸鼠移植瘤模型联合人T淋巴细胞4-1BBL/CD20融合蛋白增强抗-CD3/抗-CD20 diabody高效抑制Raji细胞裸鼠移植瘤的生长,明显延长荷瘤裸鼠的生存时间。在体外和体内4-1BBL/CD20融合蛋白均能增强抗-CD3/抗-CD20 diabody介导激活的T细胞杀伤表达CD20抗原的肿增细胞,是一个有望用于B细胞恶性肿瘤临床治疗的特异性融合蛋白。     

海蛇乙醇浸出物对小鼠免疫系统的影响

目的 探讨海蛇乙醇浸出物（AEBFSS）在小鼠体内、体外对免疫系统的影响。方法 体外试验：采用AEBFSS与小鼠脾细胞共孵育72h,测定T、B淋巴细胞转化功能;体内试验：采用每天灌胃给予小鼠1次AEBFSS,共6天。测定脾脏中T淋巴细胞转化功能和溶血素抗体生成水平。结果 在体外条件下低浓度AEBFSS促进T、B淋巴细胞增殖,高浓度时则作用相反;在体内条件下低浓度AEBFSS能增加B细胞生成溶血素抗体,对T细胞增殖无明显影响,高浓度则抑制T、B细胞功能。结论 AEBFSS对小鼠免疫系统有一定的双向调节作用。     

灵芝中有效成分灵芝酸的抑制肿瘤作用研究

本文采用了体外肿瘤细胞培养增殖抑制试验与体内肿瘤细胞抑制试验,结果显示灵芝酸在体外对肿瘤细胞株SW620、LS180、S180的增殖具有明显的抑制作用,体内抗肿瘤疗效试验显示灵芝酸对Lewis肺癌(足趾接种)具有一定的疗效,对荷Lewis肺癌的小鼠IL-2的生成及NK细胞的免疫活性均有一定的促进作用。因此可以认为灵芝酸通过直接细胞毒作用与激活免疫体系实现抑制肿瘤作用。     

低氧对曲霉和假丝酵母体外两性霉素B、伊曲康唑和棘白素药敏试验的影响[英]／Warn PA…／／J Antimicrobial Chemother．

抗真菌药在体外和体内的效果有很大差异,可靠的体外药敏试验在对真菌病的用药是有帮助的。已知许多因素可影响真菌的最低抑菌浓度(MIC)测定,如培养基、菌悬液的浓度、试验方法的选择(多量稀释法或微量稀释法)和培养温度。作者研究了不同氧浓度对真菌体外药敏试验的影响。     

五倍子对铜绿假单胞菌R质粒消除作用的实验研究

探讨中药五倍子提取液对铜绿假单胞菌R质粒的消除作用。对老年呼吸系统感染患者痰中分离的铜绿假单胞菌R质粒进行了检测 ,并选用中药五倍子提取液对该质粒进行了体外体内消除试验。结果可见 ,体外药物作用 2 4 ,4 8,72hR质粒消除率分别为 0 ,10 .2 % ,3.4 % ,SDS对照组分别为 0 ,0 .8% ,1.6 %。体内药物作用 2 4 ,4 8,72h ,R质粒消除率分别为 0 ,2 % ,13.6 % ,对照组均为 0。可见 ,中药五倍子提取液对铜绿假单胞菌R质粒在体外、体内均具有消除作用 ,体内消除作用强于体外。     

灯盏花总黄酮对血小板聚集和血栓形成的影响

采用Ｂｏｍ氏比浊法测定灯盏花总黄酮（Ｅｒｉｇｅｒｏｎ ｂｒｅｖｉｓｃａｐｕｓ ｆｌａｖｏｎｅｓ,ＥＢＦ）在体内和体外对血小板活化聚集的影响。应用Ｋｏｈｌｅｒ等法观察ＥＢＦ对小鼠尾静脉注射花生四烯酸（ＡＡ）所致突然死亡的保护作用。结果表明,ＥＢＦ在体外和体内对ＡＤＰ、ＡＡ或血小板活化因子（ＰＡＦ）引起的血小板聚集均有明显抑制作用,体外实验,其效应呈浓度依赖关系,体内试验,于给药后１８０ｍｉｎ达最大抑     

絮状单位测定与小鼠体内中和试验法检测TAT效价的比较

目的为了更好地进行生产质量控制,快速准确地测定破伤风抗毒素(TAT)效价,以统计分析絮状单位测定法(体外法)和小鼠中和试验法(体内法)测定TAT效价的相关性。方法对2010—2013年破伤风抗毒素生产过程中的原料血浆、原液的絮状单位值与小鼠中和效价进行了统计分析和比较。结果体外法和体内法检测TAT原料血浆和原液效价的相关系数分别为r血浆=0.794 3,P0.001和r原液=0.901 6,P0.001,均呈显著性正相关。结论体外法可指导或替代体内法TAT效价测定应用于生产过程中间品的质量控制。     

鼠伤寒沙门氏菌SL7207 SifA-突变株的构建和鉴定

鼠伤寒沙门氏菌SifA^-基因突变株的特点是能进入真核细胞的胞液。利用P22噬菌体转导技术构建了鼠伤寒沙门氏菌疫苗株SL7207的SifA^-突变株SL7207,该突变株与SL7207有着相似的体外生长曲线和细胞侵袭力,SL7207。在MDCK上皮细胞中的增殖能力增强,但在RAW264．7巨噬细胞中的生存能力减弱。小鼠毒力试验显示SL7207。在BALB／c小鼠体内毒力下降。仅SL7207在体外可向RAW264．7巨噬细胞递送真核表达质粒。SL7207的构建为重组沙门氏菌疫苗载体的研制提供了一个新的选择。     

体外培养小鼠卵母细胞及其生长分化因子-9基因表达

体外培养小鼠的窦前卵泡以得到第二次减数分裂中期(MⅡ)卵母细胞，比较体外发育卵母细胞与体内生长的卵母细胞生长分化因子-9(GDF-9)的基因表达量，探讨GDF-9的表达对卵母细胞体外发育成熟的影响。选择体外培养第2天(D2)、D4、D6、D8、D10、D12卵母细胞作为体外发育组；同窝雌性小鼠出生后D12、D14、D16、D18、D20、D22卵母细胞作为体内发育组；半定量逆转录多聚酶链反应技术分别检测两组MⅠ卵母细胞GDF-9基因表达量。结果体外培养小鼠窦前卵泡可以得到MⅡ期卵母细胞，卵泡成活率、窦腔形成率、卵母细胞成熟率分别达到89.5%、51.8%和56.6%。小鼠卵母细胞GDF-9基因表达量随发育时间的改变而发生变化，而体外发育D8—12卵母细胞GDF-9表达量显著低于同期体内发育卵母细胞(P<0.05)。体外发育D8—12卵母细胞GDF-9基因表达量低于同期体内发育的卵母细胞的原因之一可能是其发育潜能较低。     

小刺猴头菌多糖的荧光标记及其稳定性

通过体外和小鼠体内试验,验证荧光标记的小刺猴头菌多糖的稳定性和生物体内代谢途径。结果表明:标记后的小刺猴头菌多糖体外稳定性在24 h内良好,小鼠体内代谢途径主要通过消化系统代谢,并在8 h内基本代谢完毕,这一结果为荧光标记真菌多糖的药理活性提供了依据。     

金红石型氧化钛覆膜热解碳的制备及血液相容性研究

用离子束增强沉积 (IBED)方法 :即在氧气氛中 ,通过惰性气体Xe+离子轰击和Ti的电子束蒸发进行了氧化钛薄膜的合成 .X射线衍射分析表明 ,用离子束增强沉积技术合成的薄膜为金红石结构 ,具有 ( 10 0 )择优取向 .用背散射技术分析了薄膜的成分 ,发现薄膜的O/Ti基本上接近 2∶1.薄膜中含有一定量的Ti2 +和Ti3+.体外试验及动物体内试验结果表明 ,金红石型氧化钛薄膜具有比目前临床应用的热解碳更好的血液相容性 .并认为 ,金红石型氧化钛覆膜热解碳极可能成为新的人工心脏瓣膜材料 .     

体外皮肤刺激模型的生物标志研究进展

皮肤刺激试验是人类健康相关产品危险性评价的常见项目,传统皮肤刺激试验采用实验动物进行,成本高周期长,给动物造成一定程度的痛苦。近年来,多种替代动物试验的体外模型被开发和应用。体外试验主要通过定量检测细胞活性和代谢变化的生物标志物预测体内的效应,应用最广泛的生物标志物是细胞活性、炎性因子、胞质酶等,在生物技术的推动下,新的特异性标志物被开发和验证。     

结核分枝杆菌GroEL1蛋白过表达的生理效应分析

为研究结核分枝杆菌热休克蛋白GroEL1在耻垢分枝杆菌中过表达所引发的生理效应,本实验采用透射电子显微镜观察细菌个体形态,并绘制细菌群体生长曲线;药敏试验检测重组耻垢分枝杆菌的药物耐受性;细菌攻毒BALB/c小鼠以检测细菌在体内的存活能力;通过病理切片观察细菌毒力。结果显示,GroEL过表达细菌菌体内核糖体数量显著增加,细菌生长分裂能力及群体适应能力提高,但对常用的一线、二线抗结核药物耐受性无影响。GroEL1过表达有助于延长细菌在宿主体内的生存周期,增强细菌毒力。结果提示,结核分枝杆菌GroEL1蛋白过表达会对细菌体内、体外生长产生明显影响。     

恶性转化试验及其相关试验体系在环境致癌因素检测中的应用

恶性转化试验及在其基础上建立起来的相关试验体系是当前用于环境致癌因素检测的主要手段,本以各种试验方法为核心,以试验中应用的靶材料为依据,从体内,体外两个方面,对现有的环境致癌因素检测方法进行了综述。     

基于全场光学相干层析技术评估卵母细胞质量

卵胞质质量是影响卵母细胞发育能力的重要因素，然而目前仍缺少无损且客观高效地评估卵胞质成熟度的方法.已知胞质成熟度低是导致体外成熟卵母细胞发育能力远低于体内成熟卵母细胞的主要原因.全场光学相干层析技术(FF-OCT)具有无损非标记且三维高分辨的特点.FF-OCT采集的体内成熟与体外成熟小鼠卵胞质图像，经对比发现，具有大面积高亮皮质区及胞质均匀分布的卵母细胞，其胞质成熟度更高.为验证这一点，对比了显微镜下筛选和FF-OCT筛选的体外成熟卵母细胞的体外受精率，发现显微镜筛选组的体外受精率远低于体内成熟的情况，FF-OCT筛选组的体外受精率与体内成熟组之间无显著差异.这说明FF-OCT筛选的体外成熟卵母细胞发育能力接近于体内成熟的卵母细胞.此外还利用FF-OCT成功观测到新鲜及老化卵母细胞之间的形态差别，即老化卵母细胞胞质均匀性更差及高亮皮质区更小.因此，FF-OCT可用于无损评估卵胞质质量，且大面积高亮皮质区的存在性及胞质分布的均匀性是评估卵胞质质量的有效指标.     

用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测白喉毒素的抗体

<正> 本文叙述了定量测定白喉毒素抗体的酶联免疫吸附测定法(ELISA)。用ELISA技术与单间免疫扩散测定法比较,其结果能很好地相关,而且ELISA技术更为敏感一万倍。比在家兔体内皮肤试验法也至少敏感10倍。 绪言 某些方法用于定量测定白喉毒素的抗体,它包括体内和体外测定试验。体内测定如在家兔去毛的背上作皮内中和滴定试验,有利于测定实际中和毒素的抗体。虽然,在体内进行中和抗体滴度的测定是不可缺少的,但这些方法需要精心操作,代价高而又费时,另外,如果不进行大量的动物实验,     

蛇毒的研究和利用——Ⅲ.浙江产蝮蛇Agkistrodon halys Pallas蛇毒对凝血系统的作用

用体外和体内试验方法研究了浙江产蝮蛇毒对凝血系统的作用。实验结果表明,浙江产蝮蛇毒中至少含有两种抗凝组份——抗凝血活酶组份和胞浆素样物质。     

禽致病性大肠杆菌E058株毒力基因(aerobactin)与sit操纵子基因突变株的构建及其致病性

[目的]探究毒力基因aerobactin与sit操纵子与禽致病性大肠杆菌E058株致病作用的相关性.[方法]利用Red同源重组方法,构建APEC E058株aerobactin与sit操纵子基因缺失株E058Δvir,并通过一系列的体内及体外试验对其生物学特性进行研究.[结果]生长曲线测定、细菌侵袭试验及体外竞争等试验结果表明,突变株与亲本株差异不显著;体内动态分布试验结果显示,突变株E058Δvir在5个被检脏器中均极显著地低于亲本株(P＜0.001).[结论]aerobactin与sit操纵子与禽致病性大肠杆菌E058株的致病性相关,是其重要的致病因子.