甘蓝型油菜子油分的积累与某些生理变化关系的研究

油菜种子发育过程中,其内部的生理代谢过程发生了规律性的变化。伴随着种子的发育进程,６－磷酸葡萄糖脱氢酶、异柠檬酸裂解酶、异柠檬酸脱氢酶和琥珀酸脱氢酶的活性均有不同程度的增强。在油分旺盛合成期,６－磷酸葡萄糖脱氢酶和异柠檬酸裂解酶的活性均达到了最大值,而此时,异柠檬酸脱氢酶和琥珀酸脱氢酶的活属于匀增加较慢;在种子的不同发育时期,高含油量品系的６－磷酸葡萄糖脱氢酶和异柠檬酸裂解酶的活性均高于低含油量的     

利用大肠杆菌表达系统进行葡萄糖－6－磷酸脱氢酶（G－6－PD）的生化鉴定

利用大肠杆菌表达系统进行葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ－６－ＰＤ）的生化鉴定卢义钦（湖南医科大学生化教研室,长沙４１００７８）关键词葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ－６－ＰＤ）,大肠杆菌,表达葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）缺乏症在各民族人群中均有发现,据估...     

三平正并殖吸虫发育过程中的同工酶谱

采用同工酶电泳技术对三平正并殖吸虫童虫、早期成虫和后期成虫的葡萄糖磷酸变位酶、葡萄糖磷酸异构酶和葡萄糖－６－磷酸脱氢酶的同工酶进行了研究,结果显示三平正并殖吸虫由童虫向成熟期发育过程中,葡萄糖磷酸变位酶和葡萄糖磷酸异构酶的同工酶谱趋于复杂,酶带数目后期成虫〉早期成虫〉童虫;而葡萄糖－６－磷酸脱氢酶同工酶谱则趋于简单,童虫或未成熟虫体酶带数目较成熟虫体为多。三种酶系统的同工酶排列型式显示,吸虫由童虫     

胰岛素对葡萄糖-6-磷酸酶基因转录的调控

葡萄糖－６－磷酸酶（Ｇｌｕｃｏｓｅ－６－ｐｈｏｓ－ｐｈａｔａｓｅ,Ｇ６Ｐａｓｅ,Ｅ．Ｃ．３．１．３．９）是一种膜结合酶,主要存在于肝和肾细胞中的内质网膜及核膜上,其生物功能是催化葡萄糖异生和糖原分解两个代谢途径中由葡萄糖－６－磷酸到葡萄糖的水解反应,是调节生物体内血糖水平的关键酶之一。胰岛素（Ｉｎｓ）通过调控Ｇ６Ｐａｓｅ而调节血糖水平,近年的研究表明,Ｉｎｓ可以通过调控相关酶的基因转录来实现其相应的生理功能。１．Ｇ６Ｐａｓｅ的分子生物学研究肝微粒体Ｇ６Ｐａｓｅ酶系包括活性部分位于内质网腔表面的Ｇ…     

PGDH^L生化突变型谷氨酸生产菌株选育的生化模式

以Ｔｂｍ－３（ｉｃｌ＾－,异柠檬酸裂解酶活力的生化突变株）为出发菌株,经紫外一诱变,通过依据生人代谢所设计的选择培养基（Ｌ－阿拉伯糖平板与Ｄ－葡萄糖酸钠平板）对接的筛选方法,获得磷酸葡萄糖酸脱氢酶（ＰＧＤＨ,Ｅ．Ｃ．４．２．１．１２）忖突变型的生化突变型菌株Ｔｂｍ３．１８,该菌株经摇瓶发酵试验显示,比出发菌株Ｔｂｍ－３提高产酸率８．９％和转化率８．１％,表明ｐｇｄｈ或ｐｇｄｈ生在变型菌株的选育,对     

体外培养的哺乳动物细胞的葡萄糖和谷氨酰胺代谢

综述体外培养哺乳动物细胞的葡萄糖和谷氨酰胺代谢。大部分的葡萄糖通过糖酵解途径为细胞提供中间代谢物质和能量 ,最终生成乳酸 ,只有很少部分进入TCA循环和磷酸戊糖途径。谷氨酰胺通过谷氨酰胺酶生成谷氨酸 ,并进一步通过谷氨酸脱氢酶或转氨酶生成α -酮戊二酸进入TCA循环 ,为细胞提供中间代谢物质和能量。糖酵解和谷氨酰胺代谢 (glutaminolysis)受葡萄糖和谷氨酰胺的影响而相互调节。     

课堂教学随笔:异构酶、变位酶、消旋酶、差向异构酶与互变异构酶

物质代谢过程涉及多种酶的参与,了解这些酶的作用及机制对理解代谢过程非常重要。课堂教学中,我们经常会碰到各种名称的异构酶,包括变位酶、消旋酶、差向异构酶与互变异构酶等,学生难免会混淆彼此的含义。本文拟就生化代谢中的一些反应实例,探讨这几类酶的作用特点。     

畲族Ge,PGM1,AcP1,6—PGD,ADA和AK1的遗传多态性

对畲族血浆组特异性成分、红细胞磷酸葡萄糖变位酶１（ＰＧＭ１）、酶性磷酸酶（ＡｃＰ１）、６－磷酸葡萄糖酸氢酶（６－ＰＧＤ）、腺苷脱氨酶（ＡＤＡ０、腺苷酸激酶（ＡＫ１）的遗传多态性进行了研究。Ｇｃ与ＰＧＭ１是用薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚集分析的,ＡｃＰ１、６－ＰＧＤ、ＡＤＡ及ＡＤ１是用淀粉凝胶电泳分析的。各基因座的基因频率分别为Ｇｃ１Ｆ０．４７２２、Ｇｅ１Ｓ０．２４２１、Ｇｃ２０．２７３８;ＰＧＭ１１Ａ     

细胞质雄性不育水稻幼穗花药的呼吸酶活性研究

研究珍汕９７Ａ和珍汕９７Ｂ的雌雄蕊原基形成期、花粉母细胞形成期和花粉母细胞减数分裂期的幼穗及单核期、二核期和三核期的花药中呼吸代谢三羧酸循环（ＴＣＡ）的苹果酸脱氢酶（ＭＤＨ）和异柠檬酸脱氢酶（ＩＤＨ）及戊糖途径（ＰＰＰ）的磷酸葡萄糖脱氢酶（Ｇ６ＰＤＨ）、磷酸葡萄糖酸脱氢酶（６ＰＧＤＨ）和５－磷酸核糖异构酶（Ｒ５ＰＩ）的活性。结果表明：可育花药的５种酶活性皆高于同期不育花药;而幼穗中,ＴＣＡ途径中的     

L615白血病鼠胸腺和脾脏淋巴细胞脱氢酶同工酶的研究

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对比研究了纯系６１５鼠和Ｌ６１５可移植性淋巴细胞型白血病鼠胸腺和脾脏淋巴细胞的葡萄糖－６－磷酸脱氢酶同工酶（ＥＣｌ．１．１．４９,Ｄ－葡萄糖－６－磷酸：ＮＡＤＰ氧化还原酶,Ｇ６ＰＤ）和乳酸脱氢酶同工酶（ＥＣｌ．１．１．２７,Ｌ－乳酸：ＮＡＤ氧化还原酶,ＬＤＨ）。并应用定量细胞化学法对ＬＤＨ和６ＰＤ全酶活性进行了测定。结果：在Ｌ６１５白血病鼠胸腺淋巴细胞中（白血病细胞占４０％）,Ｇ６ＰＤ同工酶谱显示异常,全酶活性明显增高、ＬＤＨ同工酶谱及全酶活性未发生明显变化。Ｌ６１５白血病鼠脾脏淋巴细胞中（白血病细胞占８４％）,Ｇ６ＰＤ和ＬＤＨ同工酶谱均显示异常,同时全酶活性也明显增强。提示：Ｇ６ＰＤ对白血病细胞的恶性增殖和浸润似乎更为敏感。     

盐生杜氏藻生油—3—磷酸脱氢酶的分离化及其特性的研究

利用ＰＥＧ分级,ＤＥＡＥ离子交换层析,Ｂｈｕｅ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ拟亲和层析,ＭｏｎｏＱ离子交换层析等手段,分离纯化直二氏藻甘油三磷酸（Ｇ－３－Ｐ）脱氢酶（ＥＣ１．１．１．８）得到比活为１２．６ｕ／ｍｇ的电泳纯的酶,并对此酶的生化特性进行了研究。４－２０％非变性聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳测得全酶分子量约为２７０ｋＤ,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ表明该酶只有一种分子量约为６５ｋＤ的亚基,据此推测该酶应为同四聚体。酶     

高等植物葡萄糖-6- 磷酸脱氢酶与6- 磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因的不同进化起源

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶与6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶是植物戊糖磷酸途径中的两个关键酶。在克隆了水稻质体葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因OsG6PDH2和质体6-磷酸葡萄糖脱氢酶基因Os6PGDH2基础上,分析比较了水稻胞质和质体葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因和6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因的基因结构、表达特性和进化地位。结合双子叶模式植物拟南芥两种酶基因的分析结果,认为高等植物葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因和6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因在进化方式上截然不同,葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的胞质基因与动物和真菌等真核生物具有共同的祖先;6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶的胞质酶和质体酶基因都起源于原核生物的内共生。讨论了植物葡萄糖-6-磷酸脱氢酶与6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因可能的进化模式,为高等植物及质体的进化起源提供了新的资料。     

几种化学药剂对‘NJ72’油桃休眠解除的影响

在进行果树温室栽培时,经常遇到萌芽率低,萌芽开花延迟,花器官发育差,座果率低的问题。本试验以‘NU72’油桃为试材,观察了3种药剂对解除芽休眠的影响。结果表明,2％（NH2）2CS能提早花期,但存在药害现象,6％KNO3不能提早花期,并且花期不整齐,5％NH4NO3效果与6％KNO3类似。同时化学药剂处理促进花芽内H2O2的积累,抑制了过氧化氢酶（CAT）活性但促进了过氧化物酶（POD）活性,超氧物岐化酶（SOD）活性变化较小,化学药剂使花芽的呼吸速率增加,其中磷酸戊糖途径（PPP）代谢增加,糖酵解（EMP）降低,而三羧酸循环（TCA）代谢波动较小,葡萄糖－6－磷酸脱氢酶（G6PDH）活性在化学药剂处理时也增加。     

快原子轰击质谱技术结合酶学方法鉴定黑曲霉1,6—缩水—β—D—吡喃葡萄糖激酶的诱导合成

1,6－缩水－β－D－吡喃葡萄糖是纤维素类物质热解的主要产物,黑曲霉突变株CBX－209能较好地利用该糖作为唯一的碳源和能源生长并产生有用的代谢产物柠檬酸,其效率与利用葡萄糖大致相当。利用葡萄糖氧化酶和竦根过氧化物酶复合系统测定证明该菌株不存在1,6－缩水－β－D－吡喃葡萄糖水解酶,采用快原子轰击质谱技术结合6－磷酸葡萄糖脱氢酶系统进行测定,结果表明经（NH4）2SO4沉淀或阴离子交换层析析处理后的无细胞提取液在加入ATP和Mg^2 条件下能直接催化1,6－缩水－β－D－吡喃葡萄糖合成6－磷酸葡萄糖,证明黑曲霉突变株中存在一个新酶,即1,6－缩水－β－D－吡喃葡萄糖激酶。该酶为诱导酶。     

Komagataeibacter rhaeticus 3-15全基因组及葡萄糖脱氢酶基因缺失体的构建

细菌纤维素(BC)是一种新型的可再生、可降解的生物高分子材料。为了最大程度的发挥BC生产菌株K. rhaeticus 315的生产能力,本文首先对K. rhaeticus 315进行全基因组测序,通过功能基因的注释、分析碳源代谢流向。结果显示,该菌株碳代谢特征之一是缺乏磷酸果糖激酶的编码基因,不能通过EMP途径代谢糖类碳源,而是主要通过PPP途径和TCA途径代谢碳源,维持菌体生长和BC合成。由于葡萄糖脱氢酶的存在,该菌株在合成BC的同时生成大量副产物—葡萄糖酸。为此,本文通过敲除葡萄糖酸合成酶相关基因,即葡萄糖脱氢酶基因gcd,构建葡萄糖脱氢酶基因缺失重组株(gcd-),将葡萄糖酸的生成量降低了77%。     

蚕豆病溶血危象与过氧化氢酶

蚕豆病溶血危象与过氧化氢酶卢义钦刘俊凡（湖南医科大学生化教研室，长沙４１００７８）关键词蚕豆病溶血危象过氧化氢酶当暴露于蚕豆或伯胺喹宁与呋喃英妥等药物时，葡糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）缺乏症患者的红细胞常易破裂而引起急性溶血性贫血（ＡＨＡ），称为溶...     

柑桔同工酶及其在分类中应用的研究

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,分析了柑桔类３属１０５个生物型以及１个自交和２个杂我组合后代的谷氨酸草酰乙酸转氨酶、６－磷酸葡萄糖异构酶、６－磷酸葡萄糖变位酶、苹果酸酶、过氧化物酶、超氧化物歧化酶、四唑氧化酶等７种酶系统同工酶;并研究研究了它们的遗传控制,发现这７种酶系统同工酶至少由１４个基因位点控制,柑桔类３属之间的同工酶基因型差异十分明显,各属都有独特的基因。两个物型之间,相同基因数目越多,则亲缘关     

实验性肝硬化部分肝切除后肝组织学及组织化学变化的研究

四氯化碳所致肝硬化的大白鼠,进行７０％和３０％肝脏切除,于术后４８小时、１周、２周分别取剩余肝脏观察肝的组织化学变化,包括ＤＮＡ（脱氧核糖核酸）,ｈｉｓｔｏｎｅ（组蛋白）、ＲＮＡ（核糖核酸）、ＳＤＨ（琥珀酸脱氢酶）、Ｇ－６－Ｐａｓｅ（葡萄糖－６－磷酸酶）、Ｍｇ－ＡＴＰａｓｅ（镁激活三磷酸腺苷酶）、ＣｈＥ（胆碱酯酶）、ＡＫＰ（碱性磷酸酶）、ＡＣＰ（酸性磷酸酶）,ＰＡＳ（糖原）反应。其中肝硬化切除３０％肝脏的动物,术后４８小时再生肝细胞活跃,肝脏ＤＮＡ、ｈｉｓｔｏｎｅ、ＳＤＨ、Ｇ－６－ｐａｓｅ、ＡＴＰａｓｅ活性及反应明显增高;而ＣｈＥ活性及ＰＡＳ反应等显著减弱。     

十字花科黑腐病菌中葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的酶学分析

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶是磷酸戊糖途径(HMP)的限速酶,在十字花科黑腐病菌8004的基因组中,有2个基因XC1977和XC4082被注释为葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)。前期工作发现XC1977突变后,细胞的胞外多糖产量明显降低,而XC4082突变不影响胞外多糖产量。为明确这两个基因的编码产物在Xcc中的生化功能,本工作表达纯化了这两个蛋白,并对这两个蛋白的特征进行分析,发现这两个蛋白均具有6-葡萄糖脱氢酶的活性,但是它们的最适反应温度、最适反应pH、金属离子和烷化剂的敏感性完全不同。而且,XC1977以NAD~+和NADP~+为电子受体,而XC4082只能以NADP~+为电子受体。在以NAD~+和NADP~+为受体时,XC1977的K_m值分别为0.125 mmol/L和0.927 mmol/L,而XC4082以NADP~+为受体时的K_m值为0.364 mmol/L。这表明Xcc细胞合成胞外多糖时,需要NAD~+参与能量代谢。     

番茄果实中焦磷酸：D—果糖—6—磷酸 1—磷酸转移酶的结构和动力学特性

比较了番茄果实和红果实中焦磷酸－Ｄ－果糖－６－磷酸 １－磷酸转移酶的两种酶型的结构和动力学特性。绿果实中大分子酶型Ｑ２在酶蛋白量和酶活力方面均占绝对优势,而在红果实中小分子酶型Ｑ１起主导作用。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ凝胶扫描结果显示绿Ｑ２和红Ｑ２的亚基组成不同。组成该酶的α－亚基和β－亚基的化学裂解肽谱表明两亚基差异很大,同时证明构成Ｑ１和Ｑ２的β亚基具有相同的肽谱。分析Ｑ１和Ｑ２的β亚基具有相同的肽谱。